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长链非编码RNA AW112010通过miR-204/POU2F2轴改善衰老小鼠脂肪细胞的胰岛素抵抗

中华内分泌代谢杂志 2024年第1期40卷 44-52页

作者：王锐王淑文张一凡胡雅琪原琪温媛陈晓玲卢婷郑颖林志勇薛梦珍王雅琦夏芳奇朱蕾奇袁成福三峡大学基础医学院国家中医药管理局中药药理(肿瘤)科研三级实验室宜昌443002

目的探讨长链非编码RNA AW112010(lncRNA AW112010)是否可能通过miR-204/POU类同源盒2(POU2F2)信号通路改善衰老脂肪细胞的胰岛素抵抗。方法体内实验:将C57BL/6小鼠按体重分成年轻对照组(4月龄)、衰老模型组(18月龄);实时荧光定量PCR及W... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA AW112010(lncRNA AW112010)是否可能通过miR-204/POU类同源盒2(POU2F2)信号通路改善衰老脂肪细胞的胰岛素抵抗。方法体内实验:将C57BL/6小鼠按体重分成年轻对照组(4月龄)、衰老模型组(18月龄);实时荧光定量PCR及Western印迹法检测附睾脂肪组织中lncRNA AW112010、miR-204-5p、POU2F2、衰老相关指标(p16、p21)及胰岛素信号通路基因[胰岛素受体(INSR)、胰岛素受体底物1(IRS1)、磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)]的表达量。体外实验:用阿霉素诱导3T3-L1衰老脂肪细胞模型,β-gal染色观察细胞衰老,成功构建miR-204抑制剂及miR-204模拟物的小干扰RNA,转染3T3-L1脂肪细胞。结果实时荧光PCR与Western印迹结果表明,与年轻小鼠比较,衰老小鼠附睾脂肪组织中AW112010的表达水平增高,而miR-204-5p的表达水平降低;衰老小鼠附睾脂肪组织中POU2F2、p16、p21的表达水平增高,而INSR、IRS1、PI3K、GLUT4 mRNA及蛋白的表达水平降低。β-gal染色结果表明,阿霉素诱导的3T3-L1衰老脂肪细胞数量明显增多,且与对照组相比,阿霉素诱导的衰老脂肪细胞中AW112010、POU2F2、p16、p21的表达量增高,而miR-204-5p、INSR、IRS1、PI3K、GLUT4的表达量降低,培养基中葡萄糖的剩余量增多。与对照组相比,miR-204过表达后,衰老指标p16、p21及靶基因POU2F2的表达量降低;INSR、GLUT4的表达量增高。结论衰老小鼠脂肪细胞中上调的lncRNA AW112010可能通过靶向miR-204-5p/POU2F2/IRS1导致胰岛素抵抗。

关键词：衰老 LncRNA AW112010 miR-204-5p POU2F2 胰岛素抵抗

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竹节参总皂苷对高脂饮食小鼠白色脂肪棕色化/棕色脂肪活化的影响及机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第2期30卷 71-78页

作者：王淑文胡雅琪王锐张一凡薛梦珍王雅琦夏芳奇朱蕾奇袁成福三峡大学国家中医药管理局中药药理(肿瘤)科研三级实验室湖北宜昌443002 三峡大学基础医学院湖北宜昌443002

目的:研究竹节参总皂苷对高脂饮食(HFD)喂养C57BL6/J雄性小鼠白色脂肪棕色化/棕色脂肪活化的影响,并探讨其机制。方法:将32只8周龄小鼠随机分为正常组、模型组、竹节参总皂苷低、高剂量组。对竹节参总皂苷低、高剂量组分别按25、75 mg&#... 详细信息

