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中国中药杂志 2021年第15期46卷 3853-3858页

作者：周宇娟王俊豪徐红侴桂新王峥涛上海中医药大学中药研究所教育部中药标准化重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海中药标准化研究中心上海201203

研究铁皮石斛乙酸乙酯部分中联苄类化学成分。运用大孔树脂、MCI、硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)、ODS等柱色谱、制备薄层色谱及制备高效液相色谱等技术进行化合物的分离纯化,根据1H-NMR、13C-NMR、MS等波谱数据和理化性质鉴定化合物的结... 详细信息

研究铁皮石斛乙酸乙酯部分中联苄类化学成分。运用大孔树脂、MCI、硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)、ODS等柱色谱、制备薄层色谱及制备高效液相色谱等技术进行化合物的分离纯化,根据1H-NMR、13C-NMR、MS等波谱数据和理化性质鉴定化合物的结构。从铁皮石斛乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到了15个联苄类化合物,分别鉴定为dendrocandin X(1)、3,4′-二羟基-4,5-二甲氧基联苄(2)、6″-de-O-methyldendrofindlaphenol A(3)、3,4-二羟基-4′,5-二甲氧基联苄(4)、dendrosinen B(5)、3,4,4′-三羟基-5-甲氧基联苄(6)、3,3′-二羟基-4,5-二甲氧基联苄(7)、3,4′-二羟基-5-甲氧基联苄(8)、杓唇石斛素(9)、石斛酚(10)、4,4′-二羟基-3,5-二甲氧基联苄(11)、3,4′,5-三羟基-3′-甲氧基联苄(12)、3-O-methylgigantol(13)、dendrocandin U(14)和dendrocandin N(15)。化合物1为新化合物,化合物2首次在石斛属中分离得到,化合物37首次在铁皮石斛中分离得到。

关键词：铁皮石斛化学成分联苄 dendrocandin X

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铁皮石斛醋酸乙酯部位化学成分研究

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中草药 2021年第17期52卷 5218-5225页

作者：周宇娟王俊豪薛亚甫徐红侴桂新王峥涛上海中医药大学中药研究所教育部中药标准化重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海中药标准化研究中心上海201203

目的进一步研究铁皮石斛Dendrobium officinale活性醋酸乙酯部位的化学成分。方法运用大孔树脂、MCI、硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)、ODS等柱色谱、制备薄层色谱及制备高效液相色谱法等分离技术,进行化合物的分离纯化,根据^(1)H-NMR、^(1... 详细信息

目的进一步研究铁皮石斛Dendrobium officinale活性醋酸乙酯部位的化学成分。方法运用大孔树脂、MCI、硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)、ODS等柱色谱、制备薄层色谱及制备高效液相色谱法等分离技术,进行化合物的分离纯化,根据^(1)H-NMR、^(13)C-NMR、MS等波谱数据和理化性质鉴定化合物的结构。结果从铁皮石斛乙醇提取物的醋酸乙酯部位分离得到了34个化合物,分别鉴定为moscatin(1)、黑麦草内酯(2)、柚皮素(3)、橙皮苷(4)、甘草素(5)、2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-(2-hydroxy-5-methoxyphenyl)-3-oxo-l-propanol(6)、异甘草素(7)、(E)-4-hydroxycinnamic acid(8)、(Z)-4-hydroxycinnamic acid(9)、coniferyl p-coumarate(10)、sinapyl p-coumarate(11)、tinosporaic acid A(12)、N-trans-coumaroyltyramine(13)、N-trans-feruloyltyramine(14)、丁香脂素(15)、pinoresinol(16)、梣皮树脂醇(17)、lirioresionol(18)、2(5H)-Furanone 5-hydroxy-3,4-dimethyl-5-pentyl(19)、丁香酸(20)、十六烷酸(21)、对羟基苯甲酸(22)、对羟基苯甲醛(23)、阿魏酸(24)、二氢松柏醇(25)、十七烷(26)、4-羟基-3,5-二甲氧基反式肉桂醛(27)、dihydro-p-cinnamic acid(28)、(+)-(4S)-(2E)-4-羟基-2-壬烯酸(29)、1,3-benzenediol(30)、对羟基苯酚(31)、水杨酸(32)、对羟基苯乙酮(33)和香草醛(34)。结论化合物2首次从石斛属植物中分离得到,化合物3~7均为首次从铁皮石斛中分离得到。

关键词：铁皮石斛 loliolide 柚皮素 hesperetin 甘草素 2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-(2-hydroxy-5-methoxyphenyl)-3-oxo-l-propanol 异甘草素

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基于胆汁酸代谢网络分析中药黄药子的肝毒性

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药学学报 2011年第1期46卷 39-44页

作者：徐英陈崇崇杨莉王君明季莉莉王峥涛胡之璧上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海201210 上海中药标准化研究中心上海201210

