检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2002年第1期29卷 94-99页

作者：张芳林李果叶传忠丁伟刘优萍谢超张迪孙卫华罗敏上海第二医科大学附属瑞金医院上海市内分泌研究所上海200025 复旦大学附属中山医院泌尿外科上海200032

为筛选大鼠糖尿病性高血压病所致的肾损害相关基因 ,自发性高血压大鼠以STZ 5 0mg/kg一次性尾静脉注射 ,建立糖尿病性高血压大鼠模型 ,4周后该模型大鼠尿蛋白持续阳性 ,电镜观察到肾小球基质增生、足突融合或扁平 .应用荧光标记的差异... 详细信息

为筛选大鼠糖尿病性高血压病所致的肾损害相关基因 ,自发性高血压大鼠以STZ 5 0mg/kg一次性尾静脉注射 ,建立糖尿病性高血压大鼠模型 ,4周后该模型大鼠尿蛋白持续阳性 ,电镜观察到肾小球基质增生、足突融合或扁平 .应用荧光标记的差异显示反转录聚合酶链反应 (DDRT PCR)及RNA印迹技术 ,比较两种模型大鼠肾皮质的基因表达差异 ,并进行差异条带的cdna序列生物信息学分析 .其中 4个差异条带与Genbank数据库比较 ,2个为未知基因 ,2个为已知基因 ,即成淀粉样糖蛋白 (amyloidogenicglycoprotein ,AGG)、CDK10 9,两者可能与糖尿病性高血压肾损害的发生相关 ,对它们的进一步研究将为肾损害发病机理的发现提供思路 .

关键词：差异显示糖尿病性高血压肾损害生物信息学相关基因 cdna片段克隆

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水稻矮化突变体差异表达cdna片段的克隆与分析

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中山大学学报（自然科学版） 2001年第6期40卷 59-62页

作者：王永胜王景李发强刘筱斌刘良式中山大学基因工程教育部重点实验室广东广州510275 中国科学院华南植物研究所广东广州510650

利用抑制性消减杂交 (Suppressivesubtractionhybridization ,SSH)分离本实验室获得的一株水稻矮化突变体dwarf6 9与其野生型对照品系特光矮_2 (Oryzasativa ,TGA_2indica)间表达有差异的cdna片段 .分别以dwarf6 9作为驱赶子 ,TGA_2为检测子 ,以及以dwarf6 9作为检测子 ,TGA_2为驱赶子建立了两个差异表达cdna文库 ,分别代表在TGA_2和dwarf6 9中特异表达的cdna .经反式Northern检测这两个文库共得到

关键词：抑制性消减杂交矮化突变体反式Northern 水稻 cdna片段表达克隆

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胃癌高表达cdna片段W41的克隆及组织表达谱分析

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中华医学遗传学杂志 2003年第1期20卷 12-14页

作者：李红王孟薇邵勇王刚石尤纬缔解放军总医院南楼消化科北京100853

目的　从人胃癌组织中克隆新的相关易感基因。方法　利用 c DNA末端快速扩增 PCR技术得到了扩增片段 ,将其克隆、核苷酸序列分析 ,并将序列在 Gen Bank进行同源性比较。利用 Northern杂交、多组织 Northern及基因表达系列分析了所得基... 详细信息

目的　从人胃癌组织中克隆新的相关易感基因。方法　利用 c DNA末端快速扩增 PCR技术得到了扩增片段 ,将其克隆、核苷酸序列分析 ,并将序列在 Gen Bank进行同源性比较。利用 Northern杂交、多组织 Northern及基因表达系列分析了所得基因片段的组织表达谱。结果　获得 1条 5 33bp带有 poly(A)尾的 c DNA片段 ,可见加尾信号 AATAAA。与 Gen Bank基因数据库同源比较 ,该序列未见与任何已知基因同源 ,登录 Gen Bank(登录号为 AF32 5 2 0 2 )。该序列在胃癌组织的表达强度高于对应正常组织 ,多组织Northern及基因表达系列分析表明该序列在多种肿瘤组织中高表达 ,在正常组织中表达减弱。结论　得到了 1条与胃癌可能相关的新的 c

关键词：胃癌 cdna片段 W41 组织表达谱基因基因克隆

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Tenebrio molitor抗冻蛋白基因家族cdna片段的克隆、序列分析及原核表达

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遗传 2006年第12期28卷 1532-1540页

作者：刘忠渊王芸吕国栋王贤磊张富春马纪新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐830046

利用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法,克隆黄粉甲虫(Tenebriomolitor)抗冻蛋白基因cdna片段并进行序列分析和原核表达。同源性分析表明,获得9条新cdna片段,与黄粉甲虫抗冻蛋白基因家族的其他基因序列具有较高的同源性。重组质粒pGE... 详细信息

