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第十次中医药防治老年病学术交流会

作者：黎志萍夏花英康湘萍许言午张江虹上海中医药大学基础医学院生物化学教研室复旦大学放射医学研究所

目的观察自然衰老大鼠心肌组织HS/CSE系统变化及补肾方药的调整作用,为进一步研究HS系统与衰老的关系及补肾方药延缓衰老的分子机制奠定基础。方法以自然衰老雄性SD大鼠（24月龄）为模型,随机分为老年对照组、左归丸组、右归丸组,每组15... 详细信息

目的观察自然衰老大鼠心肌组织HS/CSE系统变化及补肾方药的调整作用,为进一步研究HS系统与衰老的关系及补肾方药延缓衰老的分子机制奠定基础。方法以自然衰老雄性SD大鼠（24月龄）为模型,随机分为老年对照组、左归丸组、右归丸组,每组15只,另设青年对照组（5月龄）15只,共4组。老年对照组大鼠常规喂养至24月龄。左归丸组、右归丸组大鼠自21月龄始,分别按相当于生药量4.97g/kg·d和4.94g/kg·d自由饮用稀释药液,连续3个月;采用实时定量PCR（Real-time PCR）和蛋白印迹（WesternBlot）观察大鼠心肌组织CSE mRNA和蛋白表达;采用敏感硫电极法测定HS含量和CSE活性。结果与青年大鼠相比老年大鼠心肌组织HS含量下降,CSE mRNA和蛋白表达上调,活性降低;与老年组相比左归丸组、右归丸组大鼠心肌组织HS含量升高,CSE mRNA和蛋白表达下降,活性升高。结论衰老大鼠心肌组织CSE活性降低,HS含量下降,使CSE表达增高;左归丸、右归丸可不同程度地使HS/CSE系统回复,发挥延缓衰老的作用。

关键词：衰老心肌 H2S/CSE系统补肾方药

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补肾方药对老年大鼠血清皮质酮含量、LTP及空间学习记忆能力的影响

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中国老年学杂志 2011年第24期31卷 4815-4818页

作者：康湘萍金国琴董献文龚张斌徐品初上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203 上海中医药大学基础医学院生理学教研室上海中医药大学附属曙光医院

目的观察补肾方药(左归丸、右归丸)对老年大鼠血清皮质酮水平、海马长时程增强(LTP)及空间学习记忆能力的影响。方法以自然衰老(24月龄)SD雄性大鼠为动物模型,随机分为老年对照组、老年皮质酮(GC)拮抗组、老年左归组和老年右归组,另设... 详细信息

目的观察补肾方药(左归丸、右归丸)对老年大鼠血清皮质酮水平、海马长时程增强(LTP)及空间学习记忆能力的影响。方法以自然衰老(24月龄)SD雄性大鼠为动物模型,随机分为老年对照组、老年皮质酮(GC)拮抗组、老年左归组和老年右归组,另设青年对照组。采用ELISA法检测大鼠血清皮质酮含量,Morris水迷宫法观察各组大鼠空间学习记忆能力,电生理方法记录在体大鼠LTP变化;同时观察补肾方药对上述指标异常变化的改善作用。结果与青年对照组相比,老年对照组大鼠的血清皮质酮含量明显升高(P<0.05),空间学习记忆能力显著下降,海马CA1区LTP明显受到抑制(P<0.05);补肾方药左归丸、右归丸能不同程度地改善上述指标的异常变化。结论补肾方药左归丸、右归丸改善老年大鼠空间学习记忆能力的机制之一可能与拮抗高皮质酮对老年大鼠空间学习记忆的损伤有关,其余相关分子机制有待进一步研究。

关键词：老年大鼠皮质酮学习记忆 LTP 补肾方药

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骨髓间充质干细胞向肌成纤维细胞转化及一贯煎的影响

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中国实验方剂学杂志 2011年第22期17卷 123-126页

作者：闫晓风叶目亭杰刘会洋王晓玲上海中医药大学基础医学院生物教研室上海201203

目的:观察体外诱导骨髓间充质干细胞向肌成纤维细胞分化及一贯煎的影响。方法:骨髓间充质干细胞分离、培养和鉴定,取第3代细胞加入转化生长因子(TGF-β1 5μg.L-1)诱导定向分化。骨髓间充质干细胞随机分为正常组、TGF-β1诱导组,TGF-β... 详细信息

