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微囊藻毒素亮氨酸精氨酸(MC-LR)损伤睾丸支持细胞免疫反应及细胞生物学行为的机制研究进展

细胞与分子免疫学杂志 2023年第8期39卷 753-758页

作者：朱凯丽张长城邬小平刘尚雨赵雪怡袁丁赵海霞三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002 三峡大学基础医学院机能学系湖北宜昌443002 三峡大学健康医学院中医学系湖北宜昌443002

微囊藻毒素亮氨酸精氨酸(MC-LR)是水华爆发时微囊藻属、鱼腥藻属等蓝藻产生的一种对人类有致癌性的藻毒素。MC-LR可对雄性动物生殖系统产生毒性,导致不育,主要表现为诱导细胞凋亡、破坏细胞骨架、干扰DNA损伤修复途径或损伤血睾屏障(BTB... 详细信息

微囊藻毒素亮氨酸精氨酸(MC-LR)是水华爆发时微囊藻属、鱼腥藻属等蓝藻产生的一种对人类有致癌性的藻毒素。MC-LR可对雄性动物生殖系统产生毒性,导致不育,主要表现为诱导细胞凋亡、破坏细胞骨架、干扰DNA损伤修复途径或损伤血睾屏障(BTB)功能等。睾丸支持细胞(Sertoli细胞)是生精小管中与生精细胞直接接触的体细胞,可通过分泌多种细胞因子和免疫抑制因子调节免疫反应以维持睾丸免疫稳态,亦可与邻近生殖细胞形成BTB,为各级生精细胞提供营养、支持和保护作用的微环境。MC-LR可引发睾丸Sertoli细胞炎症、诱导细胞凋亡、破坏BTB完整性,进而造成睾丸生精功能障碍。

关键词：微囊藻毒素LR(microcystin-LR) 睾丸支持细胞凋亡血睾屏障综述

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基于内质网应激的中医药防治脑缺血再灌注机制研究

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时珍国医国药 2017年第9期28卷 2218-2221页

作者：陶薇王金凤谭凌菁冯知涛蔡三金周华军梅志刚三峡大学医学院国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002 三峡大学第一临床医学院神经研究所湖北宜昌443003

内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)是内质网受到不良刺激后大量未折叠蛋白在内质网内聚集的现象,在脑缺血再灌注损伤病理过程中扮演重要角色。研究表明,早期温和的ERS有利于内质网内环境稳态的恢复,而持续长时间的ERS可能... 详细信息

内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)是内质网受到不良刺激后大量未折叠蛋白在内质网内聚集的现象,在脑缺血再灌注损伤病理过程中扮演重要角色。研究表明,早期温和的ERS有利于内质网内环境稳态的恢复,而持续长时间的ERS可能加重脑缺血再灌注后神经元凋亡和坏死,是引起再灌注损伤的重要原因。故针对不同时程的ERS药物研究可能成为缺血性中风过程中脑缺血再灌注损伤治疗的新靶点。中医药对缺血性中风治疗临床应用广泛,然而其潜在的作用机制尚不明了。近年来,中医药通过调节ERS防治脑缺血再灌注损伤的研究逐渐被关注,该文对国内外近10年来基于ERS的中医药防治脑缺血再灌注损伤的文献进行综述,以期为临床合理运用中医药防治缺血性中风提供理论依据。

关键词：内质网应激脑缺血再灌注中药

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华泽兰根部乙酸乙酯萃取物基于NF-κB及NLR-P3炎症小体信号通路对NIH-3T3小鼠胚胎成纤维细胞功能的影响

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中华中医药学刊 2023年第4期41卷 144-150,I0040,I0041页

作者：杜冯邹坤黄文峰天然产物研究与利用湖北省重点实验室三峡大学医学院湖北宜昌443002 三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002

目的探讨华泽兰乙酸乙酯萃取物对小鼠胚胎成纤维细胞(NIH-3T3)功能的影响。方法从炎症因子一氧化氮(NO)及氧化应激重要因素活性氧(ROS)介入,通过核因子κB(NF-κB)及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLR-P3)炎症小体等信号通路角度... 详细信息

