检索结果-内蒙古大学图书馆

药学学报 2021年第3期56卷 823-830页

作者：姜凯元叶铉玲熊芬张祎杨莉熊爱珍王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

近年来,含吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloid,PA)的中草药所致药源性肝损伤引起了国内外的广泛关注,但缺乏有效的临床治疗药物。因此,本文研究中药泽泻对代表性PA千里光碱(senecionine,SEN)所致急性肝损伤的改善作用,并初步探讨... 详细信息

近年来,含吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloid,PA)的中草药所致药源性肝损伤引起了国内外的广泛关注,但缺乏有效的临床治疗药物。因此,本文研究中药泽泻对代表性PA千里光碱(senecionine,SEN)所致急性肝损伤的改善作用,并初步探讨其潜在的药理作用机制。实验方案经上海中医药大学实验动物福利与伦理委员会审查,符合实验动物福利与伦理相关规范。小鼠单次灌胃SEN(50 mg·kg^(-1))造成急性肝损伤模型,并设泽泻水提物(18 g·kg^(-1))保护组、泽泻醇提物(18 g·kg^(-1))保护组和空白对照组。结果表明,泽泻对SEN致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用:泽泻提取物可显著降低急性肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性及总胆汁酸水平,炎性细胞浸润、肝窦淤血、肝组织坏死等病理变化均有所缓解,且醇提物药效优于水提物。进一步测定血清中主要胆汁酸的含量和肝脏胆汁酸代谢相关因子的mRNA和蛋白表达,发现泽泻可调控胆汁外排转运体和肝脏代谢酶的表达,维护胆汁酸代谢平衡,修复受损的肝细胞。本研究为临床上应用泽泻防治PA致肝损伤提供了理论依据。

关键词：泽泻胆汁酸吡咯里西啶生物碱千里光碱药源性肝损伤

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铁皮石斛联苄类化学成分的研究

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中国中药杂志 2021年第15期46卷 3853-3858页

作者：周宇娟王俊豪徐红侴桂新王峥涛上海中医药大学中药研究所教育部中药标准化重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海中药标准化研究中心上海201203

研究铁皮石斛乙酸乙酯部分中联苄类化学成分。运用大孔树脂、MCI、硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)、ODS等柱色谱、制备薄层色谱及制备高效液相色谱等技术进行化合物的分离纯化,根据1H-NMR、13C-NMR、MS等波谱数据和理化性质鉴定化合物的结... 详细信息

研究铁皮石斛乙酸乙酯部分中联苄类化学成分。运用大孔树脂、MCI、硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)、ODS等柱色谱、制备薄层色谱及制备高效液相色谱等技术进行化合物的分离纯化,根据1H-NMR、13C-NMR、MS等波谱数据和理化性质鉴定化合物的结构。从铁皮石斛乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到了15个联苄类化合物,分别鉴定为dendrocandin X(1)、3,4′-二羟基-4,5-二甲氧基联苄(2)、6″-de-O-methyldendrofindlaphenol A(3)、3,4-二羟基-4′,5-二甲氧基联苄(4)、dendrosinen B(5)、3,4,4′-三羟基-5-甲氧基联苄(6)、3,3′-二羟基-4,5-二甲氧基联苄(7)、3,4′-二羟基-5-甲氧基联苄(8)、杓唇石斛素(9)、石斛酚(10)、4,4′-二羟基-3,5-二甲氧基联苄(11)、3,4′,5-三羟基-3′-甲氧基联苄(12)、3-O-methylgigantol(13)、dendrocandin U(14)和dendrocandin N(15)。化合物1为新化合物,化合物2首次在石斛属中分离得到,化合物37首次在铁皮石斛中分离得到。

关键词：铁皮石斛化学成分联苄 dendrocandin X

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铁皮石斛醋酸乙酯部位化学成分研究

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中草药 2021年第17期52卷 5218-5225页

作者：周宇娟王俊豪薛亚甫徐红侴桂新王峥涛上海中医药大学中药研究所教育部中药标准化重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海中药标准化研究中心上海201203

目的进一步研究铁皮石斛Dendrobium officinale活性醋酸乙酯部位的化学成分。方法运用大孔树脂、MCI、硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)、ODS等柱色谱、制备薄层色谱及制备高效液相色谱法等分离技术,进行化合物的分离纯化,根据^(1)H-NMR、^(1... 详细信息

