检索结果-内蒙古大学图书馆

上海中医药大学学报 2022年第5期36卷 39-45页

作者：胡耀廷肖传光陈文杰王如锋杨莉赵淑娟上海中医药大学中药研究所国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室教育部中药标准化重点研究室上海市中药复方重点实验室上海201203

目的:将胆固醇生物转化成7α-羟基-4-胆甾烯-3-酮。方法:PCR扩增中华大蟾蜍来源的3β羟基类固醇脱氢酶基因(Bg-HSD3B7)、细胞色素P450还原酶基因(Bg-CPR)、大鼠来源的细胞色素P450酶基因(Rn-CYP7A1),生物信息学网站ExPASy、TMHMM预测理... 详细信息

目的:将胆固醇生物转化成7α-羟基-4-胆甾烯-3-酮。方法:PCR扩增中华大蟾蜍来源的3β羟基类固醇脱氢酶基因(Bg-HSD3B7)、细胞色素P450还原酶基因(Bg-CPR)、大鼠来源的细胞色素P450酶基因(Rn-CYP7A1),生物信息学网站ExPASy、TMHMM预测理化性质,采用不同的构建组合方式构建工程菌;以胆固醇为底物进行全细胞催化,高效液相色谱检测是否产生7-α羟基胆固醇中间产物和7α-羟基-4-胆甾烯-3-酮终产物。结果:克隆并以单顺反子方式构建到pETM6载体,获得带有3个基因Rn-CYP7A1、Bg-CPR、Bg-HSD3B7的大肠杆菌工程菌BL21(DE3),该工程菌可以全细胞催化方式将胆固醇转化生成7α-羟基-4-胆甾烯-3-酮,且没有中间产物。结论:克隆得到中华大蟾蜍来源的Bg-HSD3B7基因、Bg-CPR基因、大鼠来源的Rn-CYP7A1基因,构建了具有全细胞催化功能的工程大肠杆菌,可以催化胆固醇转化生成7α-羟基-4-胆甾烯-3-酮。

关键词：中华大蟾蜍胆固醇工程菌 3β羟基类固醇脱氢酶细胞色素P450还原酶

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于ABTS自由基的薄层色谱-生物自显影新方法的建立及其在中药抗氧化活性评价中的应用

引用

上海中医药大学学报 2013年第3期27卷 99-104页

作者：谷丽华侴桂新王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海201210 上海中药标准化研究中心上海201210 中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海201210

目的:建立一种基于2,2-氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除能力活性筛选的薄层色谱-生物自显影新方法。方法:将含有14 mmol/L ABTS和4.9 mmol/L过硫酸钾混合水溶液10 ml,置于暗处12～16 h制备ABTS+.,用75%乙醇将A... 详细信息

目的:建立一种基于2,2-氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除能力活性筛选的薄层色谱-生物自显影新方法。方法:将含有14 mmol/L ABTS和4.9 mmol/L过硫酸钾混合水溶液10 ml,置于暗处12～16 h制备ABTS+.,用75%乙醇将ABTS+.溶液稀释至100 ml,作为显色剂。将点有样品(或展开)的薄层板喷显色剂,在可见光下检视或在734 nm下扫描。对显色剂、衍生化方法、薄层板、检测波长等参数进行优化使薄层板获得明显的蓝色背景色。结果:具有清除ABTS自由基活性的化合物在薄层板的蓝色背景下呈现白色斑点。采用建立的TLC-生物自显影法结合扫描仪测定6-羟基-2,5,7,8-四甲基苯并二氢吡喃-2-羧酸(Trolox),叔丁基羟基茴香醚(BHA),2,6-二叔丁基对甲酚(BHT),特丁基对苯二酚(TBHQ)和没食子酸丙酯(PG)等抗氧化剂的ABTS自由基清除能力,结果抗氧化能力顺序为:PG>BHA>TBHQ>麦角甾苷>BHT>Trolox>野黄芩苷,与分光光度法测定结果一致;并采用TLC-生物自显影法对不同来源的中药肉苁蓉和灯盏花样品及其所含清除ABTS自由基活性成分进行了分析和评价,发现肉苁蓉和灯盏花中很多成分具有清除ABTS自由基作用,购自上海的肉苁蓉和购自云南文山的灯盏花的抗氧化活性强于其他来源样品。结论:该方法能够测定和评价单体化合物和复杂组分(如中药提取物)中化合物的ABTS自由基清除能力。