目的探讨华泽兰乙酸乙酯萃取物对小鼠胚胎成纤维细胞(NIH-3T3)功能的影响。方法从炎症因子一氧化氮(NO)及氧化应激重要因素活性氧(ROS)介入,通过核因子κB(NF-κB)及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLR-P3)炎症小体等信号通路角度阐明其作用机制。体外培养NIH-3T3细胞,分为空白对照组(Control)、不同浓度华泽兰根部乙酸乙酯萃取物组,检测不同浓度下华泽兰根部乙酸乙酯萃取物对NIH-3T3细胞Toll增殖活性(MTT法)、细胞迁移(细胞划痕实验)、分泌NO及胞内ROS生成的影响,Western blot法检测其对Toll样受体4(TLR-4)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、NLR-P3、NF-κB、髓样分化因子(Myd88)、核因子抑制蛋白α(IκBα)、白细胞介素-18(IL-18)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、环氧化酶-2(COX-2)蛋白表达的影响。结果细胞增殖与细胞划痕实验表明,华泽兰根部乙酸乙酯萃取物对于NIH-3T3细胞的增殖与划痕愈合影响具有双向性。与对照组相比在低浓度下(<6.25μg·mL^(-1)),萃取物有促进NIH-3T3细胞增殖与迁移的作用,而高浓度(>25μg·mL^(-1))反而表现出对NIH-3T3细胞的增殖与迁移抑制作用,且不同阶段呈现出相应的剂量依赖性,与对照组相比有统计学意义(P<0.05)。在萃取物浓度为6.25μg·mL^(-1)时,NO生成量相较于低浓度组差异有显著统计学意义(P<0.01),而高浓度组(>12.5μg·mL^(-1))相较对照组差异无统计学意义(P>0.05)。细胞内ROS生成实验表明,经华泽兰根部乙酸乙酯萃取物处理后ROS生成量显著高于对照组(P<0.05,P<0.01)。Western blot实验表明,与对照组相比,萃取物作用浓度为6.25μg·mL^(-1)时,细胞内NF-κB、TLR-4、Myd88、NLR-P3、ASC表达显著升高(P<0.01),IκBα表达升高(P<0.05),IL-18表达显著降低(P<0.01),Caspase-3表达降低(P<0.05)。结论华泽兰乙酸乙酯萃取物对小鼠胚胎成纤维细胞(NIH-3T3)增殖的影响具有双向性,即低浓度促进细胞增殖而高浓度抑制细胞增殖。其作用机制可能与NF-κB及NLR-P3炎症小体信号通路和细胞凋亡有关。

关键词：华泽兰 NIH-3T3细胞细胞功能 NF-κB 炎症小体

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葛根素对脑缺血再灌注大鼠海马组织中Bcl-2、Beclin1及LC3蛋白表达的影响

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时珍国医国药 2018年第5期29卷 1064-1068页

作者：王静静梅志刚汪露刘晓露程瑶冯知涛张继红谭凌菁三峡大学医学院国家中医药管理局中药药理三级实验室湖北宜昌443002 三峡大学第二人民医院湖北宜昌443000

目的观察葛根素对脑缺血再灌注大鼠海马组织中Bcl-2、Beclin1及LC3表达的影响。方法 28只雄性SD(250~300g)大鼠随机分为假手术组、模型组、葛根素低剂量(50mg/kg)组和葛根素高剂量(100mg/kg)组。连续给药7 d,末次给药1 h后,建立大脑中... 详细信息

目的观察葛根素对脑缺血再灌注大鼠海马组织中Bcl-2、Beclin1及LC3表达的影响。方法 28只雄性SD(250~300g)大鼠随机分为假手术组、模型组、葛根素低剂量(50mg/kg)组和葛根素高剂量(100mg/kg)组。连续给药7 d,末次给药1 h后,建立大脑中动脉闭塞模型,缺血90 min后,再灌注24 h,评估神经功能,采用TTC染色观察脑梗死面积,Western Blotting法检测缺血侧海马组织中Bcl-2、Beclin1及LC3蛋白表达的变化。结果与假手术组比较,模型组的大鼠神经功能损伤显著增强,脑梗死面积增加,Bcl-2蛋白表达显著下调,Beclin1蛋白表达显著上调,LC3-II/LC3-I的比值显著上升;与模型组比较,葛根素低、高剂量组随着剂量的增加,大鼠的神经功能损伤逐渐改善,脑梗死面积逐渐减小,Bcl-2的表达逐渐上调,Beclin1的表达逐渐下调,LC3-II/LC3-I的比值逐渐下降,呈剂量依赖性。结论葛根素可通过调控脑缺血/再灌注后凋亡基因Bcl-2的表达,下调自噬相关蛋白Beclin1及LC3蛋白表达,抑制过度自噬,继而达到保护缺血性中风损伤的目的。

