检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中药杂志 2021年第14期46卷 3605-3613页

作者：丁玉莲林李雁陈丹青徐红王峥涛上海中医药大学中药研究所教育部中药标准化重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海中药标准化研究中心上海201203 上海上药神象健康药业有限公司上海200336

建立HPLC一测多评法结合双波长法同时测定铁皮石斛中6种黄酮类成分的含量,比较不同产地、栽培和加工的铁皮石斛茎中黄酮类成分的含量,明确引起铁皮石斛黄酮类成分差异性的主要因素。采用资生堂Capcell PAK MGⅡC18色谱柱(4.6 mm×25... 详细信息

建立HPLC一测多评法结合双波长法同时测定铁皮石斛中6种黄酮类成分的含量,比较不同产地、栽培和加工的铁皮石斛茎中黄酮类成分的含量,明确引起铁皮石斛黄酮类成分差异性的主要因素。采用资生堂Capcell PAK MGⅡC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸为流动相,以芦丁为内标物,检测波长340 nm,建立其对维采宁-2、夏佛塔苷、异夏佛塔苷和牡荆素葡萄糖苷的相对校正因子,并进行含量测定,实现一测多评,同时在290 nm波长下,建立柚皮素的含量测定方法。结果表明5种黄酮类成分的一测多评法与常规外标的含量测定结果无显著性差异,结合柚皮素的测定结果,可实现铁皮石斛中6中黄酮类成分的同时测定。对82个铁皮石斛样品进行含量测定并进行主成分分析和判别分析,结果表明仿野生铁皮石斛的黄酮类含量明显高于大棚床栽铁皮石斛,不同地区的仿野生铁皮石斛黄酮类成分以产自江西、贵州、浙江和福建的含量较高,大棚床栽铁皮石斛以产自福建、浙江的黄酮含量较高,柚皮素的含量与加工温度呈正相关,其他5个黄酮成分与加工温度呈负相关。主成分分析显示仿野生铁皮石斛和大棚床栽的铁皮石斛可大致分为两类,大棚床栽的铁皮石斛按产地被分为4类,仿野生铁皮石斛中贵州产地的样品基本聚集在一起,其他产地的没有明显规律。所建立的铁皮石斛含量方法简化了其多指标性黄酮类成分的测定方法,可为有效的控制铁皮石斛整体质量控制及其种植栽培、产地加工提供依据。

关键词：铁皮石斛黄酮含量高效液相色谱法一测多评(QAMS) 产地栽培方式加工方式

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中华大蟾蜍细胞色素P450还原酶基因克隆、表达与功能鉴定

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上海中医药大学学报 2024年第1期38卷 27-33页

作者：肖传光胡耀廷杨莉赵淑娟王峥涛上海中医药大学中药研究所中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203

目的:从中华大蟾蜍(Bufo gargarizans Cantor)肝脏组织中克隆细胞色素P450还原酶基因(BgCPR,GenBank登录号:OQ572435)进行生物信息学分析,并进行功能验证。方法:基于中华大蟾蜍转录组数据库挖掘BgCPR基因序列,使用SnapGene软件设计BgCP... 详细信息

目的:从中华大蟾蜍(Bufo gargarizans Cantor)肝脏组织中克隆细胞色素P450还原酶基因(BgCPR,GenBank登录号:OQ572435)进行生物信息学分析,并进行功能验证。方法:基于中华大蟾蜍转录组数据库挖掘BgCPR基因序列,使用SnapGene软件设计BgCPR基因两端特异性引物,以蟾蜍肝脏组织总RNA逆转录成的cDNA为模板进行PCR扩增。利用生物信息学分析BgCPR蛋白理化性质、空间结构并构建系统进化树;基于CRISPR/Cas9基因编辑系统将蟾蜍BgCPR基因表达框经同源重组整合进入酿酒酵母基因组,利用聚乙二醇法制备转化子微粒体,验证其对细胞色素C的还原功能。结果:克隆得到全长2043 bp的BgCPR基因cDNA,编码680个氨基酸,相对分子质量77852 Da。结构预测显示,BgCPR蛋白为非分泌蛋白;有一段跨膜螺旋区,位于蛋白的第24~46位氨基酸之间;亚细胞定位预测显示该蛋白定位于内质网上。采用体外酶活实验证明其具有传递电子功能。结论:本研究克隆得到中华大蟾蜍BgCPR基因,并构建了表达具有生物活性的BgCPR的酿酒酵母工程细胞,为进一步研究蟾蜍CYP450基因功能乃至解析蟾蜍二烯内酯类化合物的生物合成途径奠定了基础。

