检索结果-内蒙古大学图书馆

上海中医药杂志 2021年第10期55卷 66-72页

作者：刘世欣陈良妮程雪梅季莉莉李小锋刘胜康兴东尉小慧王长虹上海中医药大学中药研究所上海市复方中药重点实验室中药标准化教育部重点实验室上海201203 江西普正制药股份有限公司江西吉安331409

目的建立肾康宁胶囊中泽泻、丹参、茯苓和锁阳的薄层色谱定性鉴别质量控制方法。方法采用单因素试验方法,对不同的展开系统、显色剂、点样量、温湿度进行系统考察,确定鉴定泽泻、丹参、茯苓和锁阳的最佳薄层色谱条件。结果泽泻、丹参采... 详细信息

目的建立肾康宁胶囊中泽泻、丹参、茯苓和锁阳的薄层色谱定性鉴别质量控制方法。方法采用单因素试验方法,对不同的展开系统、显色剂、点样量、温湿度进行系统考察,确定鉴定泽泻、丹参、茯苓和锁阳的最佳薄层色谱条件。结果泽泻、丹参采用硅胶G薄层板,以正己烷-乙酸乙酯-甲酸(7∶4∶0.6)为展开剂,展开、取出、晾干,置紫外光灯(365 nm)下检视荧光斑点,再喷以2%磷钼酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰;茯苓采用硅胶G薄层板,以正己烷-乙酸乙酯-甲酸(7∶4∶0.4)为展开剂,展开、取出、晾干,置紫外光灯(365 nm)下检视荧光斑点;锁阳采用硅胶G薄层板,以环己烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(8∶6∶1∶1)为展开剂,展开、取出、晾干,用0.04%DPPH无水乙醇溶液浸板,取出、晾干,置日光下检视斑点显色清晰。结论薄层色谱特征鉴别斑点清晰、专属性强、阴性对照无干扰。该方法简单方便,重复性好,可用于肾康宁胶囊的质量控制。

关键词：肾康宁胶囊薄层鉴别泽泻丹参茯苓锁阳

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中华大蟾蜍细胞色素P450还原酶基因克隆、表达与功能鉴定

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上海中医药大学学报 2024年第1期38卷 27-33页

作者：肖传光胡耀廷杨莉赵淑娟王峥涛上海中医药大学中药研究所中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203

目的:从中华大蟾蜍(Bufo gargarizans Cantor)肝脏组织中克隆细胞色素P450还原酶基因(BgCPR,GenBank登录号:OQ572435)进行生物信息学分析,并进行功能验证。方法:基于中华大蟾蜍转录组数据库挖掘BgCPR基因序列,使用SnapGene软件设计BgCP... 详细信息

目的:从中华大蟾蜍(Bufo gargarizans Cantor)肝脏组织中克隆细胞色素P450还原酶基因(BgCPR,GenBank登录号:OQ572435)进行生物信息学分析,并进行功能验证。方法:基于中华大蟾蜍转录组数据库挖掘BgCPR基因序列,使用SnapGene软件设计BgCPR基因两端特异性引物,以蟾蜍肝脏组织总RNA逆转录成的cDNA为模板进行PCR扩增。利用生物信息学分析BgCPR蛋白理化性质、空间结构并构建系统进化树;基于CRISPR/Cas9基因编辑系统将蟾蜍BgCPR基因表达框经同源重组整合进入酿酒酵母基因组,利用聚乙二醇法制备转化子微粒体,验证其对细胞色素C的还原功能。结果:克隆得到全长2043 bp的BgCPR基因cDNA,编码680个氨基酸,相对分子质量77852 Da。结构预测显示,BgCPR蛋白为非分泌蛋白;有一段跨膜螺旋区,位于蛋白的第24~46位氨基酸之间;亚细胞定位预测显示该蛋白定位于内质网上。采用体外酶活实验证明其具有传递电子功能。结论:本研究克隆得到中华大蟾蜍BgCPR基因,并构建了表达具有生物活性的BgCPR的酿酒酵母工程细胞,为进一步研究蟾蜍CYP450基因功能乃至解析蟾蜍二烯内酯类化合物的生物合成途径奠定了基础。

关键词：中华大蟾蜍细胞色素P450还原酶细胞色素P450 蟾蜍二烯内酯

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中药黄芪皂苷类成分生物合成研究进展

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上海中医药大学学报 2021年第5期35卷 80-88,96页

