检索结果-内蒙古大学图书馆

药学学报 2021年第12期56卷 3460-3472页

作者：郑小宇陈敏李航赵淑娟上海中医药大学中药研究所中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室教育部中药标准化研究中心上海市复方中药重点研究室上海201203 上海中医药大学教学实验中心上海201203 上海上药杏灵科技药业股份有限公司上海201703

miRNA(microRNA)是一类长度约为21nt的内源性非编码单链小RNA,在植物生长发育、信号转导、环境胁迫响应和次生代谢产物形成等方面发挥着重要的调控作用。近年来,多种药用植物中鉴定出了大量miRNA,并初步研究了这些miRNA对药用植物的调... 详细信息

miRNA(microRNA)是一类长度约为21nt的内源性非编码单链小RNA,在植物生长发育、信号转导、环境胁迫响应和次生代谢产物形成等方面发挥着重要的调控作用。近年来,多种药用植物中鉴定出了大量miRNA,并初步研究了这些miRNA对药用植物的调控作用。药用植物的活性成分大多是其次生代谢产物,研究miRNA对药用植物次生代谢产物形成的调控作用具有十分重要的意义。本文综述了植物miRNA的一般研究方法与药用植物miRNA的研究进展及其对具有药用活性的代谢产物形成的调控作用,并对药用植物miRNA发展趋势做了展望,为药用植物的研究开拓新思路。

关键词：药用植物 microRNA 研究方法次生代谢

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大鼠灌胃菊三七生成吡咯蛋白加合物的药代动力学研究

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药学学报 2020年第3期55卷 473-477页

作者：陈岩王汛江熊芬王蔚倩杨莉熊爱珍王长虹王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

近年来,误服菊三七引起肝窦阻塞综合征(hepatic sinusoidal obstruction syndrome,HSOS)的案例逐年增多,引起国内外的广泛关注。菊三七含大量吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloids,PAs),经肝脏代谢活化生成吡咯-蛋白加合物(pyrrole... 详细信息

近年来,误服菊三七引起肝窦阻塞综合征(hepatic sinusoidal obstruction syndrome,HSOS)的案例逐年增多,引起国内外的广泛关注。菊三七含大量吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloids,PAs),经肝脏代谢活化生成吡咯-蛋白加合物(pyrrole-protein adducts,PPAs)。本文首先利用SD雄性大鼠单次灌胃不同剂量的菊三七醇提物(0.0625、0.25、0.5、2.0和4.0 g·kg-1)后,于2、12、24和48 h眼眶静脉丛取血,并48 h后异氟烷麻醉取肝,用于苏木精-伊红染色,进行肝组织病理分析,考察不同剂量菊三七醇提物与PPAs生成量及菊三七肝毒性的关系。此外,利用SD雄性大鼠单次灌胃0.25和0.5 g·kg-1菊三七醇提物后,于不同的时间点(10、20和30 min、1、2、4、6、12、24和48 h)眼眶静脉丛取血,进行了不同剂量的PPAs的药代动力学研究。实验方案经上海中医药大学动物实验伦理委员会批准(PZSHUTCM190912019)。采用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)检测血清中PPAs含量,并用PK Solutions 2TM软件的非房室模型进行拟合求算药动学参数。结果表明,PPAs含量随菊三七给药剂量增加呈剂量依赖性,且与肝损伤程度相关;PPAs在大鼠体内的消除率随着给药剂量的增加明显减慢。PPAs可作为PAs毒性标志物,其含量的高低及清除的快慢可为PAs减毒策略的开发提供参考。

关键词：菊三七吡咯里西啶生物碱肝窦阻塞综合征吡咯蛋白加合物药代动力学

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芍药甘草汤化学成分、药动学及药效学研究进展

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上海中医药大学学报 2022年第4期36卷 98-105页

作者：鲍斌赵咏麟王辉俊施松善王顺春上海中医药大学中药研究所上海201203 中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 中药标准化教育部重点实验室上海201203

芍药甘草汤(SGD)属于中医经典方剂,源自汉朝张仲景《伤寒论》,由白芍和炙甘草2味中药组成。该方富含多种化学成分,包括萜类、皂苷类、黄酮类及多糖类等,以芍药总苷、甘草酸及甘草苷等为主要活性成分,临床上除广泛用于解痉镇痛外,还用于... 详细信息