本文采用超高效液相色谱质谱联用(UPLC-MS)胆汁酸代谢网络分析方法评价黄药子乙醇提取物(ethanol extraction,ET)和单体化合物黄独素B(diosbulbin B,DB)致小鼠的肝毒性。通过小鼠毒性实验,ET和DB给药组小鼠都可见明显的肝脏毒性。血清... 详细信息

本文采用超高效液相色谱质谱联用(UPLC-MS)胆汁酸代谢网络分析方法评价黄药子乙醇提取物(ethanol extraction,ET)和单体化合物黄独素B(diosbulbin B,DB)致小鼠的肝毒性。通过小鼠毒性实验,ET和DB给药组小鼠都可见明显的肝脏毒性。血清胆汁酸含量测定结果经主成分分析后,空白组和给药组区分明显,ET和DB给药组矢量方向一致,但两者之间也有一定距离,提示DB是黄药子致肝毒性的主要毒性成分之一。经偏最小二乘法-判别分析后,结果表明牛磺酸结合型胆汁酸对表征ET和DB致小鼠肝毒性具有重要的贡献,且以牛磺酸结合型为主的胆汁酸与ALT和AST具有很好的相关性,因此以牛磺酸结合型为主的胆汁酸可作为评价黄药子致小鼠肝毒性的生物标识物。本研究为进一步深入评价黄药子致肝毒性及致毒机制研究奠定了基础。

关键词：胆汁酸黄药子黄独素B 主成分分析偏最小二乘法-判别分析相关分析

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川续断β-香树脂醇合酶的基因克隆及生物信息学分析

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中国中药杂志 2022年第17期47卷 4593-4599页

作者：姚魏琳潘杰牛腾飞杨小林赵淑娟王峥涛王如锋上海中医药大学中药研究所上海201203 上海中医药大学中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203 上海中医药大学中药标准化教育部重点实验室上海201203

续断是我国常用中药材之一,药用历史悠久,具有补肝肾、强筋骨、续折伤等功效。三萜皂苷类化合物是川续断科植物川续断的主要药效成分。β-香树脂醇合酶(β-AS)属于氧化角鲨烯环化酶(OSCs)超家族,在生物合成途径中具有催化齐墩果烷型三... 详细信息

续断是我国常用中药材之一,药用历史悠久,具有补肝肾、强筋骨、续折伤等功效。三萜皂苷类化合物是川续断科植物川续断的主要药效成分。β-香树脂醇合酶(β-AS)属于氧化角鲨烯环化酶(OSCs)超家族,在生物合成途径中具有催化齐墩果烷型三萜皂苷骨架形成的功能。目前有关川续断β-香树脂醇合酶的研究较少,其催化机制仍待探究。为进一步挖掘与丰富该类酶的信息,该研究通过对转录组测序结果进行分析,从川续断中克隆得到1个β-香树脂醇合酶基因DaWβ-AS,并构建至大肠杆菌载体中实现蛋白表达;并采用实时荧光定量PCR技术分析其在川续断4个不同组织中的相对表达量,结果显示DaWβ-AS基因在叶中的相对表达量最高。生物信息学分析表明,DaWβ-AS蛋白含有PLN03012保守结构域,属于cl31551超家族,无跨膜区且不含信号肽。通过对川续断β-AS的克隆、表达及生物信息学分析,为川续断三萜皂苷生物途径解析提供了科学依据,有助于推动后期川续断三萜皂苷的定向生物合成,并为高质量川续断资源培育与开发提供相关参考。

关键词：川续断三萜皂苷 β-香树脂醇合酶基因克隆生物信息学

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竹节参鲨烯环氧酶基因的克隆及生物信息学分析

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中草药 2023年第6期54卷 1917-1923页

作者：李鹏飞黄朝康杨小林牛腾飞陈军峰赵淑娟王峥涛王如锋上海中医药大学中药研究所上海201203 上海中医药大学中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203 上海中医药大学中药标准化教育部重点实验室上海201203

目的克隆竹节参Panax japonicus鲨烯环氧酶基因(squalene epoxidase,PjSE)的全长cDNA序列,进行生物信息学分析和原核表达。方法设计特异性引物,从竹节参中克隆得到PjSE序列;以PjSE基因序列作为输入数据,利用多序列同源比对等生物信息学... 详细信息