作者：肖亦菽王如锋赵淑娟上海中医药大学中药研究所中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203

作为常用中药,黄芪具有补气升阳、固表利水、托毒排脓等功效。黄芪皂苷类化合物是其主要活性成分,具有抗炎、抗肿瘤、免疫调节、代谢调节、器官保护等药理作用。从黄芪皂苷的化学结构与药理活性、生物合成途径与代谢调控、生物转化与合... 详细信息

作为常用中药,黄芪具有补气升阳、固表利水、托毒排脓等功效。黄芪皂苷类化合物是其主要活性成分,具有抗炎、抗肿瘤、免疫调节、代谢调节、器官保护等药理作用。从黄芪皂苷的化学结构与药理活性、生物合成途径与代谢调控、生物转化与合成生物学等方面进行综述,并对其生物合成前景进行展望,以期为应用生物技术实现黄芪皂苷的规模化生产提供参考。

关键词：黄芪皂苷生物合成生物转化综述

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复方木尼孜其颗粒中骆驼蓬子质量控制方法研究

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上海中医药杂志 2014年第11期48卷 91-95页

作者：程娟娟穆丹丹田芳张新杰程雪梅王长虹上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203 新疆维吾尔药业有限责任公司新疆乌鲁木齐830000

目的研究复方木尼孜其颗粒中骆驼蓬子的质量控制方法。方法分别以骆驼蓬碱（HAL）和去氢骆驼蓬碱（HAR）为对照,建立复方木尼孜其颗粒中骆驼蓬子的薄层色谱鉴别及HPLC含量测定方法。薄层色谱：以硅胶HSGF254为薄层板,乙酸乙酯-甲醇-... 详细信息

目的研究复方木尼孜其颗粒中骆驼蓬子的质量控制方法。方法分别以骆驼蓬碱（HAL）和去氢骆驼蓬碱（HAR）为对照,建立复方木尼孜其颗粒中骆驼蓬子的薄层色谱鉴别及HPLC含量测定方法。薄层色谱：以硅胶HSGF254为薄层板,乙酸乙酯-甲醇-氨水（10∶1.5∶0.5）为展开剂;HPLC条件：采用反相HPLC色谱柱,以乙腈-醋酸铵缓冲盐（22∶78）为流动相,流速1.0 ml/min,柱温为30℃,检测波长为330 nm。结果复方木尼孜其颗粒的薄层色谱中HAL、HAR分离度良好,可以用于鉴别复方木尼孜其颗粒中的骆驼蓬子。含量测定方法学研究结果表明,HAL和HAR分别在0.33~104.10 mg/L和0.13~40.91 mg/L范围内呈良好的线性关系,方法平均回收率分别为97.04%和101.83%,RSD分别为2.02%和2.32%,方法的日内和日间精密度RSD均小于3%。15批复方木尼孜其颗粒样品的测定结果表明,HAL含量范围为1.62~5.04 mg/袋,平均为（2.87±0.95）mg/袋;HAR含量范围为0.87~2.22 mg/袋,平均为（1.51±0.41）mg/袋;总碱（HAL＋HAR）含量范围为（2.49~7.14）mg/袋,平均为（4.38±1.33）mg/袋。结论建立的复方木尼孜其颗粒中骆驼蓬子质量控制方法灵敏、准确、重现性好、精密度高、专属性强,适用于复方木尼孜其颗粒中骆驼蓬子的质量控制。

关键词：复方木尼孜其颗粒骆驼蓬子骆驼蓬碱去氢骆驼蓬碱薄层色谱高效液相色谱质量控制

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黄芩素-羟丙基-γ-环糊精包合物制备工艺研究

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上海中医药杂志 2013年第8期47卷 82-85页

作者：周秋娜尉小慧王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海201210 上海中医药大学中药研究所中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海201210 上海中医药大学中药研究所上海市复方中药重点实验室上海201210 上海中药标准化研究中心上海201203

目的优化羟丙基-γ-环糊精(HP-γ-CD)包合黄芩素的工艺条件。方法采用冷冻干燥法,以包合物的得率、包封率和载药率为考察指标,通过L9(3)4正交设计优选黄芩素(Ba)与HP-γ-CD摩尔比、包合温度、包合时间、包合溶剂比(水∶无水乙醇),综合... 详细信息