芍药甘草汤(SGD)属于中医经典方剂,源自汉朝张仲景《伤寒论》,由白芍和炙甘草2味中药组成。该方富含多种化学成分,包括萜类、皂苷类、黄酮类及多糖类等,以芍药总苷、甘草酸及甘草苷等为主要活性成分,临床上除广泛用于解痉镇痛外,还用于神经系统疾病、内分泌系统疾病等的治疗。现代药理研究发现,SGD在中枢系统方面具有镇痛、神经保护和解痉等作用,在消化系统方面可调节胃肠道蠕动,同时具有保肝、止咳平喘和治疗高催乳素血症等作用。通过分析SGD药动学相关研究,可为SGD的药效物质基础和药效学研究之间建立新的联系,为阐明量效关系和复方配伍规律提供思路,并为该方的临床合理应用及二次开发提供参考。

关键词：芍药甘草汤解痉镇痛化学成分药动学药效学

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野百合碱对人肝窦内皮细胞的毒性机制研究

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中国药理学通报 2020年第6期36卷 833-839页

作者：王蔚倩叶铉玲陈岩熊爱珍杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学交叉科学研究院上海201203

目的利用人肝窦内皮细胞(human hepatic sinusoidal endothelial cell,HHSEC)探讨野百合碱(monocrotaline,MCT)的体外毒性及其毒性作用机制。方法CCK-8检测MCT对细胞存活率的影响;通过LC-MS检测毒性代谢物吡咯蛋白加合物(PPA)的水平;用... 详细信息

目的利用人肝窦内皮细胞(human hepatic sinusoidal endothelial cell,HHSEC)探讨野百合碱(monocrotaline,MCT)的体外毒性及其毒性作用机制。方法CCK-8检测MCT对细胞存活率的影响;通过LC-MS检测毒性代谢物吡咯蛋白加合物(PPA)的水平;用试剂盒检测细胞中还原型谷胱甘肽(GSH)的含量;通过Hoechst染色、荧光底物法和Western blot来检测细胞凋亡情况;QT-PCR分析细胞中相关基因的mRNA表达情况。结果与空白组比较,MCT(5,10 mmol·L-1)能明显降低HHSEC的细胞存活率;在给药后的HHSEC和培养基中均检测到了大量PPA,且其水平呈剂量依赖性增加;并明显降低了HHSEC中GSH含量。MCT能导致细胞核固缩,同时提高caspase-3蛋白酶活性,诱导细胞中凋亡蛋白的表达水平升高。MCT诱导代谢活化关键酶CYP3A4,并使细胞中VEGFA和MMP9基因表达上调,NOS3基因则表达下调。结论MCT经HHSEC内代谢酶代谢活化,同时消耗细胞内GSH,破坏肝脏抗氧化系统,激活了HHSEC凋亡并影响内皮及血管系统等进一步加剧细胞损伤。

关键词：野百合碱人肝窦内皮细胞吡咯里西啶生物碱肝窦阻塞综合征肝毒性凋亡

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三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的HPLC定量分析及其肠黏膜渗透性研究

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上海中医药杂志 2023年第9期57卷 78-84页

作者：王筱懿仇坤陈明彭桂明赖树生蒋腾川尉小慧王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海201203 广西梧州中恒集团股份有限公司广西梧州543000 广西中恒创新医药研究有限公司广西南宁530000

目的通过前期建立的3种体外肠黏液渗透模型[纯化黏蛋白渗透模型(PIM)、人工肠黏液渗透模型(AIM)及大鼠肠黏液渗透模型(RIM)],研究三七中主要单体成分三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1在肠黏液层的渗透作用,以期为三七皂苷类成分的... 详细信息

