检索结果-内蒙古大学图书馆

中西医结合学报 2011年第6期9卷 651-657页

作者：王晓柠陶庆冯琴彭景华刘平胡义扬上海中医药大学附属曙光医院上海中医药大学肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点研究室上海高校中医内科学E-研究院上海201203

目的:探讨一贯煎对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的肝纤维化大鼠肝脏胶原代谢的影响。方法:腹腔注射CCl49周制备大鼠肝纤维化模型,于造模第3周、第6周末各处死6只大鼠作动态观察,自第7周起将模型大鼠随机分为模型对照组和干... 详细信息

目的:探讨一贯煎对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的肝纤维化大鼠肝脏胶原代谢的影响。方法:腹腔注射CCl49周制备大鼠肝纤维化模型,于造模第3周、第6周末各处死6只大鼠作动态观察,自第7周起将模型大鼠随机分为模型对照组和干预组。干预组于继续造模的同时给予一贯煎灌胃3周,正常组与模型对照组大鼠给予同体积蒸馏水灌胃。第9周末处死全部大鼠,采集肝组织标本,检测肝组织组织金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhibitor ofmetalloproteinase-1,TI MP-1)、-2,基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)、-14,α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA),Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,ColⅠ)等的蛋白表达以及MMP-2、-9的活性。结果:与正常大鼠比较,造模第3、6和9周时肝纤维化大鼠肝组织胶原纤维增生程度增加,肝组织α-SMA、ColⅠ、TI MP-1、TI MP-2、MMP-13、MMP-14蛋白表达和MMP-2、MMP-9活性逐渐升高(P<0.05或P<0.01);与9周模型组比较,一贯煎组大鼠胶原纤维增生程度显著减轻(P<0.05),肝组织α-SMA、ColⅠ、TI MP-1、TI MP-2、MMP-13和MMP-14蛋白表达及MMP-2、MMP-9活性显著降低(P<0.01)。结论:一贯煎可以抑制肝星状细胞活化,抑制胶原的合成,促进过度增生的胶原纤维的降解,从而抑制CCl4诱导大鼠肝硬化的形成。

关键词：肝纤维化肝星状细胞胶原代谢一贯煎大鼠

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清热活血类方剂防治CCl_4小鼠肝纤维化的药效比较

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中国中药杂志 2012年第12期37卷 1804-1808页

作者：赵志敏余慧颖彭渊任红旭陶艳艳王峥涛朱邦贤刘平刘成海上海中医药大学附属曙光医院上海市中医药研究院肝病研究所上海201203 上海中医药大学中药研究所上海201203 上海中医药大学中医方证信息研究中心上海201203 上海高校中医内科学E-研究院上海201203 上海中医药大学肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203

目的:基于方证相对原理,通过肝肾纤维化方证数据库筛选分析,选择清热活血中药类方:鳖甲饮子、膈下逐瘀汤、复肝丸3首,以燮理枢机的燮枢汤作对照,观察比较不同类方对CCl4小鼠肝纤维化的药效作用。方法:10周龄C57BL/6小鼠雄性,体重(20... 详细信息

目的:基于方证相对原理,通过肝肾纤维化方证数据库筛选分析,选择清热活血中药类方:鳖甲饮子、膈下逐瘀汤、复肝丸3首,以燮理枢机的燮枢汤作对照,观察比较不同类方对CCl4小鼠肝纤维化的药效作用。方法:10周龄C57BL/6小鼠雄性,体重(20±3)g,清洁级,随机分为正常组、模组型、鳖甲饮子组、膈下逐瘀汤组、复肝丸组、燮枢汤组。除正常组外,其他各组小鼠均以10%CCl4橄榄油溶液2 ***-1体重腹腔注射,每周3次,共4周。造模同时,治疗组在造模之日起分别给予鳖甲饮子、膈下逐瘀汤、复肝丸、燮枢汤浸膏灌胃,每天1次,连续4周。正常组、模型组给予等体积的去离子水灌胃。试剂盒测定血清ALT,AST,γ-GT活性及Alb,TBil量,盐酸水解法观察肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量,天狼猩红染色观察肝组织胶原沉积情况。结果:与正常组相比,模型组小鼠体重明显降低,肝体比、脾体比明显升高;肝细胞脂肪变性及炎性坏死明显。胶原纤维沉积明显,形成纤维间隔,并可见假小叶形成。血清ALT,AST,TBil,γ-GT均显著升高,肝组织Hyp含量明显升高。鳖甲饮子组AST有所降低,但肝细胞变性、炎症坏死和胶原沉积没有明显减少;膈下逐瘀汤组脾体比和γ-GT显著降低,肝细胞变性和炎症坏死有所减轻,胶原沉积有所减少;复肝丸组脾体比降低,AST,γ-GT显著降低,肝细胞变性和炎症坏死有所减轻,胶原沉积显著减少,Hyp含量明显降低;燮枢汤组脾体比降低,但炎症和纤维化程度未减轻。结论:复肝丸显示出较好的抗CCl4小鼠肝纤维化作用。

