检索结果-内蒙古大学图书馆

中药药理与临床 2022年第1期38卷 110-118页

作者：李文标徐缘博沈隽吉殷宇晴张学礼姚领爱康湘萍许言午上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203

目的:基于网络药理学和分子对接技术探讨黄芪拮抗阿霉素心肌损伤“多成分-多靶点-多途径”的整体药理作用特征和具体机制,并选取JNK和凋亡信号通路进行细胞水平实验验证。方法:以网络药理学为手段,通过中药系统药理学数据库与分析平台(T... 详细信息

目的:基于网络药理学和分子对接技术探讨黄芪拮抗阿霉素心肌损伤“多成分-多靶点-多途径”的整体药理作用特征和具体机制,并选取JNK和凋亡信号通路进行细胞水平实验验证。方法:以网络药理学为手段,通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索并筛选黄芪的活性成分,并结合PharmMapper获取其对应的靶点;通过GeneCards、OMIM、DrugBank和PharmGKB数据库检索阿霉素心肌损伤相关靶点;对交集靶点通过STRING数据库与Cytoscape软件构建“黄芪有效成分-靶点”网络及“蛋白质-蛋白质互作”网络并依据拓扑学分析进行核心网络筛选;通过R软件对核心网络基因进行GO和KEGG富集分析;利用Cytoscape软件构建“信号通路-靶点”网络并根据连接度筛选核心靶点;利用AutoDock软件进行目标成分与关键靶点的分子对接,采用PyMOL软件对最优结果进行可视化。采用Western blot法验证炙黄芪对阿霉素诱导的AC16细胞JNK、c-Jun、c-Fos蛋白表达及其磷酸化水平和凋亡相关蛋白Caspase-3、BAX和BCL-2表达与活化的调控作用。结果:筛选出黄芪活性成分33个,对应280个无重靶点;获得阿霉素心肌损伤相关基因1368个;二者交集靶点为138个,映射了黄芪25个有效成分;“黄芪有效成分-靶点”网络中靶点最多的前10位成分为槲皮素、山柰酚、芒柄花黄素、7-O-甲基异丁香酚、异鼠李素、毛蕊异黄酮、(Z)-1-(2,4-二羟基苯基)-3-(4-羟基苯基)丙基-2-烯-1-酮、黄芪甲苷I、黄芪甲苷IV、3,9-二-O-黄芪紫檀烷。由STRING数据库对交集靶点构建的PPI网络经拓扑学筛选得到了包括MAPK8、MAPK1、AKT1、MAPK14等23个靶点构成的核心PPI网络;对核心网络靶点的GO分析得到1806个条目,KEGG分析共富集到包括MAPK信号通路、TNF信号通路、凋亡信号通路等137条通路。“信号通路-靶点”网络结果显示,MAPK8、MAPK1、AKT1、MAPK14为具有最高连接度的核心靶点。分子对接显示,黄芪靶点最多的前10位有效成分与4个核心靶点的结合能均<-7.0 kcal/mol。炙黄芪400、500μg/mL可明显增加损伤的心肌组织的存活率,Western blot结果显示,与阿霉素组相比,给予炙黄芪处理后损伤的心肌细胞p-JNK/JNK、p-c-Jun/c-Jun、p-c-Fos/c-Fos、BAX和cleaved-Caspase-3/Caspase-3表达明显下调(P<0.05或P<0.01),BCL-2表达明显上调(P<0.05)。结论:黄芪可通过多种机制拮抗阿霉素心肌损伤,其多种成分通过作用于MAPK信号通路中多个核心基因而抑制心肌细胞凋亡,这可能是黄芪发挥对阿霉素损伤心肌保护作用的主要机制。

关键词：黄芪阿霉素心肌损伤网络药理学分子对接实验验证

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甘麦大枣汤加味对抑郁症模型大鼠海马-HPA轴的调节作用

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中国老年学杂志 2012年第24期32卷 5450-5452页