关键词：薄层色谱生物自显影 ABTS 抗氧化中药

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

反相高效液相色谱法测定不同产地龙胆中的龙胆苦苷和2’-(2,3-二羟基苯甲酰)-獐牙菜苷含量

引用

上海中医药大学学报 2011年第1期25卷 72-75页

作者：俞丽吴立宏侴桂新王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的:运用反相高效液相色谱法同时测定不同产地龙胆中龙胆苦苷(GPS)和2’-(2,3-二羟基苯甲酰)-獐牙菜苷(DHBS)的含量。方法:色谱柱为Ultimate XB-C18(150 mm×4.6 mm,5μm);甲醇-乙腈-水为流动相,梯度洗脱,检测波长为270 nm和215 nm... 详细信息

目的:运用反相高效液相色谱法同时测定不同产地龙胆中龙胆苦苷(GPS)和2’-(2,3-二羟基苯甲酰)-獐牙菜苷(DHBS)的含量。方法:色谱柱为Ultimate XB-C18(150 mm×4.6 mm,5μm);甲醇-乙腈-水为流动相,梯度洗脱,检测波长为270 nm和215 nm,柱温为25℃,流速为1.0 ml/min。结果:龙胆苦苷和2’-(2,3-二羟基苯甲酰)-獐牙菜苷的线性范围分别为0.0201 5～5.038μg(r=1)和0.00512～0.409 6μg(r=0.999 8),平均加样回收率分别为100.4%(RSD 2.72%)和102.2%(RSD 1.99%)。结论:本法准确、简便、重现性好。龙胆的种间(四基源药材)的龙胆苦苷和2’-(2,3-二羟基苯甲酰)-獐牙菜苷的含量有较大差异。

关键词：高效液相色谱法龙胆龙胆苦苷 2’-(2,3-二羟基苯甲酰)-獐牙菜苷

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

RP-HPLC法测定刺山苷不同药用部位中芦丁和山萘酚芸香苷含量

引用

上海中医药杂志 2010年第9期44卷 68-71页

作者：刘红娟杨涛程雪梅王长虹王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室上海市复方中药重点实验室上海中药标准化研究中心上海201210

目的建立刺山柑不同药用部位中芦丁和山萘酚芸香苷的RP-HPLC含量测定法。方法采用Agilent ZORBAX SBC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%三氟乙酸(37:63)为流动相,流速为1.0 ml·min^(-1),紫外检测波长为265 nm,柱温为3... 详细信息

目的建立刺山柑不同药用部位中芦丁和山萘酚芸香苷的RP-HPLC含量测定法。方法采用Agilent ZORBAX SBC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%三氟乙酸(37:63)为流动相,流速为1.0 ml·min^(-1),紫外检测波长为265 nm,柱温为30℃,进样量20μl。结果芦丁在12.0-599.5μg·ml^(-1)之间与峰面积呈良好的线性关系(τ~2=0.9996);山萘酚芸香苷在4.8-237.5μg·ml^(-1)之间与峰面积呈良好的线性关系(r^2=0.9998);芦丁和山萘酚芸香苷的平均回收率分别为99.15%(RSD=1.3%)和99.58%(RSD=2.1%)。结论本方法简单、重复性好、专属性强,可为评价刺山柑药材的质量提供科学依据。

关键词：刺山柑芦丁山萘酚芸香苷反相高效液相色谱法

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

红花龙胆的药用民族植物学及质量评价

引用

中央民族大学学报（自然科学版） 2011年第2期20卷 76-80页

作者：吴立宏官海峰俞丽侴桂新王峥涛上海中药标准化研究中心上海201203 上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海201203

采用药用民族植物学的文献研究和调查编目等方法对涉及红花龙胆的文献进行系统梳理,对采集和收集的样品进行鉴定;运用高效液相色谱法对采集和收集样品中的芒果苷进行含量测定.结果显示,红花龙胆分布区内的苗族、土家族及汉族等民族均将... 详细信息

采用药用民族植物学的文献研究和调查编目等方法对涉及红花龙胆的文献进行系统梳理,对采集和收集的样品进行鉴定;运用高效液相色谱法对采集和收集样品中的芒果苷进行含量测定.结果显示,红花龙胆分布区内的苗族、土家族及汉族等民族均将红花龙胆用作清热、消炎、止咳之草药,用于治疗肺及肝胆疾病;12批样品中的芒果苷含量平均2.8%,传统应用全草的样品含量均超过2.0%,地区之间的含量没有显著差异.研究表明,芒果苷可视为红花龙胆的药效物质基础;芒果苷限量标准的制订可为以红花龙胆为原料的新药和成药标准的提升提供参考.

