检索结果-内蒙古大学图书馆

中草药 2023年第6期54卷 1917-1923页

作者：李鹏飞黄朝康杨小林牛腾飞陈军峰赵淑娟王峥涛王如锋上海中医药大学中药研究所上海201203 上海中医药大学中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203 上海中医药大学中药标准化教育部重点实验室上海201203

目的克隆竹节参Panax japonicus鲨烯环氧酶基因(squalene epoxidase,PjSE)的全长cDNA序列,进行生物信息学分析和原核表达。方法设计特异性引物,从竹节参中克隆得到PjSE序列;以PjSE基因序列作为输入数据,利用多序列同源比对等生物信息学... 详细信息

目的克隆竹节参Panax japonicus鲨烯环氧酶基因(squalene epoxidase,PjSE)的全长cDNA序列,进行生物信息学分析和原核表达。方法设计特异性引物,从竹节参中克隆得到PjSE序列;以PjSE基因序列作为输入数据,利用多序列同源比对等生物信息学分析工具进行序列分析;构建重组原核表达载体pCold-PjSE,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行蛋白诱导表达;采用实时荧光定量PCR技术分析该基因在竹节参不同组织中的相对表达量。结果PjSE基因开放阅读框长度为1884 bp,编码627个氨基酸,PjSE蛋白相对分子质量为68639.49,初步预测其具有跨膜结构域,可能定位在叶绿体上;聚丙烯凝胶电泳结果显示诱导表达蛋白的相对分子质量大小与预期结果一致;该基因在竹节参叶中表达量最高,须根次之,根中表达量最低。结论PjSE基因的克隆、生信分析及原核表达研究,不仅有助于丰富竹节参中该类功能蛋白的种类和数量,完善竹节参皂苷类成分的生物合成途径,也为后期开展竹节参皂苷的异源合成提供了可供选择的关键基因元件。

关键词：竹节参鲨烯环氧酶基因克隆生物信息学分析原核表达

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川续断β-香树脂醇合酶的基因克隆及生物信息学分析

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中国中药杂志 2022年第17期47卷 4593-4599页

作者：姚魏琳潘杰牛腾飞杨小林赵淑娟王峥涛王如锋上海中医药大学中药研究所上海201203 上海中医药大学中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203 上海中医药大学中药标准化教育部重点实验室上海201203

续断是我国常用中药材之一,药用历史悠久,具有补肝肾、强筋骨、续折伤等功效。三萜皂苷类化合物是川续断科植物川续断的主要药效成分。β-香树脂醇合酶(β-AS)属于氧化角鲨烯环化酶(OSCs)超家族,在生物合成途径中具有催化齐墩果烷型三... 详细信息

续断是我国常用中药材之一,药用历史悠久,具有补肝肾、强筋骨、续折伤等功效。三萜皂苷类化合物是川续断科植物川续断的主要药效成分。β-香树脂醇合酶(β-AS)属于氧化角鲨烯环化酶(OSCs)超家族,在生物合成途径中具有催化齐墩果烷型三萜皂苷骨架形成的功能。目前有关川续断β-香树脂醇合酶的研究较少,其催化机制仍待探究。为进一步挖掘与丰富该类酶的信息,该研究通过对转录组测序结果进行分析,从川续断中克隆得到1个β-香树脂醇合酶基因DaWβ-AS,并构建至大肠杆菌载体中实现蛋白表达;并采用实时荧光定量PCR技术分析其在川续断4个不同组织中的相对表达量,结果显示DaWβ-AS基因在叶中的相对表达量最高。生物信息学分析表明,DaWβ-AS蛋白含有PLN03012保守结构域,属于cl31551超家族,无跨膜区且不含信号肽。通过对川续断β-AS的克隆、表达及生物信息学分析,为川续断三萜皂苷生物途径解析提供了科学依据,有助于推动后期川续断三萜皂苷的定向生物合成,并为高质量川续断资源培育与开发提供相关参考。

