检索结果-内蒙古大学图书馆

药学学报 2024年第5期59卷 1261-1270页

作者：蒋嘉瑞董跨金玉春杨心茹罗亦轩徐书扬王汛江谷丽华石燕红杨莉王峥涛王旭丁丽丽上海中医药大学中药研究所上海市复方中药重点实验室中药标准化教育部重点实验室暨国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203 复旦大学附属妇产科医院乳腺科上海200011

炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)以慢性复发性肠道炎症为特征,包括溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)和克罗恩病(Crohn’s disease,CD)。IBD已成为全球性的医疗保健问题。临床上尚缺乏有效治疗药物。本研究聚焦于UC模型... 详细信息

炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)以慢性复发性肠道炎症为特征,包括溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)和克罗恩病(Crohn’s disease,CD)。IBD已成为全球性的医疗保健问题。临床上尚缺乏有效治疗药物。本研究聚焦于UC模型,旨在寻找新的治疗策略。前期研究发现,五味子甲素(schisandrin A,SchA)体外具有抗炎作用,并促进法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)的转录活性。FXR反向调控NF-κB的转录活性,在调节炎症反应中具有重要作用。因此,本研究主要探讨SchA对UC的保护作用及其通过FXR信号通路调控的机制。在RAW264.7细胞上评价SchA对炎症因子mRNA水平的影响。用双荧光素酶报告基因实验验证SchA与FXR靶向关系。动物实验遵循上海中医药大学动物伦理委员会规定(批准号:PZSHUTCM2304250005)。野生型或FXR敲除的C57BL/6小鼠自由饮用3%右旋葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)7天诱导小鼠急性UC,并灌胃给药SchA连续7天。实验期间每日监测小鼠体重及粪便情况。采用RT-qPCR方法检测结肠组织炎症因子、FXR靶基因的mRNA水平。结果显示:体外SchA抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的炎症因子mRNA水平的增加。同时,SchA可以增加FXR的转录活性。在野生型小鼠中,SchA能明显改善急性UC小鼠的体重下降、结肠缩短、稀便和便血;SchA显著降低结肠组织中促炎因子基因的表达、增加FXR靶基因的表达。在FXR敲除小鼠中,SchA对小鼠急性UC的缓解作用消失。综上,SchA可通过FXR信号通路降低肠道炎症,缓解DSS诱导的小鼠急性UC,提示五味子木脂素类化合物可能是IBD药物开发的先导化合物。

关键词：五味子甲素结肠炎葡聚糖硫酸钠法尼醇X受体抗炎

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泽泻改善胆管结扎致小鼠肝纤维化的药效与机制研究

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药学学报 2025年第5期 1454-1463页

作者：董跨唐莹莹蒋嘉瑞黄幼媚谷丽华丁丽丽李冠成熊爱珍杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室中药功效成分发掘与利用全国重点实验室上海中医药大学附属上海市中医医院

肝纤维化是由多种致病因素导致的慢性肝损伤,造成胶原在内的细胞外基质过度堆积,是多数慢性肝病进展过程中常见的病理改变,然而迄今尚无公认特异有效的药物用于肝纤维化的临床治疗。因此本文研究中药泽泻对胆管结扎(bile duct ligation,... 详细信息