目的通过前期建立的3种体外肠黏液渗透模型[纯化黏蛋白渗透模型(PIM)、人工肠黏液渗透模型(AIM)及大鼠肠黏液渗透模型(RIM)],研究三七中主要单体成分三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1在肠黏液层的渗透作用,以期为三七皂苷类成分的口服吸收及应用提供实验依据。方法采用高效液相色谱(HPLC)法建立三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的定量分析方法,并对其线性范围、精密度、稳定性、重复性、加样回收率进行考察;分别测定不同浓度三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1溶液在3种肠黏液渗透模型上的表观渗透系数(Papp),分析比较其肠黏液渗透作用。结果建立了三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的HPLC定量分析方法,精密度、稳定性、重复性、加样回收率均符合要求。3种皂苷成分在PIM、AIM、RIM模型的渗透性结果显示:三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1在3种模型上的渗透作用随着药物浓度的升高均有不同程度的增加;在PIM中,与人参皂苷Rb1和人参皂苷Rg1相比,三七皂苷R1在不同浓度下的Papp均显著增加(P<0.05);在AIM中,20g·L-1浓度下的Papp为三七皂苷R1>人参皂苷Rb1>人参皂苷Rg1(P<0.05);在RIM中,20 g·L-1浓度下的Papp为人参皂苷Rg1>三七皂苷R1>人参皂苷Rb1(P<0.05)。结论不同浓度的三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1在3种肠黏液渗透模型中的稳定性、重现性较好,且随着药物浓度的上升渗透性也随之增加;水溶性较强且分子量相对较小的三七皂苷R1在脂类成分较少的PIM和AIM中渗透作用较强,而脂溶性较强的人参皂苷Rg1在RIM中渗透作用较强。

关键词：三七三七皂苷R1 人参皂苷Rg1 人参皂苷Rb1 肠吸收生物利用度中药研究

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液滴萃取表面分析-质谱法用于新鲜与蒸制三七根切片中皂苷成分的快速鉴别

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药学学报 2020年第1期55卷 123-130页

作者：田妹李林楠杨远贵杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

三七为五加科植物三七(Panax notoginseng)的干燥根及根茎,为我国传统珍贵中药材,具有止血散瘀、消肿止痛等功效。相比于新鲜三七,蒸制三七对治疗肿瘤和心血管疾病等表现出更好的疗效。皂苷是三七主要的化学和药效成分,本研究基于表面... 详细信息

三七为五加科植物三七(Panax notoginseng)的干燥根及根茎,为我国传统珍贵中药材,具有止血散瘀、消肿止痛等功效。相比于新鲜三七,蒸制三七对治疗肿瘤和心血管疾病等表现出更好的疗效。皂苷是三七主要的化学和药效成分,本研究基于表面萃取结合芯片多通道纳喷质谱技术,建立了液滴萃取表面分析-质谱方法 (LESAMS),能够直接、快速地对新鲜与蒸制三七根切片中木质部、韧皮部和形成层中皂苷成分进行鉴别。实验结果表明,新鲜与蒸制三七根中皂苷成分及其含量具有一定的差异,表现为在新鲜三七根切片中,人参皂苷Rg1、Rb1、Re、Rd,三七皂苷R1及其丙二酰类成分较高。而在蒸制三七根切片中,人参皂苷Rg5、Rk1等弱极性成分能被检测到,大极性成分则相对含量较低。本方法具有快速、稳健且灵敏度高的优势,且操作过程无需破碎、萃取、色谱分离等繁琐的步骤,实现了对鲜三七与蒸三七根切片所含化学成分及二者差异的无损分析。

关键词：液滴萃取表面分析质谱三七皂苷快速鉴别

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基于全细胞催化的蟾蜍二烯内酯前体化合物生物合成研究

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上海中医药大学学报 2022年第5期36卷 39-45页

作者：胡耀廷肖传光陈文杰王如锋杨莉赵淑娟上海中医药大学中药研究所国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室教育部中药标准化重点研究室上海市中药复方重点实验室上海201203

目的:将胆固醇生物转化成7α-羟基-4-胆甾烯-3-酮。方法:PCR扩增中华大蟾蜍来源的3β羟基类固醇脱氢酶基因(Bg-HSD3B7)、细胞色素P450还原酶基因(Bg-CPR)、大鼠来源的细胞色素P450酶基因(Rn-CYP7A1),生物信息学网站ExPASy、TMHMM预测理... 详细信息

