检索结果-内蒙古大学图书馆

中草药 2021年第17期52卷 5218-5225页

作者：周宇娟王俊豪薛亚甫徐红侴桂新王峥涛上海中医药大学中药研究所教育部中药标准化重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海中药标准化研究中心上海201203

目的进一步研究铁皮石斛Dendrobium officinale活性醋酸乙酯部位的化学成分。方法运用大孔树脂、MCI、硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)、ODS等柱色谱、制备薄层色谱及制备高效液相色谱法等分离技术,进行化合物的分离纯化,根据^(1)H-NMR、^(1... 详细信息

目的进一步研究铁皮石斛Dendrobium officinale活性醋酸乙酯部位的化学成分。方法运用大孔树脂、MCI、硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)、ODS等柱色谱、制备薄层色谱及制备高效液相色谱法等分离技术,进行化合物的分离纯化,根据^(1)H-NMR、^(13)C-NMR、MS等波谱数据和理化性质鉴定化合物的结构。结果从铁皮石斛乙醇提取物的醋酸乙酯部位分离得到了34个化合物,分别鉴定为moscatin(1)、黑麦草内酯(2)、柚皮素(3)、橙皮苷(4)、甘草素(5)、2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-(2-hydroxy-5-methoxyphenyl)-3-oxo-l-propanol(6)、异甘草素(7)、(E)-4-hydroxycinnamic acid(8)、(Z)-4-hydroxycinnamic acid(9)、coniferyl p-coumarate(10)、sinapyl p-coumarate(11)、tinosporaic acid A(12)、N-trans-coumaroyltyramine(13)、N-trans-feruloyltyramine(14)、丁香脂素(15)、pinoresinol(16)、梣皮树脂醇(17)、lirioresionol(18)、2(5H)-Furanone 5-hydroxy-3,4-dimethyl-5-pentyl(19)、丁香酸(20)、十六烷酸(21)、对羟基苯甲酸(22)、对羟基苯甲醛(23)、阿魏酸(24)、二氢松柏醇(25)、十七烷(26)、4-羟基-3,5-二甲氧基反式肉桂醛(27)、dihydro-p-cinnamic acid(28)、(+)-(4S)-(2E)-4-羟基-2-壬烯酸(29)、1,3-benzenediol(30)、对羟基苯酚(31)、水杨酸(32)、对羟基苯乙酮(33)和香草醛(34)。结论化合物2首次从石斛属植物中分离得到,化合物3~7均为首次从铁皮石斛中分离得到。

关键词：铁皮石斛 loliolide 柚皮素 hesperetin 甘草素 2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-(2-hydroxy-5-methoxyphenyl)-3-oxo-l-propanol 异甘草素

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丹参SmERF081转录因子基因克隆与靶基因鉴定

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上海中医药大学学报 2024年第3期38卷 7-14页

作者：肖亦菽陈敏谈荣慧郑小宇赵淑娟上海中医药大学中药研究所国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室教育部中药标准化重点研究室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学中药学院上海201203

目的:克隆丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)转录因子SmERF081,分析SmERF081的靶基因。方法:以丹参转录组数据Unigene(c48961-g1)序列为参考,利用PCR扩增获得SmERF081基因序列;通过生物信息学预测SmERF081编码蛋白的理化性质、蛋白质结构... 详细信息

目的:克隆丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)转录因子SmERF081,分析SmERF081的靶基因。方法:以丹参转录组数据Unigene(c48961-g1)序列为参考,利用PCR扩增获得SmERF081基因序列;通过生物信息学预测SmERF081编码蛋白的理化性质、蛋白质结构等分子特征;使用MEGA 7软件构建系统进化树;对SmERF081进行异源表达和蛋白纯化;通过酵母单杂、双荧光素酶报告系统和化学发光法凝胶迁移实验(EMSA)鉴定SmERF081与SmCPS5启动子是否结合。结果:克隆得到SmERF081基因,cDNA全长453 bp(Genbank登陆号:OQ466089),编码151个氨基酸,相对分子质量16.46 kDa,等电点9.75。该蛋白不含信号肽,无跨膜区,其高级结构主要由无规则卷曲构成。进化树分析表明SmERF081与拟南芥At1G28360.1、丹参SmERF8同源关系最近。原核表达结果显示,经IPTG诱导后SmERF081在大肠杆菌中成功异源表达,并通过纯化获得目的蛋白。酵母单杂、双荧光素酶报告基因检测和EMSA确认SmERF081可与丹参SmCPS5启动子结合。结论:鉴定到丹参中一个新转录因子SmERF081,生物信息学分析及分子互作初步证实其靶基因为丹参SmCPS5二萜环化酶。