关键词：脑缺血再灌注葛根素自噬 Beclin1 Bcl-2 LC3

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华蟾素对骨癌痛大鼠镇痛机制探讨

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中草药 2020年第14期51卷 3734-3741页

作者：焦良波刘丹陈涛张继红胡卫三峡大学第二人民医院/宜昌市第二人民医院湖北宜昌443002 黄冈市中医医院湖北黄冈438000 三峡大学医学院/国家中医药管理局中药药理(肿瘤)科研三级实验室湖北宜昌443003

目的探讨华蟾素对骨癌痛(cancer-induced bone pain,CIBP)大鼠镇痛作用机制。方法筛选痛阈值满足条件的雌性SD大鼠构建CIBP模型,华蟾素各组大鼠在造模第7天开始ip低、中、高浓度的华蟾素注射液,假手术组与模型组ip等量的生理盐水,连续给... 详细信息

目的探讨华蟾素对骨癌痛(cancer-induced bone pain,CIBP)大鼠镇痛作用机制。方法筛选痛阈值满足条件的雌性SD大鼠构建CIBP模型,华蟾素各组大鼠在造模第7天开始ip低、中、高浓度的华蟾素注射液,假手术组与模型组ip等量的生理盐水,连续给药7 d,各组大鼠分别在造模前和造模后及单次注射华蟾素后的0.5、1、2、4、6、8、24 h检测大鼠机械痛阈值与热痛阈值,Western blotting检测丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)相关蛋白的表达,ELISA法检测脊髓细胞因子白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNFtumornecrosis factor-alpha,TNF-α)、单核细胞趋化蛋白(monocyte chemoat tractant protein,MCP-1)的含量。结果大鼠造模后,模型组大鼠的热痛阈值、机械痛阈值明显降低(P<0.01);予以华蟾素干预后,大鼠的热痛阈值、机械痛阈值升高,且浓度越高,痛阈值越高(P<0.05、0.01);单次给药后,华蟾素在ip后6 h作用最强,而后作用缓慢减弱;但华蟾素对正常大鼠的痛阈值无影响(P>0.05)。Westernblotting的结果显示,模型组大鼠脊髓MAPKs相关蛋白的活化水平增加(P<0.05);华蟾素能下调大鼠脊髓中活化的氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinases,JNK)、p38蛋白的表达量,而p-ERK蛋白的表达未见明显差异(P>0.05)。ELISA结果显示,模型组大鼠脊髓中TNF-α、IL-1β、MCP-1的含量明显增多(P<0.05),华蟾素能显著抑制其释放(P<0.05)。结论华蟾素可能是通过抑制脊髓MAPKs信号通路相关蛋白(JNK、p38)的活化,减少细胞因子释放,从而发挥缓解CIBP的作用。

关键词：华蟾素骨癌痛镇痛丝裂原激活的蛋白激酶机械痛热痛细胞因子

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肠道干细胞标记物的研究进展

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中国细胞生物学学报 2023年第8期45卷 1265-1272页

作者：李梅童乐黄玲唐小涵张长城郭煜晖三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室三峡大学健康医学院宜昌443002

肠道干细胞(intestinal stem cells,ISCs)除了具有自我更新能力和多能性外,还表现出活跃的增殖、信号活动以及特殊的表观遗传和代谢特征。其主要作用是维护肠道组织的稳态、修复受损的肠道黏膜和调节肠道细胞分化。目前,主要有两种ISCs... 详细信息

肠道干细胞(intestinal stem cells,ISCs)除了具有自我更新能力和多能性外,还表现出活跃的增殖、信号活动以及特殊的表观遗传和代谢特征。其主要作用是维护肠道组织的稳态、修复受损的肠道黏膜和调节肠道细胞分化。目前,主要有两种ISCs,各自拥有不同的特异性标记物且具有广泛不同的生物学功能,但都与肠道疾病的发生和发展关系密切。然而,ISCs标记物的缺乏严重限制了对ISCs生物学特性的研究,阻碍了临床上ISCs及其衍生物用于治疗肠道相关疾病的研究进程。以下就近年来ISCs标记物及肠道诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)的研究进展作一综述,旨在为临床治疗肠道疾病提供有益线索。