目的:研究竹节参总皂苷对高脂饮食(HFD)喂养C57BL6/J雄性小鼠白色脂肪棕色化/棕色脂肪活化的影响,并探讨其机制。方法:将32只8周龄小鼠随机分为正常组、模型组、竹节参总皂苷低、高剂量组。对竹节参总皂苷低、高剂量组分别按25、75 mg·kg^(-1)·d^(-1)剂量灌胃给药4个月,其余组用0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶剂灌胃。4月后将小鼠置于4℃环境进行急性冷暴露实验,监测小鼠核心体温情况,冷暴露实验结束后处死小鼠,快速分离棕色脂肪组织(BAT)及腹股沟白色脂肪组织(iWAT)。苏木素-伊红(HE)染色观察各组小鼠组织形态变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组小鼠中解偶联蛋白1(UCP1)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、细胞色素C(CytC)、PR结构域蛋白16(PRDM16)、超长链脂肪酸延伸酶3(ELOVL3)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠UCP1、PRDM16、PPARγ、PGC-1α蛋白表达;免疫组织化学检测各组小鼠UCP1表达。结果:①与模型组比较,竹节参总皂苷可降低小鼠体质量及iWAT、BAT水平(P<0.05,P<0.01)。②急性冷暴露实验结果显示,与正常组比较,模型组小鼠体温降低(P<0.05);与模型组比较,竹节参总皂苷高剂量组小鼠体温显著上升(P<0.01)。③与正常组比较,模型组小鼠iWAT、BAT中脂肪细胞直径明显增大,单位面积细胞数目减少;与模型组比较,竹节参总皂苷用药组的细胞直径明显减小,单位面积细胞数目增多,竹节参总皂苷高剂量组效果更明显。④与正常组比较,模型组小鼠脂肪组织中FABP4、UCP1、CytC、PRDM16、ELOVL3、PGC-1α、PPARγmRNA表达降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,竹节参总皂苷干预后,上述mRNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。⑤与正常组比较,模型组脂肪组织UCP1、PRDM16、PPARγ、PGC-1α蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,竹节参总皂苷高剂量组干预后,上述蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论:竹节参总皂苷可诱导高脂饮食小鼠白色脂肪组织棕色化/棕色脂肪活化,增强高脂诱导肥胖小鼠适应性产热;其机制涉及PPARγ/PGC-1α通路的激活。

关键词：竹节参总皂苷白色脂肪棕色化棕色脂肪活化肥胖过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ) 过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)

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淫羊藿苷通过调节mTORC1和mTORC2平衡改善衰老所致小鼠睾丸支持细胞紧密连接损伤

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中国药理学通报 2025年

作者：程窈婷张长城付国庆王坦毛剑敏孙建明赵海霞三峡大学国家中医药管理局中医药理科研三级实验室三峡大学基础医学院三峡大学健康医学院上海中医药大学附属第七人民医院

目的探究淫羊藿苷对自然衰老小鼠睾丸支持细胞紧密连接损伤的保护作用及机制。方法将15月龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为衰老模型组、淫羊藿苷低剂量(5mg·kg-1)和高剂量(20mg·kg-1)给药组，另设1月龄小鼠为青年对照组，10只/组... 详细信息

目的探究淫羊藿苷对自然衰老小鼠睾丸支持细胞紧密连接损伤的保护作用及机制。方法将15月龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为衰老模型组、淫羊藿苷低剂量(5mg·kg-1)和高剂量(20mg·kg-1)给药组，另设1月龄小鼠为青年对照组，10只/组。青年对照组与衰老模型组小鼠接受0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃作为溶媒对照，淫羊藿苷给药组小鼠则分别接受不同浓度淫羊藿苷灌胃，连续给药3个月后，检测小鼠睾丸和附睾重量、脏器指数、精子活率和浓度，HE染色观察睾丸组织形态，电镜观察睾丸支持细胞紧密连接超微结构，Westernblot检测睾丸支持细胞紧密连接相关蛋白ZO-1、Occludin和Claudin11表达水平，免疫荧光检测睾丸ZO-1、Occludin、Raptor、Rictor、p-70S6K和p-rps6定位和表达。结果与衰老模型组相比，淫羊藿苷可明显增加衰老小鼠睾丸重量、睾丸指数、附睾指数，提高精子活率和浓度，改善睾丸组织形态及紧密连接超微结构损伤。Westernblot结果显示，淫羊藿苷上调ZO-1和Occludin表达，但对Claudin11的表达无显著影响。免疫荧光结果显示，淫羊藿苷能上调ZO-1、Occludin及Rictord的表达，下调p-70S6K、p-rps6及Raptor的表达。结论淫羊藿苷可改善自然衰老小鼠睾丸支持细胞紧密连接损伤，其机制可能与恢复mTORC1和mTORC2的平衡有关。