作者：张晟戴薇薇张学礼金国琴夏花英上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203

目的探讨甘麦大枣汤加味对模型大鼠海马-HPA轴的调节作用。方法以孤养加慢性不可预见性温和刺激制作抑郁症模型大鼠,放免法检测大鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)含量,RT-PCR法检测大鼠海马糖皮质激素受体(GR)、脑源性神经... 详细信息

目的探讨甘麦大枣汤加味对模型大鼠海马-HPA轴的调节作用。方法以孤养加慢性不可预见性温和刺激制作抑郁症模型大鼠,放免法检测大鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)含量,RT-PCR法检测大鼠海马糖皮质激素受体(GR)、脑源性神经营养因子(BD-NF)mRNA表达。并以西药文拉法辛为对照,观察甘麦大枣汤加味对上述各项指标的影响。结果模型组大鼠垂体重/体重、血浆ACTH、CORT含量显著增高(P<0.05),海马GR、BDNF mRNA表达降低;与模型大鼠比较,西药组与中药组大鼠血浆CORT含量显著下降(P<0.05),血浆ACTH含量有下降趋势,海马GR、BDNF mRNA表达增高。结论甘麦大枣汤加味与文拉法辛通过对海马保护作用,抑制HPA轴过度亢进,从而纠正模型大鼠行为学异常。

关键词：抑郁症慢性不可预见性温和刺激海马下丘脑-垂体-肾上腺轴甘麦大枣汤

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补肾方药对老年大鼠血清皮质酮含量、LTP及空间学习记忆能力的影响

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中国老年学杂志 2011年第24期31卷 4815-4818页

作者：康湘萍金国琴董献文龚张斌徐品初上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203 上海中医药大学基础医学院生理学教研室上海中医药大学附属曙光医院

目的观察补肾方药(左归丸、右归丸)对老年大鼠血清皮质酮水平、海马长时程增强(LTP)及空间学习记忆能力的影响。方法以自然衰老(24月龄)SD雄性大鼠为动物模型,随机分为老年对照组、老年皮质酮(GC)拮抗组、老年左归组和老年右归组,另设... 详细信息

目的观察补肾方药(左归丸、右归丸)对老年大鼠血清皮质酮水平、海马长时程增强(LTP)及空间学习记忆能力的影响。方法以自然衰老(24月龄)SD雄性大鼠为动物模型,随机分为老年对照组、老年皮质酮(GC)拮抗组、老年左归组和老年右归组,另设青年对照组。采用ELISA法检测大鼠血清皮质酮含量,Morris水迷宫法观察各组大鼠空间学习记忆能力,电生理方法记录在体大鼠LTP变化;同时观察补肾方药对上述指标异常变化的改善作用。结果与青年对照组相比,老年对照组大鼠的血清皮质酮含量明显升高(P<0.05),空间学习记忆能力显著下降,海马CA1区LTP明显受到抑制(P<0.05);补肾方药左归丸、右归丸能不同程度地改善上述指标的异常变化。结论补肾方药左归丸、右归丸改善老年大鼠空间学习记忆能力的机制之一可能与拮抗高皮质酮对老年大鼠空间学习记忆的损伤有关,其余相关分子机制有待进一步研究。

关键词：老年大鼠皮质酮学习记忆 LTP 补肾方药

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抑郁症模型大鼠海马受体、离子通道基因表达谱变化及甘麦大枣汤加味的调节作用

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中药药理与临床 2011年第6期27卷 6-10页

作者：张学礼戴薇薇金国琴夏花英姚领爱龚张斌康湘萍黎志萍张丽娜张晟上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203

目的:探讨抑郁症模型大鼠海马受体、离子通道基因表达谱变化及甘麦大枣汤加味的调节作用。方法:以孤养加慢性不可预见性温和刺激制作抑郁症模型大鼠,通过旷场行为测定和饮水试验观察大鼠行为学变化,采用基因芯片技术检测大鼠海马各类受... 详细信息