关键词：中华大蟾蜍细胞色素P450还原酶细胞色素P450 蟾蜍二烯内酯

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2',4'-二甲氧基查尔酮抑制c-Myc介导的葡萄糖摄取和糖酵解抗胃癌作用研究

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药学学报 2025年第5期 1421-1431页

作者：李昱彤李文标张玉杰潘巧岭杜婷婷吴辉黄菲费晓燕吴晓俊石海莲上海市复方中药重点实验室教育部中药标准化重点实验室国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室上海中药标准化研究中心上海中医药大学中药研究所上海中医药大学附属龙华医院脾胃病一科

2',4'-二甲氧基查尔酮(DMC)是卡瓦胡椒素B的结构修饰物,本课题以胃癌细胞MGC-803和HGC-27为研究对象,探讨DMC对胃癌细胞的体内外抗肿瘤作用及机制。采用CCK-8法、EdU染色法和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测胃癌细胞活力... 详细信息

2',4'-二甲氧基查尔酮(DMC)是卡瓦胡椒素B的结构修饰物,本课题以胃癌细胞MGC-803和HGC-27为研究对象,探讨DMC对胃癌细胞的体内外抗肿瘤作用及机制。采用CCK-8法、EdU染色法和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测胃癌细胞活力、增殖率和凋亡率,发现DMC抑制胃癌细胞活力和增殖,促进胃癌细胞凋亡;构建裸鼠胃癌细胞皮下移植瘤模型观察DMC对胃癌移植瘤生长的影响,发现DMC抑制裸鼠胃癌皮下移植瘤的生长,动物实验获得上海中医药大学动物伦理委员会的批准,伦理编号为PZSHUTCM2310110002。转录组学研究DMC对MGC-803细胞RNA表达的影响,发现生物功能富集于糖酵解;采用2-NBDG探针标记及流式细胞术和乳酸测试盒检测胃癌细胞葡萄糖摄取能力和乳酸生成与外排能力,发现DMC抑制胃癌细胞的葡萄糖摄取能力和乳酸生成与外排;通过蛋白印迹实验检测胃癌细胞增殖、凋亡及糖酵解相关蛋白的表达,发现DMC能上调胃癌细胞促凋亡蛋白cleaved caspase-9、cleaved caspase-3、cleaved PARP的表达,下调胃癌细胞增殖标志物Ki-67的蛋白表达,并抑制胃癌细胞糖酵解相关蛋白c-Myc、LDHA、GLUT3、PDHK1和MCT1的表达;通过Seahorse能量代谢分析仪检测实时糖酵解速率,发现DMC能下调胃癌细胞基础糖酵解速率和代偿糖酵解;通过c-Myc过表达稳转株MGC-803细胞的翻转实验明确DMC通过抑制c-Myc介导的葡萄糖摄取和糖酵解发挥胃癌抑制作用。综上所述, DMC可能通过调控胃癌细胞c-Myc及其靶基因糖酵解相关蛋白的表达,抑制胃癌细胞c-Myc介导的葡萄糖摄取功能和糖酵解,从而抑制胃癌细胞增殖,促进胃癌细胞凋亡,最终在体内外抑制胃癌的生长。

关键词： 2',4'-二甲氧基查尔酮胃癌增殖凋亡糖酵解

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EGF诱导DDP耐药SKOV3细胞死亡作用

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上海中医药大学学报 2024年第5期38卷 18-27页

作者：王永祥张司明赵丽杰陈秀慧余明珠马庆良石海莲上海中医药大学附属曙光医院妇产科上海每201203 上海市复方中药重点实验室教育部中药标准化重点实验室国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室上海中医药大学中药研究所上海201203 上海交通大学医学院附属新华医院妇产科上海200092

目的:考察表皮生长因子(EGF)对人卵巢癌顺铂(DDP)耐药细胞生长的体内外抑制作用。方法:酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测EGF含量;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测EGF对人卵巢上皮性癌细胞细胞活力的影响;裸鼠皮下注射SKOV3-DDP耐药细胞制备DD... 详细信息