关键词：川续断三萜皂苷 β-香树脂醇合酶基因克隆生物信息学

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川西千里光中正丁醇部位化学成分研究

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中国医药工业杂志 2014年第7期45卷 626-628,645页

作者：李定祥侴桂新王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海201203

利用大孔树脂、MCI、ODS和Sephadex LH-20柱色谱以及反相制备液相色谱对川西千里光Senecio solidagineus Hand.-Mazz.正丁醇萃取部位的化学成分进行系统分离,并利用1H NMR、13C NMR等现代波谱技术鉴定其结构.结果从川西千里光中分离得到... 详细信息

利用大孔树脂、MCI、ODS和Sephadex LH-20柱色谱以及反相制备液相色谱对川西千里光Senecio solidagineus Hand.-Mazz.正丁醇萃取部位的化学成分进行系统分离,并利用1H NMR、13C NMR等现代波谱技术鉴定其结构.结果从川西千里光中分离得到8个化合物,分别鉴定为丁香酚-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（1）、灯盏花苷Ⅱ （2）、（6R,7E,9R）-9-hydroxymegastigma-4,7-dien-3-one-9-O-β-D-glucopyranoside （3）、crotonine （4）、bidensmethoside B （5）、松脂醇葡萄糖苷（6）、picraquassioside C （7）和3,3＇-二甲氧基鞣花酸（8）.化合物2～8均为首次从该属植物中分离得到,化合物1为首次从该植物中分离得到.

关键词：千里光属川西千里光灯盏花苷Ⅱ 分离结构解析

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基于外观性状与内在指标结合的板蓝根饮片质量等级标准研究

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中国中药杂志 2024年第24期49卷 6699-6712页

作者：李燕付康宁王帅杨莉王峥涛王瑞石燕红上海中医药大学中药学院上海201203 上海中医药大学中药研究所、中药标准化教育部重点实验室上海201203 上海中医药大学中医药国际标准化研究所上海201203 上海市中医药国际标准化研究院上海201203

建立传统辨状论质与现代质量评价模式相结合的板蓝根饮片质量分级策略。基于板蓝根现有标准和市场流通情况,以饮片直径和颜色为外观性状指标进行初步分级,综合比较水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物和9个活性成分含量等内在质... 详细信息

建立传统辨状论质与现代质量评价模式相结合的板蓝根饮片质量分级策略。基于板蓝根现有标准和市场流通情况,以饮片直径和颜色为外观性状指标进行初步分级,综合比较水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物和9个活性成分含量等内在质量指标对不同等级饮片的影响,并通过t检验确定关键分级指标。采用相关性分析、主成分分析、正交偏最小二乘法判别分析和层次聚类分析等多维统计学方法考察不同等级饮片外观性状与内在质量的关联;采用荧光底物法考察不同等级饮片抑制流感病毒神经氨酸酶活性,进一步结合网络药理学验证等级划分指标成分选取的合理性。结果表明,除水分外,饮片直径与各指标成分均呈显著正相关,综合现有板蓝根商品规格等级标准及市场实际流通情况,选择以直径为外观性状指标,(R,S)-告依春为合格限量指标,在此基础上,以醇溶性浸出物、总芥子苷和总核苷含量指导等级划分,最终建立了板蓝根饮片质量等级标准。体外酶活性评价表明一等板蓝根饮片有更为明显地抑制流感病毒神经氨酸酶活性,网络药理学结果发现所选择的等级划分质量指标成分与流感疾病具有较强的关联性。该研究建立的外观性状与内在质量关键指标相结合的质量等级标准评价模式,为板蓝根饮片现有等级标准的提升和优质优价的实现提供科学依据。

关键词：板蓝根饮片外观性状内在质量质量等级标准活性评价

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新疆千里光的化学成分研究

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天然产物研究与开发 2013年第B12期25卷 5-7,50页

