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中成药 2025年第2期47卷 552-556页

作者：胡先润刘文康张思彤杨华高慧娟谭泽云程雪梅王长虹上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 湖南汉森制药股份有限公司湖南益阳431000

目的建立四磨汤挥发性成分GC特征图谱,并测定芳樟醇、4-萜烯醇、α-松油醇、去氢木香内酯的含量。方法分析采用DM-5MS毛细管柱(30 m×0.25 mm,0.25μm);进样口温度280℃;检测器温度300℃;载气氦气,体积流量0.98 mL/min;程序升温。... 详细信息

目的建立四磨汤挥发性成分GC特征图谱,并测定芳樟醇、4-萜烯醇、α-松油醇、去氢木香内酯的含量。方法分析采用DM-5MS毛细管柱(30 m×0.25 mm,0.25μm);进样口温度280℃;检测器温度300℃;载气氦气,体积流量0.98 mL/min;程序升温。再进行聚类分析、偏最小二乘法判别分析。结果15批GC特征图谱中有8个特征峰,相似度均大于0.93,并指认出5个。各批样品聚为4类,去氢木香内酯、芳樟醇、4-萜烯醇和α-松油醇可作为质量标志物。4种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9990),平均加样回收率97.7%~100.8%,RSD 0.7%~2.6%。结论该方法稳定可靠,可用于四磨汤口服液质量控制。

关键词：四磨汤口服液挥发性成分 GC特征图谱含量测定聚类分析偏最小二乘法判别分析

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化痰合剂提取工艺优化及其质量标准建立

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中成药 2024年第5期46卷 1617-1621页

作者：孟慧頔范伟顾伟鹰时扣荣刘娟罗兰王长虹上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学附属第七人民医院药学部上海200137

目的优化化痰合剂提取工艺,并建立该方质量标准。方法以料液比、提取时间、提取次数为影响因素,白花前胡甲素、橙皮苷含量及干膏得率的综合评分为评价指标,正交试验优化提取工艺。TLC法定性鉴别前胡、陈皮,HPLC法测定白花前胡甲素、橙... 详细信息

目的优化化痰合剂提取工艺,并建立该方质量标准。方法以料液比、提取时间、提取次数为影响因素,白花前胡甲素、橙皮苷含量及干膏得率的综合评分为评价指标,正交试验优化提取工艺。TLC法定性鉴别前胡、陈皮,HPLC法测定白花前胡甲素、橙皮苷含量。结果最佳条件为加入12倍量水提取3次,每次1 h,综合评分为0.98。TLC斑点清晰,阴性无干扰。2种成分分别在2.71~108.54μg/mL(r=0.9986)、5.05~505.44μg/mL(r=0.9996)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为94.63%、98.70%,RSD分别为1.29%、1.08%。结论该方法简便稳定,专属性强,准确可靠,可为化痰合剂的工业生产和质量控制提供参考。

关键词：化痰合剂提取工艺定性鉴别含量测定正交试验 TLC HPLC

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连翘酯苷A抑制四氯化碳诱导小鼠肝纤维化及其机制的研究

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中国中药杂志 2022年第22期47卷 6137-6145页

作者：郭茜张奕黄镇林陆宾季莉莉上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203

该研究旨在探讨连翘酯苷A(forsythiaside A, FTA)改善四氯化碳(carbon tetrachloride, CCl4)诱导小鼠肝纤维化的药效及其机制。通过血清谷丙/谷草转氨酶(alanine/aspartate aminotransferase, ALT/AST)活力检测,肝组织羟脯氨酸(hydroxyproline, HYP)含量测定和Ⅰ型胶原α1 (collagenⅠalpha 1, Col1a1)、Ⅲ型胶原α1 (collagenⅢalpha 1, Col3a1)基因表达的检测,并进行肝组织苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色、马松三色(Masson′s trichrome, Masson)染色和天狼星红(Sirius red)染色评价FTA对CCl4诱导小鼠肝纤维化的改善作用;采用qPCR检测肝组织和肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSC)中α-平滑肌肌动蛋白(actin alpha 2/α-smooth muscle actin, Acta2/α-SMA)、转化生长因子β(transforming growth factor β, Tgfβ)等基因的表达,并采用Western blot检测肝组织和HSC中α-SMA蛋白的表达,评价FTA对HSC活化的抑制作用;采用Western blot检测肝组织血管富集部位中α-SMA、波形蛋白(vimentin, Vim)、血管内皮钙黏蛋白(vascular endothelial cadherin, Ve-cadherin)与血小板-内皮细胞黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1, PECAM-1/CD31)蛋白的表达,评价FTA对血管内皮-间充质转化(endothelial-mesenchymal transition, EMT)的逆转作用。结果显示,与模型组相比,FTA能明显地降低CCl4造成的肝细胞坏死、肝脏中的炎性细胞浸润和胶原沉积,表明FTA具有改善肝纤维化的药效。FTA可以降低肝脏组织中Acta2、Tgfβ、Col1a1、Col3a1基因的表达,减少HSC中升高的α-SMA蛋白表达;FTA还可以逆转肝组织血管富集部位中升高的Vim、α-SMA和降低的Ve-cadherin、CD31蛋白表达。上述结果表明,FTA可能通过抑制HSC活化和逆转EMT发挥抗肝纤维化的药效。