目的:观察体外诱导骨髓间充质干细胞向肌成纤维细胞分化及一贯煎的影响。方法:骨髓间充质干细胞分离、培养和鉴定,取第3代细胞加入转化生长因子(TGF-β1 5μg.L-1)诱导定向分化。骨髓间充质干细胞随机分为正常组、TGF-β1诱导组,TGF-β1诱导加一贯煎组,2周后通过免疫荧光、实时定量PCR法检测骨髓间充质干细胞分化情况及一贯煎的影响。结果:骨髓间充质干细胞鉴定结果显示CD44强阳性表达,CD29弱阳性表达。TGF-β1诱导后,免疫荧光及实时定量PCR均显示TGF-β1诱导组细胞α-SMA阳性表达,一贯煎组细胞α-SMA表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:经体外诱导骨髓间充质干细胞可以向肌成纤维细胞分化,一贯煎可阻止骨髓间充质干细胞向肌成纤维细胞分化。

关键词：骨髓间充质干细胞转化生长因子-β1 肌成纤维细胞一贯煎

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抑郁症模型大鼠海马受体、离子通道基因表达谱变化及甘麦大枣汤加味的调节作用

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中药药理与临床 2011年第6期27卷 6-10页

作者：张学礼戴薇薇金国琴夏花英姚领爱龚张斌康湘萍黎志萍张丽娜张晟上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203

目的:探讨抑郁症模型大鼠海马受体、离子通道基因表达谱变化及甘麦大枣汤加味的调节作用。方法:以孤养加慢性不可预见性温和刺激制作抑郁症模型大鼠,通过旷场行为测定和饮水试验观察大鼠行为学变化,采用基因芯片技术检测大鼠海马各类受... 详细信息

目的:探讨抑郁症模型大鼠海马受体、离子通道基因表达谱变化及甘麦大枣汤加味的调节作用。方法:以孤养加慢性不可预见性温和刺激制作抑郁症模型大鼠,通过旷场行为测定和饮水试验观察大鼠行为学变化,采用基因芯片技术检测大鼠海马各类受体mRNA表达,RT-PCR法检测大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达。并以文拉法辛为对照,观察甘麦大枣汤加味对上述各项指标的影响。结果:模型组大鼠水平运动、垂直活动及糖水消耗量显著下降(P<0.01),海马单胺类(DA、5-HT、NE)、氨基酸类(NMDA、GABA、Gly)、神经肽类(AT、AVP)受体亚型表达下调,BDNF mRNA表达显著下降(P<0.05);与模型组比较,甘麦大枣汤加味23g/kg与文拉法辛25mg/kg大鼠水平运动、垂直活动及糖水消耗量显著上升(P<0.01),海马单胺类(DA、5-HT、NE)、氨基酸类(NMDA、GABA、Gly)、神经肽类(AT、AVP)受体亚型表达上调,BDNF mRNA表达显著增加(P<0.01)。结论:甘麦大枣汤加味与文拉法辛可上调海马单胺类、氨基酸类、神经肽类受体亚型,改善细胞信号转导途径功能,增加BDNF表达,从而纠正模型大鼠行为学异常。

关键词：甘麦大枣汤加味抑郁症慢性不可预见性温和刺激神经递质受体信号转导

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膜型IL-15联合RAE-1ε增强小鼠NK细胞的杀伤活性

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中国肿瘤生物治疗杂志 2011年第6期18卷 611-616页

作者：钱莉陆家辉傅奕郑月娟佟大可龚卫娟潘兴元季明春扬州大学医学院病原生物学与免疫学教研室江苏扬州225001 扬州大学医学院生物化学教研室江苏扬州225001 上海中医药大学免疫学与病原生物学教研室上海200433 第二军医大学附属长海医院骨科上海200433

目的:探讨视黄酸早期转录因子1ε(retinoic acid early transcript 1ε,RAE-1ε)和膜型IL-15对小鼠NK细胞杀伤功能的影响。方法:前期研究以小鼠原B淋巴细胞株BaF3为基础构建了3株BaF3工程细胞株,即表达膜型IL-15的BaF3/mb15细胞、表达RA... 详细信息

目的:探讨视黄酸早期转录因子1ε(retinoic acid early transcript 1ε,RAE-1ε)和膜型IL-15对小鼠NK细胞杀伤功能的影响。方法:前期研究以小鼠原B淋巴细胞株BaF3为基础构建了3株BaF3工程细胞株,即表达膜型IL-15的BaF3/mb15细胞、表达RAE-1ε的BaF3/RAE细胞和同时表达膜型IL-15和RAE-1ε的BaF3/mb15/RAE细胞。将γ射线灭活后的3株BaF3工程细胞株作为刺激细胞,分别刺激小鼠NK细胞。流式细胞术检测刺激后NK细胞表面分子的表达,胞内染色法检测NK细胞穿孔素和颗粒酶B的分泌,流式细胞术检测NK细胞对小鼠淋巴瘤YAC1细胞的杀伤活性。结果:与BaF3/mb15和BaF3/RAE细胞相比,BaF3/mb15/RAE细胞可有效上调NK细胞表面CD25、CD44、FasL和CD107a的表达,但对穿孔素和颗粒酶B的分泌没有明显刺激作用。当效靶比为20:1时,BaF3/mb15、BaF3/RAE和BaF3/mb15/RAE细胞刺激后NK细胞对靶细胞YAC1的杀伤率分别为(39.7±2.9)%、(45.3±2.3)%和(59.0±6.9)%,均高于BaF3组的(28.3±1.5)%(P<0.01),且BaF3/mb15/RAE组高于BaF3/mb15和BaF3/RAE组(P<0.05)。结论:膜型IL-15联合RAE-1ε可促进NK细胞活化并增强NK细胞的杀伤活性。