目的优化羟丙基-γ-环糊精(HP-γ-CD)包合黄芩素的工艺条件。方法采用冷冻干燥法,以包合物的得率、包封率和载药率为考察指标,通过L9(3)4正交设计优选黄芩素(Ba)与HP-γ-CD摩尔比、包合温度、包合时间、包合溶剂比(水∶无水乙醇),综合评价确定最佳制备工艺;采用X射线衍射分析和差示扫描量热分析验证包合物。结果最优包合条件:Ba与HP-γ-CD摩尔比为1∶3,温度45℃,包合时间4 h,包合溶剂比(水∶无水乙醇)2∶3;采用最优包合条件制备的Ba-HP-γ-CD包合物得率为93.97%,包封率为95.96%,载药率为5.20%,其粉末经鉴定已形成包合物;Ba-HP-γ-CD包合物能够显著提高Ba的溶解度。结论优选的包合工艺合理可行,为黄芩素制备成各种剂型奠定了良好基础。

关键词：黄芩素羟丙基-γ-环糊精包合物工艺条件

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RP-HPLC法测定刺山苷不同药用部位中芦丁和山萘酚芸香苷含量

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上海中医药杂志 2010年第9期44卷 68-71页

作者：刘红娟杨涛程雪梅王长虹王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室上海市复方中药重点实验室上海中药标准化研究中心上海201210

目的建立刺山柑不同药用部位中芦丁和山萘酚芸香苷的RP-HPLC含量测定法。方法采用Agilent ZORBAX SBC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%三氟乙酸(37:63)为流动相,流速为1.0 ml·min^(-1),紫外检测波长为265 nm,柱温为3... 详细信息

目的建立刺山柑不同药用部位中芦丁和山萘酚芸香苷的RP-HPLC含量测定法。方法采用Agilent ZORBAX SBC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%三氟乙酸(37:63)为流动相,流速为1.0 ml·min^(-1),紫外检测波长为265 nm,柱温为30℃,进样量20μl。结果芦丁在12.0-599.5μg·ml^(-1)之间与峰面积呈良好的线性关系(τ~2=0.9996);山萘酚芸香苷在4.8-237.5μg·ml^(-1)之间与峰面积呈良好的线性关系(r^2=0.9998);芦丁和山萘酚芸香苷的平均回收率分别为99.15%(RSD=1.3%)和99.58%(RSD=2.1%)。结论本方法简单、重复性好、专属性强,可为评价刺山柑药材的质量提供科学依据。

关键词：刺山柑芦丁山萘酚芸香苷反相高效液相色谱法

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蜈蚣藻多糖的体外抗血管生成作用

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中国海洋药物 2010年第1期29卷 13-16页

作者：喻乾明施松善季莉莉沈凯凯秦坤王顺春上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海市复方中药重点实验室上海201210 上海中药标准化研究中心上海201210

目的探讨蜈蚣藻多糖(GFP)的体外抗血管生成作用。方法应用MTT比色法测定GFP对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)存活率的影响;用Millicell小室测定GFP对HUVEC迁移能力的影响;用Matrigel测定GFP对HUVEC管腔形成的影响。结果GFP在5、10、20、50、10... 详细信息

目的探讨蜈蚣藻多糖(GFP)的体外抗血管生成作用。方法应用MTT比色法测定GFP对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)存活率的影响;用Millicell小室测定GFP对HUVEC迁移能力的影响;用Matrigel测定GFP对HUVEC管腔形成的影响。结果GFP在5、10、20、50、100mg.L-1浓度下处理HUVEC48h,细胞存活率没有显著性变化;在50、100mg.L-1时能显著性地抑制HUVEC的迁移并呈剂量依赖关系;在100mg.L-1时能显著性地抑制HUVEC的管腔形成。结论GFP能够抑制HUVEC的迁移和管腔的形成。

关键词：蜈蚣藻人脐静脉内皮细胞血管生成

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微生物莽草酸代谢途径的研究进展

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江苏农业科学 2019年第7期47卷 19-23页

作者：陈园赵淑娟上海中医药大学中药研究所/中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室/中药标准化教育部重点实验室/上海市复方中药重点实验室上海201203

莽草酸是莽草酸代谢途径的中间产物,是合成手型药物的关键原料,也是合成芳香族类氨基酸(L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、L-色氨酸)、泛醌、叶酸、维生素K_2等芳香族化合物的关键中间体。通过基因改造微生物莽草酸代谢途径,可以使其大量积累莽草... 详细信息