肝纤维化是由多种致病因素导致的慢性肝损伤,造成胶原在内的细胞外基质过度堆积,是多数慢性肝病进展过程中常见的病理改变,然而迄今尚无公认特异有效的药物用于肝纤维化的临床治疗。因此本文研究中药泽泻对胆管结扎(bile duct ligation, BDL)诱导的肝纤维化的改善作用,并初步探讨其潜在的药理作用机制。动物实验方案经上海中医药大学实验动物福利与伦理委员会审查(批准号:PZSHUTCM2303280007),符合实验动物福利与伦理相关规范。对小鼠进行胆管结扎以诱导肝纤维化模型,并设立假手术组(Sham组)、模型组(BDL组)、泽泻醇提物保护组(BDL+EE)、泽泻水提物保护组(BDL+WE)、奥贝胆酸保护组(BDL+OCA)。结果表明,泽泻可明显改善胆管结扎诱导的肝纤维化:泽泻提取物可显著降低肝纤维化小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性、碱性磷酸酶、谷氨酰转移酶及总胆汁酸水平,改善胆汁淤积、胶原沉积、炎性细胞浸润、肝组织坏死等病理状况,其中醇提物药效优于水提物。进一步考察泽泻醇提物改善胆管结扎诱导小鼠肝纤维化的量-效关系,并探讨其作用机制,发现泽泻醇提物可缓解胆管结扎致肝纤维化小鼠体内血清和肝脏胆汁酸代谢失衡,调节肝组织内胆汁酸代谢关键核受体法尼醇X受体(farnesoid X receptor, FXR)及其下游靶基因小异二聚体伴侣(small heterodimer partner, SHP)、胆固醇7-羟化酶(cholesterol 7-alpha hydroxylase, CYP7A1)、胆盐输出泵(bile salt export pump, BSEP)的mRNA表达;体外进一步证实泽泻醇提物中4种主要三萜可在转录水平激活FXR。本研究表明泽泻在临床上防治肝纤维化的应用提供了理论依据。

关键词：泽泻三萜胆汁淤积肝纤维化胆汁酸代谢法尼醇X受体

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山楂配方颗粒UPLC特征图谱建立及绿原酸含量测定

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中成药 2024年第9期46卷 3068-3071页

作者：张方丽刘龙婵王煜李林楠杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的建立山楂配方颗粒UPLC特征图谱,并测定绿原酸含量。方法分析采用Waters ACQUITY UPLC HSS C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相乙腈-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温35℃;检测波长325 nm。结果14批样... 详细信息

目的建立山楂配方颗粒UPLC特征图谱,并测定绿原酸含量。方法分析采用Waters ACQUITY UPLC HSS C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相乙腈-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温35℃;检测波长325 nm。结果14批样品特征图谱中有6个特征峰。绿原酸在0.78125~200μg/mL范围内线性关系良好(R^(2)=0.9998),平均加样回收率为95.86%,RSD为2.36%。结论该方法简便、重复性好,明显优于国家药品监督管理局发布的山里红配方颗粒分析方法,现已作为《上海市中药配方颗粒标准》发布实行。

关键词：山楂配方颗粒 UPLC特征图谱绿原酸含量测定

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基于UPLC-MS/MS技术的内源性胆汁酸分析方法研究进展

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药学学报 2023年第1期58卷 52-62页

作者：魏娇娇鄢星梅余琪丁丽丽李林楠王峥涛杨莉上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

胆汁酸(bile acids,BAs)是一类调节脂质、葡萄糖和能量代谢的内源性甾体物质。其作为宿主和肠道微生物代谢的关键信号分子,在维持机体稳态和生理功能中发挥着重要的作用。生物体内BAs的准确定性定量在基础及临床研究中具有重要意义。过... 详细信息

胆汁酸(bile acids,BAs)是一类调节脂质、葡萄糖和能量代谢的内源性甾体物质。其作为宿主和肠道微生物代谢的关键信号分子,在维持机体稳态和生理功能中发挥着重要的作用。生物体内BAs的准确定性定量在基础及临床研究中具有重要意义。过去几十年间,酶法分析、酶联免疫分析法、核磁共振、色谱法等相关技术均相继应用于BAs的检测。由于BAs结构多样、存在同分异构体,且生物样本基质复杂,给内源性BAs检测带来巨大挑战。超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)是一种稳健性分析技术,其结合了UPLC快速的分离能力及MS/MS强大的结构鉴定功能,使得生物样品中目标分析物的快速分离、准确定性及定量检测更加便利。UPLC-MS/MS因具有高选择性、高灵敏度、高准确性等优势,近年来被广泛用于BAs的分析。本文主要对BAs的生物合成途径、样品前处理方法、常见分析检测技术进行总结,并重点介绍了近五年来UPLC-MS/MS技术在内源性BAs分析中的应用现状,旨在为内源性BAs准确检测及进一步研究和应用提供参考。