关键词：丹参 SmERF081 生物信息学靶基因

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天然低共熔溶剂在中药降香薄层色谱鉴别中的应用

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时珍国医国药 2022年第12期33卷 2951-2953页

作者：荆晓烨呼忭吴立宏上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的基于环保理念,对比天然低共熔溶剂(natural deep eutectic solvents,NADES)与传统溶剂的提取效率,为低共熔试剂应用于降香薄层色谱鉴别和质量评价提供依据。方法合成并利用NADES作为提取溶剂,采用超声水浴法提取降香药材;同时避免... 详细信息

目的基于环保理念,对比天然低共熔溶剂(natural deep eutectic solvents,NADES)与传统溶剂的提取效率,为低共熔试剂应用于降香薄层色谱鉴别和质量评价提供依据。方法合成并利用NADES作为提取溶剂,采用超声水浴法提取降香药材;同时避免使用现版中国药典降香薄层色谱鉴别中的有害试剂,优化展开系统。结果比较了六种NADES(1-6),NADES 5(乳酸∶葡萄糖∶水=6∶1∶6),具有较好的提取率,并以优化的环己烷-乙酸乙酯-乙酸(3∶1∶0.02)为展开系统试验,薄层色谱斑点丰富,分离度良好。结论NADES具有绿色环保、原料易得和价格低廉等优点,可以应用到中药降香的薄层色谱鉴别,也为其他中药化学成分的环保提取提供了新思路。

关键词：天然低共熔溶剂降香薄层色谱鉴别

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基于HPLC指纹图谱和含量测定的皂角刺配方颗粒质量控制研究

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上海中医药大学学报 2023年第2期37卷 54-60,95页

作者：吴思佳王可可徐双双徐红王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海中药标准化研究中心上海201203

目的:建立皂角刺配方颗粒的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱及含量测定方法,为皂角刺配方颗粒的质量控制和评价提供参考依据。方法:采用资生堂MG C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL... 详细信息

目的:建立皂角刺配方颗粒的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱及含量测定方法,为皂角刺配方颗粒的质量控制和评价提供参考依据。方法:采用资生堂MG C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min、检测波长260 nm、柱温35℃,建立皂角刺配方颗粒的HPLC指纹图谱及指标性成分原儿茶酸的含量测定方法。结果:皂角刺配方颗粒的HPLC指纹图谱均呈现了5个共有特征峰,并指认其中的2、4、5号峰分别为原儿茶酸、对羟基苯甲酸和香草酸。同一厂家的10批次皂角刺配方颗粒的相似度介于0.814~1.000之间,原儿茶酸含量为2.28~2.60 mg/g,批次间差异较小;不同厂家间配方颗粒差异较大,相似度介于0.580~0.956之间,原儿茶酸含量为0.26~2.60 mg/g,含量差异较大。结论:所建立的指纹图谱和含量测定方法简便、可行、重复性好,可用于皂角刺配方颗粒的质量评价和控制。

关键词：皂角刺配方颗粒 HPLC指纹图谱含量测定原儿茶酸

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基于TLC和TLC-EFISI-MSn联用技术的霍山石斛专属性鉴别研究

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上海中医药大学学报 2023年第5期37卷 39-46,54页

作者：卢文旭林李雁丁玉莲王俊豪徐红上海中医药大学中药研究所教育部中药标准化重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海中药标准化研究中心上海201203

目的:建立霍山石斛薄层色谱(TLC)定性鉴别的质量控制方法,并对霍山石斛专属性成分进行快速结构鉴定。方法:采用TLC法,以水饱和正丁醇为展开剂,低温4℃展开,以2%三氯化铝乙醇试液为显色剂,105℃加热5 min,于紫外光灯(365 nm)下观察霍山... 详细信息