目的进一步研究铁皮石斛Dendrobium officinale活性醋酸乙酯部位的化学成分。方法运用大孔树脂、MCI、硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)、ODS等柱色谱、制备薄层色谱及制备高效液相色谱法等分离技术,进行化合物的分离纯化,根据^(1)H-NMR、^(13)C-NMR、MS等波谱数据和理化性质鉴定化合物的结构。结果从铁皮石斛乙醇提取物的醋酸乙酯部位分离得到了34个化合物,分别鉴定为moscatin(1)、黑麦草内酯(2)、柚皮素(3)、橙皮苷(4)、甘草素(5)、2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-(2-hydroxy-5-methoxyphenyl)-3-oxo-l-propanol(6)、异甘草素(7)、(E)-4-hydroxycinnamic acid(8)、(Z)-4-hydroxycinnamic acid(9)、coniferyl p-coumarate(10)、sinapyl p-coumarate(11)、tinosporaic acid A(12)、N-trans-coumaroyltyramine(13)、N-trans-feruloyltyramine(14)、丁香脂素(15)、pinoresinol(16)、梣皮树脂醇(17)、lirioresionol(18)、2(5H)-Furanone 5-hydroxy-3,4-dimethyl-5-pentyl(19)、丁香酸(20)、十六烷酸(21)、对羟基苯甲酸(22)、对羟基苯甲醛(23)、阿魏酸(24)、二氢松柏醇(25)、十七烷(26)、4-羟基-3,5-二甲氧基反式肉桂醛(27)、dihydro-p-cinnamic acid(28)、(+)-(4S)-(2E)-4-羟基-2-壬烯酸(29)、1,3-benzenediol(30)、对羟基苯酚(31)、水杨酸(32)、对羟基苯乙酮(33)和香草醛(34)。结论化合物2首次从石斛属植物中分离得到,化合物3~7均为首次从铁皮石斛中分离得到。

关键词：铁皮石斛 loliolide 柚皮素 hesperetin 甘草素 2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-(2-hydroxy-5-methoxyphenyl)-3-oxo-l-propanol 异甘草素

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石菖蒲配方颗粒特征图谱及其尿苷含量测定研究

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上海中医药杂志 2023年第7期57卷 72-80页

作者：张倩金武燮陆美龙韩沅沅陈天琦谷丽华王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海中药标准化研究中心上海201203

目的为控制石菖蒲配方颗粒内在质量,分别建立超高效液相色谱(UPLC)法整体特征图谱和高效液相色谱(HPLC)法水溶性成分特征图谱,且对核酸成分尿苷进行HPLC法含量测定。方法UPLC法整体特征图谱采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.... 详细信息

目的为控制石菖蒲配方颗粒内在质量,分别建立超高效液相色谱(UPLC)法整体特征图谱和高效液相色谱(HPLC)法水溶性成分特征图谱,且对核酸成分尿苷进行HPLC法含量测定。方法UPLC法整体特征图谱采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以甲醇、0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL/min,检测波长280 nm,柱温35℃,进样量1μL;HPLC法水溶性成分特征图谱及含量测定采用SHIMADZU Shim-pack GIST C_(18)-AQ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇、0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1 mL/min,检测波长260 nm,柱温35℃,进样量10μL。结果石菖蒲配方颗粒的整体性特征图谱共有9个特征峰,其中4个特征峰分别是细辛醛(峰3)、N-反式阿魏酰酪胺(峰4)、β-细辛醚(峰6)和α-细辛醚(峰9),10批样品与共有模式图的相似度在0.994~1.000之间;石菖蒲配方颗粒的水溶性特征图谱共获得8个特征峰,指认其中5个特征峰,分别为腺嘌呤(峰1)、尿苷(峰2)、腺苷(峰3)、鸟苷(峰5)和L-苯丙氨酸(峰7),23批样品与共有模式图的相似度在0.931~0.972之间。定量实验显示,尿苷浓度在2.086~104.300 mg/L范围内与峰面积呈现良好的线性关系(R^(2)=1.0000),加样回收率平均值为100.16%,RSD值为2.02%,23批石菖蒲配方颗粒尿苷含量在0.037%~0.061%之间,配方颗粒质量稳定。结论研究所建立的两种特征图谱和含量测定方法操作简便,重复性和专属性好,可用于石菖蒲配方颗粒的质量控制。

