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中国中药杂志 2021年第15期46卷 3853-3858页

作者：周宇娟王俊豪徐红侴桂新王峥涛上海中医药大学中药研究所教育部中药标准化重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海中药标准化研究中心上海201203

研究铁皮石斛乙酸乙酯部分中联苄类化学成分。运用大孔树脂、MCI、硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)、ODS等柱色谱、制备薄层色谱及制备高效液相色谱等技术进行化合物的分离纯化,根据1H-NMR、13C-NMR、MS等波谱数据和理化性质鉴定化合物的结... 详细信息

研究铁皮石斛乙酸乙酯部分中联苄类化学成分。运用大孔树脂、MCI、硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)、ODS等柱色谱、制备薄层色谱及制备高效液相色谱等技术进行化合物的分离纯化,根据1H-NMR、13C-NMR、MS等波谱数据和理化性质鉴定化合物的结构。从铁皮石斛乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到了15个联苄类化合物,分别鉴定为dendrocandin X(1)、3,4′-二羟基-4,5-二甲氧基联苄(2)、6″-de-O-methyldendrofindlaphenol A(3)、3,4-二羟基-4′,5-二甲氧基联苄(4)、dendrosinen B(5)、3,4,4′-三羟基-5-甲氧基联苄(6)、3,3′-二羟基-4,5-二甲氧基联苄(7)、3,4′-二羟基-5-甲氧基联苄(8)、杓唇石斛素(9)、石斛酚(10)、4,4′-二羟基-3,5-二甲氧基联苄(11)、3,4′,5-三羟基-3′-甲氧基联苄(12)、3-O-methylgigantol(13)、dendrocandin U(14)和dendrocandin N(15)。化合物1为新化合物,化合物2首次在石斛属中分离得到,化合物37首次在铁皮石斛中分离得到。

关键词：铁皮石斛化学成分联苄 dendrocandin X

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丹参SmERF081转录因子基因克隆与靶基因鉴定

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上海中医药大学学报 2024年第3期38卷 7-14页

作者：肖亦菽陈敏谈荣慧郑小宇赵淑娟上海中医药大学中药研究所国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室教育部中药标准化重点研究室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学中药学院上海201203

目的:克隆丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)转录因子SmERF081,分析SmERF081的靶基因。方法:以丹参转录组数据Unigene(c48961-g1)序列为参考,利用PCR扩增获得SmERF081基因序列;通过生物信息学预测SmERF081编码蛋白的理化性质、蛋白质结构... 详细信息

目的:克隆丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)转录因子SmERF081,分析SmERF081的靶基因。方法:以丹参转录组数据Unigene(c48961-g1)序列为参考,利用PCR扩增获得SmERF081基因序列;通过生物信息学预测SmERF081编码蛋白的理化性质、蛋白质结构等分子特征;使用MEGA 7软件构建系统进化树;对SmERF081进行异源表达和蛋白纯化;通过酵母单杂、双荧光素酶报告系统和化学发光法凝胶迁移实验(EMSA)鉴定SmERF081与SmCPS5启动子是否结合。结果:克隆得到SmERF081基因,cDNA全长453 bp(Genbank登陆号:OQ466089),编码151个氨基酸,相对分子质量16.46 kDa,等电点9.75。该蛋白不含信号肽,无跨膜区,其高级结构主要由无规则卷曲构成。进化树分析表明SmERF081与拟南芥At1G28360.1、丹参SmERF8同源关系最近。原核表达结果显示,经IPTG诱导后SmERF081在大肠杆菌中成功异源表达,并通过纯化获得目的蛋白。酵母单杂、双荧光素酶报告基因检测和EMSA确认SmERF081可与丹参SmCPS5启动子结合。结论:鉴定到丹参中一个新转录因子SmERF081,生物信息学分析及分子互作初步证实其靶基因为丹参SmCPS5二萜环化酶。

关键词：丹参 SmERF081 生物信息学靶基因

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含吡咯里西啶生物碱中成药潜在风险评估

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中草药 2021年第17期52卷 5389-5400页

作者：熊芬谷丽华杨莉熊爱珍宋宗华王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203 国家药典委员会北京100061

吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloids,PAs)是一种双环吡咯啶生物碱,因多数具有肝毒性,又称肝毒性吡咯里西啶生物碱(hepatotoxic PAs)。PAs广泛存在于菊科、豆科、紫草科的多种药用植物中。《中国药典》2020年版共收载含有PAs的药... 详细信息

吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloids,PAs)是一种双环吡咯啶生物碱,因多数具有肝毒性,又称肝毒性吡咯里西啶生物碱(hepatotoxic PAs)。PAs广泛存在于菊科、豆科、紫草科的多种药用植物中。《中国药典》2020年版共收载含有PAs的药材8种,包括千里光Senecionis Scandentis Herba、款冬花Farfarae Flos、佩兰Eupatorii Herba、紫草Arnebiae Radix等,涉及成方制剂数十种。此外,《卫生部药品标准》《药品注册标准》等收载含PAs制剂尚有200余种。除千里光药材外,其他含PAs中药及其制剂均没有关于PAs类成分的安全限量标准,其临床用药安全存在极大的风险。对含PAs中成药的研究概况进行了系统总结、分析,以期为此类中成药的临床用药安全提供警示和参考。

关键词：吡咯里西啶生物碱中国药典中药中成药安全性

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高良姜素抑制胃癌MGC803细胞NF-κB通路促进自噬

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中国中药杂志 2021年第16期46卷 4167-4174页

作者：梁晓晖余明珠石海莲吴晓俊上海中医药大学中药研究所上海市复方中药重点实验室教育部中药标准化重点实验室国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室上海201203

探究高良姜素对胃癌细胞MGC803能量代谢和自噬的影响及其可能的分子机制。细胞增殖-毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测不同浓度高良姜素干预MGC803细胞48 h对细胞活力的影响;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测高良姜素对MG... 详细信息

探究高良姜素对胃癌细胞MGC803能量代谢和自噬的影响及其可能的分子机制。细胞增殖-毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测不同浓度高良姜素干预MGC803细胞48 h对细胞活力的影响;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测高良姜素对MGC803细胞自噬、核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路、能量代谢相关蛋白的表达;实时荧光定量核酸扩增检测(Real-time quantitative PCR,qPCR)法检测高良姜素对MGC803细胞能量代谢相关蛋白mRNA表达的影响;自噬小体检测试剂盒检测高良姜素对MGC803细胞自噬体的作用;透射电子显微镜观察高良姜素对MGC803细胞自噬体和溶酶体的影响。裸鼠皮下注射MGC803细胞制备胃癌移植瘤模型,随机分组后,模型组灌胃给予0.5%羧甲基纤维素钠,高良姜素组每天灌胃给予高良姜素(120 mg·kg^(-1)),阳性对照组腹腔注射5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)(50 mg·kg^(-1),1周2次),每3 d相同时间同一人用游标卡尺精确测量肿瘤大小及裸鼠体质量,给药21 d后处死动物,剥离肿瘤并称重,计算抑瘤率。结果显示,与对照组相比,高良姜素能够抑制MGC803细胞的活力;高良姜素可上调MGC803细胞Ⅱ型微管相关蛋白1轻链3B(microtuble-associated protein 1 light chain 3B,LC3B)的蛋白表达,同时可抑制NF-κB通路相关蛋白的磷酸化水平;高良姜素促进MGC803细胞中自噬小体的形成;高良姜素对MGC803细胞能量代谢相关蛋白的表达水平无明显影响;120 mg·kg^(-1)高良姜素显著抑制荷瘤裸鼠胃癌肿瘤质量和体积的增长,并能够显著上调LC3BⅡ蛋白表达,同时可抑制NF-κB通路相关蛋白的磷酸化水平。结果表明,高良姜素体内外均能够抑制胃癌细胞MGC803的生长,其作用机制可能与其抑制NF-κB通路、促进自噬有关。

关键词：高良姜素胃癌自噬 NF-κB LC3B

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中药通过肠道菌群改善肥胖症及其相关代谢性疾病的作用机制研究进展

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上海中医药杂志 2023年第2期57卷 1-7页

作者：王紫轩薛琼雯罗亦轩蒋嘉瑞徐书杨杨莉王峥涛丁丽丽上海中医药大学中药研究所上海市复方中药重点实验室中药标准化教育部重点实验室暨国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

肥胖症及其相关代谢性疾病的发病率逐年增长,引发了全球性的公共健康问题。越来越多的研究发现肥胖症的发生发展与肠道菌群的结构及功能变化密切相关,两者关系的失衡被认为是代谢障碍的标志之一。中医药在治疗多种糖脂代谢紊乱引起的代... 详细信息