目的:考察表皮生长因子(EGF)对人卵巢癌顺铂(DDP)耐药细胞生长的体内外抑制作用。方法:酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测EGF含量;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测EGF对人卵巢上皮性癌细胞细胞活力的影响;裸鼠皮下注射SKOV3-DDP耐药细胞制备DDP耐药卵巢癌移植瘤模型,随机分组后,EGF组和EGF+DDP组裸鼠每日灌胃EGF,Model组和DDP组裸鼠每日灌胃ddH_(2)O。1周后,DDP组和EGF+DDP组裸鼠腹腔注射DDP,Model组和EGF组小鼠每天注射0.9%NaCl溶液。同时,每日察看裸鼠的生长状态,每3 d相同时间测量一次肿瘤大小及裸鼠体重,给药37 d后处理动物,收集肿瘤并称重。结果:蓓丽雅泰国野葛根片(TPMT)能显著降低卵巢癌顺铂耐药患者的CA125水平。TPMT含有EGF(每片含45.763 ng)。与对照组相比,EGF能够促进A2780-DDP耐药细胞的细胞活力,但是能够抑制SKOV3-DDP耐药细胞的细胞活力。EGF(14 ng/kg)有抑制SKOV3-DDP低剂量(0.1μg/mL)耐药细胞移植瘤生长的趋势,但是无统计学差异。EGF(28 ng/kg)能够显著抑制SKOV3-DDP高剂量(2μg/mL)耐药细胞移植瘤的生长,甚至逆转了对顺铂的耐药性,与临床上观察到的结果一致。RNAseq后,Top20差异表达基因结果表明,EGF增强了ID4、ENSG00000283602、UQCRFS1P1、ENSG000000227632、ENSG0000267436、TMEM252、SDHAP1、ENSG_0000273276、RASAL3、ENSG_000256349 mRNA表达,并抑制了SKOV3/DDP细胞异种移植瘤组织中ENSG_0000280800、ENSG_00000281181、PSMD6-AS2、AP4B1-AS1、ENSG_10000263603、PFN1P8、ENSg_0000273047、LINC02754、SLC23A3、ENSG00001258757 mRNA的表达。KEGG分析表明,EGF通过调节TGF-β信号通路、调节干细胞多能性的信号通路、Ras信号通路,抑制SKOV3/DDP细胞皮下移植瘤的生长。结论:EGF在临床治疗顺铂耐药卵巢癌中具有重大价值,但可能有卵巢癌细胞分型和分子分型依赖性,并不能逆转所有的卵巢癌顺铂耐药。

关键词：表皮生长因子卵巢癌顺铂耐药

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植物miRNA研究方法与药用植物miRNA研究进展

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药学学报 2021年第12期56卷 3460-3472页

作者：郑小宇陈敏李航赵淑娟上海中医药大学中药研究所中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室教育部中药标准化研究中心上海市复方中药重点研究室上海201203 上海中医药大学教学实验中心上海201203 上海上药杏灵科技药业股份有限公司上海201703

miRNA(microRNA)是一类长度约为21nt的内源性非编码单链小RNA,在植物生长发育、信号转导、环境胁迫响应和次生代谢产物形成等方面发挥着重要的调控作用。近年来,多种药用植物中鉴定出了大量miRNA,并初步研究了这些miRNA对药用植物的调... 详细信息

miRNA(microRNA)是一类长度约为21nt的内源性非编码单链小RNA,在植物生长发育、信号转导、环境胁迫响应和次生代谢产物形成等方面发挥着重要的调控作用。近年来,多种药用植物中鉴定出了大量miRNA,并初步研究了这些miRNA对药用植物的调控作用。药用植物的活性成分大多是其次生代谢产物,研究miRNA对药用植物次生代谢产物形成的调控作用具有十分重要的意义。本文综述了植物miRNA的一般研究方法与药用植物miRNA的研究进展及其对具有药用活性的代谢产物形成的调控作用,并对药用植物miRNA发展趋势做了展望,为药用植物的研究开拓新思路。

关键词：药用植物 microRNA 研究方法次生代谢

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高良姜素抑制胃癌MGC803细胞NF-κB通路促进自噬

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中国中药杂志 2021年第16期46卷 4167-4174页

作者：梁晓晖余明珠石海莲吴晓俊上海中医药大学中药研究所上海市复方中药重点实验室教育部中药标准化重点实验室国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室上海201203