关键词：肠道干细胞 Lgr5 Olfm4 Bmi1 Lrig1

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荨麻的性状和显微鉴别研究

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时珍国医国药 2019年第6期30卷 1401-1403页

作者：卫子皎张敏王纯张小佳曾建红陈涛三峡大学医学院国家中医药管理局中药药理(肿瘤)科研三级实验室湖北宜昌443002 湖北省松滋市人民医院 434200

目的对荨麻进行组织形态学研究,为其鉴定提供依据。方法采用性状和显微鉴别方法对荨麻进行鉴别。结果茎四棱形,少分枝;叶近膜质,呈宽卵形、椭圆形、五角形或近圆形;气微,味淡,微辛。茎的横切片显微特征:茎表皮细胞分化有少数腺毛和... 详细信息

目的对荨麻进行组织形态学研究,为其鉴定提供依据。方法采用性状和显微鉴别方法对荨麻进行鉴别。结果茎四棱形,少分枝;叶近膜质,呈宽卵形、椭圆形、五角形或近圆形;气微,味淡,微辛。茎的横切片显微特征:茎表皮细胞分化有少数腺毛和非腺毛,内侧有1~4层成环状排列厚角细胞;皮层薄壁细胞含大量碳酸钙钟乳体和草酸钙簇晶;9个外韧型维管束,韧皮部窄小,木质部导管、木纤维发达;髓宽广,近中心的薄壁细胞较大,形成髓腔。叶的横切片显微特征:叶脉由表皮、基本组织和外韧型维管束组成,基本组织中含大量碳酸钙钟乳体和草酸钙簇晶,韧皮纤维和厚角组织发达。荨麻茎和叶粉末中均有多数棒状腺毛,非腺毛单个或多个细胞组成,钟乳体和草酸钙簇晶众多,此外可见成束的晶鞘纤维。茎粉末中以具缘纹孔导管为主,而叶粉末中以梯纹导管多见。荨麻叶粉末中的不定式或不等式的气孔,可作为荨麻鉴别的依据之一。结论该研究明确了荨麻的性状特征和显微特征,所建立的鉴别方法操作简单,准确可靠。

关键词：荨麻性状鉴定显微鉴定

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耳穴电刺激配合声音掩蔽对耳鸣大鼠听觉皮层的CREB蛋白、BDNF及其受体TrkB表达的影响

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中国针灸 2019年第6期39卷 637-642页

作者：杨松柏彭利艳梅志刚谭凌菁黄亚光冯知涛蔡三金马文翰张定棋三峡大学中医医院宜昌市中医医院湖北宜昌443003 华中科技大学同济医学院附属同济医院耳鼻喉科三峡大学医学院国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002

目的:探讨耳穴电刺激配合声音掩蔽对耳鸣大鼠听觉皮层的环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)表达的影响。方法:将27只成年雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组。模型... 详细信息

目的:探讨耳穴电刺激配合声音掩蔽对耳鸣大鼠听觉皮层的环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)表达的影响。方法:将27只成年雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组。模型组及治疗组大鼠采取腹腔注射水杨酸钠诱导制作耳鸣模型;对照组注射0.9%NaCl溶液。造模成功后,治疗组采用耳穴"神门""胰胆"电刺激配合声音掩蔽法治疗,每天1次,治疗15d。采用声音惊吓反应监测系统监测各组大鼠的停顿声音预刺激抑制惊吓反应(GPIAS)及预刺激抑制反应(PPI),以WesternBlot法检测各组大鼠听觉皮层的BDNF及其受体TrkB,CREB和磷酸化CREB(p-CREB)蛋白表达。结果:①与对照组比较,模型组大鼠在12、16、20、28 kHz高频背景声音的GPIAS比值均下降(均P<0.05);与模型组比较,治疗组在12、16、20、28 kHz高频背景声音的GPIAS比值均升高(均P<0.05)。②与对照组比较,模型组BDNF蛋白表达、p-CREB蛋白表达均升高(均P<0.01),TrkB表达升高(P<0.05);治疗组与模型组BDNF和TrkB表达、CREB及p-CREB蛋白表达比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:耳穴电刺激配合声音掩蔽法能改善耳鸣大鼠高频背景声音的GPIAS比值变化,此作用可能与抑制耳鸣大鼠听觉皮层的BDNF/TrkB/CREB信号通路相关蛋白表达下调,进而逆转不良可塑性改变有关。

