检索结果-内蒙古大学图书馆

世界科学技术-中医药现代化 2023年第5期25卷 1689-1701页

作者：曲欣妮李文标王利沈隽吉殷宇晴徐缘博何建成许言午上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海中医药大学基础医学院中医诊断教研室上海市健康辨识与评估重点实验室上海201203

目的应用网络药理学方法预测和分析甘草苷治疗帕金森病的作用机制,并选取凋亡信号通路进行细胞水平实验验证。方法从BATMAN-TCM、PharmMapper、SEA、SuperPred、SwissTargetPrediction等数据库获取甘草苷的作用靶点,从OMIM、GeneCards、... 详细信息

目的应用网络药理学方法预测和分析甘草苷治疗帕金森病的作用机制,并选取凋亡信号通路进行细胞水平实验验证。方法从BATMAN-TCM、PharmMapper、SEA、SuperPred、SwissTargetPrediction等数据库获取甘草苷的作用靶点,从OMIM、GeneCards、CTD等数据库获取帕金森病相关基因。将甘草苷的预测靶点和帕金森病相关基因取交集,通过Cytoscape软件利用交集靶点构建“药物-靶点-疾病”网络并进行可视化;运用Cytoscape软件的BisoGenet插件对交集靶点构建PPI网络,通过CytoNCA插件进行拓扑学计算并经度中心性(Degree centrality,DC)和中介中心性(Between centrality,BC)两步筛选获得核心PPI网络;采用R软件运行Bioconductor程序包进行GO和KEGG富集分析;运用Cytoscape软件构建“基因-通路”网络,筛选出网络的关键靶点,并将其与甘草苷进行分子对接;采用Western blot方法验证甘草苷对6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)诱导的SH-SY5Y细胞Caspase-3、Bax、Bcl-2、p-PI3K和p-AKT等凋亡通路关键蛋白表达与活化的调控作用。结果共获得甘草苷靶点343个,帕金森病相关基因1328个,二者交集靶点为46个;经拓扑学分析获得核心PPI网络,包含108个节点和2298条边;GO功能分析得到的1543个条目主要与凋亡调控、细胞周期与节律、DNA合成及分解代谢有关;凋亡、PI3K-AKT、NF-κB、TGF-β、HIF-1、FoxO等97条KEGG信号通路被显著富集;“基因-通路”中筛选的关键蛋白及分子对接结果显示TP53、AKT1及RELA可能是甘草苷治疗帕金森病的关键靶点;Western blot结果显示,与6-OHDA组相比,给与甘草苷处理后Bax和Cleaved-Caspase-3的表达水平明显减少(P<0.05),Bcl-2的表达水平显著增加(P<0.01);p-PI3K和p-AKT磷酸化水平明显增多(P<0.01)。结论网络药理学分析提示甘草苷可通过调控多种生物学过程和相关信号途径治疗帕金森病;细胞水平实验证明了甘草苷对6-OHDA损伤神经细胞的保护作用,并初步证实了其对凋亡信号通路的调控作用,为进一步阐明甘草苷治疗帕金森病的分子机制奠定了基础。

关键词：网络药理学甘草苷帕金森病机制凋亡

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基于自然杀伤(NK)细胞的肝癌免疫疗法研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第1期40卷 80-88页

作者：朱鑫月周玉付朱诗国上海中医药大学基础医学院免疫学与病原生物学教研室上海201203

肝细胞肝癌(HCC)异质性高,晚期诊断和化疗耐药使其成为我国难治性肿瘤之一。自然杀伤(NK)细胞在机体的免疫监视过程中充当重要角色。但在肝癌的进展过程中,NK细胞的功能受损致肿瘤免疫逃逸。该文总结了HCC中基于NK细胞的不同免疫治疗策... 详细信息