莽草酸是莽草酸代谢途径的中间产物,是合成手型药物的关键原料,也是合成芳香族类氨基酸(L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、L-色氨酸)、泛醌、叶酸、维生素K_2等芳香族化合物的关键中间体。通过基因改造微生物莽草酸代谢途径,可以使其大量积累莽草酸,进而为生物体内合成芳香族氨基酸奠定基础。本文综述了莽草酸代谢途径在重组大肠杆菌中的生物合成途径的研究进展,分析了莽草酸合成过程中关键酶基因改造对莽草酸积累的影响、辅因子再生对目的产物的影响,还讨论了减少莽草酸工程菌代谢副产物产生量的措施。随着代谢工程技术和合成生物学技术的发展,通过基因技术定向改造代谢途径,构建理想的高产菌株已经成为研究的新热点。

关键词：莽草酸代谢途径基因改造关键酶基因辅因子

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黄草类石斛的薄层色谱鉴别研究

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中国药品标准 2010年第2期11卷 99-103页

作者：徐蓓杨莉陈崇崇王峥涛徐珞珊中国药科大学生药学研究室南京210038 上海中医药大学中药研究所教育部中药标准化重点实验室上海201203 上海中医药大学中药研究所上海市复方中药重点实验室上海201203

目的:建立黄草类石斛的薄层色谱(TLC)定性鉴别方法。方法:采用薄层色谱法,考察不同基源石斛及商品药材中专属性成分联苄类化合物毛兰素(erianin)、石斛酚(gigantol)、杓唇石斛素(moscatilin)和3,4',5-三羟基-3'-甲氧基联苄(tris... 详细信息

目的:建立黄草类石斛的薄层色谱(TLC)定性鉴别方法。方法:采用薄层色谱法,考察不同基源石斛及商品药材中专属性成分联苄类化合物毛兰素(erianin)、石斛酚(gigantol)、杓唇石斛素(moscatilin)和3,4',5-三羟基-3'-甲氧基联苄(tristin)的薄层色谱行为,对石斛药材进行定性鉴别。结果:通过21种不同基源的石斛及11批商品石斛的薄层色谱鉴别,证明此方法专属性强,操作简单,重复性好,为石斛的鉴别提供了一种准确、有效的新方法。结论:本方法可用于黄草类石斛的鉴别,为中药石斛的质量标准研究提供科学依据。

关键词：石斛联苄类化合物薄层色谱法鉴别质量控制

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丹参SmERF081转录因子基因克隆与靶基因鉴定

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上海中医药大学学报 2024年第3期38卷 7-14页

作者：肖亦菽陈敏谈荣慧郑小宇赵淑娟上海中医药大学中药研究所国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室教育部中药标准化重点研究室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学中药学院上海201203

目的:克隆丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)转录因子SmERF081,分析SmERF081的靶基因。方法:以丹参转录组数据Unigene(c48961-g1)序列为参考,利用PCR扩增获得SmERF081基因序列;通过生物信息学预测SmERF081编码蛋白的理化性质、蛋白质结构... 详细信息

目的:克隆丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)转录因子SmERF081,分析SmERF081的靶基因。方法:以丹参转录组数据Unigene(c48961-g1)序列为参考,利用PCR扩增获得SmERF081基因序列;通过生物信息学预测SmERF081编码蛋白的理化性质、蛋白质结构等分子特征;使用MEGA 7软件构建系统进化树;对SmERF081进行异源表达和蛋白纯化;通过酵母单杂、双荧光素酶报告系统和化学发光法凝胶迁移实验(EMSA)鉴定SmERF081与SmCPS5启动子是否结合。结果:克隆得到SmERF081基因,cDNA全长453 bp(Genbank登陆号:OQ466089),编码151个氨基酸,相对分子质量16.46 kDa,等电点9.75。该蛋白不含信号肽,无跨膜区,其高级结构主要由无规则卷曲构成。进化树分析表明SmERF081与拟南芥At1G28360.1、丹参SmERF8同源关系最近。原核表达结果显示,经IPTG诱导后SmERF081在大肠杆菌中成功异源表达,并通过纯化获得目的蛋白。酵母单杂、双荧光素酶报告基因检测和EMSA确认SmERF081可与丹参SmCPS5启动子结合。结论:鉴定到丹参中一个新转录因子SmERF081,生物信息学分析及分子互作初步证实其靶基因为丹参SmCPS5二萜环化酶。

关键词：丹参 SmERF081 生物信息学靶基因

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