关键词：胆汁酸生物基质样品前处理液质联用分析方法

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基于网络药理学和实验验证探讨泽泻改善慢性肾小球肾炎的作用机制

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药学学报 2023年第6期58卷 1430-1440页

作者：仇之淼陆宾卫梦娟季莉莉上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海市复方中药重点实验室上海201203

本文旨在探讨泽泻(Alisma plantago-aquatica Linn.,ApL)对慢性肾小球肾炎(chronic glomerulonephritis CGN)小鼠的改善作用及其机制。动物实验过程均遵循上海中医药大学动物实验伦理委员会的规定。运用一次性尾静脉注射多柔比星(doxoru... 详细信息

本文旨在探讨泽泻(Alisma plantago-aquatica Linn.,ApL)对慢性肾小球肾炎(chronic glomerulonephritis CGN)小鼠的改善作用及其机制。动物实验过程均遵循上海中医药大学动物实验伦理委员会的规定。运用一次性尾静脉注射多柔比星(doxorubicin,Dox,20 mg·kg^(-1))方法建立CGN小鼠模型,造模1周后每天灌胃给药ApL水提物(85和255 mg·kg^(-1)),两周后结束实验。检测小鼠尿白蛋白与肌酐的比值(urine albumin-to-creatinine ratio,ACR)、血清白蛋白(serum albumin,ALB)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和血清肌酐(serum creatinine,SCr)含量,利用HE (hematoxylin-eosin staining,H&E)染色观察肾组织中病理损伤情况。根据TCMSP数据库获取ApL的化学成分及作用靶点,并通过Genecards数据库获取CGN相关靶点。运用String及Metascape数据库进行蛋白互作、GO功能和KEGG通路富集分析。研究结果发现,ApL (85和255 mg·kg^(-1))可以明显降低CGN小鼠ACR以及SCr和BUN含量,并使ALB含量上升。网络药理学结果发现,核因子-κB (nuclear factor kappa-B,NF-κB)相关通路以及氧化还原酶活性调节的生物过程可能是ApL改善CGN的关键因素。验证实验发现,ApL (85和255 mg·kg^(-1))可以抑制CGN小鼠NF-κB的激活和其下游炎症因子的表达,降低肾脏髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活力;并促进核因子E2相关因子2 (nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)的激活,增加其下游基因表达,降低肾脏丙二醛(malondialdehyde,MDA)及活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,提升谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平。本研究基于网络药理学结合实验验证发现ApL可能通过多靶点、多通路发挥改善小鼠CGN的作用,其中对NF-κB信号的抑制和Nrf2信号的激活可能是重要的作用机制。

关键词：慢性肾小球肾炎泽泻网络药理学核因子-κB 核因子E2相关因子2

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大黄素甲醚改善小鼠非酒精性脂肪性肝病的研究

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药学学报 2024年第4期59卷 939-947页

作者：张进宇张少波徐红欧阳豪季莉莉上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院肝病科上海201203

大黄素甲醚(physcion,PHY)是一种来源于大黄等中药的蒽醌类化合物。本实验旨在探究PHY对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的改善作用及其机制。采用蛋氨酸胆碱缺乏饲料(methionine-and choline-deficient diet,MCD)喂养6周诱导小鼠NAFLD疾病模型(本实验获得上海中医药大学实验动物伦理委员会批准,批准号:PZSHUTCM190705019)。结果显示,PHY(5和20 mg·kg^(-1))能改善MCD诱导NAFLD小鼠的肝损伤,减轻肝脏脂肪累积,降低升高的NAFLD活动性评分(NAFLD activity score,NAS)。Western blot及酶活力实验结果提示,PHY能提升肝脏及L-02细胞中肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(carnitine palmitoyltransferase 1A,CPT1A)蛋白表达及酶活力,但real-time PCR结果显示PHY不影响Cpt1a mRNA表达。免疫荧光结果提示,PHY(10和25μmol·L^(-1))能缓解游离脂肪酸(non-esterified fatty acids,NEFA)诱导的人正常肝L-02细胞中的线粒体损伤。Seahorse实验结果提示,PHY给药后能提升L-02细胞内线粒体基础呼吸能力、最大呼吸能力、ATP合成和储备呼吸能力,但不影响线粒体质子漏。以上研究表明,PHY可能通过改善线粒体功能,促进脂肪酸β氧化,减少肝脏中脂肪的堆积,发挥改善NAFLD的药效。

