检索结果-内蒙古大学图书馆

世界科学技术-中医药现代化 2017年第2期19卷 359-364页

作者：吴立宏王峥涛上海中医药大学中药研究所/中药标准化教育部重点实验室/中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

运用本草学和分类学方法对古今涉及白花龙胆(■,榜间嘎保)的文献进行系统梳理分析,表明敦煌吐蕃医药文献中的榜间(■)即是其后《月王药诊》、《四部医典》等典籍中的白花龙胆,主治音哑、咳嗽等肺部疾病;大花龙胆Gentiana szechenyii Kan... 详细信息

运用本草学和分类学方法对古今涉及白花龙胆(■,榜间嘎保)的文献进行系统梳理分析,表明敦煌吐蕃医药文献中的榜间(■)即是其后《月王药诊》、《四部医典》等典籍中的白花龙胆,主治音哑、咳嗽等肺部疾病;大花龙胆Gentiana szechenyii Kanitz和高山龙胆Gentiana algida Pall.是白花龙胆的两个基原,从古至今前者则是其主流品种。对涉及藏药的标准和专著中出现的认识混乱现象进行了分析和规范,结合田野和市场调查,使白花龙胆名实相符,为该藏药制剂的现代化研究和用药安全提供了基原和文献依据。

关键词：名实白花龙胆榜间嘎保藏药

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斜率校正一测多评法同时测定茯苓中3种三萜酸成分的含量

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上海中医药杂志 2023年第7期57卷 66-71页

作者：赵鑫谷丽华杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中医药大学交叉科学研究院上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的建立新的一测多评法同时测定茯苓中3-O-乙酰基-16α-羟基-氢化松苓酸、去氢茯苓酸和茯苓酸的含量。方法以Agilent ZORBAX SB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5µm)为色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相等度洗脱;流速:0.8 mL/min... 详细信息

目的建立新的一测多评法同时测定茯苓中3-O-乙酰基-16α-羟基-氢化松苓酸、去氢茯苓酸和茯苓酸的含量。方法以Agilent ZORBAX SB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5µm)为色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相等度洗脱;流速:0.8 mL/min;进样量:10µL;柱温:30℃;检测波长为210 nm。以茯苓酸为内参计算其他两个成分的校正因子。结果以茯苓酸为内参,3-O-乙酰基-16α-羟基-氢化松苓酸和去氢茯苓酸的校正因子分别为0.71和1.43;一测多评法测定结果与外标法测定结果无明显差异[相对误差(RE)<5%]。结论建立的一测多评方法简便准确,可用于茯苓药材中多指标成分的含量测定,为茯苓药材质量评价提供参考。

关键词：一测多评法茯苓茯苓酸含量测定中药研究

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中华大蟾蜍细胞色素P450还原酶基因克隆、表达与功能鉴定

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上海中医药大学学报 2024年第1期38卷 27-33页

作者：肖传光胡耀廷杨莉赵淑娟王峥涛上海中医药大学中药研究所中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203

目的:从中华大蟾蜍(Bufo gargarizans Cantor)肝脏组织中克隆细胞色素P450还原酶基因(BgCPR,GenBank登录号:OQ572435)进行生物信息学分析,并进行功能验证。方法:基于中华大蟾蜍转录组数据库挖掘BgCPR基因序列,使用SnapGene软件设计BgCP... 详细信息

目的:从中华大蟾蜍(Bufo gargarizans Cantor)肝脏组织中克隆细胞色素P450还原酶基因(BgCPR,GenBank登录号:OQ572435)进行生物信息学分析,并进行功能验证。方法:基于中华大蟾蜍转录组数据库挖掘BgCPR基因序列,使用SnapGene软件设计BgCPR基因两端特异性引物,以蟾蜍肝脏组织总RNA逆转录成的cDNA为模板进行PCR扩增。利用生物信息学分析BgCPR蛋白理化性质、空间结构并构建系统进化树;基于CRISPR/Cas9基因编辑系统将蟾蜍BgCPR基因表达框经同源重组整合进入酿酒酵母基因组,利用聚乙二醇法制备转化子微粒体,验证其对细胞色素C的还原功能。结果:克隆得到全长2043 bp的BgCPR基因cDNA,编码680个氨基酸,相对分子质量77852 Da。结构预测显示,BgCPR蛋白为非分泌蛋白;有一段跨膜螺旋区,位于蛋白的第24~46位氨基酸之间;亚细胞定位预测显示该蛋白定位于内质网上。采用体外酶活实验证明其具有传递电子功能。结论:本研究克隆得到中华大蟾蜍BgCPR基因,并构建了表达具有生物活性的BgCPR的酿酒酵母工程细胞,为进一步研究蟾蜍CYP450基因功能乃至解析蟾蜍二烯内酯类化合物的生物合成途径奠定了基础。