目的:建立霍山石斛薄层色谱(TLC)定性鉴别的质量控制方法,并对霍山石斛专属性成分进行快速结构鉴定。方法:采用TLC法,以水饱和正丁醇为展开剂,低温4℃展开,以2%三氯化铝乙醇试液为显色剂,105℃加热5 min,于紫外光灯(365 nm)下观察霍山石斛的专属性斑点并进行真伪鉴别;利用原位薄层色谱-静电场诱导喷雾-质谱(TLC-EFISI-MS^(n))联用技术进一步对专属性斑点进行快速结构解析。结果:建立了霍山石斛专属性的TLC鉴别方法,发现霍山石斛有一专属性斑点,通过该斑点可实现霍山石斛与铁皮石斛、紫皮石斛等13种石斛属植物的区分,且能够将霍山石斛粉中掺混20%以上的铁皮石斛粉鉴别出来;根据化合物的相对分子量、多级质谱裂解碎片,初步鉴定该斑点为黄酮类化合物芹菜素-6-C-α-L-鼠李糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷-8-C-α-L-阿拉伯糖,为霍山石斛的专属性成分。结论:所建立的TLC鉴别方法简单灵敏、准确可靠、重现性好且专属性强,为提高霍山石斛的质量控制方法提供了实验依据,对于保证其质量和临床疗效具有重要意义。

关键词：霍山石斛薄层色谱薄层色谱-静电场诱导喷雾离子化质谱黄酮苷芹菜素-6-C-α-L-鼠李糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷-8-C-α-L-阿拉伯糖

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高良姜素抑制胃癌MGC803细胞NF-κB通路促进自噬

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中国中药杂志 2021年第16期46卷 4167-4174页

作者：梁晓晖余明珠石海莲吴晓俊上海中医药大学中药研究所上海市复方中药重点实验室教育部中药标准化重点实验室国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室上海201203

探究高良姜素对胃癌细胞MGC803能量代谢和自噬的影响及其可能的分子机制。细胞增殖-毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测不同浓度高良姜素干预MGC803细胞48 h对细胞活力的影响;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测高良姜素对MG... 详细信息

探究高良姜素对胃癌细胞MGC803能量代谢和自噬的影响及其可能的分子机制。细胞增殖-毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测不同浓度高良姜素干预MGC803细胞48 h对细胞活力的影响;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测高良姜素对MGC803细胞自噬、核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路、能量代谢相关蛋白的表达;实时荧光定量核酸扩增检测(Real-time quantitative PCR,qPCR)法检测高良姜素对MGC803细胞能量代谢相关蛋白mRNA表达的影响;自噬小体检测试剂盒检测高良姜素对MGC803细胞自噬体的作用;透射电子显微镜观察高良姜素对MGC803细胞自噬体和溶酶体的影响。裸鼠皮下注射MGC803细胞制备胃癌移植瘤模型,随机分组后,模型组灌胃给予0.5%羧甲基纤维素钠,高良姜素组每天灌胃给予高良姜素(120 mg·kg^(-1)),阳性对照组腹腔注射5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)(50 mg·kg^(-1),1周2次),每3 d相同时间同一人用游标卡尺精确测量肿瘤大小及裸鼠体质量,给药21 d后处死动物,剥离肿瘤并称重,计算抑瘤率。结果显示,与对照组相比,高良姜素能够抑制MGC803细胞的活力;高良姜素可上调MGC803细胞Ⅱ型微管相关蛋白1轻链3B(microtuble-associated protein 1 light chain 3B,LC3B)的蛋白表达,同时可抑制NF-κB通路相关蛋白的磷酸化水平;高良姜素促进MGC803细胞中自噬小体的形成;高良姜素对MGC803细胞能量代谢相关蛋白的表达水平无明显影响;120 mg·kg^(-1)高良姜素显著抑制荷瘤裸鼠胃癌肿瘤质量和体积的增长,并能够显著上调LC3BⅡ蛋白表达,同时可抑制NF-κB通路相关蛋白的磷酸化水平。结果表明,高良姜素体内外均能够抑制胃癌细胞MGC803的生长,其作用机制可能与其抑制NF-κB通路、促进自噬有关。

关键词：高良姜素胃癌自噬 NF-κB LC3B

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蟾蜍二烯酸内酯类成分的生物转化和生物合成研究进展

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中草药 2021年第15期52卷 4741-4751页

作者：陈文杰胡耀廷王如锋赵淑娟王峥涛上海中医药大学中药研究所上海201203 中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 中药标准化教育部重点实验室上海201203 上海市中药复方重点实验室上海201203