肥胖症及其相关代谢性疾病的发病率逐年增长,引发了全球性的公共健康问题。越来越多的研究发现肥胖症的发生发展与肠道菌群的结构及功能变化密切相关,两者关系的失衡被认为是代谢障碍的标志之一。中医药在治疗多种糖脂代谢紊乱引起的代谢性疾病中积累了丰富的经验,其在减重、改善糖脂代谢方面效果显著。但中药及其复方的有效成分口服生物利用度低,很难在靶器官达到起效浓度,而肠道可能是其主要作用器官。围绕肥胖症及其相关代谢性疾病与肠道菌群的相互作用,综述中药通过调节肠道菌群改善肥胖症、Ⅱ型糖尿病、代谢相关脂肪性肝病等代谢性疾病的研究进展,旨在为中药防治肥胖症等代谢性疾病提供理论依据,并为靶向肠道菌群抗肥胖及其并发症的药物研发提供参考策略。

关键词：肥胖代谢性疾病中药肠道菌群糖脂代谢 Ⅱ型糖尿病代谢相关脂肪性肝病

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薄层色谱常用固定相及其在中药鉴别中的应用优势探讨和展望

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药物分析杂志 2025年第1期45卷 39-50页

作者：斯子豪金武燮潘丽张鹏森谷丽华吴立宏杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所、中药标准化教育部重点实验室、国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

薄层色谱法作为一种平面色谱技术,具有经济、灵活,高通量,直观等特点,被广泛用于多个领域的成分分离分析。其中固定相类型是影响薄层色谱结果的一个重要因素,以《中华人民共和国药典》为例,目前使用的薄层色谱固定相包括硅胶、聚酰胺和... 详细信息

薄层色谱法作为一种平面色谱技术,具有经济、灵活,高通量,直观等特点,被广泛用于多个领域的成分分离分析。其中固定相类型是影响薄层色谱结果的一个重要因素,以《中华人民共和国药典》为例,目前使用的薄层色谱固定相包括硅胶、聚酰胺和纤维素。本文对薄层色谱这3种固定相的特点和应用现状进行了论述。针对野菊花、葶苈子、菟丝子、木蝴蝶、肉苁蓉、蒲黄和儿茶7味中药材为代表的聚酰胺或纤维素薄层方法存在的不足,平行建立了以硅胶为固定相的薄层色谱鉴别方法。该方法斑点丰富,分离度良好,说明硅胶固定相薄层板对部分黄酮、酚酸类成分具有分析优势,该研究结果为相关中药的标准提升提供了参考。本文同时依据薄层色谱法的要素组成探讨了薄层色谱技术的未来发展趋势。

关键词：薄层色谱硅胶聚酰胺纤维素中药鉴定质量控制定性鉴别

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基于HPLC指纹图谱和含量测定的皂角刺配方颗粒质量控制研究

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上海中医药大学学报 2023年第2期37卷 54-60,95页

作者：吴思佳王可可徐双双徐红王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海中药标准化研究中心上海201203

目的:建立皂角刺配方颗粒的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱及含量测定方法,为皂角刺配方颗粒的质量控制和评价提供参考依据。方法:采用资生堂MG C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL... 详细信息

目的:建立皂角刺配方颗粒的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱及含量测定方法,为皂角刺配方颗粒的质量控制和评价提供参考依据。方法:采用资生堂MG C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min、检测波长260 nm、柱温35℃,建立皂角刺配方颗粒的HPLC指纹图谱及指标性成分原儿茶酸的含量测定方法。结果:皂角刺配方颗粒的HPLC指纹图谱均呈现了5个共有特征峰,并指认其中的2、4、5号峰分别为原儿茶酸、对羟基苯甲酸和香草酸。同一厂家的10批次皂角刺配方颗粒的相似度介于0.814~1.000之间,原儿茶酸含量为2.28~2.60 mg/g,批次间差异较小;不同厂家间配方颗粒差异较大,相似度介于0.580~0.956之间,原儿茶酸含量为0.26~2.60 mg/g,含量差异较大。结论:所建立的指纹图谱和含量测定方法简便、可行、重复性好,可用于皂角刺配方颗粒的质量评价和控制。

关键词：皂角刺配方颗粒 HPLC指纹图谱含量测定原儿茶酸

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基于TLC和TLC-EFISI-MSn联用技术的霍山石斛专属性鉴别研究

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上海中医药大学学报 2023年第5期37卷 39-46,54页

作者：卢文旭林李雁丁玉莲王俊豪徐红上海中医药大学中药研究所教育部中药标准化重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海中药标准化研究中心上海201203

目的:建立霍山石斛薄层色谱(TLC)定性鉴别的质量控制方法,并对霍山石斛专属性成分进行快速结构鉴定。方法:采用TLC法,以水饱和正丁醇为展开剂,低温4℃展开,以2%三氯化铝乙醇试液为显色剂,105℃加热5 min,于紫外光灯(365 nm)下观察霍山... 详细信息