关键词：中药清热活血 CCl4 肝纤维化比较

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提高小鼠原代肝星状细胞获得率及纯度的分离方法

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中国组织工程研究 2018年第21期22卷 3376-3380页

作者：徐莹张定棋慕永平陈佳美王清兰平键刘伟刘平上海中医药大学上海中医药大学附属曙光医院上海市中医药研究院肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室上海中医临床重点实验室上海市201203 上海中医药大学上海高校中医内科学E-研究院上海市201203

背景:由于小鼠肝脏小、血管较细,其原代肝星状细胞分离的难度相对较大,且得率有限,难以满足体外实验需求。目的:建立小鼠原代肝星状细胞高效稳定的分离方法,提高小鼠原代肝星状细胞的得率与纯度,为研究肝纤维化的机制奠定实验基础。方法... 详细信息

背景:由于小鼠肝脏小、血管较细,其原代肝星状细胞分离的难度相对较大,且得率有限,难以满足体外实验需求。目的:建立小鼠原代肝星状细胞高效稳定的分离方法,提高小鼠原代肝星状细胞的得率与纯度,为研究肝纤维化的机制奠定实验基础。方法:取成年雄性C57BL/6小鼠,以无钙镁离子的前灌流液经门静脉充分灌注肝脏,再先后以1 g/L链霉蛋白酶和0.7 g/LⅣ型胶原酶灌注,使用Nycodenz进行梯度密度离心,获取中间层原代肝星状细胞,锥虫蓝染法观察肝星状细胞活力,流式细胞法检测细胞纯度,免疫荧光法检测Desmin表达,并于倒置显微镜下观察细胞培养3,5,7 d后的形态变化,PCR法检测培养3,5,7 d后α-平滑肌肌动蛋白及Ⅰ型胶原蛋白基因表达情况。结果与结论:(1)每只小鼠肝脏可获得肝星状细胞(5.5±0.4)×10~6个,锥虫蓝检测细胞活力均大于95%,流式细胞法检测细胞纯度为94%,免疫荧光检测细胞高表达Desmin;(2)随着体外培养时间的延长,可见原代肝星状细胞逐渐由圆形向星型发展;(3)随培养天数增长,α-平滑肌肌动蛋白及Ⅰ型胶原蛋白表达逐渐升高;(4)结果提示,实验成功建立了高效分离小鼠肝星状细胞的方法,可为获得高纯度、高细胞活力的小鼠原代肝星状细胞提供技术方案,也为肝纤维化的机制研究提供技术保障。

关键词：肝星状细胞细胞分离技术原代细胞细胞外基质荧光鉴定肝纤维化细胞得率国家自然科学基金肝细胞细胞分离组织工程

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肝细胞向胆管上皮细胞转分化在继发性胆汁淤积性大鼠肝纤维化形成中的作用及黄芪汤组分的干预效应

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中国中西医结合杂志 2010年第5期30卷 513-518页

作者：邱冰峰都金星申定珠陈高峰刘平上海中医药大学附属曙光医院上海市中医药研究院肝病研究所.肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203 上海高校中医内科学E-研究院杭州师范大学附属医院杭州310015