蟾蜍二烯酸内酯类化合物是名贵中药蟾酥的主要活性成分,具有显著的抗肿瘤、强心、镇痛和抗炎等药理活性。目前,蟾蜍二烯酸内酯成分的主要来源方法是从蟾蜍类药材中直接提取,但此方法成本高、收益低,且药用资源十分短缺,相关新药开发与... 详细信息

蟾蜍二烯酸内酯类化合物是名贵中药蟾酥的主要活性成分,具有显著的抗肿瘤、强心、镇痛和抗炎等药理活性。目前,蟾蜍二烯酸内酯成分的主要来源方法是从蟾蜍类药材中直接提取,但此方法成本高、收益低,且药用资源十分短缺,相关新药开发与应用研究严重受阻。近年来,中药活性成分的生物合成在中药资源保护方面发挥起越来越重要的作用。基于合成生物学原理,设计和改造微生物菌株发酵生产天然产物的方法已被广泛使用。该方法的应用需要建立在目标产物生物合成途径完全解析的基础之上。基于此,总结近年来蟾蜍二烯酸内酯的生物转化以及生物合成途径解析方面的研究进展,并进一步推测蟾蜍二烯酸内酯类的生物合成途径,并进一步展望与其相关的生物合成发展方向。

关键词：蟾酥蟾蜍二烯酸内酯类生物转化生物合成微生物转化

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中药品质调控与资源可持续利用的思考与方法探讨

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上海中医药大学学报 2024年第1期38卷 8-17页

作者：肖莹邱实陈瑞兵管芹陈万生上海中医药大学中药研究所中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 海军军医大学药学院上海200433

高品质中药资源是中医药全产业链健康发展的物质载体和战略基石。当前,大宗药材品质退化、珍稀濒危资源匮乏,优质中药资源需求和供给矛盾日益突出,成为制约中医药高质量发展的瓶颈问题。作者团队长期从事中药品质调控与资源可持续利用... 详细信息

高品质中药资源是中医药全产业链健康发展的物质载体和战略基石。当前,大宗药材品质退化、珍稀濒危资源匮乏,优质中药资源需求和供给矛盾日益突出,成为制约中医药高质量发展的瓶颈问题。作者团队长期从事中药品质调控与资源可持续利用研究。该文结合研究实例,从“道地药材品质形成机制研究、中药活性成分生源途径解析、中药材优良品种的培育、中药活性成分异源生物制造”几个方面阐述中药品质调控与资源可持续利用的思路和方法,为本领域相关研究提供参考和借鉴。

关键词：中药资源中药品质品质调控资源可持续利用

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一测多评法结合双波长法分析不同产地、栽培和加工铁皮石斛黄酮类成分的含量

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中国中药杂志 2021年第14期46卷 3605-3613页

作者：丁玉莲林李雁陈丹青徐红王峥涛上海中医药大学中药研究所教育部中药标准化重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海中药标准化研究中心上海201203 上海上药神象健康药业有限公司上海200336

建立HPLC一测多评法结合双波长法同时测定铁皮石斛中6种黄酮类成分的含量,比较不同产地、栽培和加工的铁皮石斛茎中黄酮类成分的含量,明确引起铁皮石斛黄酮类成分差异性的主要因素。采用资生堂Capcell PAK MGⅡC18色谱柱(4.6 mm×25... 详细信息

建立HPLC一测多评法结合双波长法同时测定铁皮石斛中6种黄酮类成分的含量,比较不同产地、栽培和加工的铁皮石斛茎中黄酮类成分的含量,明确引起铁皮石斛黄酮类成分差异性的主要因素。采用资生堂Capcell PAK MGⅡC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸为流动相,以芦丁为内标物,检测波长340 nm,建立其对维采宁-2、夏佛塔苷、异夏佛塔苷和牡荆素葡萄糖苷的相对校正因子,并进行含量测定,实现一测多评,同时在290 nm波长下,建立柚皮素的含量测定方法。结果表明5种黄酮类成分的一测多评法与常规外标的含量测定结果无显著性差异,结合柚皮素的测定结果,可实现铁皮石斛中6中黄酮类成分的同时测定。对82个铁皮石斛样品进行含量测定并进行主成分分析和判别分析,结果表明仿野生铁皮石斛的黄酮类含量明显高于大棚床栽铁皮石斛,不同地区的仿野生铁皮石斛黄酮类成分以产自江西、贵州、浙江和福建的含量较高,大棚床栽铁皮石斛以产自福建、浙江的黄酮含量较高,柚皮素的含量与加工温度呈正相关,其他5个黄酮成分与加工温度呈负相关。主成分分析显示仿野生铁皮石斛和大棚床栽的铁皮石斛可大致分为两类,大棚床栽的铁皮石斛按产地被分为4类,仿野生铁皮石斛中贵州产地的样品基本聚集在一起,其他产地的没有明显规律。所建立的铁皮石斛含量方法简化了其多指标性黄酮类成分的测定方法,可为有效的控制铁皮石斛整体质量控制及其种植栽培、产地加工提供依据。