利用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法,克隆黄粉甲虫(Tenebriomolitor)抗冻蛋白基因cdna片段并进行序列分析和原核表达。同源性分析表明,获得9条新cdna片段,与黄粉甲虫抗冻蛋白基因家族的其他基因序列具有较高的同源性。重组质粒pGEX-4T-1-tmafp-XJ430,转化***21进行原核表达,SDS-PAGE分析结果表明,抗冻蛋白基因以可溶性融合蛋白表达,相对分子量为38kDa。构建真核表达载体pcdna3-tmafp-XJ430,免疫小鼠,获得的抗血清滴度为1:2000。Westernblotting结果为单一的条带,证明该抗血清具有针对抗冻蛋白TmAFP-XJ430抗原的专一性。

关键词：黄粉甲虫抗冻蛋白 cdna片段序列分析原核表达

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人子宫肌层诱导型环加氧酶剪接变异体cdna片段的克隆和序列测定

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中华妇产科杂志 2003年第5期38卷 270-272页

作者：黄引平叶笃筠吴萍黄云峰孙炜应红钢盘茜万敬员袁萍张代娟温州医学院附属第一医院妇产科 325000 华中科技大学同济医学院病理生理教研室

目的　寻找人子宫肌层诱导型环加氧酶 (cyclooxygenase 2 ,COX 2 )选择性剪接变异体。方法　运用自行设计的COX 2mRNA引物 ,采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,分离临产与未临产产妇子宫肌层COX 2mRNA ,再对电泳所获条带进行亚克隆... 详细信息

目的　寻找人子宫肌层诱导型环加氧酶 (cyclooxygenase 2 ,COX 2 )选择性剪接变异体。方法　运用自行设计的COX 2mRNA引物 ,采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,分离临产与未临产产妇子宫肌层COX 2mRNA ,再对电泳所获条带进行亚克隆、测序。结果　未临产产妇子宫肌层未检测到COX 2mRNA ,临产产妇子宫肌层不仅检测到COX 2mRNA ,而且分离出一新条带 ,经亚克隆及测序 ,证实该条带系人子宫肌层COX 2蛋白DNA的第 7、8外显子间的内含子序列被保留所致。结论　临产产妇子宫肌层COX 2mRNA存在选择性剪接变异体。该变异体的发现。

关键词：子宫肌层诱导型环加氧酶 cdna片段克隆序列测定逆转录聚合酶链反应分娩前列腺素内过氧化物合酶

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hTERT cdna片段的克隆及其单克隆抗体与喉癌的发病机制(英文)

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Acta Genetica Sinica 2003年第2期30卷 109-113页

作者：邱广斌贺光宫立国赵震潘子民唐玉钗孙开来中国医科大学医学遗传学教研室沈阳110001 中国医科大学第一临床学院耳鼻喉科沈阳110001 南京军区福州总医院全军检验中心福州350025

端粒酶的激活及其调控机制至今仍不清楚。为研究喉癌发生中端粒酶表达规律及激活的可能机制 ,我们克隆了hTERTcdna片段并制备了抗hTERT单克隆抗体。应用此抗体对喉癌组织进行了免疫组化检测 ,发现喉癌分化程度降低与癌组织中hTERT阳性... 详细信息

端粒酶的激活及其调控机制至今仍不清楚。为研究喉癌发生中端粒酶表达规律及激活的可能机制 ,我们克隆了hTERTcdna片段并制备了抗hTERT单克隆抗体。应用此抗体对喉癌组织进行了免疫组化检测 ,发现喉癌分化程度降低与癌组织中hTERT阳性细胞率增高有关 ;而c Myc表达与hTERT表达呈明显正相关 ,提示c Myc可能对喉癌发生过程中端粒酶的激活起着重要作用。这些研究表明 ,喉癌的发生可能是由于c Myc的过度表达使端粒酶表达上调 ,从而使喉鳞状上皮细胞达到永生化 ,这一机制不仅存在于喉癌发生的早期。

关键词： hTERT cdna片段克隆单克隆抗体喉癌发病机制端粒酶免疫组化

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中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1(MIH1)基因的cdna片段克隆和Northern印迹分析

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中国水产科学 2003年第5期10卷 353-358页

作者：宋霞周开亚马长艳南京师范大学生命科学学院遗传资源研究所江苏南京210097

根据其他蟹类蜕皮抑制激素的氨基酸序列设计了简并引物,运用RT PCR和RACE技术,从中华绒螯蟹(E riocheirjaponicasinensis)成体的蜕皮间期眼柄中,克隆了1条长1145bp的cdna。该cdna编码60个氨基酸,包括942bp的3′端非翻译区。同源性分析... 详细信息

