检索结果-内蒙古大学图书馆

慢性背根神经节受压对大鼠脊髓背角Wnt/β-catenin信号通路的影响

中华物理医学与康复杂志 2022年第2期44卷 97-102页

作者：张也陈雪梅许东升上海交通大学附属第六人民医院康复医学科上海200233 郑州大学人体解剖学教研室郑州450001 上海中医药大学康复医学研究所上海201203

目的探讨慢性背根神经节受压(CCD)对大鼠脊髓背角Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法选取42只成年雄性SD大鼠,按照随机数字表法将其分为假手术组和CCD组,其中假手术组9只,CCD组33只。按照术后时间点不同,将CCD组细分为术后1 d组(6只)... 详细信息

目的探讨慢性背根神经节受压(CCD)对大鼠脊髓背角Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法选取42只成年雄性SD大鼠,按照随机数字表法将其分为假手术组和CCD组,其中假手术组9只,CCD组33只。按照术后时间点不同,将CCD组细分为术后1 d组(6只)、术后3 d组(6只)、术后7 d组(9只)、术后14 d组(6只)、术后28 d组(6只)。术前及术后1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d、28 d,检测各组大鼠机械缩足阈值。术后1 d、3 d、7 d、14 d、28 d,采用Western blot技术检测各组大鼠脊髓背角中活化的β-连环蛋白(activeβ-catenin)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况;术后7 d,利用免疫荧光技术检测大鼠脊髓背角中activeβ-catenin的核转位及星形胶质细胞的活化情况。结果术后1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d、28 d,CCD组大鼠机械缩足阈值均显著低于假手术组(P<0.05);Western blot显示CCD术后各时间点脊髓背角中activeβ-catenin表达均较假手术组升高(P<0.05),CCD术后7 d,大鼠脊髓背角中GFAP的表达较假手术组明显升高(P<0.05)。免疫荧光结果显示,CCD术后脊髓背角中activeβ-catenin表达增多且发生核转位,星形胶质细胞发生明显的活化。结论Wnt/β-catenin信号通路在CCD模型大鼠脊髓背角中显著激活,提示其可能在神经病理性疼痛发生发展中发挥重要作用。

关键词： Wnt信号通路星形胶质细胞神经病理性疼痛背根神经节脊髓背角

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猪动脉及心脏瓣膜内皮细胞的形态学特征

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解剖学报 2013年第4期44卷 541-545页

作者：高洪泉李学敏吴彩琴关国平王富军王璐王克强张红旗厦门医学高等专科学校解剖学教研室厦门361008 复旦大学上海医学院解剖学和组织学胚胎学系上海200032 上海中医药大学护理学院上海201203 东华大学纺织面料技术教育部重点实验室上海201620 复旦大学附属中山医院心血管病研究所上海200032

目的探讨猪大、中动脉及心脏瓣膜内皮细胞的形态学特征,为血管的临床和实验研究积累资料。方法动物在生理压下先后灌注肝素生理盐水和中性福尔马林溶液,取出升主动脉、主动脉弓,主动脉降部等大动脉和主动脉瓣;颈总动脉、胸廓内动脉、冠... 详细信息

目的探讨猪大、中动脉及心脏瓣膜内皮细胞的形态学特征,为血管的临床和实验研究积累资料。方法动物在生理压下先后灌注肝素生理盐水和中性福尔马林溶液,取出升主动脉、主动脉弓,主动脉降部等大动脉和主动脉瓣;颈总动脉、胸廓内动脉、冠状动脉及其前后降支等中动脉。标本按照电子显微镜常规处理,扫描电子显微镜下观察其内皮细胞的形态学特征。结果在大、中动脉的直部,内皮细胞呈梭形,核区微隆起,其长轴与血流方向一致。在大动脉弯曲部和主动脉瓣,内皮细胞呈卵圆形,有丰富的微绒毛。在冠状动脉观察到多个白细胞黏附在内皮表面。在右冠状动脉的后室间支,观察到一处细胞正处在更新状态。在胸廓内动脉、颈总动脉和冠状动脉观察到黏附在内皮表面且具有长突起的细胞,其胞体呈圆形、卵圆形、三角形等,突起数量2～6个不等。有的突起有分叉。结论内皮细胞的形态、排列、微绒毛的长度、密度和数量等随部位的不同而有差异,切应力可能是造成这些差异的重要因素之一。

关键词：内皮细胞形态学长突起细胞扫描电子显微镜猪

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外源性分化抑制因子Id2在C_2C_(12)细胞中的表达