关键词：石菖蒲配方颗粒特征图谱含量测定高效液相色谱质量标准中药研究

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丹参SmERF081转录因子基因克隆与靶基因鉴定

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上海中医药大学学报 2024年第3期38卷 7-14页

作者：肖亦菽陈敏谈荣慧郑小宇赵淑娟上海中医药大学中药研究所国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室教育部中药标准化重点研究室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学中药学院上海201203

目的:克隆丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)转录因子SmERF081,分析SmERF081的靶基因。方法:以丹参转录组数据Unigene(c48961-g1)序列为参考,利用PCR扩增获得SmERF081基因序列;通过生物信息学预测SmERF081编码蛋白的理化性质、蛋白质结构... 详细信息

目的:克隆丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)转录因子SmERF081,分析SmERF081的靶基因。方法:以丹参转录组数据Unigene(c48961-g1)序列为参考,利用PCR扩增获得SmERF081基因序列;通过生物信息学预测SmERF081编码蛋白的理化性质、蛋白质结构等分子特征;使用MEGA 7软件构建系统进化树;对SmERF081进行异源表达和蛋白纯化;通过酵母单杂、双荧光素酶报告系统和化学发光法凝胶迁移实验(EMSA)鉴定SmERF081与SmCPS5启动子是否结合。结果:克隆得到SmERF081基因,cDNA全长453 bp(Genbank登陆号:OQ466089),编码151个氨基酸,相对分子质量16.46 kDa,等电点9.75。该蛋白不含信号肽,无跨膜区,其高级结构主要由无规则卷曲构成。进化树分析表明SmERF081与拟南芥At1G28360.1、丹参SmERF8同源关系最近。原核表达结果显示,经IPTG诱导后SmERF081在大肠杆菌中成功异源表达,并通过纯化获得目的蛋白。酵母单杂、双荧光素酶报告基因检测和EMSA确认SmERF081可与丹参SmCPS5启动子结合。结论:鉴定到丹参中一个新转录因子SmERF081,生物信息学分析及分子互作初步证实其靶基因为丹参SmCPS5二萜环化酶。

关键词：丹参 SmERF081 生物信息学靶基因

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中华大蟾蜍细胞色素P450还原酶基因克隆、表达与功能鉴定

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上海中医药大学学报 2024年第1期38卷 27-33页

作者：肖传光胡耀廷杨莉赵淑娟王峥涛上海中医药大学中药研究所中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203

目的:从中华大蟾蜍(Bufo gargarizans Cantor)肝脏组织中克隆细胞色素P450还原酶基因(BgCPR,GenBank登录号:OQ572435)进行生物信息学分析,并进行功能验证。方法:基于中华大蟾蜍转录组数据库挖掘BgCPR基因序列,使用SnapGene软件设计BgCP... 详细信息

目的:从中华大蟾蜍(Bufo gargarizans Cantor)肝脏组织中克隆细胞色素P450还原酶基因(BgCPR,GenBank登录号:OQ572435)进行生物信息学分析,并进行功能验证。方法:基于中华大蟾蜍转录组数据库挖掘BgCPR基因序列,使用SnapGene软件设计BgCPR基因两端特异性引物,以蟾蜍肝脏组织总RNA逆转录成的cDNA为模板进行PCR扩增。利用生物信息学分析BgCPR蛋白理化性质、空间结构并构建系统进化树;基于CRISPR/Cas9基因编辑系统将蟾蜍BgCPR基因表达框经同源重组整合进入酿酒酵母基因组,利用聚乙二醇法制备转化子微粒体,验证其对细胞色素C的还原功能。结果:克隆得到全长2043 bp的BgCPR基因cDNA,编码680个氨基酸,相对分子质量77852 Da。结构预测显示,BgCPR蛋白为非分泌蛋白;有一段跨膜螺旋区,位于蛋白的第24~46位氨基酸之间;亚细胞定位预测显示该蛋白定位于内质网上。采用体外酶活实验证明其具有传递电子功能。结论:本研究克隆得到中华大蟾蜍BgCPR基因,并构建了表达具有生物活性的BgCPR的酿酒酵母工程细胞,为进一步研究蟾蜍CYP450基因功能乃至解析蟾蜍二烯内酯类化合物的生物合成途径奠定了基础。