肝细胞肝癌(HCC)异质性高,晚期诊断和化疗耐药使其成为我国难治性肿瘤之一。自然杀伤(NK)细胞在机体的免疫监视过程中充当重要角色。但在肝癌的进展过程中,NK细胞的功能受损致肿瘤免疫逃逸。该文总结了HCC中基于NK细胞的不同免疫治疗策略,包括直接输注过继性NK细胞免疫疗法、基因工程NK细胞免疫疗法、靶向NK细胞受体免疫疗法、改变免疫抑制微环境免疫疗法、细胞因子增强NK细胞肿瘤毒性免疫疗法以及中医药增强NK细胞肿瘤毒性免疫疗法,这些基于NK细胞的免疫治疗策略已显示出巨大的治疗潜力。

关键词：自然杀伤细胞肝癌肿瘤逃逸免疫疗法综述

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肝纤维化的逆转机制

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中华肝脏病杂志 2022年第6期30卷 577-582页

作者：齐婧姝胡旭东刘成海上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所上海201203 上海中医药大学基础医学院生物教研室上海201203

越来越多的临床证据表明, 肝纤维化与一定程度的肝硬化均可发生肝组织学的逆转与预后改善。肝纤维化涉及多种细胞与多个环节, 其逆转机制也十分复杂, 主要有肝细胞炎症坏死减轻与肝细胞再生、活化肝星状细胞的凋亡与失活、肝窦内皮细胞... 详细信息

越来越多的临床证据表明, 肝纤维化与一定程度的肝硬化均可发生肝组织学的逆转与预后改善。肝纤维化涉及多种细胞与多个环节, 其逆转机制也十分复杂, 主要有肝细胞炎症坏死减轻与肝细胞再生、活化肝星状细胞的凋亡与失活、肝窦内皮细胞与微血管的改善、肝巨噬细胞恢复型极化等, 且细胞之间相互影响。而基质金属蛋白酶抑制因子表达减少、基质金属蛋白酶活性增加、细胞外基质降解增多则是肝纤维化逆转的生化学基础。但是, 目前肝纤维化逆转的临床病理机制研究较少, 不同病因不同程度肝纤维化逆转的关键靶点群尚不清楚, 缺乏相应的转化应用研究。深入系统地了解肝纤维化逆转的特点与机制, 不仅可丰富对肝纤维化肝硬化自然史的认识, 亦可为抗肝纤维化的治疗药物研发及其临床应用提供参考帮助。

关键词：肝纤维化逆转机制肝细胞肝星状细胞肝窦内皮细胞肝巨噬细胞基质金属蛋白酶

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基于网络药理学研究活血调脂方对糖尿病性脂肪肝糖脂代谢的作用

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中成药 2022年第6期44卷 1993-1999页

作者：周涛涛徐定昌平菁张春枚孙继佳王雨秾上海中医药大学基础医学院上海201203 上海中医药大学数学与物理教研室上海201203

目的基于网络药理学分析活血调脂方对糖尿病性脂肪肝的通路调节机制,并通过体外实验对关键通路进行验证。方法收集活血调脂方的化学成分并通过SwissADME筛选出有效成分,对有效成分进行靶点预测;从DisGeNET、DrugBank、OMIM、TTD获得... 详细信息

目的基于网络药理学分析活血调脂方对糖尿病性脂肪肝的通路调节机制,并通过体外实验对关键通路进行验证。方法收集活血调脂方的化学成分并通过SwissADME筛选出有效成分,对有效成分进行靶点预测;从DisGeNET、DrugBank、OMIM、TTD获得与糖尿病性脂肪肝有关的疾病基因;构建有效成分-靶点-疾病网络图,对靶点基因进行GO功能和KEGG富集分析,并对关键成分和靶点进行分子对接验证。基于靶点基因在通路中的分布,用活血调脂方干预HepG2细胞疾病模型进行体外验证。结果 KEGG富集得到的非酒精性脂肪性肝病、胰岛素抵抗、PPAR信号通路与疾病关系最密切。分子对接显示关键成分和靶点结合稳固。体外实验显示,与模型组比较,活血调脂方能增加细胞葡萄糖消耗(P<0.05),改善胰岛素敏感性(P<0.05),降低TG水平(P<0.05),减少脂质沉积,降低p-IRS-1、SREBP-1C、SOCS-3蛋白表达(P<0.05),升高p-Akt、p-GSK-3β、Adiponectin、PPARγ蛋白表达(P<0.05)。结论活血调脂方通过IRS-1/AKT/GSK-3β信号通路改善胰岛素信号传导,并且通过下调SREBP-1C、SOCS-3蛋白表达,上调Adiponectin、PPARγ蛋白表达调节糖脂代谢和改善胰岛素抵抗,进而达到治疗糖尿病性脂肪肝的作用。