根据其他蟹类蜕皮抑制激素的氨基酸序列设计了简并引物,运用RT PCR和RACE技术,从中华绒螯蟹(E riocheirjaponicasinensis)成体的蜕皮间期眼柄中,克隆了1条长1145bp的cdna。该cdna编码60个氨基酸,包括942bp的3′端非翻译区。同源性分析结果表明,该cdna编码的氨基酸序列和其他蟹类蜕皮抑制激素有较高的一致性,最高的一致性为64%,将获得的序列命名为中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1基因(GenBank检索号:AY309062)。用Northern印迹分析的方法对处于各个发育阶段的胚胎及状幼体期该基因的表达进行了研究,结果表明,处于胚胎发育早期的卵裂期几乎没有检测到杂交信号,而胚胎发育的其他时期和状幼体期都检测到蜕皮抑制激素1基因的mRNA。中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1基因部分cdna序列的获得为进一步获得该基因的全长cdna、研究其功能及阐明中华螯蟹蜕皮的分子机制奠定了基础。

关键词：中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1 MIH1 基因 cdna片段 Northern印迹分析克隆蜕皮测序结构分析

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鼠牙乳头细胞核心结合因子cdna片段的克隆与序列测定

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第三军医大学学报 2001年第11期23卷 1309-1311页

作者：郭红延吴补领郭希民陆怀秀余擎第四军医大学口腔医学院牙体科西安710032

目的　从培养的大鼠牙乳头细胞中克隆核心结合因子 (cbfa1)的cdna片段。方法　原代培养大鼠牙乳头细胞 ,提取培养细胞的总RNA ,逆转录合成cdna ,用PCR的方法扩增cbfa1基因片段。将获得的预期大小的PCR产物插入pUC18克隆载体中 ,转化TOP1... 详细信息

目的　从培养的大鼠牙乳头细胞中克隆核心结合因子 (cbfa1)的cdna片段。方法　原代培养大鼠牙乳头细胞 ,提取培养细胞的总RNA ,逆转录合成cdna ,用PCR的方法扩增cbfa1基因片段。将获得的预期大小的PCR产物插入pUC18克隆载体中 ,转化TOP10感受态细胞 ,蓝白筛选白色克隆 ,进行体外扩增 ,提取质粒进行酶切鉴定 ,含目的插段的克隆在PE317 A自动测序仪上进行序列测定。结果　从培养的鼠牙乳头细胞提取的总RNA中成功克隆出 6 91bpcbfa1基因片段 ,测序结果和GenBank报道序列完全一致。结论　从鼠牙乳头细胞中成功克隆到cbfa1基因片段 ,确切的证实了核心结合因子 (cbfa1)基因在鼠牙乳头细胞中的表达。

关键词：鼠牙乳头细胞核心结合因子 cdna片段基因表达成骨细胞转录因子

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香蕉果实炭疽病病程相关基因cdna片段克隆

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植物病理学报 2009年第3期39卷 325-327页

作者：陈弟谭志琼殷晓敏徐碧玉金志强张荣意海南大学环境与植物保护学院儋州571737 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海口571101

A suppression subtractive hybridization(SSH) cdna library was constructed from 5 d lesion of banana fruit inoculated with Colletotrichum musae F1.70 cdna clones selected randomly were sequenced and *** result showed that 29 cdna clones were related to disease *** were chitinase,se-rine/threonine phosphate,Leucine-rich repeat(LRR),isoflavone reductase and so on.

关键词：香蕉炭疽病病程相关基因香蕉果实 cdna片段克隆防治技术香蕉生产抗病品种

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小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体α亚基cdna片段的克隆和序列分析

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南京农业大学学报 2003年第1期26卷 29-32页

作者：韩招久韩召军李凤良李忠英陈之浩南京军区军事医学研究所江苏南京210002 南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室江苏南京210095 贵州省农业科学院植物保护研究所贵州贵阳550006

利用简并引物 ,采用PCR等分子生物学技术 ,对小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体 (nAChR)α亚基的cdna片段进行克隆 ,并对序列进行分析。测序结果显示 ,扩增的目的基因片段包含了nAChRα亚基的 3种亚型 (分别命名为Pxαl、Pxα2、Pxα3) ,都具有... 详细信息

利用简并引物 ,采用PCR等分子生物学技术 ,对小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体 (nAChR)α亚基的cdna片段进行克隆 ,并对序列进行分析。测序结果显示 ,扩增的目的基因片段包含了nAChRα亚基的 3种亚型 (分别命名为Pxαl、Pxα2、Pxα3) ,都具有典型的α亚基的结构 :2个相邻的半胱氨酸 ,由 2个半胱氨酸之间二硫键形成包含 15个氨基酸的胞外环 ,与烟碱和α银环蛇毒素结合有关的氨基酸残基。克隆的基因片段在氨基酸序列上和其他昆虫nAChRα亚基基因之间有高达 6 5 %～ 99%的同源性 ,表明克隆的cdna片段是小菜蛾nAChRα亚基基因的部分序列。

关键词：小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体 α亚基 cdna片段克隆序列分析

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