关键词：淫羊藿苷衰老睾丸支持细胞紧密连接功能 mTORC1和mTORC2平衡

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不同性味化瘀消癥药对子宫腺肌病小鼠肠道代谢的差异性调节作用研究

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中药药理与临床 2024年第12期40卷 8-15页

作者：刘士丹王美玲屈赵付先芸王坤陈敏敏杨丹三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室三峡大学健康医学院宜昌443002 宜昌市中医医院宜昌443000

目的:探讨不同性味化瘀消癥药对子宫腺肌病(AM)小鼠肠道代谢的差异性调控作用。方法:ICR小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、桂枝茯苓丸0.42 g/kg组和大黄-桃仁0.31 g/kg组。采用同种异体垂体移植法构建AM小鼠模型。对比小鼠给药前后... 详细信息

目的:探讨不同性味化瘀消癥药对子宫腺肌病(AM)小鼠肠道代谢的差异性调控作用。方法:ICR小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、桂枝茯苓丸0.42 g/kg组和大黄-桃仁0.31 g/kg组。采用同种异体垂体移植法构建AM小鼠模型。对比小鼠给药前后热板痛阈值变化;阴道涂片观察小鼠动情周期;HE染色评价子宫组织病理浸润深度;免疫荧光检测子宫组织雌激素受体α(ERα)表达。采用液质联用技术(LC-MS)进行肠道代谢组学分析,筛选和对比潜在的差异代谢物,并根据部分筛选结果进行实验验证。结果:与正常对照组相比,模型对照组小鼠热板痛阈时间显著缩短,子宫组织病理学评分显著升高,ERα表达量明显增加(P<0.01);与模型对照组相比,各给药组均能显著延长热板痛阈时间,子宫组织病理学评分和ERα表达水平显著降低(P<0.05)。代谢组学筛选到35种与AM相关的生物标志物,桂枝茯苓丸0.42 g/kg组、大黄-桃仁0.31 g/kg组可回调其中8种差异代谢物。其中,桂枝茯苓丸0.42 g/kg组可干预含硫氨基酸代谢的多个环节,显著升高花生四烯酸代谢中前列腺素D3含量,有效抑制硬脂酰胺、硬脂酸甘油酯、磷脂酰甘油等脂肪酸代谢水平。大黄-桃仁0.31 g/kg组同时调控花生四烯酸代谢中前列腺素D3及血栓素B2水平,并通过胆汁酸途径改善AM的脂质代谢紊乱。进一步的实验证实,与正常对照组相比,模型对照组子宫组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)蛋白表达显著上调,子宫组织活性氧(ROS)水平显著升高(P<0.01);与模型对照组相比,各给药组子宫组织中TNF-α、IL-1β蛋白表达明显下调,桂枝茯苓丸0.42 g/kg组ROS水平明显降低(P<0.05)。结论:两类不同性味的化瘀消癥药可参与调控不同的代谢通路及环节,通过调节炎症因子、氧化应激水平发挥对AM小鼠的治疗作用。

关键词：桂枝茯苓丸大黄-桃仁子宫腺肌病肠道代谢组学肿瘤坏死因子-α 白介素-1β

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硫氧还蛋白-1在脑缺血中作用的研究现状

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中国临床药理学杂志 2024年第10期40卷 1525-1529页

作者：刘怀玉王可闫文静王月张文欣何治三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室三峡大学健康医学院嘉兴大学医学院

