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药学学报 2024年第4期59卷 939-947页

作者：张进宇张少波徐红欧阳豪季莉莉上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院肝病科上海201203

大黄素甲醚(physcion,PHY)是一种来源于大黄等中药的蒽醌类化合物。本实验旨在探究PHY对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的改善作用及其机制。采用蛋氨酸胆碱缺乏饲料(methionine-and choline-deficient diet,MCD)喂养6周诱导小鼠NAFLD疾病模型(本实验获得上海中医药大学实验动物伦理委员会批准,批准号:PZSHUTCM190705019)。结果显示,PHY(5和20 mg·kg^(-1))能改善MCD诱导NAFLD小鼠的肝损伤,减轻肝脏脂肪累积,降低升高的NAFLD活动性评分(NAFLD activity score,NAS)。Western blot及酶活力实验结果提示,PHY能提升肝脏及L-02细胞中肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(carnitine palmitoyltransferase 1A,CPT1A)蛋白表达及酶活力,但real-time PCR结果显示PHY不影响Cpt1a mRNA表达。免疫荧光结果提示,PHY(10和25μmol·L^(-1))能缓解游离脂肪酸(non-esterified fatty acids,NEFA)诱导的人正常肝L-02细胞中的线粒体损伤。Seahorse实验结果提示,PHY给药后能提升L-02细胞内线粒体基础呼吸能力、最大呼吸能力、ATP合成和储备呼吸能力,但不影响线粒体质子漏。以上研究表明,PHY可能通过改善线粒体功能,促进脂肪酸β氧化,减少肝脏中脂肪的堆积,发挥改善NAFLD的药效。

关键词：大黄素甲醚非酒精性脂肪性肝病肉毒碱棕榈酰基转移酶1A β氧化线粒体损伤

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泽泻改善胆管结扎致小鼠肝纤维化的药效与机制研究

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药学学报 2025年第5期 1454-1463页

作者：董跨唐莹莹蒋嘉瑞黄幼媚谷丽华丁丽丽李冠成熊爱珍杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室中药功效成分发掘与利用全国重点实验室上海中医药大学附属上海市中医医院

肝纤维化是由多种致病因素导致的慢性肝损伤,造成胶原在内的细胞外基质过度堆积,是多数慢性肝病进展过程中常见的病理改变,然而迄今尚无公认特异有效的药物用于肝纤维化的临床治疗。因此本文研究中药泽泻对胆管结扎(bile duct ligation,... 详细信息

肝纤维化是由多种致病因素导致的慢性肝损伤,造成胶原在内的细胞外基质过度堆积,是多数慢性肝病进展过程中常见的病理改变,然而迄今尚无公认特异有效的药物用于肝纤维化的临床治疗。因此本文研究中药泽泻对胆管结扎(bile duct ligation, BDL)诱导的肝纤维化的改善作用,并初步探讨其潜在的药理作用机制。动物实验方案经上海中医药大学实验动物福利与伦理委员会审查(批准号:PZSHUTCM2303280007),符合实验动物福利与伦理相关规范。对小鼠进行胆管结扎以诱导肝纤维化模型,并设立假手术组(Sham组)、模型组(BDL组)、泽泻醇提物保护组(BDL+EE)、泽泻水提物保护组(BDL+WE)、奥贝胆酸保护组(BDL+OCA)。结果表明,泽泻可明显改善胆管结扎诱导的肝纤维化:泽泻提取物可显著降低肝纤维化小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性、碱性磷酸酶、谷氨酰转移酶及总胆汁酸水平,改善胆汁淤积、胶原沉积、炎性细胞浸润、肝组织坏死等病理状况,其中醇提物药效优于水提物。进一步考察泽泻醇提物改善胆管结扎诱导小鼠肝纤维化的量-效关系,并探讨其作用机制,发现泽泻醇提物可缓解胆管结扎致肝纤维化小鼠体内血清和肝脏胆汁酸代谢失衡,调节肝组织内胆汁酸代谢关键核受体法尼醇X受体(farnesoid X receptor, FXR)及其下游靶基因小异二聚体伴侣(small heterodimer partner, SHP)、胆固醇7-羟化酶(cholesterol 7-alpha hydroxylase, CYP7A1)、胆盐输出泵(bile salt export pump, BSEP)的mRNA表达;体外进一步证实泽泻醇提物中4种主要三萜可在转录水平激活FXR。本研究表明泽泻在临床上防治肝纤维化的应用提供了理论依据。