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广州医学院学报 2012年第4期40卷 1-4页

作者：赖桂华余磊张黎声欧阳钧邱小忠安徽省蚌埠医学院人体解剖学教研室安徽蚌埠233030 南方医科大学临床解剖学研究所广东省组织构建与检测重点实验室广东广州510515 上海中医药大学解剖学教研室上海201203

目的:构建大鼠Id2基因真核荧光表达载体,并观察外源性Id2基因C_2C_(12)细胞中的表达。方法:RT-PCR扩增出Id2全长cDNA,T4 DNA连接酶将载体pGEM-T和Id2 cDNA进行连接,构建克隆载体,经限制性内切酶EcoR I酶切pGEM-Id2克隆载体和pEGFP-C2真... 详细信息

目的:构建大鼠Id2基因真核荧光表达载体,并观察外源性Id2基因C_2C_(12)细胞中的表达。方法:RT-PCR扩增出Id2全长cDNA,T4 DNA连接酶将载体pGEM-T和Id2 cDNA进行连接,构建克隆载体,经限制性内切酶EcoR I酶切pGEM-Id2克隆载体和pEGFP-C2真核表达栽体,构建出重组真核表达载体pEGFP-C2-Id2,经酶切分析、PCR鉴定及DNA测序证实cDNA片段大小和序列的正确性;通过电穿孔转染法将外源性Id2基因导入C_2C_(12)成肌细胞中。分别于转染4、8、12、24、36、72 h后通过荧光倒置显微镜下观察细胞整体情况,并计算转染效率。结果:经酶切分析和序列测定证实pEGFP-C2-Id2含大小正确的正向Id2 cDNA片段,获得高转染率和高表达外源性Id2基因的C_2C_(12)细胞,转染8 h时,转染效率约为(10.5±2.8)%;转染12 h后,转染效率约为(20.9±3.1)%;转染24 h后,转染效率最高,约为(60.8±3.2)%。结论:成功构建了同时携带有G418筛选位点和Id2基因的真核表达载体;并获得高表达外源性Id2基因的C_2C_(12)细胞。

关键词： Id2基因 C2C12细胞转染真核表达载体大鼠

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重组苦瓜叶蛋白MAP30诱导人食管癌细胞株EC-1.71凋亡的实验研究

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临床检验杂志 2011年第5期29卷 354-357页

作者：韩晓红邵世和薛延军陈德玉黄河李先茜许化溪江苏大学基础医学与医学技术学院病理学教研室江苏镇江212013 江苏大学基础医学与医学技术学院微生物学教研室江苏镇江212013 江苏大学基础医学与医学技术学院人体解剖学教研室江苏镇江212013 江苏大学附属医院肿瘤科江苏镇江212001 上海中医药大学附属普陀医院肿瘤实验室上海200062 江苏大学检验医学研究所江苏镇江212013

目的探讨用重组苦瓜蛋白MAP30(Momordica anti-HIV protein of 30 ku)诱导人食管癌细胞株EC-1.71细胞凋亡状况。方法 MAP30诱导EC-1.71细胞后,透射电镜观察细胞凋亡的形态特征;JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位(ΔΨm)变化;ELISA法检... 详细信息

目的探讨用重组苦瓜蛋白MAP30(Momordica anti-HIV protein of 30 ku)诱导人食管癌细胞株EC-1.71细胞凋亡状况。方法 MAP30诱导EC-1.71细胞后,透射电镜观察细胞凋亡的形态特征;JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位(ΔΨm)变化;ELISA法检测细胞培养上清液中细胞色素c(Cytc)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;免疫细胞化学法检测细胞ERK1/PERK1,AKT/PAKT和NF-κB表达;荧光微板阅读仪检测细胞caspase-12活性。结果 MAP30诱导可以使EC-1.71细胞固缩,核膜扭曲,核染色质聚集成块并靠近核膜,内质网高度膨胀、扩张;ΔΨm水平下降;Cytc和TNF-α含量增加;胞质中ERK1、AKT表达增强而胞核中PERK1、PAKT表达降低,NF-κB活性降低,caspase-12活性增强。结论 MAP30可以诱导EC-1.71细胞凋亡。

关键词：重组苦瓜蛋白MAP30 食管癌 EC-1.71细胞凋亡

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二氧化锗诱导L_6成肌细胞株的MyoD基因表达

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中国临床解剖学杂志 2005年第1期23卷 14-16页

