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中药调心方对氧化损伤型类Alzheimer病大鼠线粒体呼吸链酶活性和钙稳态的影响

中国老年学杂志 2003年第6期23卷 364-366页

作者：金国琴邱宏张学礼戴薇薇赵伟康林水淼上海中医药大学基础医学院生化教研室上海200032 上海中医药大学老年医学研究所

目的　观察调心方对氧化损伤型类Alzheimer病 (AD)大鼠线粒体呼吸链酶活性和钙稳态的影响。方法　采用二羟延胡索酸 (DHF) +FeCl3+ADP左侧脑室注射法建立氧化损伤型类AD大鼠模型。Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力 ;Clark氧电极... 详细信息

目的　观察调心方对氧化损伤型类Alzheimer病 (AD)大鼠线粒体呼吸链酶活性和钙稳态的影响。方法　采用二羟延胡索酸 (DHF) +FeCl3+ADP左侧脑室注射法建立氧化损伤型类AD大鼠模型。Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力 ;Clark氧电极法观察脑皮层线粒体呼吸链氧化酶活性 ;原位杂交法观察脑皮层线粒体细胞色素氧化酶Ⅱ型亚基 (COⅡ )mRNA表达 ;Fura 2 /AM 荧光法测定脑皮层和海马Ca2 + 含量以及调心方对AD大鼠上述各项指标变化的影响。结果　与正常对照组比较 ,AD模型大鼠空间学习记忆能力、脑线粒体细胞色素氧化酶活性和皮层COⅡmRNA表达明显降低 ,皮层和海马神经元内Ca2 + 含量显著增高 ;调心方对上述各项指标有不同程度的改善作用。结论　调心方具有改善AD大鼠空间学习记忆能力、脑线粒体细胞色素氧化酶活性、皮层COⅡmRNA表达和钙稳态失衡的作用。

关键词：中药调心方氧化损伤型 Alzheimer病大鼠线粒体钙稳态细胞色素氧化酶活性

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骨髓间充质干细胞向肌成纤维细胞转化及一贯煎的影响

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中国实验方剂学杂志 2011年第22期17卷 123-126页

作者：闫晓风叶目亭杰刘会洋王晓玲上海中医药大学基础医学院生物教研室上海201203

目的:观察体外诱导骨髓间充质干细胞向肌成纤维细胞分化及一贯煎的影响。方法:骨髓间充质干细胞分离、培养和鉴定,取第3代细胞加入转化生长因子(TGF-β1 5μg.L-1)诱导定向分化。骨髓间充质干细胞随机分为正常组、TGF-β1诱导组,TGF-β... 详细信息

目的:观察体外诱导骨髓间充质干细胞向肌成纤维细胞分化及一贯煎的影响。方法:骨髓间充质干细胞分离、培养和鉴定,取第3代细胞加入转化生长因子(TGF-β1 5μg.L-1)诱导定向分化。骨髓间充质干细胞随机分为正常组、TGF-β1诱导组,TGF-β1诱导加一贯煎组,2周后通过免疫荧光、实时定量PCR法检测骨髓间充质干细胞分化情况及一贯煎的影响。结果:骨髓间充质干细胞鉴定结果显示CD44强阳性表达,CD29弱阳性表达。TGF-β1诱导后,免疫荧光及实时定量PCR均显示TGF-β1诱导组细胞α-SMA阳性表达,一贯煎组细胞α-SMA表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:经体外诱导骨髓间充质干细胞可以向肌成纤维细胞分化,一贯煎可阻止骨髓间充质干细胞向肌成纤维细胞分化。

关键词：骨髓间充质干细胞转化生长因子-β1 肌成纤维细胞一贯煎

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补肾方药对老年大鼠BDNF介导的信号通路关键分子表达的影响

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中华中医药杂志 2013年第5期28卷 1309-1312页

作者：康湘萍金国琴梁超龚张斌张学礼戴薇薇上海中医药大学基础医学院生化教研室上海201203

目的:观察左归丸、右归丸对老年大鼠学习记忆相关信号分子脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸蛋白激酶B(TrkB)、细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、反应结合蛋白(CREB)、活性调节细胞骨架蛋白(Arc)及突触蛋白(Synapsin)mRNA表达的影响。方法:... 详细信息

