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黄芪汤含药血清对血管内皮生长因子诱导的大鼠肝窦内皮细胞增殖、迁移和成管能力的影响及其作用机制

临床肝胆病杂志 2022年第10期38卷 2279-2285页

作者：王浩艺麦静愔平键成扬上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所上海201203 上海市光华中西医结合医院治未病科上海200052 上海中医药大学肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203

目的基于蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探讨黄芪汤含药血清对血管内皮生长因子(VEGF)诱导的大鼠肝窦内皮细胞(LSEC)增殖、迁移和成管能力的影响。方法制备黄芪汤含药血清,体外分离、培养SD大鼠LSEC,将大鼠LSE... 详细信息

目的基于蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探讨黄芪汤含药血清对血管内皮生长因子(VEGF)诱导的大鼠肝窦内皮细胞(LSEC)增殖、迁移和成管能力的影响。方法制备黄芪汤含药血清,体外分离、培养SD大鼠LSEC,将大鼠LSEC随机分为空白组,VEGF组,血清对照组,低、中、高剂量黄芪汤含药血清组,利用噻唑蓝(MTT)比色法、Transwell实验、成管实验分别检测各组LSEC增殖、迁移和成管能力,通过Western Blot法检测血小板-内皮细胞黏附分子-1(CD31)、内皮素-1(ET-1)、内皮性一氧化氮合酶(eNOS)和AKT/mTOR信号通路中AKT、磷酸化(p)-AKT、mTOR、磷酸化(p)-mTOR蛋白表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用Tukey’s检验。结果与空白组相比,VEGF组、血清对照组能够促进大鼠LSEC增殖、迁移和血管新生(P值均<0.05);Western Blot结果显示,CD31、ET-1、eNOS和AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达显著升高(P值均<0.05)。VEGF组与血清对照组比较,上述指标差异均无统计学意义(P值均>0.05)。与血清组比较,黄芪汤中、高剂量组能显著抑制VEGF诱导的大鼠LSEC增殖、迁移和血管新生(P值均<0.05);Western Blot结果显示,CD31、ET-1、eNOS和AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达均显著降低(P值均<0.05)。结论较高剂量黄芪汤含药血清能抑制VEGF诱导的大鼠LSEC增殖、迁移和成管能力,其作用机制可能与调控AKT/mTOR信号通路有关。

关键词：肝硬化黄芪肝窦内皮细胞大鼠,Sprague-Dawley

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肝星状细胞的活化机制--探寻肝纤维化新的诊断指标和治疗靶点

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临床肝胆病杂志 2019年第3期35卷 640-643页

作者：姜娜平键徐列明上海中医药大学附属曙光医院上海201203 上海中医药大学肝病研究所上海201203 肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203 国家中医药管理局重点研究室(慢性肝病虚损) 上海201203

肝纤维化的形成机制复杂,目前主流研究依然围绕肝星状细胞(HSC)开展,并发现许多促进HSC活化的刺激因子和调节通路。对影响HSC的几种主要细胞因子和过氧化物酶体增殖物激活受体γ相关近期研究结果以及近年的研究热点——小RNA、长非编码... 详细信息

肝纤维化的形成机制复杂,目前主流研究依然围绕肝星状细胞(HSC)开展,并发现许多促进HSC活化的刺激因子和调节通路。对影响HSC的几种主要细胞因子和过氧化物酶体增殖物激活受体γ相关近期研究结果以及近年的研究热点——小RNA、长非编码RNA、外泌体等与HSC活化的关系进行综述,旨在介绍治疗肝纤维化的潜在新靶点和非侵入性肝病诊断的新检测指标,提出将作用于HSC活化的不同靶点的化学药物或中药成分合理组成复方,以期在肝纤维化治疗学上有所突破的观点。

关键词：肝星状细胞细胞因子类过氧化物酶体增殖物激活受体微RNAs 综述

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基于均匀设计的中药有效单体“IR”方筛选及其对慢性肾衰竭大鼠肾纤维化的作用

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中华中医药学刊 2024年第2期42卷 63-68,I0015,I0016页

作者：王蒙王凌晨王琛上海中医药大学附属曙光医院上海201203 上海中医药大学中医肾病研究所上海201203 上海中医药大学肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203

目的运用“均匀设计法”从“肾衰Ⅱ号方”中筛选抗肾纤维化中药有效单体组方(淫羊藿苷合迷迭香酸配伍,简称IR方),并进行验证。方法采用5/6(Ablation and infarction,A/I)慢性肾衰大鼠模型,将肾衰Ⅱ号方中已知的5种抗肾纤维化有效单体(... 详细信息