关键词：中华大蟾蜍细胞色素P450还原酶细胞色素P450 蟾蜍二烯内酯

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金丝桃苷改善吡咯里西啶生物碱诱导小鼠急性肝损伤的作用及机制研究

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上海中医药杂志 2023年第12期57卷 80-87页

作者：徐婕陈依琳阮德清张雨萌王汛江丁丽丽王峥涛熊爱珍杨莉上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的明确金丝桃苷对吡咯里西啶生物碱(PAs)诱导小鼠急性肝损伤的作用及机制。方法40只C57BL/6雄性小鼠随机分成5组,即空白对照组、模型组以及金丝桃苷低、中、高剂量组,每组8只。除空白对照组外,其余小鼠采用PAs建立急性肝损伤模型,造模... 详细信息

目的明确金丝桃苷对吡咯里西啶生物碱(PAs)诱导小鼠急性肝损伤的作用及机制。方法40只C57BL/6雄性小鼠随机分成5组,即空白对照组、模型组以及金丝桃苷低、中、高剂量组,每组8只。除空白对照组外,其余小鼠采用PAs建立急性肝损伤模型,造模6 h、30 h后金丝桃苷低、中、高剂量组小鼠分别灌胃给予20、40、80 mg/kg金丝桃苷各1次,造模48 h后,收集血清、肝脏、回肠、粪便。检测小鼠血清生化指标丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和总胆汁酸(TBA)水平;苏木精-伊红(HE)染色法观察小鼠肝脏组织病理学形态变化;测定小鼠血清、肝脏、回肠、粪便中胆汁酸含量;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法及Western blot法检测小鼠肝脏组织中法尼酯X受体(Fxr)、小异源二聚体伴侣(Shp)、胆盐输出泵(Bsep)、胆固醇-7α-羟化酶(Cyp7a1)、甾醇-12α-羟化酶(Cyp8b1)mRNA与蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,模型组血清生化指标ALT、AST、TBA水平显著升高(P<0.05),肝细胞大面积坏死,同时伴有肝窦淤血;与模型组比较,金丝桃苷各剂量组血清生化指标ALT、AST、TBA水平显著降低(P<0.05),金丝桃苷中、高剂量组未见明显肝细胞坏死及肝窦淤血。与空白对照组比较,模型组胆汁酸代谢异常,小鼠肝脏Fxr、Shp、Bsep、Cyp7a1、Cyp8b1 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,金丝桃苷中剂量组胆汁酸稳态失衡有所改善,小鼠肝脏Fxr、Shp、Bsep、Cyp7a1、Cyp8b1 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论金丝桃苷可改善PAs诱导的急性肝损伤,其机制与调控胆汁酸相关基因、维护胆汁酸稳态平衡有关。

关键词：急性肝损伤吡咯里西啶生物碱金丝桃苷胆汁酸小鼠模型中药研究

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千里光配方颗粒特征图谱及含量测定方法研究

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上海中医药大学学报 2023年第1期37卷 45-53页

作者：王金圆王煜王子樱唐莹莹张紫佳杨莉熊爱珍王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的:建立千里光配方颗粒的特征图谱及含量测定方法,为其质量评价提供参考。方法:采用CAPCELL PAK C18AQ色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5.0μm),以乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1 mL/min,柱温为30℃,检测波长为360 nm,建... 详细信息

目的:建立千里光配方颗粒的特征图谱及含量测定方法,为其质量评价提供参考。方法:采用CAPCELL PAK C18AQ色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5.0μm),以乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1 mL/min,柱温为30℃,检测波长为360 nm,建立千里光配方颗粒特征图谱。采用CAPCELL PAK C18MGⅡ(4.6 mm×250 mm,5.0μm)色谱柱,以乙腈-0.2%乙酸溶液(16∶84)为流动相进行等度洗脱,流速为1 mL/min,柱温为30℃,进样量为5μL,检测波长为360 nm,测定千里光配方颗粒中活性成分金丝桃苷的含量。结果:建立了千里光配方颗粒的高效液相色谱(HPLC)特征图谱以及含量测定方法。从特征图谱中指认了6个特征峰(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷),10批样品的HPLC特征图谱的相似度在0.997~1.000之间,各样品与对照特征图谱间的相似度在0.998~1.000之间。以金丝桃苷作为指标成分建立千里光配方颗粒含量测定方法,10批千里光配方颗粒中金丝桃苷含量在0.484~0.549 mg/g之间,平均含量为0.514 mg/g。结论:建立的特征图谱以及含量测定方法简便、准确,重复性好,能有效评价千里光配方颗粒的质量,为保障千里光配方颗粒临床应用的有效性提供参考。