作者：李定祥侴桂新王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海201203

本文对新疆千里光进行了化学成分研究，从中分离鉴定了12个化合物，分别为千里光碱（1）、千里光菲灵碱（2）、全缘千里光碱（3）、克式千里光碱（4）、异鼠李素（5）、槲皮素（6）、异鼠李素-3—O-β-D-半乳糖苷（7）、8-（2＂-pyrroli... 详细信息

本文对新疆千里光进行了化学成分研究，从中分离鉴定了12个化合物，分别为千里光碱（1）、千里光菲灵碱（2）、全缘千里光碱（3）、克式千里光碱（4）、异鼠李素（5）、槲皮素（6）、异鼠李素-3—O-β-D-半乳糖苷（7）、8-（2＂-pyrrolidinone-5”-y1）-isorhamnetin（8）、pseudotaraxasterc1（9）、咖啡酸（10）、β-谷甾醇（11）、卢-胡萝卜苷（12）。除1—3外，其余9个化合物均为首次从该植物中分离得到。

关键词：新疆千里光千里光属吡咯里西啶类生物碱黄酮

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野百合碱对人肝窦内皮细胞的毒性机制研究

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中国药理学通报 2020年第6期36卷 833-839页

作者：王蔚倩叶铉玲陈岩熊爱珍杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学交叉科学研究院上海201203

目的利用人肝窦内皮细胞(human hepatic sinusoidal endothelial cell,HHSEC)探讨野百合碱(monocrotaline,MCT)的体外毒性及其毒性作用机制。方法CCK-8检测MCT对细胞存活率的影响;通过LC-MS检测毒性代谢物吡咯蛋白加合物(PPA)的水平;用... 详细信息

目的利用人肝窦内皮细胞(human hepatic sinusoidal endothelial cell,HHSEC)探讨野百合碱(monocrotaline,MCT)的体外毒性及其毒性作用机制。方法CCK-8检测MCT对细胞存活率的影响;通过LC-MS检测毒性代谢物吡咯蛋白加合物(PPA)的水平;用试剂盒检测细胞中还原型谷胱甘肽(GSH)的含量;通过Hoechst染色、荧光底物法和Western blot来检测细胞凋亡情况;QT-PCR分析细胞中相关基因的mRNA表达情况。结果与空白组比较,MCT(5,10 mmol·L-1)能明显降低HHSEC的细胞存活率;在给药后的HHSEC和培养基中均检测到了大量PPA,且其水平呈剂量依赖性增加;并明显降低了HHSEC中GSH含量。MCT能导致细胞核固缩,同时提高caspase-3蛋白酶活性,诱导细胞中凋亡蛋白的表达水平升高。MCT诱导代谢活化关键酶CYP3A4,并使细胞中VEGFA和MMP9基因表达上调,NOS3基因则表达下调。结论MCT经HHSEC内代谢酶代谢活化,同时消耗细胞内GSH,破坏肝脏抗氧化系统,激活了HHSEC凋亡并影响内皮及血管系统等进一步加剧细胞损伤。

关键词：野百合碱人肝窦内皮细胞吡咯里西啶生物碱肝窦阻塞综合征肝毒性凋亡

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鼓槌石斛对小鼠非增殖性糖尿病视网膜病变的改善作用及其机制研究

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中草药 2016年第11期47卷 1908-1913页

作者：余增洋盛雨辰周玲玉陆宾季莉莉上海中医药大学中药研究所上海市复方中药重点实验室中药标准化教育部重点实验室上海201203 上海中医药大学药物安全评价研究中心上海201203

目的观察鼓槌石斛乙醇提取物（ethanol extract of Dendrobium chrysotoxum，EEDC）对链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病小鼠非增殖性糖尿病视网膜病变（NPDR）的改善作用及其机制。方法采用STZ诱导小鼠发生糖尿病,进而建立糖尿病并发症NPD... 详细信息