关键词：活血调脂方糖尿病性脂肪肝网络药理学糖脂代谢胰岛素抵抗 IRS-1/AKT/GSK-3β信号通路

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通过网络药理学与转录组学探讨扶正化瘀方影响巨噬细胞的抗肝纤维化机制及效应成分

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中国中药杂志 2022年第11期47卷 3029-3037页

作者：幸鹭胡旭东陶艳艳彭渊刘成海上海中医药大学附属曙光医院上海201203 上海中医药大学基础医学院生物教研室上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203

前期已证实扶正化瘀方(FZHY)可通过调控肝内巨噬细胞极化发挥抗肝纤维化作用,但FZHY基于巨噬细胞的抗肝纤维化关键靶点及效应成分目前尚不清楚。作者通过网络药理学分析获取FZHY基于巨噬细胞的抗肝纤维化潜在靶点集合及RNA-Seq测序获取F... 详细信息

前期已证实扶正化瘀方(FZHY)可通过调控肝内巨噬细胞极化发挥抗肝纤维化作用,但FZHY基于巨噬细胞的抗肝纤维化关键靶点及效应成分目前尚不清楚。作者通过网络药理学分析获取FZHY基于巨噬细胞的抗肝纤维化潜在靶点集合及RNA-Seq测序获取FZHY防治小鼠肝纤维化的肝组织差异表达基因集合,将2个集合的交集靶点蛋白进行degree分析,得到FZHY基于巨噬细胞的抗肝纤维化潜在核心靶点,经由PubMed医学文献数据库的检索分析,确定FZHY基于巨噬细胞的抗肝纤维化潜在关键靶点;接着通过反向药理学分析获得FZHY中与关键靶点相对应的效应成分信息;最后将这些效应成分在脂多糖(LPS)诱导M1型THP-1人单核巨噬细胞上进行调控关键靶点基因表达的实验验证。网络药理学联合RNA-seq转录组测序结果分析表明,FZHY可能通过调控巨噬细胞中CCL2和TIMP1、MMP2基因表达发挥抗肝纤维化作用。体内实验结果验证,FZHY在肝纤维化小鼠肝组织中可显著抑制CCL2、TIMP1基因表达,促进MMP2基因表达。体外实验结果验证,FZHY全方及其4种有效单体成分木犀草素、熊果酸、槲皮素、丹参素均可显著抑制M1型THP-1细胞中CCL2、TIMP1基因表达;此外,木犀草素、熊果酸、槲皮素可促进MMP2基因表达,但FZHY全方对MMP2基因表达无明显作用,丹参素对MMP2基因表达有抑制作用。该研究证实FZHY主要通过4种单体活性成分木犀草素、熊果酸、槲皮素、丹参素抑制M1型巨噬细胞中的CCL2、TIMP1基因表达从而实现抗炎、抗肝纤维化作用。

关键词：网络药理学 RNA-seq 扶正化瘀方(FZHY) 巨噬细胞肝纤维化 CCL2 TIMP1

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一贯煎通过调节Parp-1的翻译后修饰保护肝细胞DNA

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中国药理学通报 2023年第2期39卷 373-379页

作者：张宇佳叶杰卢艳琳闫晓风李华王晓玲上海中医药大学基础医学院生物教研室上海201203 苏州卫生职业技术学院临床医学院江苏苏州215009 上海中医药大学附属龙华医院肿瘤科上海200032