关键词：中华大蟾蜍细胞色素P450还原酶细胞色素P450 蟾蜍二烯内酯

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芍药甘草汤化学成分、药动学及药效学研究进展

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上海中医药大学学报 2022年第4期36卷 98-105页

作者：鲍斌赵咏麟王辉俊施松善王顺春上海中医药大学中药研究所上海201203 中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 中药标准化教育部重点实验室上海201203

芍药甘草汤(SGD)属于中医经典方剂,源自汉朝张仲景《伤寒论》,由白芍和炙甘草2味中药组成。该方富含多种化学成分,包括萜类、皂苷类、黄酮类及多糖类等,以芍药总苷、甘草酸及甘草苷等为主要活性成分,临床上除广泛用于解痉镇痛外,还用于... 详细信息

芍药甘草汤(SGD)属于中医经典方剂,源自汉朝张仲景《伤寒论》,由白芍和炙甘草2味中药组成。该方富含多种化学成分,包括萜类、皂苷类、黄酮类及多糖类等,以芍药总苷、甘草酸及甘草苷等为主要活性成分,临床上除广泛用于解痉镇痛外,还用于神经系统疾病、内分泌系统疾病等的治疗。现代药理研究发现,SGD在中枢系统方面具有镇痛、神经保护和解痉等作用,在消化系统方面可调节胃肠道蠕动,同时具有保肝、止咳平喘和治疗高催乳素血症等作用。通过分析SGD药动学相关研究,可为SGD的药效物质基础和药效学研究之间建立新的联系,为阐明量效关系和复方配伍规律提供思路,并为该方的临床合理应用及二次开发提供参考。

关键词：芍药甘草汤解痉镇痛化学成分药动学药效学

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中药黄芪皂苷类成分生物合成研究进展

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上海中医药大学学报 2021年第5期35卷 80-88,96页

作者：肖亦菽王如锋赵淑娟上海中医药大学中药研究所中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203

作为常用中药,黄芪具有补气升阳、固表利水、托毒排脓等功效。黄芪皂苷类化合物是其主要活性成分,具有抗炎、抗肿瘤、免疫调节、代谢调节、器官保护等药理作用。从黄芪皂苷的化学结构与药理活性、生物合成途径与代谢调控、生物转化与合... 详细信息

作为常用中药,黄芪具有补气升阳、固表利水、托毒排脓等功效。黄芪皂苷类化合物是其主要活性成分,具有抗炎、抗肿瘤、免疫调节、代谢调节、器官保护等药理作用。从黄芪皂苷的化学结构与药理活性、生物合成途径与代谢调控、生物转化与合成生物学等方面进行综述,并对其生物合成前景进行展望,以期为应用生物技术实现黄芪皂苷的规模化生产提供参考。

关键词：黄芪皂苷生物合成生物转化综述

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基于全细胞催化的蟾蜍二烯内酯前体化合物生物合成研究

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上海中医药大学学报 2022年第5期36卷 39-45页

作者：胡耀廷肖传光陈文杰王如锋杨莉赵淑娟上海中医药大学中药研究所国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室教育部中药标准化重点研究室上海市中药复方重点实验室上海201203

目的:将胆固醇生物转化成7α-羟基-4-胆甾烯-3-酮。方法:PCR扩增中华大蟾蜍来源的3β羟基类固醇脱氢酶基因(Bg-HSD3B7)、细胞色素P450还原酶基因(Bg-CPR)、大鼠来源的细胞色素P450酶基因(Rn-CYP7A1),生物信息学网站ExPASy、TMHMM预测理... 详细信息

