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中华口腔医学研究杂志（电子版） 2024年第2期18卷 89-95页

作者：狄静陈禹江陈欣欣陈文霞广西医科大学口腔医学院/附属口腔医院广西口腔感染性疾病防治重点实验室南宁5530021 广西医科大学附属口腔医院牙体牙髓科南宁530021

目的研究基质细胞衍生因子1(SDF-1)对小鼠RAW264.7巨噬细胞迁移和极化的影响及机制。方法对体外培养对数生长期小鼠RAW264.7巨噬细胞采用SDF-1和(或)磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)抑制剂LY294002处理,Transwell检测细胞的迁移情况;反转录聚合... 详细信息

目的研究基质细胞衍生因子1(SDF-1)对小鼠RAW264.7巨噬细胞迁移和极化的影响及机制。方法对体外培养对数生长期小鼠RAW264.7巨噬细胞采用SDF-1和(或)磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)抑制剂LY294002处理,Transwell检测细胞的迁移情况;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞相关基因的表达;流式细胞术检测M1、M2巨噬细胞特异性表面标志物;ELISA测定细胞因子;Western blot检测pi3k/蛋白激酶B1(akt1)蛋白磷酸化水平。使用SPSS 21.0软件进行统计学分析。结果SDF-1可以促进巨噬细胞的迁移,SDF-1组的细胞迁移数从(90±16)上升至(199±9),差异有统计学意义(t=12.010,P<0.001),并显著提高巨噬细胞M2向极化诱导过程中抗炎相关基因白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β(TGF-β)的表达水平,IL-10表达量从(1.015±0.111)上升至(3.686±0.268),差异有统计学意义(t=15.960,P<0.001);CD206+M2样巨噬细胞占比增加11.5%;pi3k/akt1蛋白磷酸化水平显著增加,p-akt1表达从(1.02±0.09)增长至(1.47±0.12),差异有统计学意义(t=5.082,P=0.007),促进巨噬细胞向M2极化。LY294002抑制了pi3k/akt1蛋白磷酸化,P-akt1表达从(1.02±0.09)减少至(0.41±0.13),差异有统计学意义(t=6.503,P=0.002)。并使SDF-1诱导巨噬细胞迁移的能力下降,细胞迁移数从(90±16)下降至(60±11),差异有统计学意义(t=3.133,P=0.02),同时下调了M2巨噬细胞极化诱导过程中抗炎相关因子IL-10、TGF-β的表达水平,IL-10表达量从(1.015±0.111)下降至(0.608±0.034),差异有统计学意义(t=6.075,P<0.001);CD206+M2样巨噬细胞占比减少10.3%。与SDF-1处理组相比,SDF-1和LY294002联合处理组M2巨噬细胞极化诱导过程中抗炎相关因子IL-10、TGF-β的表达下降(t_(IL-10)=14.730,P_(IL-10)<0.001,t_(TGF-β)=31.180,P_(TGF-β)<0.001),M1巨噬细胞极化过程中促炎因子IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达无明显变化。结论SDF-1可显著促进巨噬细胞向M2型极化,其机制可能与激活pi3k/akt1信号通路相关。

关键词：基质细胞衍生因子1 巨噬细胞巨噬细胞极化 pi3k/akt1信号通路

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清解化攻方对重症急性胰腺炎模型大鼠急性肺损伤的治疗作用及其机制

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中国药理学通报 2024年第5期40卷 975-983页

作者：冯敏超罗芳唐曦平李凯朱晓东张冰玉陈国忠广西中医药大学第一临床医学院广西南宁530001 广西中医药防治医学分子生物重点实验室广西南宁530001 广西医科大学附属肿瘤医院广西南宁5300013 广西中医药大学第一附属医院广西南宁530001

目的使用网络药理学探究清解化攻方对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)相关急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的可能作用机制,并通过动物实验验证。方法检索TCMSP、BATMAN-TCM、ETCM、SwissTargetPrediction数据库获取清解化攻方中各药物入血有效成分的作用靶点,在GeneCard数据库中检索获得SAP-ALI疾病靶点,将药物靶点与疾病靶点取交集获得共同靶点,随后通过STRING数据库及Cytoscape3.7.1软件对共同靶点进行蛋白互作网络分析,借助DAVID数据库行GO、kEGG富集分析,最后动物实验对关键信号通路予以验证。结果共筛选出清解化攻方治疗SAP-ALI有效活性成分28种,作用于42个共同靶点。Ppi网络分析显示,STAT3、IL-6、TGFB1可能是核心靶点;GO、kEGG富集分析主要涉及细胞增殖、pi3k/akt信号通路等。动物实验证实,清解化攻方能够改善SAP-ALI大鼠模型的胰腺、肺组织的病理情况,下调血清中α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平,下调肺组织中pi3k/akt1信号通路相关蛋白及mRNA表达水平。结论清解化攻方可能通过多成分、多靶点,多通路协同治疗SAP-ALI,其机制可能与抑制pi3k/akt信号通路活化有关。

关键词：清解化攻方 pi3k/akt1信号通路重症急性胰腺炎相关急性肺损伤网络药理学实验验证炎症反应

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四甲基吡嗪对感染鸡白痢沙门菌肉鸡生产性能的影响及氧化应激机制研究

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家畜生态学报 2022年第11期43卷 36-42页

作者：王恩玲刘宁张飞可河南科技大学动物科技学院河南洛阳471023 帝斯曼维生素(上海)有限公司上海201400 洛阳鑫泰农牧科技股份有限公司河南洛阳471400