目的:探讨抑郁症模型大鼠海马受体、离子通道基因表达谱变化及甘麦大枣汤加味的调节作用。方法:以孤养加慢性不可预见性温和刺激制作抑郁症模型大鼠,通过旷场行为测定和饮水试验观察大鼠行为学变化,采用基因芯片技术检测大鼠海马各类受体mRNA表达,RT-PCR法检测大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达。并以文拉法辛为对照,观察甘麦大枣汤加味对上述各项指标的影响。结果:模型组大鼠水平运动、垂直活动及糖水消耗量显著下降(P<0.01),海马单胺类(DA、5-HT、NE)、氨基酸类(NMDA、GABA、Gly)、神经肽类(AT、AVP)受体亚型表达下调,BDNF mRNA表达显著下降(P<0.05);与模型组比较,甘麦大枣汤加味23g/kg与文拉法辛25mg/kg大鼠水平运动、垂直活动及糖水消耗量显著上升(P<0.01),海马单胺类(DA、5-HT、NE)、氨基酸类(NMDA、GABA、Gly)、神经肽类(AT、AVP)受体亚型表达上调,BDNF mRNA表达显著增加(P<0.01)。结论:甘麦大枣汤加味与文拉法辛可上调海马单胺类、氨基酸类、神经肽类受体亚型,改善细胞信号转导途径功能,增加BDNF表达,从而纠正模型大鼠行为学异常。

关键词：甘麦大枣汤加味抑郁症慢性不可预见性温和刺激神经递质受体信号转导

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美沙拉秦干预下IBD小鼠结肠组织的转录组分析

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中国实验动物学报 2022年第1期30卷 7-16页

作者：王怡如周唯蒋笑影潘一滨许言午曹永清上海中医药大学附属龙华医院肛肠科上海200032 上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203

目的应用转录组测序技术(RNA sequencing,RNA-seq)检测炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)小鼠结肠组织的基因表达变化,增进对美沙拉秦(5-aminosalicylic acid,5-ASA)治疗IBD的分子机制的理解。方法用葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)建立IBD小鼠模型。将15只C57BL/6小鼠随机均分为三组:对照组、DSS组和DSS+5-ASA组。每组随机选择3只小鼠取结肠组织进行测序,经两组间比较,鉴定差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)及重要生物学信号通路。随后通过基因表达数据库(gene expression omnibus,GEO)中溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者和经美沙拉秦治疗后患者结肠组织活检的微阵列(microarray)数据,验证前面鉴定得到的子显著DEGs。结果DSS+5-ASA组与DSS组比较中共得到2983个差异表达基因,上调基因604个,下调基因753个;DSS组与对照组比较,共得到1626个差异表达基因,其中上调基因820个,下调基因806个。GO(gene ontology)和KEGG富集分析结果显示,这些DEGs与免疫反应等信号通路有关。部分表达差异显著的基因如Rnase1和Cxcl10,在UC患者结肠组织中有相似的表达趋势。结论经美沙拉秦治疗的IBD模型小鼠结肠组织的基因表达谱,与IBD患者对比进行验证,得到数个IBD治疗过程中可能涉及的基因和生物学通路,增加了美沙拉秦对IBD治疗作用机制的进一步理解。

关键词：炎症性肠病美沙拉秦葡聚糖硫酸钠转录组测序差异表达基因

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胆固醇诱导人血管平滑肌细胞表型转化

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第7期30卷 725-728,731页

作者：束波杨一峻钱民章上海中医药大学上海200032 遵义医学院生物化学教研室贵州遵义563003

目的观察胆固醇对人血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化的影响。方法体外培养人血管平滑肌细胞株,分别用(12.5、25.0、50.0)mg/L浓度的胆固醇作用细胞48 h;50.0 mg/L的胆固醇分别作用细胞24、48、72 h。采用实时定量PCR检测VSMC中α-平滑肌... 详细信息