目的运用“均匀设计法”从“肾衰Ⅱ号方”中筛选抗肾纤维化中药有效单体组方(淫羊藿苷合迷迭香酸配伍,简称IR方),并进行验证。方法采用5/6(Ablation and infarction,A/I)慢性肾衰大鼠模型,将肾衰Ⅱ号方中已知的5种抗肾纤维化有效单体(淫羊藿苷、迷迭香酸、阿魏酸、苦杏仁苷、大黄素)作为研究对象,按照均匀设计法“5因素8水平”分组,共设8种配比组方。造模后4周,组1~组8给予相应配比的组方药液,假手术组和模型组给予生理盐水,连续干预8周。末次给药后,检测各组大鼠血清肌酐(Serum creatinine,Scr)水平,苏木素-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)和马松(Masson)染色观察肾组织病理形态,Western Blot法检测纤维化标志蛋白Ⅰ型胶原(CollagenⅠ,Col-Ⅰ)、纤维连接蛋白(Fibronectin,FN)、结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)表达。以各药物组大鼠Scr为筛选指标,通过多元逐步回归分析筛选中药单体成分组方并确定特定配比。再用5/6(A/I)大鼠模型,以氯沙坦钾、母方“肾衰Ⅱ号方”和淫羊藿苷(20 mg·kg^(-1)·d^(-1))作为对照,有效成分组方(淫羊藿苷20 mg·kg^(-1)·d^(-1)+迷迭香酸2.1 mg·kg^(-1)·d^(-1))作为实验药物,连续干预8周。通过各组大鼠Scr、血尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、病理染色(HE和Masson)和FN、Col-Ⅰ蛋白表达比较各组大鼠肾功能和肾纤维化程度。体外构建转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导肾小管细胞(NRK-52E)损伤和肾成纤维细胞(NRK-49F)活化模型,以有效成分组方和相应单一成分作为干预药物,Western Blot法检测FN、Col-Ⅰ、CTGF蛋白表达。结果筛选实验结果提示,组1~组8均可不同程度降低5/6(A/I)大鼠Scr水平,结合病理染色和Western Blot分析,组8效果最优。经过多元逐步回归分析,得到方程为:=88.381-0.539X1-0.473X2+0.01X1X2(X1淫羊藿苷,X2迷迭香酸),提示淫羊藿苷和迷迭香酸配伍为最佳,量比为9.6:1。验证实验结果提示,IR方可以明显改善5/6(A/I)大鼠肾功能,减轻肾小管间质损伤和纤维化,抑制FN和Col-Ⅰ蛋白表达,其表现的肾保护效应与肾衰Ⅱ号方相当,并优于西药对照。体外实验发现,IR方可以明显抑制TGF-β1刺激的NRK-52E细胞和NRK-49F细胞FN、Col-Ⅰ、CTGF蛋白表达,并优于淫羊藿苷或迷迭香酸单独干预。结论基于均匀设计法筛选的有效单体IR方具有改善慢性肾衰大鼠肾功能和抗肾纤维化的效应。

关键词：肾纤维化均匀设计法有效单体肾衰Ⅱ号方 IR方

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加强中医药抗肝纤维化

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中华消化杂志 2012年第3期32卷 208-209页

作者：徐列明上海中医药大学附属曙光医院肝硬化科上海中医药大学肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室国家中医药管理局慢性肝病虚损重点研究室 201203

器官纤维化已成为影响人类健康的一大类疾病。据报道，在工业化国家，45％的死亡病例与纤维化有关。因此，开展抗纤维化的研究十分必要。在各种器官纤维化中，肝纤维化的研究可能相对较易，可望获得突破性成果。其理由如下。病例多。在... 详细信息

器官纤维化已成为影响人类健康的一大类疾病。据报道，在工业化国家，45％的死亡病例与纤维化有关。因此，开展抗纤维化的研究十分必要。在各种器官纤维化中，肝纤维化的研究可能相对较易，可望获得突破性成果。其理由如下。病例多。在肝病领域，各种慢性肝病都可伴有肝纤维化。

关键词：抗肝纤维化中医药器官纤维化死亡病例慢性肝病工业化国家人类健康抗纤维化

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双虎清肝颗粒中4种成分在大鼠血浆中体内药动学研究

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中成药 2023年第6期45卷 1760-1765页

作者：余上海方勤勤戚胜兰陈佳美刘平张华刘伟上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所国家中医管理局中药制剂三级实验室肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室上海201203 上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203