关键词：泽泻三萜胆汁淤积肝纤维化胆汁酸代谢法尼醇X受体

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手性分离方法及在中药手性成分研究中的应用

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药学学报 2023年第6期58卷 1566-1576页

作者：李依璠刘龙婵李林楠王峥涛杨莉上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学交叉科学研究院上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

化合物手性是自然界的基本特性之一,组成生命体的重要分子大多含有手性结构。药物有效性和安全性往往与化合物的手性结构密切相关,然而目前对手性小分子化学药物的合成表征、药理学、毒理学等研究相对较多,但对中药等天然药物中所含手... 详细信息

化合物手性是自然界的基本特性之一,组成生命体的重要分子大多含有手性结构。药物有效性和安全性往往与化合物的手性结构密切相关,然而目前对手性小分子化学药物的合成表征、药理学、毒理学等研究相对较多,但对中药等天然药物中所含手性化合物的研究相对较少。手性分离作为手性研究的基础,在手性化合物的研究中具有举足轻重的地位。本文从色谱法和非色谱法的手性拆分方法,以及色谱填料、手性添加剂、手性衍生化等方面系统阐述手性化合物的分离方法,并对近十年报道的中药等天然药物中的手性化合物进行综述,以期为中药中手性化合物的分离、活性评价,以及中药质量标准的提升提供参考。

关键词：手性分离手性填料手性化合物中药天然产物

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山楂配方颗粒UPLC特征图谱建立及绿原酸含量测定

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中成药 2024年第9期46卷 3068-3071页

作者：张方丽刘龙婵王煜李林楠杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的建立山楂配方颗粒UPLC特征图谱,并测定绿原酸含量。方法分析采用Waters ACQUITY UPLC HSS C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相乙腈-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温35℃;检测波长325 nm。结果14批样... 详细信息

目的建立山楂配方颗粒UPLC特征图谱,并测定绿原酸含量。方法分析采用Waters ACQUITY UPLC HSS C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相乙腈-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温35℃;检测波长325 nm。结果14批样品特征图谱中有6个特征峰。绿原酸在0.78125~200μg/mL范围内线性关系良好(R^(2)=0.9998),平均加样回收率为95.86%,RSD为2.36%。结论该方法简便、重复性好,明显优于国家药品监督管理局发布的山里红配方颗粒分析方法,现已作为《上海市中药配方颗粒标准》发布实行。

关键词：山楂配方颗粒 UPLC特征图谱绿原酸含量测定

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基于UPLC-MS/MS技术的内源性胆汁酸分析方法研究进展

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药学学报 2023年第1期58卷 52-62页

作者：魏娇娇鄢星梅余琪丁丽丽李林楠王峥涛杨莉上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

胆汁酸(bile acids,BAs)是一类调节脂质、葡萄糖和能量代谢的内源性甾体物质。其作为宿主和肠道微生物代谢的关键信号分子,在维持机体稳态和生理功能中发挥着重要的作用。生物体内BAs的准确定性定量在基础及临床研究中具有重要意义。过... 详细信息

胆汁酸(bile acids,BAs)是一类调节脂质、葡萄糖和能量代谢的内源性甾体物质。其作为宿主和肠道微生物代谢的关键信号分子,在维持机体稳态和生理功能中发挥着重要的作用。生物体内BAs的准确定性定量在基础及临床研究中具有重要意义。过去几十年间,酶法分析、酶联免疫分析法、核磁共振、色谱法等相关技术均相继应用于BAs的检测。由于BAs结构多样、存在同分异构体,且生物样本基质复杂,给内源性BAs检测带来巨大挑战。超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)是一种稳健性分析技术,其结合了UPLC快速的分离能力及MS/MS强大的结构鉴定功能,使得生物样品中目标分析物的快速分离、准确定性及定量检测更加便利。UPLC-MS/MS因具有高选择性、高灵敏度、高准确性等优势,近年来被广泛用于BAs的分析。本文主要对BAs的生物合成途径、样品前处理方法、常见分析检测技术进行总结,并重点介绍了近五年来UPLC-MS/MS技术在内源性BAs分析中的应用现状,旨在为内源性BAs准确检测及进一步研究和应用提供参考。

关键词：胆汁酸生物基质样品前处理液质联用分析方法

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两面针质量控制方法改进

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中成药 2024年第5期46卷 1440-1446页

作者：安定邦林启焰赵祥程雪梅王长虹上海中医药大学中药研究所上海中药标准化研究中心中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 皖西学院生物与制药工程学院安徽六安237012

目的改进两面针质量控制方法。方法在氯化两面针碱、白屈菜红碱、毛两面针素的TLC定性鉴别中,分析采用硅胶GF_(254)薄层板,以氯仿-甲醇-氨水(30∶1∶0.1)为展开剂。建立两面针及其混淆品HPLC指纹图谱。在木兰花碱、氯化两面针碱、白屈... 详细信息