目的观察一贯煎(Yiguanjian decoction,YGJ)影响Parp-1修复H_(2)O_(2)诱导肝细胞DNA损伤的机制。方法培养小鼠胚胎肝细胞BNL CL.2,建立H_(2)O_(2)细胞损伤模型并用YGJ预处理,CCK-8检测细胞活力,Annexin V/PI流式细胞术检测细胞死亡,EDU掺入检测细胞增殖,8-羟基脱氧鸟苷比色法和γ-H_(2)AX细胞荧光染色检测DNA损伤。免疫印迹法检测Parp-1、Parp-1的Par化和乙酰化。结果H_(2)O_(2)作用后,肝细胞凋亡率增加;细胞增殖被明显抑制;DNA损伤持续存在于整个实验过程。Parp-1在6 h升高后维持高表达,Parp-1的Par化和乙酰化均先升高随后降低。Sirt-1的抑制剂EX527可明显提高Parp-1的Par化,而其激动剂SRT1720可明显降低Parp-1的Par化。YGJ作用后细胞凋亡率和DNA损伤明显减少,增殖细胞数明显增加,Parp-1高表达时间点提前,Parp-1的Par化明显提高,乙酰化时间点推迟,且持续时间更长。结论YGJ可降低H_(2)O_(2)诱导的肝细胞DNA损伤,其作用机制与Sirt-1对Parp-1去乙酰化维持其含量、负调控Parp-1的Par化维持一定的活性有关。

关键词：肝细胞 Parp-1 Sirt-1 翻译后修饰 DNA损伤 H_(2)O_(2)

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基于网络药理学和分子对接探讨炙黄芪拮抗阿霉素心肌损伤的机制研究

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中药药理与临床 2022年第1期38卷 110-118页

作者：李文标徐缘博沈隽吉殷宇晴张学礼姚领爱康湘萍许言午上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203

目的:基于网络药理学和分子对接技术探讨黄芪拮抗阿霉素心肌损伤“多成分-多靶点-多途径”的整体药理作用特征和具体机制,并选取JNK和凋亡信号通路进行细胞水平实验验证。方法:以网络药理学为手段,通过中药系统药理学数据库与分析平台(T... 详细信息

目的:基于网络药理学和分子对接技术探讨黄芪拮抗阿霉素心肌损伤“多成分-多靶点-多途径”的整体药理作用特征和具体机制,并选取JNK和凋亡信号通路进行细胞水平实验验证。方法:以网络药理学为手段,通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索并筛选黄芪的活性成分,并结合PharmMapper获取其对应的靶点;通过GeneCards、OMIM、DrugBank和PharmGKB数据库检索阿霉素心肌损伤相关靶点;对交集靶点通过STRING数据库与Cytoscape软件构建“黄芪有效成分-靶点”网络及“蛋白质-蛋白质互作”网络并依据拓扑学分析进行核心网络筛选;通过R软件对核心网络基因进行GO和KEGG富集分析;利用Cytoscape软件构建“信号通路-靶点”网络并根据连接度筛选核心靶点;利用AutoDock软件进行目标成分与关键靶点的分子对接,采用PyMOL软件对最优结果进行可视化。采用Western blot法验证炙黄芪对阿霉素诱导的AC16细胞JNK、c-Jun、c-Fos蛋白表达及其磷酸化水平和凋亡相关蛋白Caspase-3、BAX和BCL-2表达与活化的调控作用。结果:筛选出黄芪活性成分33个,对应280个无重靶点;获得阿霉素心肌损伤相关基因1368个;二者交集靶点为138个,映射了黄芪25个有效成分;“黄芪有效成分-靶点”网络中靶点最多的前10位成分为槲皮素、山柰酚、芒柄花黄素、7-O-甲基异丁香酚、异鼠李素、毛蕊异黄酮、(Z)-1-(2,4-二羟基苯基)-3-(4-羟基苯基)丙基-2-烯-1-酮、黄芪甲苷I、黄芪甲苷IV、3,9-二-O-黄芪紫檀烷。由STRING数据库对交集靶点构建的PPI网络经拓扑学筛选得到了包括MAPK8、MAPK1、AKT1、MAPK14等23个靶点构成的核心PPI网络;对核心网络靶点的GO分析得到1806个条目,KEGG分析共富集到包括MAPK信号通路、TNF信号通路、凋亡信号通路等137条通路。“信号通路-靶点”网络结果显示,MAPK8、MAPK1、AKT1、MAPK14为具有最高连接度的核心靶点。分子对接显示,黄芪靶点最多的前10位有效成分与4个核心靶点的结合能均<-7.0 kcal/mol。炙黄芪400、500μg/mL可明显增加损伤的心肌组织的存活率,Western blot结果显示,与阿霉素组相比,给予炙黄芪处理后损伤的心肌细胞p-JNK/JNK、p-c-Jun/c-Jun、p-c-Fos/c-Fos、BAX和cleaved-Caspase-3/Caspase-3表达明显下调(P<0.05或P<0.01),BCL-2表达明显上调(P<0.05)。结论:黄芪可通过多种机制拮抗阿霉素心肌损伤,其多种成分通过作用于MAPK信号通路中多个核心基因而抑制心肌细胞凋亡,这可能是黄芪发挥对阿霉素损伤心肌保护作用的主要机制。