目的克隆竹节参Panax japonicus鲨烯环氧酶基因(squalene epoxidase,PjSE)的全长cDNA序列,进行生物信息学分析和原核表达。方法设计特异性引物,从竹节参中克隆得到PjSE序列;以PjSE基因序列作为输入数据,利用多序列同源比对等生物信息学分析工具进行序列分析;构建重组原核表达载体pCold-PjSE,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行蛋白诱导表达;采用实时荧光定量PCR技术分析该基因在竹节参不同组织中的相对表达量。结果PjSE基因开放阅读框长度为1884 bp,编码627个氨基酸,PjSE蛋白相对分子质量为68639.49,初步预测其具有跨膜结构域,可能定位在叶绿体上;聚丙烯凝胶电泳结果显示诱导表达蛋白的相对分子质量大小与预期结果一致;该基因在竹节参叶中表达量最高,须根次之,根中表达量最低。结论PjSE基因的克隆、生信分析及原核表达研究,不仅有助于丰富竹节参中该类功能蛋白的种类和数量,完善竹节参皂苷类成分的生物合成途径,也为后期开展竹节参皂苷的异源合成提供了可供选择的关键基因元件。

关键词：竹节参鲨烯环氧酶基因克隆生物信息学分析原核表达

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阔刺兔唇花全草的化学成分研究

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中草药 2014年第22期45卷 3224-3229页

作者：张成刚卢叶王峥涛侴桂新徐红上海中医药大学中药研究所教育部中药标准化重点实验室中药新资源质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的研究阔刺兔唇花Lagochilus platyacanthus的化学成分。方法利用多种色谱方法进行分离纯化,综合运用各种光谱方法鉴定化合物的结构。结果从阔刺兔唇花全草95%乙醇提取物中分离鉴定了21个化合物,包括15个黄酮类化合物:芹菜素-7,4′-... 详细信息

目的研究阔刺兔唇花Lagochilus platyacanthus的化学成分。方法利用多种色谱方法进行分离纯化,综合运用各种光谱方法鉴定化合物的结构。结果从阔刺兔唇花全草95%乙醇提取物中分离鉴定了21个化合物,包括15个黄酮类化合物:芹菜素-7,4′-二甲醚(1)、刺槐素(2)、芹菜素(3)、木犀草素-7,3′,4′-三甲醚(4)、木犀草素-7,4′-二甲醚(5)、香叶木素(6)、金圣草素(7)、槲皮素-3-O-芸香糖-7-O-葡萄糖苷(8)、芦丁(9)、horridin(10)、芹菜素-6,8-二-C-葡萄糖苷(11)、异鼠李素-3-O-芸香糖苷(12)、异鼠李素-3-O-刺槐二糖苷(13)、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷(14)、异鼠李素-3-O-芸香糖-4′-O-葡萄糖苷(15);3个木脂素类化合物:1-(4-hydroxy-3-methoxy)-phenyl-2-[4-(1,2,3-trihydroxypropyl)-2-methoxy]-phenoxy-1,3-propandiol(16)、(+)-异落叶松脂醇3-α-O-β-D-葡萄糖苷(17)、(-)-异落叶松脂醇3-α-O-β-D-葡萄糖苷(18);2个环烯醚萜类化合物:8-O-乙酰哈巴苷(19)、京尼平苷酸(20)及1个苯乙醇苷类化合物:lavandulifolioside(21)。结论 21个化合物均为首次从阔刺兔唇花植物中分离得到,除化合物1、3、9、19及20外,其余化合物均为首次从兔唇花属植物中分离得到。

关键词：阔刺兔唇花刺槐素木犀草素-7,4'-二甲醚香叶木素 (+)-异落叶松脂醇3-α-Ο-β-D葡萄糖苷

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铁皮石斛专属性成分的分离制备及质量标准研究

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中国中药杂志 2016年第13期41卷 2481-2486页

作者：叶子卢叶薛亚甫徐红王峥涛上海中医药大学中药研究所教育部中药标准化重点实验室中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

采用色谱和光谱技术首次从铁皮石斛追踪分离并鉴定专属性成分佛莱心苷。对铁皮石斛药材粉末特征进行描述。采用薄层色谱法对铁皮石斛中佛莱心苷进行定性分析,硅胶SGF254薄层板,展开剂乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(4∶3∶1∶1),显色剂三氯化铝... 详细信息

采用色谱和光谱技术首次从铁皮石斛追踪分离并鉴定专属性成分佛莱心苷。对铁皮石斛药材粉末特征进行描述。采用薄层色谱法对铁皮石斛中佛莱心苷进行定性分析,硅胶SGF254薄层板,展开剂乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(4∶3∶1∶1),显色剂三氯化铝,结果铁皮石斛中佛莱心苷的薄层色谱鉴别特征明显,具有一定专属性,可实现铁皮石斛药材与易混淆的齿瓣石斛、杯鞘石斛、兜唇石斛等石斛的加工品区分鉴别。对铁皮石斛的粉末特征进行描述。采用高效液相色谱法对铁皮石斛药材中的活性成分柚皮素进行定量分析,Bischoff Chromatography HIPAK NC-04 ODS AB色谱柱(4.4 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱,检测波长226 nm,柱温25℃;结果柚皮素的定量测定在3.90~250.00 mg·L^(-1)呈良好的线性关系,r=0.999 9;平均回收率99.20%(RSD 0.17%),20批铁皮石斛药材质量分数在0.190~0.498 mg·g^(-1)。所建立的定性和定量方法简单灵敏,准确可靠,重现性好,为提高铁皮石斛的质量控制方法提供了实验依据,对于保证其质量和临床疗效具有重要意义。