目的:建立霍山石斛薄层色谱(TLC)定性鉴别的质量控制方法,并对霍山石斛专属性成分进行快速结构鉴定。方法:采用TLC法,以水饱和正丁醇为展开剂,低温4℃展开,以2%三氯化铝乙醇试液为显色剂,105℃加热5 min,于紫外光灯(365 nm)下观察霍山石斛的专属性斑点并进行真伪鉴别;利用原位薄层色谱-静电场诱导喷雾-质谱(TLC-EFISI-MS^(n))联用技术进一步对专属性斑点进行快速结构解析。结果:建立了霍山石斛专属性的TLC鉴别方法,发现霍山石斛有一专属性斑点,通过该斑点可实现霍山石斛与铁皮石斛、紫皮石斛等13种石斛属植物的区分,且能够将霍山石斛粉中掺混20%以上的铁皮石斛粉鉴别出来;根据化合物的相对分子量、多级质谱裂解碎片,初步鉴定该斑点为黄酮类化合物芹菜素-6-C-α-L-鼠李糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷-8-C-α-L-阿拉伯糖,为霍山石斛的专属性成分。结论:所建立的TLC鉴别方法简单灵敏、准确可靠、重现性好且专属性强,为提高霍山石斛的质量控制方法提供了实验依据,对于保证其质量和临床疗效具有重要意义。

关键词：霍山石斛薄层色谱薄层色谱-静电场诱导喷雾离子化质谱黄酮苷芹菜素-6-C-α-L-鼠李糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷-8-C-α-L-阿拉伯糖

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蟾蜍二烯酸内酯类成分的生物转化和生物合成研究进展

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中草药 2021年第15期52卷 4741-4751页

作者：陈文杰胡耀廷王如锋赵淑娟王峥涛上海中医药大学中药研究所上海201203 中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 中药标准化教育部重点实验室上海201203 上海市中药复方重点实验室上海201203

蟾蜍二烯酸内酯类化合物是名贵中药蟾酥的主要活性成分,具有显著的抗肿瘤、强心、镇痛和抗炎等药理活性。目前,蟾蜍二烯酸内酯成分的主要来源方法是从蟾蜍类药材中直接提取,但此方法成本高、收益低,且药用资源十分短缺,相关新药开发与... 详细信息

蟾蜍二烯酸内酯类化合物是名贵中药蟾酥的主要活性成分,具有显著的抗肿瘤、强心、镇痛和抗炎等药理活性。目前,蟾蜍二烯酸内酯成分的主要来源方法是从蟾蜍类药材中直接提取,但此方法成本高、收益低,且药用资源十分短缺,相关新药开发与应用研究严重受阻。近年来,中药活性成分的生物合成在中药资源保护方面发挥起越来越重要的作用。基于合成生物学原理,设计和改造微生物菌株发酵生产天然产物的方法已被广泛使用。该方法的应用需要建立在目标产物生物合成途径完全解析的基础之上。基于此,总结近年来蟾蜍二烯酸内酯的生物转化以及生物合成途径解析方面的研究进展,并进一步推测蟾蜍二烯酸内酯类的生物合成途径,并进一步展望与其相关的生物合成发展方向。

关键词：蟾酥蟾蜍二烯酸内酯类生物转化生物合成微生物转化

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斜率校正一测多评法同时测定茯苓中3种三萜酸成分的含量

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上海中医药杂志 2023年第7期57卷 66-71页

作者：赵鑫谷丽华杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中医药大学交叉科学研究院上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的建立新的一测多评法同时测定茯苓中3-O-乙酰基-16α-羟基-氢化松苓酸、去氢茯苓酸和茯苓酸的含量。方法以Agilent ZORBAX SB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5µm)为色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相等度洗脱;流速:0.8 mL/min... 详细信息

目的建立新的一测多评法同时测定茯苓中3-O-乙酰基-16α-羟基-氢化松苓酸、去氢茯苓酸和茯苓酸的含量。方法以Agilent ZORBAX SB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5µm)为色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相等度洗脱;流速:0.8 mL/min;进样量:10µL;柱温:30℃;检测波长为210 nm。以茯苓酸为内参计算其他两个成分的校正因子。结果以茯苓酸为内参,3-O-乙酰基-16α-羟基-氢化松苓酸和去氢茯苓酸的校正因子分别为0.71和1.43;一测多评法测定结果与外标法测定结果无明显差异[相对误差(RE)<5%]。结论建立的一测多评方法简便准确,可用于茯苓药材中多指标成分的含量测定,为茯苓药材质量评价提供参考。

关键词：一测多评法茯苓茯苓酸含量测定中药研究

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