关键词：黄芪阿霉素心肌损伤网络药理学分子对接实验验证

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基于脉搏波频域梅尔频率倒谱系数特征的高血压危险分层预测模型

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海军军医大学学报 2024年第10期45卷 1226-1240页

作者：齐晨浩杨晶东邱泽浩尧明慧燕海霞上海理工大学光电信息与计算机工程学院自主机器人实验室上海200093 上海中医药大学中医学院中医诊断学教研室上海201203

目的为改进基于人工智能技术高血压时域脉搏波分类模型精度低、泛化性能差的问题,提出一种基于融合注意力机制的频域脉搏波预测模型。方法首先将时域脉搏波转换为频域梅尔频率倒谱系数特征,增强脉搏波区分度,采用时间卷积网络与Transf... 详细信息

目的为改进基于人工智能技术高血压时域脉搏波分类模型精度低、泛化性能差的问题,提出一种基于融合注意力机制的频域脉搏波预测模型。方法首先将时域脉搏波转换为频域梅尔频率倒谱系数特征,增强脉搏波区分度,采用时间卷积网络与Transformer 结构提取脉搏波深层特征,并将自注意力机制与选择性内核注意力进行决策融合,提取脉搏波关联特征,并采用Floodings正则化方法间接控制训练损失,防止过拟合发生。针对上海中医药大学附属龙华医院及上海市中西医结合医院提供的527例临床脉诊数据,进行5折交叉验证实验。此外,采用梯度提升决策树算法统计脉搏波频域特征的贡献率排名,分析影响模型分类精度的关键因素,为中医临床辅助诊断提供参考价值。结果本研究提出的模型分类评估指标准确度、F1值、精确率、召回率和AUC值分别为0.939 6、0.924 9、0.940 9、0.929 5和0.993 4。脉搏波的静态特征、一阶差分和二阶差分系数的贡献率相对均衡,说明高血压危险程度不仅与脉搏波的静态特征相关,也应当考虑脉搏波的动态特征。结论与典型脉搏波分类模型相比,本研究提出的模型具有较高的分类精度和泛化性能。

关键词：高血压危险分层梅尔频率倒谱系数时间卷积网络 Transformer

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美沙拉秦干预下IBD小鼠结肠组织的转录组分析

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中国实验动物学报 2022年第1期30卷 7-16页

作者：王怡如周唯蒋笑影潘一滨许言午曹永清上海中医药大学附属龙华医院肛肠科上海200032 上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203