关键词： CCl4 连翘酯苷A 肝纤维化肝星状细胞内皮-间充质转化

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丹参SmHPPR1基因调控丹酚酸生物合成的研究

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药学学报 2023年第9期58卷 2818-2828页

作者：谈荣慧赵望张金家赵淑娟上海中医药大学中药研究所中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203

丹参是临床上治疗心脑血管疾病的常用中药,其主要水溶性活性成分为迷迭香酸和丹酚酸B,由苯丙烷类代谢途径产生。4-羟基苯丙酮酸还原酶(HPPR)是苯丙烷代谢途径中的关键酶。本课题组前期在丹参中克隆了SmHPPR1基因并构建了植物表达载体。... 详细信息

丹参是临床上治疗心脑血管疾病的常用中药,其主要水溶性活性成分为迷迭香酸和丹酚酸B,由苯丙烷类代谢途径产生。4-羟基苯丙酮酸还原酶(HPPR)是苯丙烷代谢途径中的关键酶。本课题组前期在丹参中克隆了SmHPPR1基因并构建了植物表达载体。在此基础上,获得了携带SmHPPR1的转基因拟南芥阳性植株并测定4-羟基苯乳酸的含量;诱导了过表达SmHPPR1丹参毛状根并进行有效成分含量测定和转录组分析。结果显示:携带SmHPPR1的T1代转基因拟南芥中4-羟基苯乳酸含量为0.594 mg·g^(-1);SmHPPR1-OE-3毛状根中的迷迭香酸、丹酚酸B、总丹酚酸含量分别是control-3毛状根的1.09、1.29、1.15倍,丹参素是control-3毛状根的36.26%;转录组分析显示,SmHPPR1过表达引起了SmTAT2表达量上调;蛋白-蛋白相互作用表明CYT(TR74706_c0_g1)、NADP^(+)(TR26565_c0_g1)和NADP^(+)(TR68771_c0_g1)是网络的中心节点并参与代谢过程、细胞过程等。以上研究表明,SmHPPR1在携带SmHPPR1的转基因拟南芥中能催化4-羟基苯丙酮酸还原为4-羟基苯乳酸;丹参毛状根中过表达SmHPPR1可以通过协同调控其他途径基因来提高丹酚酸的含量。

关键词：丹参 4-羟基苯丙酮酸还原酶丹酚酸迷迭香酸生物合成

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基于UPLC的紫苏叶配方颗粒质量标准研究

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药物分析杂志 2022年第12期42卷 2210-2217页

作者：韩沅沅金武燮谷丽华王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的:建立紫苏叶配方颗粒超高效液相(UPLC)特征图谱并测定其主成分野黄芩苷的含量,为紫苏叶配方颗粒质量评价提供方法。方法:以特征峰和定量指标成分的提取率为评价指标,系统考察并确定配方颗粒提取方法;色谱分析采用Waters ACQUITY UPL... 详细信息

目的:建立紫苏叶配方颗粒超高效液相(UPLC)特征图谱并测定其主成分野黄芩苷的含量,为紫苏叶配方颗粒质量评价提供方法。方法:以特征峰和定量指标成分的提取率为评价指标,系统考察并确定配方颗粒提取方法;色谱分析采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^(-1),柱温为25℃,检测波长为334 nm。结果:建立的方法经过系统方法学验证,精密度、重复性、稳定性和加样回收率实验结果均符合规定,不同色谱柱、不同仪器、柱温和流动相考察结果显示该方法耐受性良好。采用该方法对3个不同厂家紫苏叶配方颗粒进行分析和测定,通过比较供试品的特征图谱共标定5个共有峰,指认出木犀草素-7-O-二葡萄糖醛酸苷(峰2)、芹菜素-7-O-二葡萄糖醛酸苷(峰3)、野黄芩苷(峰4)和迷迭香酸(峰5)4个成分;12批配方颗粒样品的特征图谱相似度大于0.9,主成分分析(PCA)结果显示峰2、峰3和峰4为紫苏叶配方颗粒质量评价的主要因子;野黄芩苷含量在0.16%~1.86%之间。结论:该方法快速、准确、重复性良好,可用于评价紫苏叶配方颗粒的质量。