关键词：千里光配方颗粒特征图谱含量测定金丝桃苷质量标准

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基于TLC和TLC-EFISI-MSn联用技术的霍山石斛专属性鉴别研究

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上海中医药大学学报 2023年第5期37卷 39-46,54页

作者：卢文旭林李雁丁玉莲王俊豪徐红上海中医药大学中药研究所教育部中药标准化重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海中药标准化研究中心上海201203

目的:建立霍山石斛薄层色谱(TLC)定性鉴别的质量控制方法,并对霍山石斛专属性成分进行快速结构鉴定。方法:采用TLC法,以水饱和正丁醇为展开剂,低温4℃展开,以2%三氯化铝乙醇试液为显色剂,105℃加热5 min,于紫外光灯(365 nm)下观察霍山... 详细信息

目的:建立霍山石斛薄层色谱(TLC)定性鉴别的质量控制方法,并对霍山石斛专属性成分进行快速结构鉴定。方法:采用TLC法,以水饱和正丁醇为展开剂,低温4℃展开,以2%三氯化铝乙醇试液为显色剂,105℃加热5 min,于紫外光灯(365 nm)下观察霍山石斛的专属性斑点并进行真伪鉴别;利用原位薄层色谱-静电场诱导喷雾-质谱(TLC-EFISI-MS^(n))联用技术进一步对专属性斑点进行快速结构解析。结果:建立了霍山石斛专属性的TLC鉴别方法,发现霍山石斛有一专属性斑点,通过该斑点可实现霍山石斛与铁皮石斛、紫皮石斛等13种石斛属植物的区分,且能够将霍山石斛粉中掺混20%以上的铁皮石斛粉鉴别出来;根据化合物的相对分子量、多级质谱裂解碎片,初步鉴定该斑点为黄酮类化合物芹菜素-6-C-α-L-鼠李糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷-8-C-α-L-阿拉伯糖,为霍山石斛的专属性成分。结论:所建立的TLC鉴别方法简单灵敏、准确可靠、重现性好且专属性强,为提高霍山石斛的质量控制方法提供了实验依据,对于保证其质量和临床疗效具有重要意义。

关键词：霍山石斛薄层色谱薄层色谱-静电场诱导喷雾离子化质谱黄酮苷芹菜素-6-C-α-L-鼠李糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷-8-C-α-L-阿拉伯糖

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基于HPLC指纹图谱和含量测定的皂角刺配方颗粒质量控制研究

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上海中医药大学学报 2023年第2期37卷 54-60,95页

作者：吴思佳王可可徐双双徐红王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海中药标准化研究中心上海201203

目的:建立皂角刺配方颗粒的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱及含量测定方法,为皂角刺配方颗粒的质量控制和评价提供参考依据。方法:采用资生堂MG C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL... 详细信息

目的:建立皂角刺配方颗粒的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱及含量测定方法,为皂角刺配方颗粒的质量控制和评价提供参考依据。方法:采用资生堂MG C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min、检测波长260 nm、柱温35℃,建立皂角刺配方颗粒的HPLC指纹图谱及指标性成分原儿茶酸的含量测定方法。结果:皂角刺配方颗粒的HPLC指纹图谱均呈现了5个共有特征峰,并指认其中的2、4、5号峰分别为原儿茶酸、对羟基苯甲酸和香草酸。同一厂家的10批次皂角刺配方颗粒的相似度介于0.814~1.000之间,原儿茶酸含量为2.28~2.60 mg/g,批次间差异较小;不同厂家间配方颗粒差异较大,相似度介于0.580~0.956之间,原儿茶酸含量为0.26~2.60 mg/g,含量差异较大。结论:所建立的指纹图谱和含量测定方法简便、可行、重复性好,可用于皂角刺配方颗粒的质量评价和控制。

关键词：皂角刺配方颗粒 HPLC指纹图谱含量测定原儿茶酸

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