目的:将胆固醇生物转化成7α-羟基-4-胆甾烯-3-酮。方法:PCR扩增中华大蟾蜍来源的3β羟基类固醇脱氢酶基因(Bg-HSD3B7)、细胞色素P450还原酶基因(Bg-CPR)、大鼠来源的细胞色素P450酶基因(Rn-CYP7A1),生物信息学网站ExPASy、TMHMM预测理化性质,采用不同的构建组合方式构建工程菌;以胆固醇为底物进行全细胞催化,高效液相色谱检测是否产生7-α羟基胆固醇中间产物和7α-羟基-4-胆甾烯-3-酮终产物。结果:克隆并以单顺反子方式构建到pETM6载体,获得带有3个基因Rn-CYP7A1、Bg-CPR、Bg-HSD3B7的大肠杆菌工程菌BL21(DE3),该工程菌可以全细胞催化方式将胆固醇转化生成7α-羟基-4-胆甾烯-3-酮,且没有中间产物。结论:克隆得到中华大蟾蜍来源的Bg-HSD3B7基因、Bg-CPR基因、大鼠来源的Rn-CYP7A1基因,构建了具有全细胞催化功能的工程大肠杆菌,可以催化胆固醇转化生成7α-羟基-4-胆甾烯-3-酮。

关键词：中华大蟾蜍胆固醇工程菌 3β羟基类固醇脱氢酶细胞色素P450还原酶

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风湿骨痛胶囊定性与定量质量控制方法研究

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上海中医药杂志 2022年第1期56卷 81-88页

作者：陈良妮刘世欣林启焰程雪梅王莉莉季莉莉高武陈勇王长虹上海中医药大学中药研究所上海市复方中药重点实验室中药标准化教育部重点实验室上海中药标准化研究中心上海201203 广西中医药大学药学院广西南宁530000 国药集团精方(安徽)药业股份有限公司安徽宣城242000

目的完善风湿骨痛胶囊的质量标准,提高其质量控制水平。方法以正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(4:7:6:2)为展开剂,碘蒸汽为显色剂,对麻黄、制川乌和制草乌进行薄层色谱鉴别;以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15:1:1:2)为展开剂,10%硫酸乙醇溶... 详细信息

目的完善风湿骨痛胶囊的质量标准,提高其质量控制水平。方法以正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(4:7:6:2)为展开剂,碘蒸汽为显色剂,对麻黄、制川乌和制草乌进行薄层色谱鉴别;以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15:1:1:2)为展开剂,10%硫酸乙醇溶液为显色剂,对甘草进行薄层色谱鉴别;以三氯甲烷-乙酸乙酯-丙酮-甲酸(8:2:2:0.4)为展开剂,2,2-联苯基-1-苦基肼基(DPPH)无水乙醇溶液为显色剂,采用薄层-生物自显影技术对木瓜进行鉴别;建立同时测定苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱和苯甲酰次乌头原碱含量的HPLC方法;建立测定甘草酸含量的HPLC方法。结果所建立的2个TLC方法,各斑点清晰,Rf值适中,分离度良好。薄层-生物自显影实现了鉴别木瓜的表征抗氧活性成分的目的。含量测定中苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱和苯甲酰次乌头原碱的线性范围分别为2.200~280.0μg/mL、2.370~75.76μg/mL、3.180~101.6μg/mL,线性关系良好;各指标成分的相关系数均>0.9999,平均加样回收率为92%~107%,RSD为2.85%~5.62%。21批样品中3个指标成分含量分别为35.00~80.15μg/粒、6.92~13.57μg/粒、9.94~17.99μg/粒;甘草酸的线性范围为6.100~97.58μg/mL,线性关系良好;平均加样回收率为100.9%,RSD为1.95,21批样品中甘草酸含量为1.70~2.21 mg/粒。结论建立的相关的定性与定量方法准确灵敏,专属性强,重复性好,可用于风湿骨痛胶囊的质量控制。

关键词：风湿骨痛胶囊质量控制薄层鉴别薄层-生物自显影 HPLC含量测定

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转铁蛋白修饰的负载三七皂苷R1的PEG-PLGA纳米粒制备及其体外释药评价

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上海中医药大学学报 2021年第3期35卷 71-78页