关键词：大黄素甲醚非酒精性脂肪性肝病肉毒碱棕榈酰基转移酶1A β氧化线粒体损伤

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丹参SmHPPR1基因调控丹酚酸生物合成的研究

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药学学报 2023年第9期58卷 2818-2828页

作者：谈荣慧赵望张金家赵淑娟上海中医药大学中药研究所中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203

丹参是临床上治疗心脑血管疾病的常用中药,其主要水溶性活性成分为迷迭香酸和丹酚酸B,由苯丙烷类代谢途径产生。4-羟基苯丙酮酸还原酶(HPPR)是苯丙烷代谢途径中的关键酶。本课题组前期在丹参中克隆了SmHPPR1基因并构建了植物表达载体。... 详细信息

丹参是临床上治疗心脑血管疾病的常用中药,其主要水溶性活性成分为迷迭香酸和丹酚酸B,由苯丙烷类代谢途径产生。4-羟基苯丙酮酸还原酶(HPPR)是苯丙烷代谢途径中的关键酶。本课题组前期在丹参中克隆了SmHPPR1基因并构建了植物表达载体。在此基础上,获得了携带SmHPPR1的转基因拟南芥阳性植株并测定4-羟基苯乳酸的含量;诱导了过表达SmHPPR1丹参毛状根并进行有效成分含量测定和转录组分析。结果显示:携带SmHPPR1的T1代转基因拟南芥中4-羟基苯乳酸含量为0.594 mg·g^(-1);SmHPPR1-OE-3毛状根中的迷迭香酸、丹酚酸B、总丹酚酸含量分别是control-3毛状根的1.09、1.29、1.15倍,丹参素是control-3毛状根的36.26%;转录组分析显示,SmHPPR1过表达引起了SmTAT2表达量上调;蛋白-蛋白相互作用表明CYT(TR74706_c0_g1)、NADP^(+)(TR26565_c0_g1)和NADP^(+)(TR68771_c0_g1)是网络的中心节点并参与代谢过程、细胞过程等。以上研究表明,SmHPPR1在携带SmHPPR1的转基因拟南芥中能催化4-羟基苯丙酮酸还原为4-羟基苯乳酸;丹参毛状根中过表达SmHPPR1可以通过协同调控其他途径基因来提高丹酚酸的含量。

关键词：丹参 4-羟基苯丙酮酸还原酶丹酚酸迷迭香酸生物合成

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手性分离方法及在中药手性成分研究中的应用

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药学学报 2023年第6期58卷 1566-1576页

作者：李依璠刘龙婵李林楠王峥涛杨莉上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学交叉科学研究院上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

化合物手性是自然界的基本特性之一,组成生命体的重要分子大多含有手性结构。药物有效性和安全性往往与化合物的手性结构密切相关,然而目前对手性小分子化学药物的合成表征、药理学、毒理学等研究相对较多,但对中药等天然药物中所含手... 详细信息

化合物手性是自然界的基本特性之一,组成生命体的重要分子大多含有手性结构。药物有效性和安全性往往与化合物的手性结构密切相关,然而目前对手性小分子化学药物的合成表征、药理学、毒理学等研究相对较多,但对中药等天然药物中所含手性化合物的研究相对较少。手性分离作为手性研究的基础,在手性化合物的研究中具有举足轻重的地位。本文从色谱法和非色谱法的手性拆分方法,以及色谱填料、手性添加剂、手性衍生化等方面系统阐述手性化合物的分离方法,并对近十年报道的中药等天然药物中的手性化合物进行综述,以期为中药中手性化合物的分离、活性评价,以及中药质量标准的提升提供参考。