目的观察胆固醇对人血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化的影响。方法体外培养人血管平滑肌细胞株,分别用(12.5、25.0、50.0)mg/L浓度的胆固醇作用细胞48 h;50.0 mg/L的胆固醇分别作用细胞24、48、72 h。采用实时定量PCR检测VSMC中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及平滑肌22α(SM22α)mRNA的表达;采用Western blot法检测胆固醇对VSMC中α-SMA、SM22α及单核细胞趋化蛋白-1诱导蛋白(MCPIP)表达的影响;CCK-8法检测VSMC增殖。结果 (12.5、25.0、50.0)mg/L胆固醇作用VSMC 48 h较对照组相比,α-SMA及SM22αmRNA水平及蛋白水平表达均降低(P<0.05),50.0 mg/L胆固醇作用后表达水平最低,存在剂量依赖效应;用50.0 mg/L胆固醇分别作用VSMC 48、72 h后,α-SMA及SM22αmRNA及蛋白表达与对照组相比均降低(P<0.05)。与对照组相比,胆固醇作用均明显促进VSMC增殖(P<0.05)。50.0 mg/L胆固醇作用VSMC48 h可诱导MCPIP蛋白表达增加。结论胆固醇作用VSMC后可降低收缩型标志蛋白α-SMA及SM22α的表达、促进VSMC增殖,提示胆固醇可诱导VSMC表型转化。

关键词：平滑肌细胞胆固醇表型转化

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基于网络药理学及实验验证探讨甘草苷治疗帕金森病的作用机制

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世界科学技术-中医药现代化 2023年第5期25卷 1689-1701页

作者：曲欣妮李文标王利沈隽吉殷宇晴徐缘博何建成许言午上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海中医药大学基础医学院中医诊断教研室上海市健康辨识与评估重点实验室上海201203

目的应用网络药理学方法预测和分析甘草苷治疗帕金森病的作用机制,并选取凋亡信号通路进行细胞水平实验验证。方法从BATMAN-TCM、PharmMapper、SEA、SuperPred、SwissTargetPrediction等数据库获取甘草苷的作用靶点,从OMIM、GeneCards、... 详细信息

目的应用网络药理学方法预测和分析甘草苷治疗帕金森病的作用机制,并选取凋亡信号通路进行细胞水平实验验证。方法从BATMAN-TCM、PharmMapper、SEA、SuperPred、SwissTargetPrediction等数据库获取甘草苷的作用靶点,从OMIM、GeneCards、CTD等数据库获取帕金森病相关基因。将甘草苷的预测靶点和帕金森病相关基因取交集,通过Cytoscape软件利用交集靶点构建“药物-靶点-疾病”网络并进行可视化;运用Cytoscape软件的BisoGenet插件对交集靶点构建PPI网络,通过CytoNCA插件进行拓扑学计算并经度中心性(Degree centrality,DC)和中介中心性(Between centrality,BC)两步筛选获得核心PPI网络;采用R软件运行Bioconductor程序包进行GO和KEGG富集分析;运用Cytoscape软件构建“基因-通路”网络,筛选出网络的关键靶点,并将其与甘草苷进行分子对接;采用Western blot方法验证甘草苷对6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)诱导的SH-SY5Y细胞Caspase-3、Bax、Bcl-2、p-PI3K和p-AKT等凋亡通路关键蛋白表达与活化的调控作用。结果共获得甘草苷靶点343个,帕金森病相关基因1328个,二者交集靶点为46个;经拓扑学分析获得核心PPI网络,包含108个节点和2298条边;GO功能分析得到的1543个条目主要与凋亡调控、细胞周期与节律、DNA合成及分解代谢有关;凋亡、PI3K-AKT、NF-κB、TGF-β、HIF-1、FoxO等97条KEGG信号通路被显著富集;“基因-通路”中筛选的关键蛋白及分子对接结果显示TP53、AKT1及RELA可能是甘草苷治疗帕金森病的关键靶点;Western blot结果显示,与6-OHDA组相比,给与甘草苷处理后Bax和Cleaved-Caspase-3的表达水平明显减少(P<0.05),Bcl-2的表达水平显著增加(P<0.01);p-PI3K和p-AKT磷酸化水平明显增多(P<0.01)。结论网络药理学分析提示甘草苷可通过调控多种生物学过程和相关信号途径治疗帕金森病;细胞水平实验证明了甘草苷对6-OHDA损伤神经细胞的保护作用,并初步证实了其对凋亡信号通路的调控作用,为进一步阐明甘草苷治疗帕金森病的分子机制奠定了基础。