探究高良姜素对胃癌细胞MGC803能量代谢和自噬的影响及其可能的分子机制。细胞增殖-毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测不同浓度高良姜素干预MGC803细胞48 h对细胞活力的影响;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测高良姜素对MG... 详细信息

探究高良姜素对胃癌细胞MGC803能量代谢和自噬的影响及其可能的分子机制。细胞增殖-毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测不同浓度高良姜素干预MGC803细胞48 h对细胞活力的影响;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测高良姜素对MGC803细胞自噬、核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路、能量代谢相关蛋白的表达;实时荧光定量核酸扩增检测(Real-time quantitative PCR,qPCR)法检测高良姜素对MGC803细胞能量代谢相关蛋白mRNA表达的影响;自噬小体检测试剂盒检测高良姜素对MGC803细胞自噬体的作用;透射电子显微镜观察高良姜素对MGC803细胞自噬体和溶酶体的影响。裸鼠皮下注射MGC803细胞制备胃癌移植瘤模型,随机分组后,模型组灌胃给予0.5%羧甲基纤维素钠,高良姜素组每天灌胃给予高良姜素(120 mg·kg^(-1)),阳性对照组腹腔注射5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)(50 mg·kg^(-1),1周2次),每3 d相同时间同一人用游标卡尺精确测量肿瘤大小及裸鼠体质量,给药21 d后处死动物,剥离肿瘤并称重,计算抑瘤率。结果显示,与对照组相比,高良姜素能够抑制MGC803细胞的活力;高良姜素可上调MGC803细胞Ⅱ型微管相关蛋白1轻链3B(microtuble-associated protein 1 light chain 3B,LC3B)的蛋白表达,同时可抑制NF-κB通路相关蛋白的磷酸化水平;高良姜素促进MGC803细胞中自噬小体的形成;高良姜素对MGC803细胞能量代谢相关蛋白的表达水平无明显影响;120 mg·kg^(-1)高良姜素显著抑制荷瘤裸鼠胃癌肿瘤质量和体积的增长,并能够显著上调LC3BⅡ蛋白表达,同时可抑制NF-κB通路相关蛋白的磷酸化水平。结果表明,高良姜素体内外均能够抑制胃癌细胞MGC803的生长,其作用机制可能与其抑制NF-κB通路、促进自噬有关。

关键词：高良姜素胃癌自噬 NF-κB LC3B

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蟾蜍二烯酸内酯类成分的生物转化和生物合成研究进展

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中草药 2021年第15期52卷 4741-4751页

作者：陈文杰胡耀廷王如锋赵淑娟王峥涛上海中医药大学中药研究所上海201203 中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 中药标准化教育部重点实验室上海201203 上海市中药复方重点实验室上海201203

蟾蜍二烯酸内酯类化合物是名贵中药蟾酥的主要活性成分,具有显著的抗肿瘤、强心、镇痛和抗炎等药理活性。目前,蟾蜍二烯酸内酯成分的主要来源方法是从蟾蜍类药材中直接提取,但此方法成本高、收益低,且药用资源十分短缺,相关新药开发与... 详细信息

蟾蜍二烯酸内酯类化合物是名贵中药蟾酥的主要活性成分,具有显著的抗肿瘤、强心、镇痛和抗炎等药理活性。目前,蟾蜍二烯酸内酯成分的主要来源方法是从蟾蜍类药材中直接提取,但此方法成本高、收益低,且药用资源十分短缺,相关新药开发与应用研究严重受阻。近年来,中药活性成分的生物合成在中药资源保护方面发挥起越来越重要的作用。基于合成生物学原理,设计和改造微生物菌株发酵生产天然产物的方法已被广泛使用。该方法的应用需要建立在目标产物生物合成途径完全解析的基础之上。基于此,总结近年来蟾蜍二烯酸内酯的生物转化以及生物合成途径解析方面的研究进展,并进一步推测蟾蜍二烯酸内酯类的生物合成途径,并进一步展望与其相关的生物合成发展方向。

关键词：蟾酥蟾蜍二烯酸内酯类生物转化生物合成微生物转化

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中药品质调控与资源可持续利用的思考与方法探讨

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上海中医药大学学报 2024年第1期38卷 8-17页

作者：肖莹邱实陈瑞兵管芹陈万生上海中医药大学中药研究所中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 海军军医大学药学院上海200433