关键词：手性分离手性填料手性化合物中药天然产物

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基于UPLC-Q-TOF-MS/MS、网络药理学和“双外标”一测多评法的复方车前片质量评价研究

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中国中药杂志 2023年第17期48卷 4675-4685页

作者：王康刘培王思凡张洁玉胡智志梅余琪杨颖博王峥涛杨莉上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室、国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203 上海中医药大学交叉科学研究院上海201203 上海中医药大学中药学院上海201203

复方车前片来源于《圣济总录》中车前子散,系由车前子与黄连组方配伍,经现代工艺制作而成的创新中药。为阐明复方车前片治疗糖尿病肾病的物质基础,该研究采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对复方车前片的化学成分进行表征分析,共鉴定出48个化学... 详细信息

复方车前片来源于《圣济总录》中车前子散,系由车前子与黄连组方配伍,经现代工艺制作而成的创新中药。为阐明复方车前片治疗糖尿病肾病的物质基础,该研究采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对复方车前片的化学成分进行表征分析,共鉴定出48个化学成分;以复方车前片中鉴定出的化学成分为研究对象,进行网络药理学分析并结合活性报道,选取了6个药效成分:毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、黄连碱、木兰花碱、巴马汀和小檗碱作为质量评价的指标成分;在此基础上,采用“双外标”一测多评法对复方车前片中6个药效成分进行含量测定,分别以毛蕊花糖苷为对照,计算异毛蕊花糖苷的相对校正因子为1.118;以黄连碱为对照,计算木兰花碱、巴马汀和小檗碱的相对校正因子分别为0.729、1.065和1.126,在不同条件下稳定性良好,“双外标”一测多评法所得结果与外标法接近。该研究成功采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术定性表征复方车前片中化学成分,并结合网络药理学筛选其治疗糖尿病肾病的主要药效物质基础,进一步采用“双外标”一测多评法对主要药效物质群进行定量分析,为阐明复方车前片药效物质基础和质量控制提供科学依据。

关键词：复方车前片质量评价 UPLC-Q-TOF-MS/MS 网络药理学 “双外标”一测多评法毛蕊花糖苷黄连碱

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竹节参鲨烯环氧酶基因的克隆及生物信息学分析

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中草药 2023年第6期54卷 1917-1923页

作者：李鹏飞黄朝康杨小林牛腾飞陈军峰赵淑娟王峥涛王如锋上海中医药大学中药研究所上海201203 上海中医药大学中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203 上海中医药大学中药标准化教育部重点实验室上海201203

目的克隆竹节参Panax japonicus鲨烯环氧酶基因(squalene epoxidase,PjSE)的全长cDNA序列,进行生物信息学分析和原核表达。方法设计特异性引物,从竹节参中克隆得到PjSE序列;以PjSE基因序列作为输入数据,利用多序列同源比对等生物信息学... 详细信息

目的克隆竹节参Panax japonicus鲨烯环氧酶基因(squalene epoxidase,PjSE)的全长cDNA序列,进行生物信息学分析和原核表达。方法设计特异性引物,从竹节参中克隆得到PjSE序列;以PjSE基因序列作为输入数据,利用多序列同源比对等生物信息学分析工具进行序列分析;构建重组原核表达载体pCold-PjSE,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行蛋白诱导表达;采用实时荧光定量PCR技术分析该基因在竹节参不同组织中的相对表达量。结果PjSE基因开放阅读框长度为1884 bp,编码627个氨基酸,PjSE蛋白相对分子质量为68639.49,初步预测其具有跨膜结构域,可能定位在叶绿体上;聚丙烯凝胶电泳结果显示诱导表达蛋白的相对分子质量大小与预期结果一致;该基因在竹节参叶中表达量最高,须根次之,根中表达量最低。结论PjSE基因的克隆、生信分析及原核表达研究,不仅有助于丰富竹节参中该类功能蛋白的种类和数量,完善竹节参皂苷类成分的生物合成途径,也为后期开展竹节参皂苷的异源合成提供了可供选择的关键基因元件。

关键词：竹节参鲨烯环氧酶基因克隆生物信息学分析原核表达

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