目的改进两面针质量控制方法。方法在氯化两面针碱、白屈菜红碱、毛两面针素的TLC定性鉴别中,分析采用硅胶GF_(254)薄层板,以氯仿-甲醇-氨水(30∶1∶0.1)为展开剂。建立两面针及其混淆品HPLC指纹图谱。在木兰花碱、氯化两面针碱、白屈菜红碱的HPLC含量测定中,分析采用Diamonsil Plus色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%三氟乙酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长273 nm。结果TLC斑点清晰,分离度良好。18批药材指纹图谱相似度为0.484~0.983,两面针及其混淆品得到有效区分。3种成分在各自范围线性关系良好(R^(2)=1.0000),平均加样回收率98.9%~103.3%,RSD 1.17%~1.96%。结论该方法简便,重复性好,可为两面针质量控制提供一种新方法。

关键词：两面针定性鉴别指纹图谱含量测定 TLC HPLC

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化痰合剂提取工艺优化及其质量标准建立

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中成药 2024年第5期46卷 1617-1621页

作者：孟慧頔范伟顾伟鹰时扣荣刘娟罗兰王长虹上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学附属第七人民医院药学部上海200137

目的优化化痰合剂提取工艺,并建立该方质量标准。方法以料液比、提取时间、提取次数为影响因素,白花前胡甲素、橙皮苷含量及干膏得率的综合评分为评价指标,正交试验优化提取工艺。TLC法定性鉴别前胡、陈皮,HPLC法测定白花前胡甲素、橙... 详细信息

目的优化化痰合剂提取工艺,并建立该方质量标准。方法以料液比、提取时间、提取次数为影响因素,白花前胡甲素、橙皮苷含量及干膏得率的综合评分为评价指标,正交试验优化提取工艺。TLC法定性鉴别前胡、陈皮,HPLC法测定白花前胡甲素、橙皮苷含量。结果最佳条件为加入12倍量水提取3次,每次1 h,综合评分为0.98。TLC斑点清晰,阴性无干扰。2种成分分别在2.71~108.54μg/mL(r=0.9986)、5.05~505.44μg/mL(r=0.9996)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为94.63%、98.70%,RSD分别为1.29%、1.08%。结论该方法简便稳定,专属性强,准确可靠,可为化痰合剂的工业生产和质量控制提供参考。

关键词：化痰合剂提取工艺定性鉴别含量测定正交试验 TLC HPLC

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基于网络药理学和实验验证探讨泽泻改善慢性肾小球肾炎的作用机制

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药学学报 2023年第6期58卷 1430-1440页

作者：仇之淼陆宾卫梦娟季莉莉上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海市复方中药重点实验室上海201203

本文旨在探讨泽泻(Alisma plantago-aquatica Linn.,ApL)对慢性肾小球肾炎(chronic glomerulonephritis CGN)小鼠的改善作用及其机制。动物实验过程均遵循上海中医药大学动物实验伦理委员会的规定。运用一次性尾静脉注射多柔比星(doxoru... 详细信息

本文旨在探讨泽泻(Alisma plantago-aquatica Linn.,ApL)对慢性肾小球肾炎(chronic glomerulonephritis CGN)小鼠的改善作用及其机制。动物实验过程均遵循上海中医药大学动物实验伦理委员会的规定。运用一次性尾静脉注射多柔比星(doxorubicin,Dox,20 mg·kg^(-1))方法建立CGN小鼠模型,造模1周后每天灌胃给药ApL水提物(85和255 mg·kg^(-1)),两周后结束实验。检测小鼠尿白蛋白与肌酐的比值(urine albumin-to-creatinine ratio,ACR)、血清白蛋白(serum albumin,ALB)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和血清肌酐(serum creatinine,SCr)含量,利用HE (hematoxylin-eosin staining,H&E)染色观察肾组织中病理损伤情况。根据TCMSP数据库获取ApL的化学成分及作用靶点,并通过Genecards数据库获取CGN相关靶点。运用String及Metascape数据库进行蛋白互作、GO功能和KEGG通路富集分析。研究结果发现,ApL (85和255 mg·kg^(-1))可以明显降低CGN小鼠ACR以及SCr和BUN含量,并使ALB含量上升。网络药理学结果发现,核因子-κB (nuclear factor kappa-B,NF-κB)相关通路以及氧化还原酶活性调节的生物过程可能是ApL改善CGN的关键因素。验证实验发现,ApL (85和255 mg·kg^(-1))可以抑制CGN小鼠NF-κB的激活和其下游炎症因子的表达,降低肾脏髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活力;并促进核因子E2相关因子2 (nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)的激活,增加其下游基因表达,降低肾脏丙二醛(malondialdehyde,MDA)及活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,提升谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平。本研究基于网络药理学结合实验验证发现ApL可能通过多靶点、多通路发挥改善小鼠CGN的作用,其中对NF-κB信号的抑制和Nrf2信号的激活可能是重要的作用机制。