关键词：铁皮石斛黄酮含量高效液相色谱法一测多评(QAMS) 产地栽培方式加工方式

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EGF诱导DDP耐药SKOV3细胞死亡作用

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上海中医药大学学报 2024年第5期38卷 18-27页

作者：王永祥张司明赵丽杰陈秀慧余明珠马庆良石海莲上海中医药大学附属曙光医院妇产科上海每201203 上海市复方中药重点实验室教育部中药标准化重点实验室国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室上海中医药大学中药研究所上海201203 上海交通大学医学院附属新华医院妇产科上海200092

目的:考察表皮生长因子(EGF)对人卵巢癌顺铂(DDP)耐药细胞生长的体内外抑制作用。方法:酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测EGF含量;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测EGF对人卵巢上皮性癌细胞细胞活力的影响;裸鼠皮下注射SKOV3-DDP耐药细胞制备DD... 详细信息

目的:考察表皮生长因子(EGF)对人卵巢癌顺铂(DDP)耐药细胞生长的体内外抑制作用。方法:酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测EGF含量;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测EGF对人卵巢上皮性癌细胞细胞活力的影响;裸鼠皮下注射SKOV3-DDP耐药细胞制备DDP耐药卵巢癌移植瘤模型,随机分组后,EGF组和EGF+DDP组裸鼠每日灌胃EGF,Model组和DDP组裸鼠每日灌胃ddH_(2)O。1周后,DDP组和EGF+DDP组裸鼠腹腔注射DDP,Model组和EGF组小鼠每天注射0.9%NaCl溶液。同时,每日察看裸鼠的生长状态,每3 d相同时间测量一次肿瘤大小及裸鼠体重,给药37 d后处理动物,收集肿瘤并称重。结果:蓓丽雅泰国野葛根片(TPMT)能显著降低卵巢癌顺铂耐药患者的CA125水平。TPMT含有EGF(每片含45.763 ng)。与对照组相比,EGF能够促进A2780-DDP耐药细胞的细胞活力,但是能够抑制SKOV3-DDP耐药细胞的细胞活力。EGF(14 ng/kg)有抑制SKOV3-DDP低剂量(0.1μg/mL)耐药细胞移植瘤生长的趋势,但是无统计学差异。EGF(28 ng/kg)能够显著抑制SKOV3-DDP高剂量(2μg/mL)耐药细胞移植瘤的生长,甚至逆转了对顺铂的耐药性,与临床上观察到的结果一致。RNAseq后,Top20差异表达基因结果表明,EGF增强了ID4、ENSG00000283602、UQCRFS1P1、ENSG000000227632、ENSG0000267436、TMEM252、SDHAP1、ENSG_0000273276、RASAL3、ENSG_000256349 mRNA表达,并抑制了SKOV3/DDP细胞异种移植瘤组织中ENSG_0000280800、ENSG_00000281181、PSMD6-AS2、AP4B1-AS1、ENSG_10000263603、PFN1P8、ENSg_0000273047、LINC02754、SLC23A3、ENSG00001258757 mRNA的表达。KEGG分析表明,EGF通过调节TGF-β信号通路、调节干细胞多能性的信号通路、Ras信号通路,抑制SKOV3/DDP细胞皮下移植瘤的生长。结论:EGF在临床治疗顺铂耐药卵巢癌中具有重大价值,但可能有卵巢癌细胞分型和分子分型依赖性,并不能逆转所有的卵巢癌顺铂耐药。

关键词：表皮生长因子卵巢癌顺铂耐药

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