作者：邱小忠余磊张黎声廖华秦建强杨俊欧阳钧南方医科大学临床解剖学研究所上海中医药大学解剖学教研室上海200032

目的:探讨成肌细胞的MyoD基因在线粒体肌病发生发展中的作用。方法:采用二氧化锗(GeO2)处理大鼠的成肌细胞系L6,观察细胞形态的变化,利用MTT分析GeO2对成肌细胞的影响,用RT-PCR检测MyoD基因表达。结果:发现GeO2在损伤成肌细胞的同时,能... 详细信息

目的:探讨成肌细胞的MyoD基因在线粒体肌病发生发展中的作用。方法:采用二氧化锗(GeO2)处理大鼠的成肌细胞系L6,观察细胞形态的变化,利用MTT分析GeO2对成肌细胞的影响,用RT-PCR检测MyoD基因表达。结果:发现GeO2在损伤成肌细胞的同时,能够诱导MyoD基因的表达,表明MyoD基因在线粒体肌病的发生发展中起着重要作用。结论:MyoD基因表达的增强是线粒体肌病中骨骼肌萎缩的一个信号分子,MyoD基因表达有可能成为线粒体肌病检测的参考指标。

关键词：二氧化锗(GeO2) L6细胞株 MyoD基因线粒体肌病

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活性氧促使L6成肌细胞的分化

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第一军医大学学报 2005年第11期25卷 1384-1386页

作者：邱小忠余磊廖华张黎声秦建强杨俊欧阳钧南方医科大学临床解剖学研究所广东广州510515 上海中医药大学解剖教研室上海200032

目的探讨氧化应激对L6成肌细胞生长分化的影响。方法MTT法检测H2O2对L6细胞活力的影响;观察H2O2引起的细胞形态学变化,RT-PCR检测myogenin基因表达水平。结果在较短的处理时间内(1h),低浓度的活性氧(50μmol/LH2O2)有利于细胞的生长(P&l... 详细信息

目的探讨氧化应激对L6成肌细胞生长分化的影响。方法MTT法检测H2O2对L6细胞活力的影响;观察H2O2引起的细胞形态学变化,RT-PCR检测myogenin基因表达水平。结果在较短的处理时间内(1h),低浓度的活性氧(50μmol/LH2O2)有利于细胞的生长(P<0.05);H2O2处理12h后,50和150μmol/L的H2O2能够诱导成肌细胞分化的标记分子-myogenin基因的表达,形态学研究结果表明H2O2能够诱导肌管的形成,促使成肌细胞的分化。结论活性氧可能是细胞内诱导细胞生长与分化的信号分子。

关键词： H2O2 细胞分化 L6成肌细胞 myogenin

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甲醛固定源同种异体骨移植材料的体外实验研究

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第一军医大学学报 2004年第1期24卷 27-31页

作者：陆云涛原林焦培峰余磊邱小忠张黎声钟世镇第一军医大学临床解剖学研究所广东广州510515 上海中医药大学解剖学教研室上海201400

目的将福尔马林固定骨组织制备成可用于骨缺损修复的骨移植材料,并对其材料学性能进行研究。方法取新鲜尸体骨组织用10%福尔马林溶液固定,锯骨机将其切成5 mm×5 mm×5 mm的骨粒和5 mm×5 mm×40 mm的骨条,并对骨组织... 详细信息

目的将福尔马林固定骨组织制备成可用于骨缺损修复的骨移植材料,并对其材料学性能进行研究。方法取新鲜尸体骨组织用10%福尔马林溶液固定,锯骨机将其切成5 mm×5 mm×5 mm的骨粒和5 mm×5 mm×40 mm的骨条,并对骨组织进行处理制备骨移植材料,对材料的残余福尔马林含量进行定性和定量的检测。并和成品的骨移植材料在理化性质和细胞相容性上进行检测比较,结果用SPSS软件进行分析。结果该种骨移植材料在外观、色泽和形态良好,其残余的福尔马林含量远低于现有标准和规程对甲醛生物摄入量的要求。在理化性质上和细胞相容性方面与成形的骨移植材料差别无显著性意义。结论制备得到的同种异体骨移植材料在理化性质上能满足成骨需要,具有很好的细胞相容性,且减少了移植材料含病原体的可能性。

关键词：甲醛同种异体骨移植材料体外实验骨缺损福尔马林

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成纤维细胞条件培养基对雪旺细胞生长和增殖的影响

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中国临床康复 2004年第35期8卷 7956-7957,i002页

作者：杨俊张黎声武雷邱小忠余磊秦建强解放军第一军医大学临床解剖学研究所广东省组织构建与检测重点实验室广东省广州市510515 上海中医药大学解剖学教研室上海市201400