关键词：红花龙胆药用民族植物学芒果苷质量评价

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

诱导子对丹参毛状根丹酚酸类化合物积累的影响

引用

上海中医药大学学报 2017年第5期31卷 91-94页

作者：张金家谈荣慧上海中医药大学中药研究所上海201203 中药标准化教育部重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海201203

目的:探讨不同诱导子干预培育对丹参毛状根中丹酚酸类化合物生物合成的影响。方法:在继代培养的丹参毛状根中分别添加酵母提取物(YE)、茉莉酸甲酯(MJ)、水杨酸(SA)和银离子(Ag+)不同诱导子及其组合,用高效液相色谱法(HPLC)测定各类丹参... 详细信息

目的:探讨不同诱导子干预培育对丹参毛状根中丹酚酸类化合物生物合成的影响。方法:在继代培养的丹参毛状根中分别添加酵母提取物(YE)、茉莉酸甲酯(MJ)、水杨酸(SA)和银离子(Ag+)不同诱导子及其组合,用高效液相色谱法(HPLC)测定各类丹参毛状根中丹酚酸含量。结果:在实验浓度条件下,4种诱导子对丹参毛状根的生长均无显著影响;MJ和SA能提高丹酚酸的含量,YE会降低丹酚酸含量,Ag+无显著影响,YE+MJ+Ag+对毛状根中丹酚酸类成分积累有明显的抑制作用。结论:在丹参毛状根中可以添加适当浓度的MJ和SA诱导子会提高丹酚酸类化合物含量,且不会影响毛状根生长。

关键词：丹参毛状根诱导子丹酚酸高效液相色谱法

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

中华大蟾蜍细胞色素P450还原酶基因克隆、表达与功能鉴定

引用

上海中医药大学学报 2024年第1期38卷 27-33页

作者：肖传光胡耀廷杨莉赵淑娟王峥涛上海中医药大学中药研究所中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203

目的:从中华大蟾蜍(Bufo gargarizans Cantor)肝脏组织中克隆细胞色素P450还原酶基因(BgCPR,GenBank登录号:OQ572435)进行生物信息学分析,并进行功能验证。方法:基于中华大蟾蜍转录组数据库挖掘BgCPR基因序列,使用SnapGene软件设计BgCP... 详细信息

目的:从中华大蟾蜍(Bufo gargarizans Cantor)肝脏组织中克隆细胞色素P450还原酶基因(BgCPR,GenBank登录号:OQ572435)进行生物信息学分析,并进行功能验证。方法:基于中华大蟾蜍转录组数据库挖掘BgCPR基因序列,使用SnapGene软件设计BgCPR基因两端特异性引物,以蟾蜍肝脏组织总RNA逆转录成的cDNA为模板进行PCR扩增。利用生物信息学分析BgCPR蛋白理化性质、空间结构并构建系统进化树;基于CRISPR/Cas9基因编辑系统将蟾蜍BgCPR基因表达框经同源重组整合进入酿酒酵母基因组,利用聚乙二醇法制备转化子微粒体,验证其对细胞色素C的还原功能。结果:克隆得到全长2043 bp的BgCPR基因cDNA,编码680个氨基酸,相对分子质量77852 Da。结构预测显示,BgCPR蛋白为非分泌蛋白;有一段跨膜螺旋区,位于蛋白的第24~46位氨基酸之间;亚细胞定位预测显示该蛋白定位于内质网上。采用体外酶活实验证明其具有传递电子功能。结论:本研究克隆得到中华大蟾蜍BgCPR基因,并构建了表达具有生物活性的BgCPR的酿酒酵母工程细胞,为进一步研究蟾蜍CYP450基因功能乃至解析蟾蜍二烯内酯类化合物的生物合成途径奠定了基础。

关键词：中华大蟾蜍细胞色素P450还原酶细胞色素P450 蟾蜍二烯内酯

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

中药黄芪皂苷类成分生物合成研究进展

引用

上海中医药大学学报 2021年第5期35卷 80-88,96页

作者：肖亦菽王如锋赵淑娟上海中医药大学中药研究所中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203

作为常用中药,黄芪具有补气升阳、固表利水、托毒排脓等功效。黄芪皂苷类化合物是其主要活性成分,具有抗炎、抗肿瘤、免疫调节、代谢调节、器官保护等药理作用。从黄芪皂苷的化学结构与药理活性、生物合成途径与代谢调控、生物转化与合... 详细信息