目的:观察左归丸、右归丸对老年大鼠学习记忆相关信号分子脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸蛋白激酶B(TrkB)、细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、反应结合蛋白(CREB)、活性调节细胞骨架蛋白(Arc)及突触蛋白(Synapsin)mRNA表达的影响。方法:以自然衰老SD雄性大鼠为动物模型,随机分为老年对照组、老年糖皮质激素拮抗组、老年左归组和老年右归组,另设青年对照组。采用原位杂交法检测海马各分区TrkB mRNA表达变化,实时定量PCR法观察海马组织BDNF、ERK1/2、CREB、Arc及Synapsin mRNA表达变化。结果:与青年对照组比较,老年大鼠海马上述分子mRNA表达均明显降低(P<0.05);与老年对照组比较,RU38486能明显上调老年大鼠海马CA1区TrkB mRNA表达,提高海马组织ERK1/2、Arc及Synapsin mRNA表达(P<0.05);左归丸及右归丸均能明显上调老年大鼠海马CA1、CA2-3分区TrkB mRNA表达(P<0.05),同时左归丸还能显著提高老年大鼠海马组织Arc及Synapsin mRNA表达(P<0.05)。3种药物对其余信号分子的表达均存在一定的上调作用,但无统计学差异。结论:左归丸、右归丸及RU38486可能通过改善学习记忆相关信号分子的异常表达,进而提高长时程增强效应和延缓老年大鼠学习记忆能力的退化。

关键词：老年大鼠补肾方药脑源性神经营养因子信号转导糖皮质激素受体

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左归丸对骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的影响

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时珍国医国药 2017年第12期28卷 2837-2840页

作者：康湘萍梁超蒋嘉烨许言午金晔华金国琴上海中医药大学基础医学院生化教研室上海201203 上海中医药大学基础医学院实验中医学教研室上海201203 上海中医药大学教学实验中心上海201203

目的观察左归丸药物血清对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经样细胞分化的影响。方法采用全骨髓贴壁培养法原代培养、传代培养BMSCs;观察细胞形态,采用免疫细胞化学染色及流式细胞术检测细胞表面CD90、CD29、CD34和CD45表达以鉴定BMSCs... 详细信息

目的观察左归丸药物血清对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经样细胞分化的影响。方法采用全骨髓贴壁培养法原代培养、传代培养BMSCs;观察细胞形态,采用免疫细胞化学染色及流式细胞术检测细胞表面CD90、CD29、CD34和CD45表达以鉴定BMSCs;分别使用β-巯基乙醇及左归丸药物血清诱导BMSCs向神经样细胞分化,采用Western blot法检测诱导后神经标志蛋白(Nestin、NSE、GFAP)表达。结果培养至第3代的骨髓间充质干细胞,CD90、CD29表达阳性,CD34和CD45表达阴性;分别经β-巯基乙醇、左归丸药物血清诱导后,BMSCs可见典型的神经元样改变,神经标志蛋白(Nestin、NSE、GFAP)表达均显著增高(P<0.05)。结论左归丸药物血清可以诱导大鼠BMSCs分化,且分化细胞具备神经细胞的形态及特征,该研究为临床治疗提供了新思路、新方法;但是诱导过程中的作用机制还不清楚,有待进一步的研究。

关键词：左归丸骨髓间充质干细胞原代培养神经样细胞分化

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去卵巢大鼠全身肌肉、脂肪和雌二醇含量与骨密度的相关性及补肾健脾穴位针刺的调节作用

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中华中医药杂志 2020年第1期35卷 434-436页

作者：原淳淳艾尔扎提·艾尔宝王达宝杨飞宇张云龙赵英侠上海中医药大学基础医学院上海201203 上海中医药大学基础医学院组织胚胎学教研室上海201203

目的:探讨绝经后骨质疏松症的发生与全身肌肉、脂肪变化的关系及针刺的作用。方法:6月龄雌性SD大鼠去除双侧卵巢后第4天,取补肾健脾、通经活络穴位肾俞、脾俞、足三里(均双侧)及大椎针刺3个疗程,以骨密度检测仪prodigy测定全身骨密度(B... 详细信息

目的:探讨绝经后骨质疏松症的发生与全身肌肉、脂肪变化的关系及针刺的作用。方法:6月龄雌性SD大鼠去除双侧卵巢后第4天,取补肾健脾、通经活络穴位肾俞、脾俞、足三里(均双侧)及大椎针刺3个疗程,以骨密度检测仪prodigy测定全身骨密度(BMD)、肌肉和脂肪含量,以ELISA法测定血清雌二醇(E2)含量,以Western Blot技术测定双侧股四头肌肌球蛋白重链(MHC)蛋白表达水平,以假手术组和模型组作为对照。结果:与假手术组比较,模型组大鼠全身BMD和肌肉含量呈下降趋势,脂肪与E2含量明显升高(P<0.05),MHC蛋白呈高表达趋势;与模型组比较,针刺组全身BMD和肌肉含量呈上升趋势,脂肪与E2含量明显降低(P<0.01,P<0.05),MHC蛋白呈低表达(P<0.05)。结论:绝经后骨质疏松症的发生与肌肉减少、脂肪增加密切相关,针刺具有良性调节作用。