目的:将胆固醇生物转化成7α-羟基-4-胆甾烯-3-酮。方法:PCR扩增中华大蟾蜍来源的3β羟基类固醇脱氢酶基因(Bg-HSD3B7)、细胞色素P450还原酶基因(Bg-CPR)、大鼠来源的细胞色素P450酶基因(Rn-CYP7A1),生物信息学网站ExPASy、TMHMM预测理化性质,采用不同的构建组合方式构建工程菌;以胆固醇为底物进行全细胞催化,高效液相色谱检测是否产生7-α羟基胆固醇中间产物和7α-羟基-4-胆甾烯-3-酮终产物。结果:克隆并以单顺反子方式构建到pETM6载体,获得带有3个基因Rn-CYP7A1、Bg-CPR、Bg-HSD3B7的大肠杆菌工程菌BL21(DE3),该工程菌可以全细胞催化方式将胆固醇转化生成7α-羟基-4-胆甾烯-3-酮,且没有中间产物。结论:克隆得到中华大蟾蜍来源的Bg-HSD3B7基因、Bg-CPR基因、大鼠来源的Rn-CYP7A1基因,构建了具有全细胞催化功能的工程大肠杆菌,可以催化胆固醇转化生成7α-羟基-4-胆甾烯-3-酮。

关键词：中华大蟾蜍胆固醇工程菌 3β羟基类固醇脱氢酶细胞色素P450还原酶

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三七中黄酮糖基转移酶的筛选与鉴定

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上海中医药大学学报 2021年第6期35卷 73-81页

作者：聂锋侯茂奇赵嘉宁王如锋赵淑娟上海中医药大学中药研究所中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室中药标准化教育部重点研究室上海市中药复方重点实验室上海201203

目的:将前期克隆得到21条三七来源的糖基转移酶基因,构建到pCold表达载体,以实现重组蛋白的可溶性表达,并筛选、鉴定其在体外对黄酮类化合物的催化功能。方法:对21条糖基转移酶基因进行系统进化树分析;利用同源重组的方法将其克隆到pCol... 详细信息

目的:将前期克隆得到21条三七来源的糖基转移酶基因,构建到pCold表达载体,以实现重组蛋白的可溶性表达,并筛选、鉴定其在体外对黄酮类化合物的催化功能。方法:对21条糖基转移酶基因进行系统进化树分析;利用同源重组的方法将其克隆到pCold表达载体上,并在大肠杆菌中表达重组蛋白。低温诱导重组蛋白表达,以黄酮类化合物为糖基受体底物,UDP-葡萄糖为糖基供体,采用高效液相色谱法(HPLC)检测酶促反应产物。结果:分别以山柰酚和芹菜素为底物,重组蛋白PnUGT82参与反应后,可检测到山柰酚7-O葡萄糖苷和芹菜素7-O葡萄糖苷,而阴性对照组未检测到对应的糖苷产物。结论:筛选得到1条三七来源的糖基转移酶PnUGT82,能够催化黄酮类化合物,在体外将UDP-葡萄糖上的葡萄糖基团转移到山柰酚或芹菜素7位羟基,形成相应的黄酮7-O糖苷化产物。

关键词：三七黄酮糖基转移酶重组蛋白催化功能

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基于ABTS自由基的薄层色谱-生物自显影新方法的建立及其在中药抗氧化活性评价中的应用

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上海中医药大学学报 2013年第3期27卷 99-104页

作者：谷丽华侴桂新王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海201210 上海中药标准化研究中心上海201210 中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海201210

目的:建立一种基于2,2-氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除能力活性筛选的薄层色谱-生物自显影新方法。方法:将含有14 mmol/L ABTS和4.9 mmol/L过硫酸钾混合水溶液10 ml,置于暗处12～16 h制备ABTS+.,用75%乙醇将A... 详细信息