目的观察鼓槌石斛乙醇提取物（ethanol extract of Dendrobium chrysotoxum，EEDC）对链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病小鼠非增殖性糖尿病视网膜病变（NPDR）的改善作用及其机制。方法采用STZ诱导小鼠发生糖尿病,进而建立糖尿病并发症NPDR实验动物模型,再给予EEDC进行干预。采用视网膜组织伊文思蓝渗漏实验观察NPDR小鼠中血-视网膜屏障（BRB）的破坏情况;采用real-time PCR（RT-PCR）检测视网膜组织中白细胞介素-6（IL-6）、IL-1β、肿瘤坏死因子（TNF-α）及早期生长反应因子（Egr-l）、组织因子（TF）、纤溶酶原激活物抑制剂l（Serpine l）的基因表达;进一步采用酶联免疫实验（ELISA）检测血清中IL-1β、IL-6、TNF-α及TF、Serpine l的量。结果与对照组相比,模型组小鼠视网膜组织伊文思蓝渗漏量明显增加,EEDC能够减少视网膜组织伊文思蓝渗透量;EEDC能够显著降低模型小鼠视网膜组织中增加的IL-1β、IL-6、TNF-α及TF、Serpine l的基因表达;EEDC能够明显下调模型小鼠血清中增加的IL-1β、IL-6、TNF-α及TF、Serpine l的量。结论 EEDC具有改善STZ诱导小鼠NPDR的作用,其机制为通过抑制NPDR小鼠视网膜和血清中增加的炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α以及与凝血/纤溶相关基因TF、Serpine l的基因表达,缓解BRB的破坏,从而发挥改善NPDR的作用。

关键词：鼓槌石斛糖尿病非增殖性糖尿病视网膜病变血视网膜屏障炎性因子

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基于高效薄层色谱-电喷雾质谱联用技术建立苦参和山豆根专属性特征图谱

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药学学报 2023年第10期58卷 3090-3098页

作者：李凡谷丽华金武燮李林楠韩竹箴杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

苦参为苦参Sophora flavescens Ait.的干燥根,山豆根为越南槐Sophora tonkinensis Gagnep.的干燥根和根茎,两者均来自豆科槐属,成分和功效相似而有差异,现有标准仅显示其生物碱类成分差异性难以体现,不利于两味药材的质量控制。本研究... 详细信息

苦参为苦参Sophora flavescens Ait.的干燥根,山豆根为越南槐Sophora tonkinensis Gagnep.的干燥根和根茎,两者均来自豆科槐属,成分和功效相似而有差异,现有标准仅显示其生物碱类成分差异性难以体现,不利于两味药材的质量控制。本研究利用高效薄层色谱技术多维度多层次分析优势,对供试品制备方法和色谱参数进行优化,整体展现苦参和山豆根共有和差异性特征成分。利用薄层色谱-电喷雾质谱(HPTLC-ESI-MS)在线鉴定技术对特征条带中化学成分进行快速鉴定,并导向分离获得部分单体成分。结果从苦参与山豆根中共发现17个主要特征条带,除了3个已知成分,采用HPTLC-ESI-MS鉴定出另12个未知成分,包括1种生物碱和11种黄酮成分,后采用对照品对照或分离后经核磁共振波谱解析对鉴定结果进行了验证。最后采用优化后的色谱方法,为苦参和山豆根建立了同一的薄层色谱专属性鉴别方法。HPTLC-ESI-MS联用技术兼具薄层色谱简便、直观和整体性,能快速鉴定目标成分结构。建立的特征图谱直观反映药材整体特征和特异性,为其他同属、易混药材的分析鉴别提供了参考。

关键词：苦参山豆根高效薄层色谱高效薄层色谱-质谱黄酮

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不同基原芍药制备的黄芩汤治疗溃疡性结肠炎药效对比研究

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中国中药杂志 2021年第24期46卷 6395-6402页

作者：杨婧怡杜康杨莉王峥涛王瑞石燕红上海中医药大学中药学院上海201203 上海中医药大学交叉科学研究院上海201203 上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海201203 上海中医药大学中医药国际标准化研究所上海201203