关键词：骨质疏松症去势大鼠补肾健脾针刺骨肉不相亲肌肉脂肪骨密度

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麦角甾苷通过PI3K/Akt/GSK3β通路抑制H_2O_2诱导的小鼠胚胎肝细胞凋亡

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中国细胞生物学学报 2017年第1期39卷 13-20页

作者：赵培叶杰闫晓风王晓玲上海中医药大学基础医学院公共实验平台上海201203 上海中医药大学基础医学院生物教研室上海201203

该文建立了H_2O_2诱导小鼠胚胎肝细胞损伤模型,并探讨了麦角甾苷通过PI3K/Akt/GSK3β通路抑制H_2O_2诱导的胚胎肝细胞凋亡作用机制。CCK-8检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测Bcl-x L、Bax、Cyt-c、Akt、p-Akt、G... 详细信息

该文建立了H_2O_2诱导小鼠胚胎肝细胞损伤模型,并探讨了麦角甾苷通过PI3K/Akt/GSK3β通路抑制H_2O_2诱导的胚胎肝细胞凋亡作用机制。CCK-8检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测Bcl-x L、Bax、Cyt-c、Akt、p-Akt、GSK3β和p-GSK3β蛋白质水平。结果显示,麦角甾苷可通过降低Bax/Bcl-x L比值、抑制线粒体Cyt-c释放、增加Akt和GSK3β蛋白质磷酸化水平来提高细胞存活率、减少凋亡细胞数量。该研究结果表明,麦角甾苷可通过PI3K/Akt/GSK3β通路调节H_2O_2诱导的小鼠胚胎肝细胞凋亡。

关键词：麦角甾苷过氧化氢细胞凋亡

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左归丸和右归丸对皮质酮所致大鼠海马神经细胞病理模型学习记忆相关信号转导分子mRNA表达的影响

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中国老年学杂志 2010年第5期30卷 622-625页

作者：赵新永金国琴顾翠英戴薇薇徐品初上海中医药大学基础医学院生化教研室上海201203 上海中医药大学医技学院营养学教研室上海中医药大学附属曙光医院中医内科实验室

目的观察左归丸和右归丸含药鼠血清对皮质酮所致大鼠海马神经细胞病理模型学习记忆相关信号转导分子mRNA表达的影响。方法以新生24h乳鼠海马组织为材料,体外原代培养细胞,用高浓度皮质酮(10-4mol/L)处理细胞制作大鼠海马病理细胞模型。... 详细信息

目的观察左归丸和右归丸含药鼠血清对皮质酮所致大鼠海马神经细胞病理模型学习记忆相关信号转导分子mRNA表达的影响。方法以新生24h乳鼠海马组织为材料,体外原代培养细胞,用高浓度皮质酮(10-4mol/L)处理细胞制作大鼠海马病理细胞模型。采用倒置显微镜观察细胞形态变化,FDA/PI荧光双染法观察细胞存活情况,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,实时定量PCR法观察与学习记忆相关的信号转导分子BDNF、CaMKⅡ、ERK、CREBmRNA的表达变化,及补肾方药左归丸和右归丸的改善作用。结果与空白对照组相比,皮质酮模型组神经细胞树突和轴突变细、细胞活力下降,死亡细胞明显增多,及BDNF、CaMKⅡ、ERK、CREB等信号转导分子的mRNA表达下调;而左归丸和右归丸含药鼠血清可明显改善模型组细胞上述各项指标的异常变化。结论左归丸和右归丸鼠血清能够保护大鼠海马神经细胞免遭高浓度皮质酮的损伤作用,改善模型细胞学习记忆相关信号转导分子mRNA的表达。

关键词：海马神经细胞皮质酮补肾方药学习记忆相关信号分子

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益气聪明汤及其拆方对氧化型低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用

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中药药理与临床 2009年第6期25卷 3-6页

作者：姚领爱金国琴柯晓飞徐品初戴薇薇夏花英上海中医药大学基础医学院生化教研室上海中医药大学附属曙光医院上海201203

目的:观察益气聪明汤及其拆方对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤血管内皮细胞(ECV-304)的保护作用并初探其作用机制。方法:以体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304为研究对象,以浓度为100μg/ml的ox-LDL制造氧化损伤细胞模型,然后分别... 详细信息