关键词：膜型IL-15 视黄酸早期转录因子1ε NK细胞 CD107a 淋巴瘤 YAC1细胞

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益母草水苏碱对大鼠心肌细胞肥大的肌浆网钙摄取及SERCA活性的影响

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中国实验方剂学杂志 2010年第7期16卷 118-122页

作者：孙祝美李华吕嵘赵培上海中医药大学基础医学院生物教研室上海201203

目的:探讨益母草水苏碱(stachydrine,Sta)对去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)诱导的新生大鼠心肌细胞肥大肌浆网钙摄取及SERCA活性的影响。方法:采用不同浓度的益母草水苏碱(10-4,10-5,10-6mol·L-1)对NE诱导的心肌肥大模型组进行干... 详细信息

目的:探讨益母草水苏碱(stachydrine,Sta)对去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)诱导的新生大鼠心肌细胞肥大肌浆网钙摄取及SERCA活性的影响。方法:采用不同浓度的益母草水苏碱(10-4,10-5,10-6mol·L-1)对NE诱导的心肌肥大模型组进行干预,通过大鼠心肌肌浆网的蛋白水平和钙摄取能力来反映益母草水苏碱对NE诱导的新生大鼠心肌细胞肥大的影响。结果:益母草水苏碱能够明显减少心肌细胞蛋白含量,降低Protein/DNA比值;益母草水苏碱可剂量依赖地提高NE诱导的心肌肥大细胞的肌浆网钙摄取和SERCA活性。结论:益母草水苏碱对NE诱导的心肌肥大细胞的肌浆网钙摄取功能有一定的程度的提高,与剂量有一定的依赖关系,随着益母草水苏碱的浓度的提高,肌浆网的钙摄取速率和SERCA活性也明显提高。

关键词：益母草水苏碱心肌细胞心肌肥大钙摄取能力 SERCA活性

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黄芪汤对二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化模型作用的机制

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世界华人消化杂志 2010年第23期18卷 2410-2415页

作者：闫晓风刘平孙明瑜王晓玲上海中医药大学基础医学院生物教研室上海市201203 上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所上海高校中医内科学E-研究院上海市201203

目的:探讨黄芪汤逆转二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)诱导的大鼠肝纤维化的作用机制.方法:采用DMN诱导大鼠肝纤维化,造模4wk,随机分为正常组,2wk模型组,4wk模型组.造模结束后,将模型组随机分为模型对照组,黄芪汤组.黄芪汤组于第... 详细信息

目的:探讨黄芪汤逆转二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)诱导的大鼠肝纤维化的作用机制.方法:采用DMN诱导大鼠肝纤维化,造模4wk,随机分为正常组,2wk模型组,4wk模型组.造模结束后,将模型组随机分为模型对照组,黄芪汤组.黄芪汤组于第5周起灌胃,模型对照组以同体积生理盐水灌胃.2wk、4wk、6wk末分别收集大鼠肝组织,免疫印迹法检测Fas、caspase-8、caspase-3、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白表达;实时定量PCR法检测α-SMAmRNA表达;明胶酶图法检测肝组织MMP-2和MMP-9的活性.结果:与正常组相比,模型组Fas、caspase-8、caspase-3、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白表达量、α-SMA mRNA表达量、MMP-2活性和MMP-9活性均于造模后逐渐升高,4wk时达到高峰.与6wk模型对照组相比,黄芪汤组Fas、caspase-8、caspase-3、TIMP-1、TIMP-2蛋白表达量,α-SMAmRNA表达量、MMP-2活性明显降低(1.05±0.02vs1.17±0.04,1.41±0.04vs1.98±0.06,0.86±0.01vs1.19±0.04,1.03±0.03vs1.58±0.06,1.16±0.04vs1.53±0.01,3.12±0.47vs8.48±0.45,2.15±0.03vs2.33±0.05,均P<0.05或0.01).MMP-9蛋白表达及活性均显著升高(1.21±0.00vs1.12±0.01,1.25±0.07vs1.10±0.04,均P<0.05或0.01).结论:黄芪汤显示了良好的抗肝纤维化作用,作用机制与其抑制肝细胞凋亡,抑制HSC活化,调控MMPs/TIMPs系统,促进ECM降解有关.