关键词：紫苏叶配方颗粒超高效液相色谱特征图谱含量测定野黄芩苷质量标准

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白蚀丸中7种潜在肝毒性成分含量测定及用药安全分析

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中成药 2022年第8期44卷 2722-2727页

作者：贾夏丽熊芬熊爱珍杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的对白蚀丸中二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚、补骨脂素、异补骨脂素、黄独素B、吡咯里西啶生物碱进行含量测定,结合白蚀丸致临床肝损伤报道,分析其用药安全,为其临床用药提供参考。方法收集市场上不同来源的白蚀丸,采用UPLC-MS、HPL... 详细信息

目的对白蚀丸中二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚、补骨脂素、异补骨脂素、黄独素B、吡咯里西啶生物碱进行含量测定,结合白蚀丸致临床肝损伤报道,分析其用药安全,为其临床用药提供参考。方法收集市场上不同来源的白蚀丸,采用UPLC-MS、HPLC等技术对白蚀丸中潜在毒性成分进行定性和定量检测。结果不同批次之间同一种成分的含量差异较大,其中二苯乙烯苷含量最高,达10 mg/g,其次为补骨脂素和异补骨脂素。白蚀丸中吡咯里西啶生物碱含量超过德国卫生部门的限量标准。结论患者长期服用白蚀丸可能造成毒性成分蓄积中毒;毒性成分之间可能发生药物-药物相互作用,从而增强机体对于损伤的易感性。

关键词：白蚀丸用药安全肝毒性含量测定质量控制吡咯里西啶生物碱

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金钗石斛中1个新的异香木兰烷型倍半萜成分

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中国中药杂志 2023年第22期48卷 6088-6092页

作者：王俊豪卢文旭吴思佳李剑王峥涛徐红上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海中药标准化研究中心上海201203 金陵药业股份有限公司江苏南京210009

研究金钗石斛Dendrobium nobile茎中非生物碱部分的化学成分。运用大孔吸附树脂、MCI、硅胶、反相C_(18)、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、制备薄层色谱及制备型高效液相色谱等技术进行化合物的分离纯化,根据理化性质、波谱数据结合参考文... 详细信息

研究金钗石斛Dendrobium nobile茎中非生物碱部分的化学成分。运用大孔吸附树脂、MCI、硅胶、反相C_(18)、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、制备薄层色谱及制备型高效液相色谱等技术进行化合物的分离纯化,根据理化性质、波谱数据结合参考文献鉴定化合物结构。从金钗石斛茎中分离得到8个化合物,分别为soltorvum F(1)、对羟基苯丙酸(2)、香草酸(3)、对羟基苯甲酸(4)、N-反式桂皮酸酰对羟基苯乙胺(5)、(+)-(1R,2S,3R,4S,5R,6S,9R)-2,11,12-trihydroxypicrotoxane-3(15)-lactone(6)、dendronobilin H(7)、soltorvum E(8)。其中化合物1为新化合物,命名为soltorvum F,化合物8为首次从石斛属中分离得到。

关键词：金钗石斛化学成分倍半萜 soltorvum F

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青皮与陈皮化学成分及分析方法研究进展

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中国中药杂志 2022年第11期47卷 2866-2879页

作者：刘龙婵王星宇李林楠杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

青皮与陈皮均为常用中药,二者基原相同,但采收季节不同,临床功效各异。青皮与陈皮中的化学成分相近,均含有黄酮类、萜类与挥发油、生物碱类等,也存在着各自的差异性成分,但尚缺乏系统地归纳和比较。近年来关于青皮、陈皮所含化学成分分... 详细信息

青皮与陈皮均为常用中药,二者基原相同,但采收季节不同,临床功效各异。青皮与陈皮中的化学成分相近,均含有黄酮类、萜类与挥发油、生物碱类等,也存在着各自的差异性成分,但尚缺乏系统地归纳和比较。近年来关于青皮、陈皮所含化学成分分离、分析方法开发以及品质评价方面的研究报道很多,如采用薄层色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法、红外光谱法、紫外光谱法等对黄酮、生物碱、挥发油进行定性、定量分析。此外少数研究探讨了青皮、陈皮及不同品种间的差异。该文系统查阅了近十年来国内外对青皮、陈皮的化学成分、分析方法与品质评价方面的研究报道,并进行了归纳总结,以期为青皮、陈皮的药效物质基础、品质评价和标准提升等提供参考依据。