目的:观察成纤维细胞条件培养基对雪旺细胞增殖分化的影响,探讨两者之间的协同作用,为组织工程化神经桥接体的构建奠定实践基础。方法:取20只出生四五天的SD乳鼠的臂丛和坐骨神经,运用双酶结合单酶消化法培养雪旺细胞和成纤维细胞,纯化... 详细信息

目的:观察成纤维细胞条件培养基对雪旺细胞增殖分化的影响,探讨两者之间的协同作用,为组织工程化神经桥接体的构建奠定实践基础。方法:取20只出生四五天的SD乳鼠的臂丛和坐骨神经,运用双酶结合单酶消化法培养雪旺细胞和成纤维细胞,纯化和培养雪旺细胞并制备两种条件培养基:A组:成纤维细胞+DMEM/F12;B组:成纤维细胞+雪旺细胞+DMEM/F12;C组:DMEM/F12(对照组)。将A,B,C3组分别加入种植有纯化雪旺细胞的96孔板中,MTT检测雪旺细胞增殖情况,S-100蛋白免疫组化染色鉴定雪旺细胞。结果:B组对雪旺细胞的增殖和分化有明显的促进作用;A组次之;C组最差(P<0.001)。结论:成纤维细胞条件培养基可促进雪旺细胞的增殖和分化。

关键词：生物医学工程成纤维细胞许旺细胞

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新生大鼠脊髓星形胶质细胞体外培养方法

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中国组织化学与细胞化学杂志 2001年第2期10卷 235-236页

作者：杨成严振国上海中医药大学解剖学教研室神经研究室上海200032

星形胶质细胞是中枢神经系统主要的胶质细胞,对神经元具有绝缘、营养、保护和支持作用.它们在中枢神经系统损伤和修复中也具有重要的作用,一方面星形胶质细胞可合成神经营养因子,促进神经再生[1～3],另一方面合成神经生长抑制因子,如硫... 详细信息

星形胶质细胞是中枢神经系统主要的胶质细胞,对神经元具有绝缘、营养、保护和支持作用.它们在中枢神经系统损伤和修复中也具有重要的作用,一方面星形胶质细胞可合成神经营养因子,促进神经再生[1～3],另一方面合成神经生长抑制因子,如硫酸软骨素蛋白多糖等[4],抑制神经再生,尤其是损伤恢复后期形成星胶瘢痕被认为是神经再生的机械性障碍.脊髓损伤后的修复一直是神经科学领域研究的一个重要课题,随着分子生物学和精密方法、仪器的发展,离体研究被越来越多地采用.星形胶质细胞是神经再生微环境中的主要成分,深入研究星形胶质细胞反应性增生的规律和调控机制,主动控制星形胶质细胞的反应性增生,既可使之合成适量的促进神经再生的因子,又能其避免形成胶质瘢痕,从而形成有利于神经再生的微环境.有关星形胶质细胞培养的文献很多,但多数是培养大脑皮质的星形胶质细胞,或应用细胞株培养[5,6],有关脊髓星形胶质细胞培养资料较少.我们实验室在脊髓损伤修复研究中摸索了一套成功的脊髓星形胶质细胞体外培养方法.

关键词：新生大鼠脊髓星形胶质细胞体外培养方法

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电针后大鼠中脑腹侧部粗提液对体外培养的多巴胺能神经元生长发育的影响

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针刺研究 1999年第3期24卷 179-183页

作者：梁希彬田德全赵英侠毛根金顾洪川严振国上海中医药大学解剖学教研室神经细胞培养实验室上海200032

电针正常大鼠后摘取其中脑腹侧部，制备电针后大鼠中脑腹侧部粗提液，加入到体外原代培养的中脑腹侧部神经元中。分别在第５天和第１０天用免疫细胞化学方法显示多巴胺能神经元，观察电针后大鼠中脑腹侧部粗提液对体外培养多巴胺能神经... 详细信息

电针正常大鼠后摘取其中脑腹侧部，制备电针后大鼠中脑腹侧部粗提液，加入到体外原代培养的中脑腹侧部神经元中。分别在第５天和第１０天用免疫细胞化学方法显示多巴胺能神经元，观察电针后大鼠中脑腹侧部粗提液对体外培养多巴胺能神经元表达的数目、神经元胞体直径和神经突起长度的影响。证实电针后大鼠中脑腹侧部粗提液能够促进多巴胺能神经元胞体的发育和突起的生长，但对多巴胺能神经元表达的数目无明显影响。提示这种作用的产生可能与电针刺激了中脑腹侧部某些具有神经营养作用的物质的产生或分泌有关。

关键词：电针中脑腹侧部多巴胺能神经元免疫细胞化学

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