硫氧还蛋白-1(Trx-1)是一种小分子氧化还原蛋白，通常存在于哺乳动物细胞中，通过提供电子或调节相关蛋白来响应不断变化的氧化还原环境。根据现有证据该文将简要介绍Trx-1的基本概念以及Trx-1在脑缺血中的表达变化，重点介绍Trx-1在脑... 详细信息

硫氧还蛋白-1(Trx-1)是一种小分子氧化还原蛋白，通常存在于哺乳动物细胞中，通过提供电子或调节相关蛋白来响应不断变化的氧化还原环境。根据现有证据该文将简要介绍Trx-1的基本概念以及Trx-1在脑缺血中的表达变化，重点介绍Trx-1在脑缺血发生后的神经保护作用，包括抗氧化、抗炎、抗凋亡、促进细胞生长、血管再生作用，以及其在脑缺血相关疾病中的作用。

关键词：硫氧还蛋白-1 脑缺血硫氧还蛋白相互作用蛋白神经保护作用机制

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基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS技术的竹节参提取物血清药物化学研究

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中国中药杂志 2024年第23期49卷 6490-6499页

作者：温媛刘畅原琪王锐李雪晴袁丁袁成福何毓敏三峡大学国家中医药管理局药理科研三级实验室湖北宜昌443002 三峡大学健康医学院湖北宜昌443002 三峡大学基础医学院湖北宜昌443002

该研究运用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)技术对竹节参提取物及其入血成分进行分析。采用Waters UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈为流动相,梯度... 详细信息

该研究运用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)技术对竹节参提取物及其入血成分进行分析。采用Waters UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈为流动相,梯度洗脱,电喷雾离子源正、负离子模式下得到高分辨多级质谱数据后与对照品保留时间、高分辨精确相对分子质量、二级碎片信息及相关文献比对,阐明竹节参提取物化学成分。通过大鼠灌胃给予竹节参提取物后腹主动脉取血分离血清,扫描鉴定入血成分。最终在竹节参提取物中检测出43个化学成分,包括22个三萜皂苷类、9个氨基酸类、5个多糖类、2个挥发油类、5个核苷类。在竹节参提取物含药血清中检测出18个入血成分,包括10个原型成分、6个代谢产物和2个未知成分。该研究分析了竹节参提取物及入血成分,为明确竹节参的药效物质基础提供线索。

关键词：竹节参提取物血清药物化学原型成分代谢产物 UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS

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稀有人参皂苷的应用基础与开发利用研究进展

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中国中药杂志 2024年第2期49卷 304-314页

作者：郭佳龙刘畅王瑶袁成福袁丁何毓敏三峡大学健康医学院湖北宜昌443002 三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002 三峡大学基础医学院湖北宜昌443002

稀有人参皂苷是一类天然含量稀少、生物利用度较高、生物学活性较突出的次生皂苷,其获得途径通常是由人参属植物中直接提取的原型皂苷经生物学或化学方法转化得到,近来年还出现了利用代谢工程与合成生物学技术创建的微生物细胞工厂合成... 详细信息

稀有人参皂苷是一类天然含量稀少、生物利用度较高、生物学活性较突出的次生皂苷,其获得途径通常是由人参属植物中直接提取的原型皂苷经生物学或化学方法转化得到,近来年还出现了利用代谢工程与合成生物学技术创建的微生物细胞工厂合成的途径。稀有人参皂苷因其在提高机体免疫功能、抗肿瘤等方面的显著生物活性而受到广泛关注。目前关于稀有人参皂苷综述多数集中在转化制备、工艺优化及药理活性等方面,而在产业化分析方面有所不足。该文结合国内外相关文献整理总结了目前常见稀有人参皂苷的结构类型、药理活性、获取来源以及转化途径,并概括了目前已有稀有人参皂苷制备过程中存在的问题,讨论了未来的研究与利用展望,以期为提升稀有人参皂苷的基础研究水平,并促进其产业化发展提供理论依据。