目的探讨肝细胞向胆管上皮细胞转分化在继发性胆汁淤积性大鼠肝纤维化形成中的作用及黄芪汤组分抑制肝纤维化的效应机制。方法 75只SD雄性大鼠,采用胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)制备继发性胆汁淤积性肝纤维化模型,假手术组(Sham... 详细信息

目的探讨肝细胞向胆管上皮细胞转分化在继发性胆汁淤积性大鼠肝纤维化形成中的作用及黄芪汤组分抑制肝纤维化的效应机制。方法 75只SD雄性大鼠,采用胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)制备继发性胆汁淤积性肝纤维化模型,假手术组(Sham)仅作胆总管分离,不作胆总管结扎。大鼠BDL术后1周随机分为对照组(M)与干预组(Y组,经灌胃给予黄芪汤组分4周),Sham组于术后1周末随机抽取5只大鼠处死取材,M组分别于术后1、2、3、4周末随机抽取5只大鼠做动态观察,余下各组大鼠均于术后第5周末处死取材。观测肝脏组织学及羟脯氨酸(Hyp)含量;激光共聚焦显微镜观察肝组织胆管上皮细胞标志物角蛋白-7(CK7)与肝细胞特异性抗原(HepPar)共定位,Western blot检测CK7、HepPar的蛋白表达,IPP软件分析肝组织天狼猩红胶原染色。结果随着造模时间推移,M组大鼠肝组织肝细胞Hep Par阳性细胞逐渐减少(Sham>M1周>M2周>M3周>M4周>M5周),胆管上皮细胞(CK7阳性细胞)及纤维化程度、Hyp含量、CK7蛋白表达均逐渐增加(Shamep Par共定位细胞于术后1周即见增加,术后3周达到峰值,然后渐趋减少,肝组织Hep par蛋白表达量与CK7蛋白表达量呈显著负相关,Hep Par阳性细胞表达量与CK7阳性细胞表达量、胶原沉积程度均呈显著负相关,而CK7阳性细胞表达量与胶原沉积程度呈显著正相关;与M组比较,Y组大鼠死亡率、CK7阳性细胞、纤维化程度、肝组织Hyp含量、CK7蛋白表达量均显著下降(P<0.01),Hep Par阳性细胞及Hep Par蛋白表达含量显著增加。结论肝细胞向胆管上皮细胞转分化可能是继发性胆汁淤积性大鼠肝纤维化形成过程中的关键病理环节,抑制肝细胞向胆管上皮细胞转分化可能是黄芪汤组分有效干预继发性胆汁淤积性肝纤维化的主要效应机制之一。

关键词：继发性胆汁淤积性肝纤维化肝细胞胆管上皮细胞转分化黄芪汤

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祛湿化瘀方对脂肪肝大鼠肝脏基因表达谱的调节作用

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中国中西医结合杂志 2016年第2期36卷 203-209页

作者：冯琴唐亚军李晓飞孟胜喜彭景华赵瑜胡义扬上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203 教育部肝肾疾病病证实验室上海201203 上海高校中医内科学E-研究院上海201203

目的观察祛湿化瘀方对高脂饮食诱导脂肪肝大鼠肝脏基因表达谱的干预作用及其作用机制。方法20只SD雄性大鼠采用单纯高脂饮食(88%普通饲料+2%胆固醇+10%猪油)制备脂肪肝大鼠模型。造模4周后按随机数字表法分为祛湿化瘀方组(10只)和模型组... 详细信息