关键词：网络药理学甘草苷帕金森病机制凋亡

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水迷宫重复测量数据的方差分析及其在SPSS中的实现

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中西医结合学报 2007年第1期5卷 101-105页

作者：邱宏金国琴金如锋赵伟康上海中医药大学基础医学院预防医学与卫生统计学教研室上海201203 上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203 上海中医药大学老年医学研究所上海201203

目的:介绍用SPSS11.0实现对水迷宫重复测量资料的方差分析,以期对采用重复测量设计方案的临床和基础科研工作者提供可借鉴的统计学分析方法。方法:应用SPSS11.0中一般线性模型(generallinearmodel,GLM)的repeatedmeasures和multivariat... 详细信息

目的:介绍用SPSS11.0实现对水迷宫重复测量资料的方差分析,以期对采用重复测量设计方案的临床和基础科研工作者提供可借鉴的统计学分析方法。方法:应用SPSS11.0中一般线性模型(generallinearmodel,GLM)的repeatedmeasures和multivariate过程对水迷宫重复测量数据进行重复测量方差分析和多元方差分析,并进行不同时间点和不同组间的两两比较。结果:首先通过球形检验(Mauchly’stestofsphericity)的结果判断重复测量数据之间是否存在相关性,如存在相关性(P≤0.05),宜进行多元方差分析,或采用Greenhouse-Geisser的校正结果;通过计算个体间(between-subject)变异,可分析处理因素有无效应;计算个体内(within-subject)变异,可分析时间因素有无效应,时间与处理因素之间有无交互效应;使用重复测量数据多重比较配对的t检验法(Bonferroni法),可进行每个分组每个时间点上作用的两两比较;使用多元方差分析的方法,可进行每个时间点上每个分组之间作用的两两比较。结论:对于重复测量数据的方差分析,宜采用一般线性模型的重复测量过程方法进行分析。SPSS统计软件易于实现重复测量数据的方差分析。

关键词：方差分析统计学 SPSS 线性模型

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呼吸道合胞病毒肺炎患儿血清NRAV水平及临床意义

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中国微生态学杂志 2022年第12期34卷 1428-1431,1435页

作者：王刚郑静上海浦滨儿童医院儿内科上海200120 上海中医药大学基础医学院生物化学教研室

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎患儿血清中抗病毒应答负性调节因子(NRAV)的表达水平及临床意义。方法选取我院收治的RSV肺炎患儿100例作为RSV组,并将RSV肺炎患儿根据肺炎严重指数(PSI)分为低危组(62例)、中危组(24例)及高危组(14例)... 详细信息