试验研究了四甲基吡嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对鸡白痢沙门菌感染肉仔鸡的生产性能、氧化反应和pi3k/akt信号通路的影响,旨在探讨四甲基吡嗪对感染鸡白痢沙门菌肉鸡生产性能的影响及氧化应激机制,为肉鸡替抗寻求解决方案。试验选择1... 详细信息

试验研究了四甲基吡嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对鸡白痢沙门菌感染肉仔鸡的生产性能、氧化反应和pi3k/akt信号通路的影响,旨在探讨四甲基吡嗪对感染鸡白痢沙门菌肉鸡生产性能的影响及氧化应激机制,为肉鸡替抗寻求解决方案。试验选择1日龄AA肉公雏480只,随机分为4组:对照组、感染组、抗生素组、TMP组,每组6个重复,每个重复20只鸡。其中,对照组和感染组只饲喂基础饲粮,抗生素组和TMP组分别在基础饲粮中添加40 mg/kg盐酸恩诺沙星和150 mg/kg TMP。5日龄时,感染组、抗生素组和TMP组每只鸡口腔灌服1 mL(105 CFU/mL)鸡白痢沙门菌培养液,对照组灌服等量的无菌株培养液,试验期14 d。结果表明,鸡白痢沙门菌感染显著降低了肉仔鸡生产性能(P<0.05),显著提高了血清和十二指肠中丙二醛和蛋白质羰基含量以及二胺氧化酶活性(P<0.05),并显著上调了十二指肠pi3k和akt的mRNA表达水平(P<0.05)。与感染组相比,抗生素组和TMP组均显著提高了7 d和14 d肉仔鸡的累计增重和累计采食量(P<0.05),显著降低了肉仔鸡料重比和死亡率、血清和十二指肠中二胺氧化酶活性、血清和十二指肠中丙二醛和蛋白质羰基含量(除7 d血清外)以及十二指肠pi3k和akt1的mRNA表达水平(P<0.05)。综上所述,TMP可作为抗生素替代物,通过调节pi3k/akt1信号通路来缓解鸡白痢沙门菌感染所导致的肉仔鸡氧化损伤,进而缓解其生产性能下降。

关键词：四甲基吡嗪鸡白痢沙门菌肉仔鸡生产性能氧化损伤 pi3k/akt1信号通路

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基于磷脂酰肌醇3激酶与苏氨酸蛋白激酶1信号通路小檗碱调节巨噬细胞极化机制研究

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中华老年心脑血管病杂志 2024年第6期26卷 694-698页

作者：陈玉善王婷婷孟中华尚莎莎郑峻萌宗永华司春婴梁亚州关怀敏河南中医药大学第一附属医院心脏中心郑州450000

目的探究小檗碱对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人髓系白血病单核细胞(THP-1)巨噬细胞极化的影响和可能作用机制。方法采用佛波酯(PMA)将THP-1细胞诱导成巨噬细胞,加入不同浓度的小檗碱,分别为对照组、小檗碱5μmol/L组、小檗碱10μ... 详细信息

目的探究小檗碱对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人髓系白血病单核细胞(THP-1)巨噬细胞极化的影响和可能作用机制。方法采用佛波酯(PMA)将THP-1细胞诱导成巨噬细胞,加入不同浓度的小檗碱,分别为对照组、小檗碱5μmol/L组、小檗碱10μmol/L组、小檗碱20μmol/L组、小檗碱40μmol/L组、小檗碱50μmol/L组,干预24 h或48 h。采用细胞计数8试剂盒检测细胞活力,筛选小檗碱最佳浓度和时间。将PMA诱导的THP-1巨噬细胞分为空白组、模型组、小檗碱组、抑制剂组、小檗碱+抑制剂组。酶联免疫吸附测定检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))的含量;定量聚合酶链反应检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、精氨酸酶1(Arg1)、磷脂酰肌醇3激酶(pi3k)、苏氨酸蛋白激酶1(akt1)mRNA表达情况;Western blot检测akt1和磷酸化akt1(p-akt1)抗体蛋白含量。结果干预24 h时,与对照组比较,小檗碱40μmol/L组和50μmol/L组巨噬细胞活性降低(P<0.05);干预48 h时,小檗碱5μmol/L组、小檗碱10μmol/L组、小檗碱20μmol/L组、小檗碱40μmol/L组、小檗碱50μmol/L组巨噬细胞活性均低于对照组[(0.89±0.02)%、(0.82±0.03)%、(0.71±0.02)%、(0.62±0.03)%、(0.53±0.02)%vs(1.01±0.01)%,P<0.05]。小檗碱20μmol/L组处理24 h时对细胞活力影响不大,作为最佳浓度和时间。与空白组比较,模型组iNOS含量和TNF-αmRNA水平升高,TGF-β_(1)含量、Arg1 mRNA、pi3k mRNA、akt1 mRNA及p-akt1/akt1蛋白表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,小檗碱组iNOS含量和TNF-αmRNA水平降低,TGF-β_(1)含量、Arg1 mRNA、pi3k mRNA、akt1 mRNA及p-akt1/akt1蛋白表达水平升高(P<0.05);与小檗碱组比较,小檗碱+抑制剂组iNOS含量和TNF-αmRNA水平升高,Arg1 mRNA、pi3k mRNA、akt1 mRNA及p-akt1/akt1蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论小檗碱可通过激活pi3k/akt1通路,抑制ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞炎性反应,并抑制巨噬细胞向M1型极化,促进其向M2型极化。

关键词：小檗碱脂蛋白类 LDL 巨噬细胞磷酸肌醇3-激酶类 pi3k/akt1信号通路

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