高品质中药资源是中医药全产业链健康发展的物质载体和战略基石。当前,大宗药材品质退化、珍稀濒危资源匮乏,优质中药资源需求和供给矛盾日益突出,成为制约中医药高质量发展的瓶颈问题。作者团队长期从事中药品质调控与资源可持续利用... 详细信息

高品质中药资源是中医药全产业链健康发展的物质载体和战略基石。当前,大宗药材品质退化、珍稀濒危资源匮乏,优质中药资源需求和供给矛盾日益突出,成为制约中医药高质量发展的瓶颈问题。作者团队长期从事中药品质调控与资源可持续利用研究。该文结合研究实例,从“道地药材品质形成机制研究、中药活性成分生源途径解析、中药材优良品种的培育、中药活性成分异源生物制造”几个方面阐述中药品质调控与资源可持续利用的思路和方法,为本领域相关研究提供参考和借鉴。

关键词：中药资源中药品质品质调控资源可持续利用

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糖代谢重编程与“炎-癌转化”及抗炎中药靶向肿瘤糖代谢抗肿瘤作用机制研究进展

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中国药理学与毒理学杂志 2021年第11期35卷 859-867页

作者：梁晓晖石海莲吴晓俊上海市复方中药重点实验室上海中药标准化研究中心教育部中药标准化重点实验室国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室上海中医药大学中药研究所上海201203

炎症与肿瘤的病理进程关系密切。越来越多的研究表明,炎症信号通路广泛参与调控肿瘤细胞的糖代谢。葡萄糖主要通过糖酵解、线粒体有氧磷酸化等途径代谢生成ATP。有些肿瘤细胞倾向于通过糖酵解获能,而有些肿瘤细胞中线粒体氧化磷酸化反... 详细信息

炎症与肿瘤的病理进程关系密切。越来越多的研究表明,炎症信号通路广泛参与调控肿瘤细胞的糖代谢。葡萄糖主要通过糖酵解、线粒体有氧磷酸化等途径代谢生成ATP。有些肿瘤细胞倾向于通过糖酵解获能,而有些肿瘤细胞中线粒体氧化磷酸化反应对细胞生长和氧化应激也发挥重要作用。炎症促进糖代谢重编程介导“炎-癌转化”的分子机制涉及炎症介质和炎症因子异常表达。中药中多种生物活性物质如皂苷、黄酮、生物碱、多酚和醌类等可显著抑制炎症,并能调控肿瘤糖代谢,抑制肿瘤细胞增殖和生长。本文就“炎-癌转化”与肿瘤糖代谢重编程之间的关系和抗炎中药及单体成分靶向肿瘤糖代谢抗肿瘤的作用机制予以综述,为抗炎中药靶向肿瘤糖代谢发挥抗肿瘤作用研究提供参考。

关键词：糖代谢重编程炎症糖酵解氧化磷酸化肿瘤中药

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芍药甘草汤化学成分、药动学及药效学研究进展

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上海中医药大学学报 2022年第4期36卷 98-105页

作者：鲍斌赵咏麟王辉俊施松善王顺春上海中医药大学中药研究所上海201203 中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 中药标准化教育部重点实验室上海201203

芍药甘草汤(SGD)属于中医经典方剂,源自汉朝张仲景《伤寒论》,由白芍和炙甘草2味中药组成。该方富含多种化学成分,包括萜类、皂苷类、黄酮类及多糖类等,以芍药总苷、甘草酸及甘草苷等为主要活性成分,临床上除广泛用于解痉镇痛外,还用于... 详细信息

芍药甘草汤(SGD)属于中医经典方剂,源自汉朝张仲景《伤寒论》,由白芍和炙甘草2味中药组成。该方富含多种化学成分,包括萜类、皂苷类、黄酮类及多糖类等,以芍药总苷、甘草酸及甘草苷等为主要活性成分,临床上除广泛用于解痉镇痛外,还用于神经系统疾病、内分泌系统疾病等的治疗。现代药理研究发现,SGD在中枢系统方面具有镇痛、神经保护和解痉等作用,在消化系统方面可调节胃肠道蠕动,同时具有保肝、止咳平喘和治疗高催乳素血症等作用。通过分析SGD药动学相关研究,可为SGD的药效物质基础和药效学研究之间建立新的联系,为阐明量效关系和复方配伍规律提供思路,并为该方的临床合理应用及二次开发提供参考。

关键词：芍药甘草汤解痉镇痛化学成分药动学药效学

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