关键词：黄芪汤肝纤维化细胞凋亡肝星状细胞活化基质金属蛋白酶组织抑制剂

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硫化氢与糖尿病

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生命的化学 2010年第6期30卷 880-884页

作者：闫莉许言午中国医学科学院基础医学研究所生理与病理生理学系北京100005 上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203

硫化氢是继一氧化氮和一氧化碳之后的第三种内源性气体信号分子。近年来,内源性硫化氢的产生及生理意义已经被认识,其代谢异常与多种疾病有关。本文综述了近年报道的硫化氢及其内生酶在糖尿病发病及进展中的变化情况,并重点概述硫化氢... 详细信息

硫化氢是继一氧化氮和一氧化碳之后的第三种内源性气体信号分子。近年来,内源性硫化氢的产生及生理意义已经被认识,其代谢异常与多种疾病有关。本文综述了近年报道的硫化氢及其内生酶在糖尿病发病及进展中的变化情况,并重点概述硫化氢效应的细胞机制,包括硫化氢对β细胞胰岛素释放和对脂肪细胞葡萄糖摄取的影响。深入理解硫化氢在糖尿病中的作用将为以硫化氢为靶点的糖尿病治疗和抗糖尿病新药设计提供新的思路。

关键词：硫化氢气体介质胱硫醚-γ-裂解酶胱硫醚-β-合酶糖尿病

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生物化学PBL教学实践中指导教师的任务

生物化学PBL教学实践中指导教师的任务

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华东六省一市生物化学与分子生物学会2010年学术交流会

作者：郑静金国琴上海中医药大学基础医学院生物化学教研室

PBL是以问题为基础、学生为主体的教学模式,在教学过程中教师的角色发生了巨大的转变,本文通过作者参与生物化学PBL教学的实践经验,总结了指导教师在PBL教学各个实践环节主要是通过以下途径:①制定教学计划;②组织小组;③指导学生查找资... 详细信息

PBL是以问题为基础、学生为主体的教学模式,在教学过程中教师的角色发生了巨大的转变,本文通过作者参与生物化学PBL教学的实践经验,总结了指导教师在PBL教学各个实践环节主要是通过以下途径:①制定教学计划;②组织小组;③指导学生查找资料;④指导小组讨论,通过不同观点的碰撞、补充、相互启发,形成解决问题的最终方案,从而获得较为全面的相关知识和学习方法。教师在此过程中的任务和角色是多重的:①教师是问题解决过程中的参

关键词： PBL 生物化学教学实践

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双抗体夹心法检测3-硝基酪氨酸方法的建立及应用

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中国应用生理学杂志 2009年第4期25卷 569-572页

作者：闫莉许言午王晓梁武烨田珏杨光照马秀瑞刘慧荣山西医科大学生理学教研室山西太原030001 上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203 首都医科大学病理生理学教研室北京100069

目的:建立一种准确、快速的双抗体夹心酶免疫吸附的方法,以定量检测组织中过氧亚硝基阴离子的水平。方法:分别以小鼠源性抗3-硝基酪氨酸单克隆IgG抗体和兔源性抗3-硝基酪氨酸IgG抗体为包被抗体和检测抗体,采用正交设计方法摸索以上各抗... 详细信息

目的:建立一种准确、快速的双抗体夹心酶免疫吸附的方法,以定量检测组织中过氧亚硝基阴离子的水平。方法:分别以小鼠源性抗3-硝基酪氨酸单克隆IgG抗体和兔源性抗3-硝基酪氨酸IgG抗体为包被抗体和检测抗体,采用正交设计方法摸索以上各抗体的浓度,建立定量检测3-硝基酪氨酸(3-NT)的双抗体夹心ELISA法。同时,测定心肌缺血再灌注大鼠心肌组织3-NT的含量。结果:本研究建立的双抗体夹心ELISA法检测3-NT的最低检测下限为0.10 ***-1,具有良好线性关系的检测范围是(0.15～7.50)***-1(r2=0.995);心肌缺血再灌注组大鼠的心肌组织中的3-NT水平为(1022.42±97.35)*** pro-1,明显高于假手术组(246.58±56.52 *** pro-1,P<0.01)。结论:本研究建立的定量检测3-NT的双抗体夹心ELISA法能够方便、准确、快速地检测组织中3-NT的含量,为定量检测组织中ONOO-的水平提供了新的方法。

关键词：过氧亚硝基阴离子硝基化酪氨酸酶联免疫吸附测定

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