关键词：铁皮石斛佛莱心苷柚皮素显微鉴别薄层鉴别含量测定质量标准

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血液中类固醇激素分析方法的研究进展

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中草药 2018年第15期49卷 3710-3720页

作者：鹿倩杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所教育部中药标准化重点实验室中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

内源性类固醇激素作为内分泌系统重要的组成成分,在机体发育、免疫调节及生育控制方面均起着不可或缺的作用。类固醇激素水平的准确测定对于临床内分泌疾病的预防、诊断及治疗十分重要。近年来生物体内源性类固醇激素的测定在临床应用... 详细信息

内源性类固醇激素作为内分泌系统重要的组成成分,在机体发育、免疫调节及生育控制方面均起着不可或缺的作用。类固醇激素水平的准确测定对于临床内分泌疾病的预防、诊断及治疗十分重要。近年来生物体内源性类固醇激素的测定在临床应用中越来越广泛。主要针对2013—2018年最典型的血液中类固醇激素常用的分析方法进行归纳对比,以期为类固醇激素水平的准确测定提供更多的思路,也为后期临床诊断治疗提供更加准确的依据。

关键词：类固醇激素临床诊断分析方法血液蛋白沉淀法液液萃取法固相萃取法

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大孔吸附树脂法富集提取废液中骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱

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中国药学杂志 2010年第7期45卷 500-505页

作者：赵婷程雪梅刘力王长虹王峥涛中药标准化教育部重点实验室中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海中医药大学中药研究所上海中药标准化研究中心上海201210

目的研究大孔树脂富集骆驼蓬中总生物碱提取后废液中骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱的最佳工艺条件。方法用HPLC测定生物碱含量,以骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱的吸附量和解吸率为考察指标,对6种不同类型的树脂(LSA-8b、LSA-5b、XDA-1、LSA-21、LSA... 详细信息

目的研究大孔树脂富集骆驼蓬中总生物碱提取后废液中骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱的最佳工艺条件。方法用HPLC测定生物碱含量,以骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱的吸附量和解吸率为考察指标,对6种不同类型的树脂(LSA-8b、LSA-5b、XDA-1、LSA-21、LSA-10、D101)进行评价。考察药液pH值、吸附流速、吸附温度、洗脱流速等参数对骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱的吸附和洗脱效果的影响。结果LSA-5b对骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱具有较好的富集能力,最佳富集工艺条件:吸附pH值为9,吸附温度为30℃,上样流速为3.5BV(倍柱体积).h-1,骆驼蓬碱饱和吸附量为32.34mg·g-1;最佳的洗脱溶剂为体积分数为70%乙醇,最佳洗脱流速为1.5BV.h-1,洗脱用量为16.7BV,骆驼蓬总生物碱洗脱率达86.3%。结论在确定的工艺条件下,体积分数70%的乙醇洗脱液中骆驼蓬总生物碱的含量提高了10倍。

关键词：骆驼蓬骆驼蓬碱去氢骆驼蓬碱大孔吸附树脂

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红花龙胆质量标准研究

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中国中药杂志 2010年第16期35卷 2099-2102页

作者：吴立宏官海峰俞丽侴桂新王峥涛上海中药标准化研究中心上海201210 上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海201210

目的：建立红花龙胆的质量标准。方法：采用薄层色谱鉴别及高效液相色谱法测定红花龙胆中芒果苷含量,并测定水分、总灰分、酸不溶性灰分。结果：样品以对照药材和芒果苷为对照物质进行薄层色谱鉴别能很好比对和检出;红花龙胆药材含芒果... 详细信息

目的：建立红花龙胆的质量标准。方法：采用薄层色谱鉴别及高效液相色谱法测定红花龙胆中芒果苷含量,并测定水分、总灰分、酸不溶性灰分。结果：样品以对照药材和芒果苷为对照物质进行薄层色谱鉴别能很好比对和检出;红花龙胆药材含芒果苷质量分数为0.7%~4.4%（平均2.8%）,水分为6.1%~8.6%（平均7.2%）,总灰分为3.7%~10.8%（平均6.6%）,酸不溶性灰分为0.2%~2.7%（平均1.3%）。结论：所建立的方法操作简便,准确可靠,重现性好,制订的标准限度合理,可用于红花龙胆药材的质量评价。

关键词：红花龙胆质量标准芒果苷

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