黄芩汤为《伤寒论》中经典治痢名方,现代临床主要用于治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)。黄芩汤中以芍药记载,未明确白芍或赤芍,临床上两者均有应用。虽白芍和赤芍基原相近,主成分类似,但两者药性与功效不同,是否能引起黄芩汤... 详细信息

黄芩汤为《伤寒论》中经典治痢名方,现代临床主要用于治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)。黄芩汤中以芍药记载,未明确白芍或赤芍,临床上两者均有应用。虽白芍和赤芍基原相近,主成分类似,但两者药性与功效不同,是否能引起黄芩汤治疗UC药效差异未见系统比较研究。该研究以不同芍药(白芍、北赤芍和川赤芍)分别制备黄芩汤,采用葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠溃疡性结肠炎模型,从动物行为学、病理切片和细胞因子表达水平同步评价和比较不同芍药对经方黄芩汤整体药效的影响,从而来确定黄芩汤中芍药的确切基原。结果表明不同芍药制备的黄芩汤均能改善葡聚糖硫酸钠诱导的UC小鼠相关症状,与黄芩汤(白芍)相比,黄芩汤(北赤芍)和黄芩汤(川赤芍)在UC小鼠体质量降低率、结肠长度、病理损伤评分上均有显著差异,但黄芩汤(北赤芍)和黄芩汤(川赤芍)间无明显差异。而黄芩汤(川赤芍)小鼠结肠组织病理形态改善最为明显,黏膜缺损情况较黄芩汤(北赤芍)和黄芩汤(白芍)均有显著改善。结合前期成分表征及含量配比比较结果,认为黄芩汤中芍药在治疗UC上以川赤芍最佳,可能与川赤芍中含有大量芍药单萜苷和没食子鞣酸类成分有关。该研究可为黄芩汤中芍药基原的准确确定及临床的精准用药提供科学依据。

关键词：多基原药材芍药黄芩汤溃疡性结肠炎药效比较

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利托那韦对菊三七致大鼠肝毒性的保护作用

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药学学报 2022年第2期57卷 392-398页

作者：陈岩叶铉玲王汛江杨莉熊爱珍王长虹王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

大量体外研究表明,吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloids,PAs)肝毒性与细胞色素酶P450(cytochrome P450,CYP)3A4密切相关,但尚未在整体水平得到证实。因此,本研究利用大鼠探讨CYP3A4化学抑制剂利托那韦对菊三七致肝损伤的影响。实... 详细信息

大量体外研究表明,吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloids,PAs)肝毒性与细胞色素酶P450(cytochrome P450,CYP)3A4密切相关,但尚未在整体水平得到证实。因此,本研究利用大鼠探讨CYP3A4化学抑制剂利托那韦对菊三七致肝损伤的影响。实验方案经上海中医药大学实验动物福利与伦理委员会审查,符合实验动物福利与伦理相关规范。大鼠单次灌胃菊三七提取物(8 g·kg^(-1))造成肝损伤模型,并设利托那韦(30 mg·kg^(-1))干预组、溶剂对照组和利托那韦对照组。结果表明,利托那韦对菊三七致大鼠肝损伤有明显的保护作用:利托那韦可明显降低肝损伤大鼠血清转氨酶活性及总胆汁酸水平,肝窦淤血、肝组织坏死等病理状态均有所缓解。进一步测定菊三七提取物给药后10 min~24 h内PAs致肝毒性生物标识物吡咯-蛋白结合物含量及主要胆汁酸的含量,发现利托那韦可明显降低血清吡咯-蛋白结合物含量,修复胆汁酸代谢紊乱。本研究表明,利托那韦可明显改善菊三七致大鼠肝损伤的情况,与抑制PAs代谢活化及调节胆汁酸代谢密切相关。研究结果加强了对CYP3A4酶与PAs毒性的相关性的理解,对于PAs临床疾病干预策略的开发以及含PAs药物临床用药安全的合理评估均具有重要意义。

关键词：吡咯里西啶生物碱代谢活化胆汁酸 CYP3A4 利托那韦肝毒性

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