目的应用转录组测序技术(RNA sequencing,RNA-seq)检测炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)小鼠结肠组织的基因表达变化,增进对美沙拉秦(5-aminosalicylic acid,5-ASA)治疗IBD的分子机制的理解。方法用葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)建立IBD小鼠模型。将15只C57BL/6小鼠随机均分为三组:对照组、DSS组和DSS+5-ASA组。每组随机选择3只小鼠取结肠组织进行测序,经两组间比较,鉴定差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)及重要生物学信号通路。随后通过基因表达数据库(gene expression omnibus,GEO)中溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者和经美沙拉秦治疗后患者结肠组织活检的微阵列(microarray)数据,验证前面鉴定得到的子显著DEGs。结果DSS+5-ASA组与DSS组比较中共得到2983个差异表达基因,上调基因604个,下调基因753个;DSS组与对照组比较,共得到1626个差异表达基因,其中上调基因820个,下调基因806个。GO(gene ontology)和KEGG富集分析结果显示,这些DEGs与免疫反应等信号通路有关。部分表达差异显著的基因如Rnase1和Cxcl10,在UC患者结肠组织中有相似的表达趋势。结论经美沙拉秦治疗的IBD模型小鼠结肠组织的基因表达谱,与IBD患者对比进行验证,得到数个IBD治疗过程中可能涉及的基因和生物学通路,增加了美沙拉秦对IBD治疗作用机制的进一步理解。

关键词：炎症性肠病美沙拉秦葡聚糖硫酸钠转录组测序差异表达基因

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基于德尔菲法的强直性脊柱炎脾虚湿阻证诊断指标的研究

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中华中医药杂志 2022年第9期37卷 5304-5307页

作者：杨辉黄琳李海昌曹炜范永升谢志军王忆勤周岳君温成平浙江中医药大学基础医学院杭州310053 中国中医科学院广安门医院北京100053 上海中医药大学基础医学院中医诊断教研室上海201203

目的:采用专家调查的方式筛选强直性脊柱炎脾虚湿阻证的诊断指标,评价其重要性,以形成强直性脊柱炎脾虚湿瘀证的证候诊断标准。方法:制定强直性脊柱炎脾虚湿阻证诊断标准体系专家咨询问卷,遴选全国风湿免疫领域从事中医、中西医结合临... 详细信息

目的:采用专家调查的方式筛选强直性脊柱炎脾虚湿阻证的诊断指标,评价其重要性,以形成强直性脊柱炎脾虚湿瘀证的证候诊断标准。方法:制定强直性脊柱炎脾虚湿阻证诊断标准体系专家咨询问卷,遴选全国风湿免疫领域从事中医、中西医结合临床工作的专家20位,进行3轮问卷调查;统计专家积极系数,采用五尺度评分法,采用直接打分法、直接估计法、百分比法、秩和比法对专家指标重要性进行评估;并采用算数均数、等级和、满分比分析专家评价意见集中程度;采用变异系数(CV)、协调系数分析专家评价意见协调程度;并针对条目的赋分进行临床验证。结果:对专家指标重要性评估结果中,主要症状:(1)中轴关节酸痛;(2)脊背活动受限、凌晨痛甚伴活动后缓解,伴腰骶沉重、僵硬(必备);(3)纳少甚或纳呆;(4)肢体酸楚困重,神疲乏力;(5)舌苔腻。秩和比法值依次为0.15、0.14、0.13、0.12、0.10。专家评价意见集中程度分析结果中,主要症状的专家评分算数均数为4.95分,满分比为98%,CV为0.04。第1轮问卷CV波动在0.24~0.44,第2轮专家问卷CV波动在0~0.44,第3轮专家问卷CV波动在0~0.27。结论:经过3轮调查研究,专家积极程度和专业程度较高,意见可信度较高,且协调程度较高,基本形成强直性脊柱炎脾虚湿阻证的诊断标准。

关键词：强直性脊柱炎脾虚湿阻证诊断标准德尔菲法诊断指标

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