关键词：耳鸣耳穴电刺激声音掩蔽脑源性神经营养因子酪氨酸蛋白激酶受体B 环磷腺苷反应元件结合蛋白

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TGF-β信号通路在非小细胞肺癌中的作用

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生命的化学 2019年第3期39卷 575-580页

作者：甘声通邱君丽刘晓慧张艳丽王小振任振阳陈涛三峡大学医学院国家中医药管理局中药药理/肿瘤科研三级实验室

非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)是肺癌中最常见的类型,其恶性程度高、预后差、易于早期浸润转移。TGF-β信号通路在NSCLC的发生发展中发挥着重要作用,它能通过促进上皮-间质转化和血管生成,促使NSCLC侵袭转移,且与NS... 详细信息

非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)是肺癌中最常见的类型,其恶性程度高、预后差、易于早期浸润转移。TGF-β信号通路在NSCLC的发生发展中发挥着重要作用,它能通过促进上皮-间质转化和血管生成,促使NSCLC侵袭转移,且与NSCLC的耐药性密切相关。TGF-β信号通路与NSCLC发展之间密切的联系使其成为治疗NSCLC的新靶点。因此,靶向抑制TGF-β信号通路具有良好的临床应用前景。本文主要综述了TGF-β信号通路促进NSCLC侵袭转移及介导耐药的相关机制,并探讨了TGF-β信号通路抑制剂在NSCLC治疗中的作用。

关键词：非小细胞肺癌转化生长因子-β 上皮-间质转化靶向治疗

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基于网络药理学与实验验证探讨资木瓜治疗类风湿关节炎的作用机制

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中国中药杂志 2023年第18期48卷 4852-4863页

作者：段志豪金璨邓颖柳金浪王颉李世刚周游三峡大学附属仁和医院骨科湖北宜昌443001 三峡大学运动医学研究所湖北宜昌443001 宜昌市运动损伤与修复临床医学研究中心湖北宜昌443001 三峡大学医学院湖北宜昌443000 三峡大学国家中医药管理局中药药理(肿瘤)科研三级实验室湖北宜昌443000

运用网络药理学方法探讨资木瓜治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的物质基础和作用机制,并通过分子对接和实验验证资木瓜抗RA的潜在靶点。从中药系统药理学数据库与分析平台筛选资木瓜中的活性成分及靶点。利用GeneCards、DisG... 详细信息

运用网络药理学方法探讨资木瓜治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的物质基础和作用机制,并通过分子对接和实验验证资木瓜抗RA的潜在靶点。从中药系统药理学数据库与分析平台筛选资木瓜中的活性成分及靶点。利用GeneCards、DisGeNET和OMIM数据库获取RA相关靶点,两者取交集,即资木瓜治疗RA的潜在作用靶点。利用Cytoscape 3.9.0软件,构建“中药-活性成分-共同靶点-疾病”网络。利用STRING建立蛋白相互作用(PPI)网络,运用RStudio 4.1.0软件对核心基因进行可视化。运用DAVID数据库进行基因本体(Gene Ontology,GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析,预测其富集的信号通路并进行可视化展示。将筛选出来的活性成分作为配体,与筛选得到的RA核心靶点进行分子对接分析,最后通过动物实验进一步验证实验结果。资木瓜的主要活性成分4种、对应靶点137个,药物疾病共同靶点37个;GO富集分析得到239个条目(P<0.05),KEGG通路富集分析筛选出94条信号通路(P<0.05),主要涉及IL-17信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、Toll样受体信号通路和NF-κB信号通路等。分子对接结果显示,资木瓜主要活性成分与RA核心靶点结合较好。动物实验结果显示,资木瓜可以缓解RA小鼠的关节肿胀度,显著降低白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平,显著降低血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)蛋白表达水平。资木瓜可通过影响VEGFA、IL-1β和IL6等核心靶点发挥抗炎和减少血管翳生成,从而减轻炎症,减少血管翳对关节的破坏以达到治疗RA的作用,以上研究为该传统中药日后治疗RA的进一步探索提供了新思路。

关键词：网络药理学分子对接资木瓜实验验证作用机制

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