作为常用中药,黄芪具有补气升阳、固表利水、托毒排脓等功效。黄芪皂苷类化合物是其主要活性成分,具有抗炎、抗肿瘤、免疫调节、代谢调节、器官保护等药理作用。从黄芪皂苷的化学结构与药理活性、生物合成途径与代谢调控、生物转化与合成生物学等方面进行综述,并对其生物合成前景进行展望,以期为应用生物技术实现黄芪皂苷的规模化生产提供参考。

关键词：黄芪皂苷生物合成生物转化综述

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

丹参SmERF081转录因子基因克隆与靶基因鉴定

引用

上海中医药大学学报 2024年第3期38卷 7-14页

作者：肖亦菽陈敏谈荣慧郑小宇赵淑娟上海中医药大学中药研究所国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室教育部中药标准化重点研究室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学中药学院上海201203

目的:克隆丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)转录因子SmERF081,分析SmERF081的靶基因。方法:以丹参转录组数据Unigene(c48961-g1)序列为参考,利用PCR扩增获得SmERF081基因序列;通过生物信息学预测SmERF081编码蛋白的理化性质、蛋白质结构... 详细信息

目的:克隆丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)转录因子SmERF081,分析SmERF081的靶基因。方法:以丹参转录组数据Unigene(c48961-g1)序列为参考,利用PCR扩增获得SmERF081基因序列;通过生物信息学预测SmERF081编码蛋白的理化性质、蛋白质结构等分子特征;使用MEGA 7软件构建系统进化树;对SmERF081进行异源表达和蛋白纯化;通过酵母单杂、双荧光素酶报告系统和化学发光法凝胶迁移实验(EMSA)鉴定SmERF081与SmCPS5启动子是否结合。结果:克隆得到SmERF081基因,cDNA全长453 bp(Genbank登陆号:OQ466089),编码151个氨基酸,相对分子质量16.46 kDa,等电点9.75。该蛋白不含信号肽,无跨膜区,其高级结构主要由无规则卷曲构成。进化树分析表明SmERF081与拟南芥At1G28360.1、丹参SmERF8同源关系最近。原核表达结果显示,经IPTG诱导后SmERF081在大肠杆菌中成功异源表达,并通过纯化获得目的蛋白。酵母单杂、双荧光素酶报告基因检测和EMSA确认SmERF081可与丹参SmCPS5启动子结合。结论:鉴定到丹参中一个新转录因子SmERF081,生物信息学分析及分子互作初步证实其靶基因为丹参SmCPS5二萜环化酶。

关键词：丹参 SmERF081 生物信息学靶基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

黄芩素-羟丙基-γ-环糊精包合物制备工艺研究

引用

上海中医药杂志 2013年第8期47卷 82-85页

作者：周秋娜尉小慧王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海201210 上海中医药大学中药研究所中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室上海201210 上海中医药大学中药研究所上海市复方中药重点实验室上海201210 上海中药标准化研究中心上海201203

目的优化羟丙基-γ-环糊精(HP-γ-CD)包合黄芩素的工艺条件。方法采用冷冻干燥法,以包合物的得率、包封率和载药率为考察指标,通过L9(3)4正交设计优选黄芩素(Ba)与HP-γ-CD摩尔比、包合温度、包合时间、包合溶剂比(水∶无水乙醇),综合... 详细信息

目的优化羟丙基-γ-环糊精(HP-γ-CD)包合黄芩素的工艺条件。方法采用冷冻干燥法,以包合物的得率、包封率和载药率为考察指标,通过L9(3)4正交设计优选黄芩素(Ba)与HP-γ-CD摩尔比、包合温度、包合时间、包合溶剂比(水∶无水乙醇),综合评价确定最佳制备工艺;采用X射线衍射分析和差示扫描量热分析验证包合物。结果最优包合条件:Ba与HP-γ-CD摩尔比为1∶3,温度45℃,包合时间4 h,包合溶剂比(水∶无水乙醇)2∶3;采用最优包合条件制备的Ba-HP-γ-CD包合物得率为93.97%,包封率为95.96%,载药率为5.20%,其粉末经鉴定已形成包合物;Ba-HP-γ-CD包合物能够显著提高Ba的溶解度。结论优选的包合工艺合理可行,为黄芩素制备成各种剂型奠定了良好基础。

关键词：黄芩素羟丙基-γ-环糊精包合物工艺条件

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：