关键词：人参属稀有人参皂苷应用基础开发利用

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软骨细胞在类风湿关节炎中的双重角色

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中国病理生理杂志 2024年第5期40卷 924-930页

作者：周俨淋张晓丽艾正文曹郡李世刚三峡大学健康医学院湖北宜昌443002 三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002 三峡大学基础医学院湖北宜昌443002

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节疼痛和肿胀为主要特征的慢性自身免疫性疾病,其本质是滑膜增生和软骨被破坏。多年来,相比其他巨噬细胞,淋巴细胞等,软骨细胞受到的关注较少,人们普遍把RA中的软骨细胞作为反映病症特... 详细信息

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节疼痛和肿胀为主要特征的慢性自身免疫性疾病,其本质是滑膜增生和软骨被破坏。多年来,相比其他巨噬细胞,淋巴细胞等,软骨细胞受到的关注较少,人们普遍把RA中的软骨细胞作为反映病症特点的工具细胞。然而越来越多的研究表明,作为关节软骨中唯一的细胞,在RA中软骨细胞不仅仅作为靶细胞,被多种细胞因子从不同信号通路致使其发生细胞损伤或细胞凋亡;同时,软骨细胞自身也会产生基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)促炎因子,以及协同其他相关细胞调控关节内环境,参与RA进展。软骨细胞在RA中的重要作用,或许可能为RA临床预防和治疗提供帮助。

关键词：软骨细胞类风湿关节炎靶细胞效应细胞

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TRP通道介导线粒体功能调控及其与心血管疾病关系研究进展

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中国比较医学杂志 2024年第3期34卷 127-132页

作者：朱美萍张世忠三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室三峡大学基础医学院湖北宜昌443000

瞬时受体电位(transient receptor potential,TRP)通道是一类非选择性阳离子通道。近年来研究发现TRP通道与多种疾病有关,其中关于TRP通道通过线粒体功能调控参与相关心血管疾病机制的研究,正成为心血管疾病机制研究的热点之一。目前相... 详细信息

瞬时受体电位(transient receptor potential,TRP)通道是一类非选择性阳离子通道。近年来研究发现TRP通道与多种疾病有关,其中关于TRP通道通过线粒体功能调控参与相关心血管疾病机制的研究,正成为心血管疾病机制研究的热点之一。目前相关的文献主要集中在TRPV、TRPM和TRPC。本文主要就上述3种TRP通道在线粒体功能调节中的作用及其与心血管疾病的关系研究进展进行综述。

关键词： TRP通道线粒体功能心血管疾病

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维甲酸在脑缺血及卒中后抑郁中的作用

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生命科学 2023年第3期35卷 378-386页

作者：尚文豆鲁娇储晓娇何治三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室宜昌443002 三峡大学医学院宜昌443002

脑缺血及缺血后再灌注过程的病理生理机制复杂,发病后可能伴随卒中后抑郁等精神障碍,对人类生命和生活质量产生很大的威胁。目前的溶栓和取栓治疗具有极大限制性,寻求一种理想的神经保护药物对于治疗脑缺血有极其重要的临床意义。近年... 详细信息

脑缺血及缺血后再灌注过程的病理生理机制复杂,发病后可能伴随卒中后抑郁等精神障碍,对人类生命和生活质量产生很大的威胁。目前的溶栓和取栓治疗具有极大限制性,寻求一种理想的神经保护药物对于治疗脑缺血有极其重要的临床意义。近年研究发现维甲酸不仅可通过调节炎症反应、保护血脑屏障、抗凋亡、促进神经再生等过程对脑缺血性疾病发挥保护作用,并且血清维甲酸水平在脑缺血及卒中后抑郁中可作为一项独立的指标发挥预测作用。该文将针对维甲酸在脑缺血及卒中后抑郁中的作用进行综述。

关键词：维甲酸视黄酸脑缺血神经保护卒中后抑郁

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