目的:建立一种基于2,2-氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除能力活性筛选的薄层色谱-生物自显影新方法。方法:将含有14 mmol/L ABTS和4.9 mmol/L过硫酸钾混合水溶液10 ml,置于暗处12～16 h制备ABTS+.,用75%乙醇将ABTS+.溶液稀释至100 ml,作为显色剂。将点有样品(或展开)的薄层板喷显色剂,在可见光下检视或在734 nm下扫描。对显色剂、衍生化方法、薄层板、检测波长等参数进行优化使薄层板获得明显的蓝色背景色。结果:具有清除ABTS自由基活性的化合物在薄层板的蓝色背景下呈现白色斑点。采用建立的TLC-生物自显影法结合扫描仪测定6-羟基-2,5,7,8-四甲基苯并二氢吡喃-2-羧酸(Trolox),叔丁基羟基茴香醚(BHA),2,6-二叔丁基对甲酚(BHT),特丁基对苯二酚(TBHQ)和没食子酸丙酯(PG)等抗氧化剂的ABTS自由基清除能力,结果抗氧化能力顺序为:PG>BHA>TBHQ>麦角甾苷>BHT>Trolox>野黄芩苷,与分光光度法测定结果一致;并采用TLC-生物自显影法对不同来源的中药肉苁蓉和灯盏花样品及其所含清除ABTS自由基活性成分进行了分析和评价,发现肉苁蓉和灯盏花中很多成分具有清除ABTS自由基作用,购自上海的肉苁蓉和购自云南文山的灯盏花的抗氧化活性强于其他来源样品。结论:该方法能够测定和评价单体化合物和复杂组分(如中药提取物)中化合物的ABTS自由基清除能力。

关键词：薄层色谱生物自显影 ABTS 抗氧化中药

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诱导子对丹参毛状根丹酚酸类化合物积累的影响

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上海中医药大学学报 2017年第5期31卷 91-94页

作者：张金家谈荣慧上海中医药大学中药研究所上海201203 中药标准化教育部重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海201203

目的:探讨不同诱导子干预培育对丹参毛状根中丹酚酸类化合物生物合成的影响。方法:在继代培养的丹参毛状根中分别添加酵母提取物(YE)、茉莉酸甲酯(MJ)、水杨酸(SA)和银离子(Ag+)不同诱导子及其组合,用高效液相色谱法(HPLC)测定各类丹参... 详细信息

目的:探讨不同诱导子干预培育对丹参毛状根中丹酚酸类化合物生物合成的影响。方法:在继代培养的丹参毛状根中分别添加酵母提取物(YE)、茉莉酸甲酯(MJ)、水杨酸(SA)和银离子(Ag+)不同诱导子及其组合,用高效液相色谱法(HPLC)测定各类丹参毛状根中丹酚酸含量。结果:在实验浓度条件下,4种诱导子对丹参毛状根的生长均无显著影响;MJ和SA能提高丹酚酸的含量,YE会降低丹酚酸含量,Ag+无显著影响,YE+MJ+Ag+对毛状根中丹酚酸类成分积累有明显的抑制作用。结论:在丹参毛状根中可以添加适当浓度的MJ和SA诱导子会提高丹酚酸类化合物含量,且不会影响毛状根生长。

关键词：丹参毛状根诱导子丹酚酸高效液相色谱法

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反相高效液相色谱法测定不同产地龙胆中的龙胆苦苷和2’-(2,3-二羟基苯甲酰)-獐牙菜苷含量

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上海中医药大学学报 2011年第1期25卷 72-75页

作者：俞丽吴立宏侴桂新王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的:运用反相高效液相色谱法同时测定不同产地龙胆中龙胆苦苷(GPS)和2’-(2,3-二羟基苯甲酰)-獐牙菜苷(DHBS)的含量。方法:色谱柱为Ultimate XB-C18(150 mm×4.6 mm,5μm);甲醇-乙腈-水为流动相,梯度洗脱,检测波长为270 nm和215 nm... 详细信息

目的:运用反相高效液相色谱法同时测定不同产地龙胆中龙胆苦苷(GPS)和2’-(2,3-二羟基苯甲酰)-獐牙菜苷(DHBS)的含量。方法:色谱柱为Ultimate XB-C18(150 mm×4.6 mm,5μm);甲醇-乙腈-水为流动相,梯度洗脱,检测波长为270 nm和215 nm,柱温为25℃,流速为1.0 ml/min。结果:龙胆苦苷和2’-(2,3-二羟基苯甲酰)-獐牙菜苷的线性范围分别为0.0201 5～5.038μg(r=1)和0.00512～0.409 6μg(r=0.999 8),平均加样回收率分别为100.4%(RSD 2.72%)和102.2%(RSD 1.99%)。结论:本法准确、简便、重现性好。龙胆的种间(四基源药材)的龙胆苦苷和2’-(2,3-二羟基苯甲酰)-獐牙菜苷的含量有较大差异。

关键词：高效液相色谱法龙胆龙胆苦苷 2’-(2,3-二羟基苯甲酰)-獐牙菜苷

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