目的考察双虎清肝颗粒中马钱苷酸、獐牙菜苷、虎杖苷、甘草苷在大鼠血浆中的体内药动学。方法10只大鼠随机分为2组,分别灌胃给予10.5、21.0 g生药/kg药物溶液,于0、5、15、30、45、60、120、240、360、480、600、1440 min采血,UHPLC-Q-E... 详细信息

目的考察双虎清肝颗粒中马钱苷酸、獐牙菜苷、虎杖苷、甘草苷在大鼠血浆中的体内药动学。方法10只大鼠随机分为2组,分别灌胃给予10.5、21.0 g生药/kg药物溶液,于0、5、15、30、45、60、120、240、360、480、600、1440 min采血,UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS法测定4种成分血药浓度,计算主要药动学参数。结果双虎清肝颗粒不同剂量组中各成分C max依次为獐牙菜苷>甘草苷>马钱苷酸>虎杖苷,T max依次为獐牙菜苷>马钱苷酸>甘草苷>虎杖苷,AUC 0~t、AUC 0~∞依次为獐牙菜苷>马钱苷酸>甘草苷>虎杖苷。结论本实验可为双虎清肝颗粒临床应用和效应物质基础研究提供参考。

关键词：双虎清肝颗粒马钱苷酸獐牙菜苷虎杖苷甘草苷体内药动学 UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS

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仙灵骨葆胶囊肝毒性研究进展

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中国药物警戒 2023年第5期20卷 496-499页

作者：朱春雾余雪君孙鑫刘成海上海中医药大学附属普陀医院老年科上海200062 上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203 肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203

目的分析仙灵骨葆胶囊的肝毒性,为其安全合理使用提供参考。方法通过查阅1994年1月1日至2022年8月31日国内外相关文献,从肝毒性表现、肝损伤的因素、毒性机制、减毒应对措施等方面对仙灵骨葆胶囊肝毒性研究概况进行整理和总结。结果仙... 详细信息

目的分析仙灵骨葆胶囊的肝毒性,为其安全合理使用提供参考。方法通过查阅1994年1月1日至2022年8月31日国内外相关文献,从肝毒性表现、肝损伤的因素、毒性机制、减毒应对措施等方面对仙灵骨葆胶囊肝毒性研究概况进行整理和总结。结果仙灵骨葆胶囊的毒性成分主要是补骨脂和淫羊藿,与患者性别、年龄、药量等因素有关。结论临床使用中应加强仙灵骨葆胶囊肝毒性的监测,以减少肝损伤的发生。

关键词：仙灵骨葆胶囊肝毒性药品不良反应肝损伤补骨脂淫羊藿

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基于网络药理学探讨扶正化瘀方治疗肝癌的作用机制

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临床肝胆病杂志 2021年第10期37卷 2338-2342页

作者：齐婧姝平大冰孙鑫薛静波陶艳艳彭渊刘成海上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203 肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203 上海中医健康服务协同创新中心上海201203

目的运用网络药理学方法,探讨扶正化瘀(FZHY)方治疗肝癌的作用机制。方法从TCMSP、BATMAN、Drugbank数据库检索该方各味药的主要化学成分及相应靶标信息,采用STRING数据库进行PPI网络分析,Cytoscape软件构建药物-疾病网络模型并进行网... 详细信息

目的运用网络药理学方法,探讨扶正化瘀(FZHY)方治疗肝癌的作用机制。方法从TCMSP、BATMAN、Drugbank数据库检索该方各味药的主要化学成分及相应靶标信息,采用STRING数据库进行PPI网络分析,Cytoscape软件构建药物-疾病网络模型并进行网络分析,R语言进行靶标功能GO和KEGG富集分析。结果研究筛选得到FZHY与肝癌交集基因192个,潜在化合物95种,其中槲皮素、木犀草素等是起到重要调控作用的活性成分;INS、IL-6、EGFR等是FZHY潜在作用的关键靶点;GO富集分析主要涉及药物反应、氧化反应等多个生物过程,KEGG富集分析主要涉及细胞凋亡、肿瘤坏死因子等信号通路。结论基于网络药理学的方法揭示了FZHY多成分、多靶标治疗肝癌的初步作用机制,为临床和基础科研提供理论依据。

关键词：肝肿瘤扶正化瘀方网络药理学

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NK细胞与肝纤维化的关系及中药对NK等免疫细胞的影响

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中国免疫学杂志 2014年第2期30卷 280-282,286页