关键词：青皮陈皮化学成分分析方法品质评价

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利托那韦对菊三七致大鼠肝毒性的保护作用

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药学学报 2022年第2期57卷 392-398页

作者：陈岩叶铉玲王汛江杨莉熊爱珍王长虹王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

大量体外研究表明,吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloids,PAs)肝毒性与细胞色素酶P450(cytochrome P450,CYP)3A4密切相关,但尚未在整体水平得到证实。因此,本研究利用大鼠探讨CYP3A4化学抑制剂利托那韦对菊三七致肝损伤的影响。实... 详细信息

大量体外研究表明,吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloids,PAs)肝毒性与细胞色素酶P450(cytochrome P450,CYP)3A4密切相关,但尚未在整体水平得到证实。因此,本研究利用大鼠探讨CYP3A4化学抑制剂利托那韦对菊三七致肝损伤的影响。实验方案经上海中医药大学实验动物福利与伦理委员会审查,符合实验动物福利与伦理相关规范。大鼠单次灌胃菊三七提取物(8 g·kg^(-1))造成肝损伤模型,并设利托那韦(30 mg·kg^(-1))干预组、溶剂对照组和利托那韦对照组。结果表明,利托那韦对菊三七致大鼠肝损伤有明显的保护作用:利托那韦可明显降低肝损伤大鼠血清转氨酶活性及总胆汁酸水平,肝窦淤血、肝组织坏死等病理状态均有所缓解。进一步测定菊三七提取物给药后10 min~24 h内PAs致肝毒性生物标识物吡咯-蛋白结合物含量及主要胆汁酸的含量,发现利托那韦可明显降低血清吡咯-蛋白结合物含量,修复胆汁酸代谢紊乱。本研究表明,利托那韦可明显改善菊三七致大鼠肝损伤的情况,与抑制PAs代谢活化及调节胆汁酸代谢密切相关。研究结果加强了对CYP3A4酶与PAs毒性的相关性的理解,对于PAs临床疾病干预策略的开发以及含PAs药物临床用药安全的合理评估均具有重要意义。

关键词：吡咯里西啶生物碱代谢活化胆汁酸 CYP3A4 利托那韦肝毒性

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五味子醇甲对千里光碱致小鼠肝损伤的改善作用

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药学学报 2022年第12期57卷 3626-3633页

作者：陈岩贾夏丽熊爱珍王长虹杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

菊三七含千里光碱(senecionine, SEN)等大量吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloids, PAs),其所导致的肝毒性问题成为最受关注的中药药源性肝损伤之一,但尚无有效的临床治疗药物。本课题组前期研究表明CYP3A4抑制剂利托那韦可有效抑... 详细信息

菊三七含千里光碱(senecionine, SEN)等大量吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloids, PAs),其所导致的肝毒性问题成为最受关注的中药药源性肝损伤之一,但尚无有效的临床治疗药物。本课题组前期研究表明CYP3A4抑制剂利托那韦可有效抑制SEN代谢活化并降低其肝毒性。保肝中药五味子含大量木脂素类活性成分,可通过影响药物代谢酶改善药源性肝损伤。因此,本研究探讨了五味子主要木脂素类化合物五味子醇甲(schisandrol A,SoA)对SEN致小鼠肝损伤的改善作用,并初步探讨其对千里光碱代谢的影响。所有动物实验经上海中医药大学实验动物伦理委员会审查(PZSHUTCM210604002),符合实验动物伦理相关规范。小鼠单次灌胃SEN (150μmol·kg^(-1))造成肝损伤模型,并设SoA (116μmol·kg^(-1))干预组、溶剂对照组和SoA对照组。结果表明, SoA可明显降低SEN致肝损伤小鼠血清转氨酶活性,缓解肝细胞坏死、肝窦淤血等病理状态。进一步测定小鼠血清中SEN代谢产物的含量,结合体外肝微粒体代谢研究,发现SoA可抑制SEN代谢活化关键酶CYP3A4酶活性,降低千里光碱代谢产物的含量。本研究表明, SoA可明显改善SEN致小鼠肝损伤,与抑制SEN代谢活化密切相关。研究结果为基于药物代谢探讨SEN的减毒策略,以及菊三七等含PAs中草药的临床合理应用提供理论依据。

关键词：吡咯里西啶生物碱千里光碱木脂素五味子醇甲中药药源性肝损伤 CYP3A4

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