作者：商云霞王亚茹唐逢雨仇坤尉小慧王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的:采用单因素试验与正交试验优化转铁蛋白(Tf)修饰的负载三七皂苷R1的PEG-PLGA纳米粒(R1@Tf-PEG-PLGA NPs)的制备工艺,并对其质量进行评价。方法:采用纳米沉淀法制备负载三七皂苷R1的PEG-PLGA纳米粒(R1@PEG-PLGA NPs),通过单因素试... 详细信息

目的:采用单因素试验与正交试验优化转铁蛋白(Tf)修饰的负载三七皂苷R1的PEG-PLGA纳米粒(R1@Tf-PEG-PLGA NPs)的制备工艺,并对其质量进行评价。方法:采用纳米沉淀法制备负载三七皂苷R1的PEG-PLGA纳米粒(R1@PEG-PLGA NPs),通过单因素试验与正交试验优选其最佳制备条件。将Tf共价偶联在纳米粒表面,制得R1@Tf-PEG-PLGA NPs。以Tf接枝率为指标,通过单因素试验优选其制备条件。采用激光粒度仪和透射电子显微镜对纳米粒进行形态表征及理化参数测定。采用透析法进行纳米粒体外释药研究,并对释药过程进行动力学模型拟合。结果:制得的R1@Tf-PEG-PLGA NPs形态圆整、分散性良好,粒径(153.50±2.01)nm,多分散指数0.11±0.01,Zeta电位(-17.57±1.45)mV,包封率(50.32±0.86)%,载药量(24.26±0.18)%,蛋白接枝率(42.09±0.62)%。药物24 h累积释放率>80%,体外释放过程符合Riger-Peppas动力学模型。结论:制得的R1@Tf-PEG-PLGA NPs粒径均一,包封率与载药量适宜,能够延缓药物的释放。

关键词：三七皂苷R1 转铁蛋白纳米粒制备工艺体外释放

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温度敏感型20(S)-原人参二醇微乳-凝胶复合给药系统的研究

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上海中医药大学学报 2021年第6期35卷 66-72页

作者：唐逢雨周欣尉小慧王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的:优化温度敏感型20(S)-原人参二醇(PPD)微乳-凝胶复合系统的制备工艺,并对其胶凝温度、胶凝时间、外观性状、流变学、体外释药及机制进行研究。方法:在前期PPD微乳制备工艺基础上,采用冷溶法制备温度敏感型PPD微乳-凝胶复合系统。... 详细信息

目的:优化温度敏感型20(S)-原人参二醇(PPD)微乳-凝胶复合系统的制备工艺,并对其胶凝温度、胶凝时间、外观性状、流变学、体外释药及机制进行研究。方法:在前期PPD微乳制备工艺基础上,采用冷溶法制备温度敏感型PPD微乳-凝胶复合系统。采用单因素试验考察处方辅料泊洛沙姆407(P407)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、海藻酸钠(SA)和甘油对胶凝温度的影响,确定基本处方;继而以胶凝温度、胶凝时间和体外释放度为评价指标,筛选出最佳处方工艺。采用透射电镜和扫描电镜观察形态学;采用旋转流变仪考察流变学特性;采用透析袋法测定体外释药度,并进行方程拟合,探讨其释药机制。结果:温度敏感型PPD微乳-凝胶复合系统的最佳处方为:30%P407水溶液,P407水溶液与PPD微乳体积比为2∶1,0.6%HPMC,0.2%SA,4%甘油,0.05%尼泊金乙酯。此条件下制得的温度敏感型PPD微乳-凝胶的胶凝温度为(30.9±0.1)℃,胶凝时间为(146.7±4.4)s;扫描电镜下其呈多孔结构,孔隙疏松;透射电镜显示微乳颗粒圆整、无粘连。该制剂具有良好的温度敏感性,室温下流动性良好,在略低于皮肤温度的条件下可以发生从溶液到凝胶的相变过程;体外释放可达72 h,体外释药过程符合Weibull方程,为药物扩散和骨架溶蚀协同作用。结论:所研究的温度敏感型PPD微乳-凝胶复合系统制备工艺简单,胶凝温度、时间适宜,具有温度敏感、缓释特性,可满足皮肤局部用药需求。

关键词： 20(S)-原人参二醇微乳-凝胶复合系统温度敏感制备工艺释药机制

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