作者：钦圣兰赵长青平键周扬徐列明(指导) 上海中医药大学附属曙光医院上海201203 上海中医药大学肝病研究所上海201203 国家中医药管理局慢性肝病虚损重点研究室上海201203 肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室上海201203

肝星状细胞（Hepatic stellate cell,HSC）是位于肝索与肝窦壁间Disse间隙内的间质细胞,分静止与活化两种表型,静止状态的HSC主要参与储存脂肪与维生素A.在感染、酒精、化学药物等因素影响下,静止的HSC被激活,分泌大量细胞外基质（Extra... 详细信息

肝星状细胞（Hepatic stellate cell,HSC）是位于肝索与肝窦壁间Disse间隙内的间质细胞,分静止与活化两种表型,静止状态的HSC主要参与储存脂肪与维生素A.在感染、酒精、化学药物等因素影响下,静止的HSC被激活,分泌大量细胞外基质（Extracellular matrix,ECM）,在肝脏过度沉积,导致肝纤维化.肝纤维化如果没有得到有效的治疗措施干预,随着病情的持续发展,肝脏结构与功能进一步遭到破坏,最终将发展为不可逆的肝硬化.

关键词：肝纤维化 NK细胞免疫细胞中药静止状态 matrix 肝脏结构肝星状细胞

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p300/CBP在肾脏纤维化的作用和机制

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肾脏病与透析肾移植杂志 2022年第5期31卷 461-464,500页

作者：王艳哲吴明(综述) 叶朝阳(审校) 上海中医药大学附属曙光医院肾病科上海中医药大学中医肾病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室(上海中医药大学)上海市中医临床重点实验室上海201203

肾脏纤维化是各种病因引起的慢性肾脏病的主要病理改变,常进展至终末期肾病。组蛋白乙酰转移酶(HATs)介导的表观遗传调控在肾脏纤维化的发生发展中发挥重要作用。由高度同源的腺病毒E1A相关的300 kD蛋白(p300)和环磷酸腺苷反应元件结合... 详细信息

肾脏纤维化是各种病因引起的慢性肾脏病的主要病理改变,常进展至终末期肾病。组蛋白乙酰转移酶(HATs)介导的表观遗传调控在肾脏纤维化的发生发展中发挥重要作用。由高度同源的腺病毒E1A相关的300 kD蛋白(p300)和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)的结合蛋白(CBP)组成的p300/CBP家族是HATs家族主要成员之一。本文总结了目前关于p300/CBP的结构、功能及其在肾脏纤维化中的作用和机制。旨在对肾脏纤维化的防治提供新的靶点和思路。

关键词：组蛋白乙酰转移酶 p300/CBP 肾脏纤维化

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丹参酚酸B盐对转化生长因子β1活化的大鼠肝星状细胞内细胞外信号调节激酶信号转导通路的抑制作用(英文)

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中西医结合学报 2012年第4期10卷 454-461页

作者：宋雅芳吕志刚徐列明上海中医药大学附属曙光医院肝硬化科上海201203 上海中医药大学肝病研究所上海201203 广州中医药大学脾胃研究所广东广州510405 肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203

目的:探讨丹参酚酸B盐(salvianolic acid B,SA-B)对转化生长因子β1(transforming growthfactor-β1,TGF-β1)活化的大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)内细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号转导通路的影响。方法:采用原位灌流酶消化及Nycodenz密度梯度离心的方法分离正常大鼠HSC,将TGF-β1和SA-B直接添加于原代HSC的无血清培养液中。蛋白印记法检测HSC内磷酸化和总ERK,以及有丝分裂原激活蛋白激酶激酶MEK、有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶Raf、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果:SA-B可抑制正常原代HSC及TGF-β1刺激的HSC内ERK上游激酶MEK的磷酸化;而对正常原代HSC及TGF-β1刺激的HSC内MEK上游激酶Raf-1的磷酸化无明显抑制。SA-B对TGF-β1刺激的HSC内α-SMA表达有明显的抑制作用,SA-B与ERK阻断剂联用,几乎接近完全阻断α-SMA的表达。SA-B对正常培养的HSC和经TGF-β1刺激的HSCⅠ型胶原蛋白的合成都有明显的抑制作用。结论:SA-B抑制TGF-β1刺激的HSC内ERK信号转导通路的作用环节在于抑制了MEK的磷酸化。SA-B通过抑制TGF-β1的ERK信号转导通路,减少了因HSC活化导致的α-SMA表达和Ⅰ型胶原蛋白合成增加。

关键词：丹参酚酸B 肝星状细胞转化生长因子β1 细胞外信号调节MAP激酶类大鼠

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