目的:观察益气聪明汤及其拆方对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤血管内皮细胞(ECV-304)的保护作用并初探其作用机制。方法:以体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304为研究对象,以浓度为100μg/ml的ox-LDL制造氧化损伤细胞模型,然后分别加入益气聪明汤或其拆方的药物鼠血清进行培养,最后通过法检测细胞存活率、细胞裂解液中MDA含量、细胞上清中LDH活性,及检测调亡相关基因bcl-2、bax的mRNA表达来观察各药方对模型细胞上述各项指标变化的影响。结果:在100μg/ml的ox-LDL作用24小时后,内皮细胞存活率下降、细胞裂解液中MDA含量上升、细胞上清液中LDH活性上升,bcl-2mRNA表达下调而baxmRNA表达上调,内皮细胞增殖被明显抑制而其凋亡增加。益气聪明汤及其拆方的药物鼠血清能不同程度地使模型细胞LDH活性和MDA含量降低、bcl-2mRNA表达上调而baxmRNA表达下调,使得内皮细胞存活率由明显提高。结论:益气聪明汤及其拆方可通过程度不同地拮抗细胞氧化损伤,提高细胞生长活力并抑制其凋亡,发挥对血管内皮细胞的保护作用。

关键词：益气聪明汤氧化型低密度脂蛋白血管内皮细胞氧化损伤增殖凋亡

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美沙拉秦干预下IBD小鼠结肠组织的转录组分析

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中国实验动物学报 2022年第1期30卷 7-16页

作者：王怡如周唯蒋笑影潘一滨许言午曹永清上海中医药大学附属龙华医院肛肠科上海200032 上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203

目的应用转录组测序技术(RNA sequencing,RNA-seq)检测炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)小鼠结肠组织的基因表达变化,增进对美沙拉秦(5-aminosalicylic acid,5-ASA)治疗IBD的分子机制的理解。方法用葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)建立IBD小鼠模型。将15只C57BL/6小鼠随机均分为三组:对照组、DSS组和DSS+5-ASA组。每组随机选择3只小鼠取结肠组织进行测序,经两组间比较,鉴定差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)及重要生物学信号通路。随后通过基因表达数据库(gene expression omnibus,GEO)中溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者和经美沙拉秦治疗后患者结肠组织活检的微阵列(microarray)数据,验证前面鉴定得到的子显著DEGs。结果DSS+5-ASA组与DSS组比较中共得到2983个差异表达基因,上调基因604个,下调基因753个;DSS组与对照组比较,共得到1626个差异表达基因,其中上调基因820个,下调基因806个。GO(gene ontology)和KEGG富集分析结果显示,这些DEGs与免疫反应等信号通路有关。部分表达差异显著的基因如Rnase1和Cxcl10,在UC患者结肠组织中有相似的表达趋势。结论经美沙拉秦治疗的IBD模型小鼠结肠组织的基因表达谱,与IBD患者对比进行验证,得到数个IBD治疗过程中可能涉及的基因和生物学通路,增加了美沙拉秦对IBD治疗作用机制的进一步理解。

关键词：炎症性肠病美沙拉秦葡聚糖硫酸钠转录组测序差异表达基因

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针刺血清对体外培养破骨细胞凋亡的影响

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中国老年学杂志 2007年第6期27卷 515-517页

作者：赵英侠王静秦逸人王奕徐维蓉余安胜上海中医药大学基础医学院组织胚胎学教研室上海201203

目的观察正常大鼠及去卵巢模型大鼠针刺血清对体外培养新生大鼠破骨细胞凋亡的影响。方法将60只12月龄雌性SD大鼠随机分为正常针刺组、正常对照组、假手术组、模型组、针刺预防组和针刺治疗组,制备针刺血清和对照血清。自新生SD大鼠四... 详细信息

目的观察正常大鼠及去卵巢模型大鼠针刺血清对体外培养新生大鼠破骨细胞凋亡的影响。方法将60只12月龄雌性SD大鼠随机分为正常针刺组、正常对照组、假手术组、模型组、针刺预防组和针刺治疗组,制备针刺血清和对照血清。自新生SD大鼠四肢长骨分离破骨细胞,加含10%针刺血清或对照血清的DMEM培养液培养48h后,流式细胞术检测破骨细胞凋亡情况。结果与正常对照组大鼠血清比较,正常针刺组血清使破骨细胞凋亡率提高0.6%。模型组与假手术组比较,破骨细胞凋亡率降低4.0%,针刺预防组和针刺治疗组与模型组比较,破骨细胞凋亡率分别提高了5.4%和1.5%。结论针刺具有促进破骨细胞凋亡的作用。

关键词：针刺疗法绝经后骨质疏松症破骨细胞培养凋亡血清药理学

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