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎患儿血清中抗病毒应答负性调节因子(NRAV)的表达水平及临床意义。方法选取我院收治的RSV肺炎患儿100例作为RSV组,并将RSV肺炎患儿根据肺炎严重指数(PSI)分为低危组(62例)、中危组(24例)及高危组(14例)。另选取同期于本院体检的102例健康儿童作为对照组。采用荧光定量PCR法检测血清NRAV水平,用肺功能仪检测受试儿童肺功能,采用Pearson法分析血清NRAV水平与RSV肺炎患儿肺功能的相关性;采用Logistics回归分析RSV肺炎患儿病情严重程度的影响因素;采用ROC曲线分析血清NRAV水平对RSV肺炎的诊断价值。结果RSV组患儿血清NRAV水平高于对照组,第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV_(1)%)及FEV_(1)/用力肺活量(FVC)均低于对照组(均P<0.05)。不同严重程度RSV肺炎患儿血清NRAV水平、FEV_(1)%及FEV_(1)/FVC比较差异有统计学意义(均P<0.05)。低危组、中危组、高危组RSV肺炎患儿血清NRAV水平依次升高,FEV_(1)%及FEV_(1)/FVC均依次下降,组间两两比较差异有统计学意义(均P<0.05)。RSV肺炎患儿血清NRAV水平与FEV_(1)%及FEV_(1)/FVC均呈负相关(均P<0.05)。Logistics分析显示,血清NRAV水平升高、FEV_(1)%及FEV_(1)/FVC水平下降均是影响RSV肺炎严重程度的独立危险因素(均P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清NRAV水平诊断RSV肺炎的曲线下面积为0.843,敏感度为76.0%,特异度为88.2%,最佳截断值为1.14。结论RSV肺炎患儿血清NRAV水平升高且随着疾病严重程度的加重而升高,其水平可反映肺功能,对RSV肺炎具有一定诊断价值。

关键词：呼吸道合胞病毒肺炎长链非编码RNA 抗病毒应答负性调节因子临床意义

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顺铂通过Notch4信号通路增强口腔鳞癌干细胞的自我更新能力

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中国肿瘤生物治疗杂志 2020年第5期27卷 487-495页

作者：贾怡婷孙博文上海中医药大学研究生院上海201203 上海健康医学院医学技术学院生物化学教研室上海201318 上海中医药大学上海201203

目的:研究Notch4信号通路对口腔鳞癌PJ15和PJ41细胞的肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)自我更新能力的影响及其作用机制。方法:利用TCGA数据库分析Notch4基因在头颈部肿瘤中的表达。2μmol/L顺铂处理口腔鳞癌PJ15和PJ41细胞48 h,再加入... 详细信息

目的:研究Notch4信号通路对口腔鳞癌PJ15和PJ41细胞的肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)自我更新能力的影响及其作用机制。方法:利用TCGA数据库分析Notch4基因在头颈部肿瘤中的表达。2μmol/L顺铂处理口腔鳞癌PJ15和PJ41细胞48 h,再加入Notch通路抑制剂DAPT作用24 h,采用流式细胞术检测CSC比例,Western blotting法和qPCR法检测CSC标志物(Sox2、Bmi-1、Oct4、Nanog)和Notch4信号通路中的下游基因(JAG1、HEY1、HEY2、HES1、HES2、DLL4等)的表达。采用siRNA技术敲降Notch4,Western blotting法和q PCR法检测si-Notch4和顺铂对CSC标志物表达水平的影响,干细胞成球实验检测CSC的自我更新能力。结果:头颈部肿瘤组织中Notch4基因呈高表达(P=0.046)。顺铂处理后,PJ15和PJ41细胞中NICD4和CSC标志物(Sox2、Bmi-1、Oct4、Nanog)和Notch4信号通路的下游基因(JAG1、HEY1、HEY2、HES1、HES2、DLL4)的表达水平较对照组均显著增加(均P<0.05),ALDH1阳性细胞群体比例显著增加(P<0.05);再加入Notch通路抑制剂DAPT作用24 h后上述基因表达量均显著下降(P<0.05或P<0.01)。敲降Notch4后,与对照组相比,si-Notch4组PJ15细胞[(1.33±0.47)vs(8.00±0.82)个,P<0.01]和PJ41细胞[(1.00±0.82)vs(7.67±1.25)个,P<0.01]球体的数量和大小均显著减少;再加入2μmol/L DDP作用24 h,si-Notch4组Nanog和Bmi-1基因表达量与对照组无显著差异。结论:激活Notch4信号通路可增加口腔鳞癌PJ15和PJ41细胞的干细胞自我更新能力。

关键词：口腔鳞癌 PJ15细胞 PJ41细胞肿瘤干细胞自我更新 Notch4 顺铂

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