关键词：慢性肾小球肾炎泽泻网络药理学核因子-κB 核因子E2相关因子2

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天然5α-还原酶抑制剂用于改善良性前列腺增生的研究进展

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中国中药杂志 2024年第4期49卷 858-867页

作者：郑瑞蓉欧阳倩兮刘子瑶李林楠杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 厦门医学院药学系福建厦门361023

良性前列腺增生是一种常见的男性泌尿系统疾病,其发病率在我国呈逐年上升的趋势。目前针对该疾病的发病机制尚未十分明确,有研究认为其发病机制与类固醇激素水平变化有关。当体内二氢睾酮的含量过高,会引起前列腺增生等相关疾病。二氢... 详细信息

良性前列腺增生是一种常见的男性泌尿系统疾病,其发病率在我国呈逐年上升的趋势。目前针对该疾病的发病机制尚未十分明确,有研究认为其发病机制与类固醇激素水平变化有关。当体内二氢睾酮的含量过高,会引起前列腺增生等相关疾病。二氢睾酮由睾酮在5α-还原酶的作用下转化而成,因而通过抑制该酶活性,可减少二氢睾酮的生成量,进而达到减轻前列腺增生的效果。从天然药物中筛选和发现新的、有效和安全的5α-还原酶抑制剂,应用于防治前列腺增生,但又不影响男性的生理功能,成为该领域研究的热点话题。该文总结了5α-还原酶的作用特点及组织分布,临床常用的5α-还原酶抑制剂及其副作用,并整理了中药和天然药物中5α-还原酶抑制剂的筛选和发现,概括了前列腺增生实验动物模型和常用检测指标,为良性前列腺增生发病机制及防治药物的研发提供参考依据。

关键词：良性前列腺增生 5α-还原酶 5α-还原酶抑制剂中药材天然药物动物模型

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丹参SmHPPR1基因调控丹酚酸生物合成的研究

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药学学报 2023年第9期58卷 2818-2828页

作者：谈荣慧赵望张金家赵淑娟上海中医药大学中药研究所中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203

丹参是临床上治疗心脑血管疾病的常用中药,其主要水溶性活性成分为迷迭香酸和丹酚酸B,由苯丙烷类代谢途径产生。4-羟基苯丙酮酸还原酶(HPPR)是苯丙烷代谢途径中的关键酶。本课题组前期在丹参中克隆了SmHPPR1基因并构建了植物表达载体。... 详细信息

丹参是临床上治疗心脑血管疾病的常用中药,其主要水溶性活性成分为迷迭香酸和丹酚酸B,由苯丙烷类代谢途径产生。4-羟基苯丙酮酸还原酶(HPPR)是苯丙烷代谢途径中的关键酶。本课题组前期在丹参中克隆了SmHPPR1基因并构建了植物表达载体。在此基础上,获得了携带SmHPPR1的转基因拟南芥阳性植株并测定4-羟基苯乳酸的含量;诱导了过表达SmHPPR1丹参毛状根并进行有效成分含量测定和转录组分析。结果显示:携带SmHPPR1的T1代转基因拟南芥中4-羟基苯乳酸含量为0.594 mg·g^(-1);SmHPPR1-OE-3毛状根中的迷迭香酸、丹酚酸B、总丹酚酸含量分别是control-3毛状根的1.09、1.29、1.15倍,丹参素是control-3毛状根的36.26%;转录组分析显示,SmHPPR1过表达引起了SmTAT2表达量上调;蛋白-蛋白相互作用表明CYT(TR74706_c0_g1)、NADP^(+)(TR26565_c0_g1)和NADP^(+)(TR68771_c0_g1)是网络的中心节点并参与代谢过程、细胞过程等。以上研究表明,SmHPPR1在携带SmHPPR1的转基因拟南芥中能催化4-羟基苯丙酮酸还原为4-羟基苯乳酸;丹参毛状根中过表达SmHPPR1可以通过协同调控其他途径基因来提高丹酚酸的含量。

关键词：丹参 4-羟基苯丙酮酸还原酶丹酚酸迷迭香酸生物合成

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