目的观察祛湿化瘀方对高脂饮食诱导脂肪肝大鼠肝脏基因表达谱的干预作用及其作用机制。方法20只SD雄性大鼠采用单纯高脂饮食(88%普通饲料+2%胆固醇+10%猪油)制备脂肪肝大鼠模型。造模4周后按随机数字表法分为祛湿化瘀方组(10只)和模型组(10只),继续造模同时分别给予祛湿化瘀方汤剂(0.93 g生药/100 g体重)和蒸馏水灌胃,每日1次。同时设10只SD雄性大鼠为正常组,给予等量蒸馏水灌胃,各组均于8周末取材。采用生化法检测肝组织甘油三酯(triglyceride,TG)、游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量及血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)活性;采用He及油红染色观察肝脏组织的病理变化;采用Affymetrix基因芯片检测肝组织基因表达,比较祛湿化瘀方组与模型组差异表达基因、分析差异基因的功能以及涉及的信号通路;并选取祛湿化瘀方组与模型组间10个差异倍数大于2的涉及糖脂代谢的差异基因进行RT-PCR验证。结果(1)与正常组比较,模型组大鼠肝组织TG、FFA含量和血清ALT、AST活性均明显升高(P<0.01);与模型组比较,祛湿化瘀方组大鼠TG、FFA含量和ALT、AST活性均明显降低(P<0.05,P<0.01)。祛湿化瘀方能降低高脂饮食诱导的大鼠脂肪肝模型的肝细胞脂肪变性程度,减少炎症,改善肝组织病理。(2)祛湿化瘀方组与模型组比较,P<0.05且差异倍数大于2的功能明确、有指定基因名称的差异基因共80个,其中上调基因44个,下调基因36个。80个差异基因涉及27条差异有统计学意义的信号通路(包括甘油酯类代谢、通路脂肪细胞信号通路、胰岛素信号通路及药物代谢信号通路等,P<0.05)。(3)对甘油激酶(Gk)、硬脂酰CoA去饱和酶-1(Scd1)、甘油-3-磷酸转移酶(Gpat2)、葡萄糖-6-磷酸酶(G6pc)、Irs1等10个调节糖脂代谢基因的RT-PCR验证实验结果显示:所有基因RT-PCR与基因芯片结果上调或下调趋势完全一致,80%基因差异倍数非常接近。结论祛湿化瘀方可调节高脂饮食诱导的脂肪肝大鼠脂肪代谢、糖类代谢、抗脂质过氧化及药物代谢等相关基因表达,表现出中药复方的综合药理作用。

关键词：祛湿化瘀方脂肪肝基因表达谱糖脂代谢

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基于均匀设计的健脾活血方改善酒精性肠渗漏的主效应中药分析

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中西医结合学报 2011年第11期9卷 1234-1241页

作者：傅琪琳胡义扬冯琴王晓柠彭景华崔团上海中医药大学附属曙光医院上海中医药大学肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点研究室上海市中医临床重点实验室上海201203 上海市高校中医内科学E-研究院上海201203

目的:探讨有显著抗酒精性肝损伤和肠道损伤作用的中药复方"健脾活血方"中改善肠道通透性作用的主效应中药,探索中药复方药理作用相应物质基础的分析方法。方法:采用Lieber-DeCarli酒精液体饲料(6周)诱导的大鼠酒精性肝损伤模... 详细信息

目的:探讨有显著抗酒精性肝损伤和肠道损伤作用的中药复方"健脾活血方"中改善肠道通透性作用的主效应中药,探索中药复方药理作用相应物质基础的分析方法。方法:采用Lieber-DeCarli酒精液体饲料(6周)诱导的大鼠酒精性肝损伤模型,根据均匀设计U_(17)(17^(16))表,对健脾活血方中8味中药分组实验,取材前3.5 h各组大鼠灌胃等量内毒素脂多糖,测定门静脉血浆内毒素含量作为肠通透性的考察指标。根据均匀设计法进行逐步回归分析,筛选出主效应中药或某种配伍组合。然后,对筛选出的主效应中药或组合再以该模型进行效应验证。结果:回归方程结果提示,健脾活血方中白芍、泽泻、五味子组合且生药剂量分别为1.33、0.50、0.17 g/kg时,抑制肠渗漏的效果最佳。验证实验显示,该"筛选"结果可靠。结论:白芍、泽泻、五味子是健脾活血方改善肠道通透性的主效应中药(组合);应用均匀设计法可有效揭示中药复方针对某一作用环节的主效应中药或组合。

关键词：中草药健脾活血方肝疾病酒精性均匀设计剂量效应关系药物大鼠

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慢性肝病量表在乙型肝炎肝硬化中的应用评价

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中华肝脏病杂志 2012年第8期20卷 621-627页

作者：胡鑫才张华林彦周扬刘平上海中医药大学附属曙光医院上海市中医药研究院肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中园临床重点实验室国家中医药管理局重点研究室(慢性肝病虚损) 201203 上海中医药大学上海高校中医内科学E研究院

目的评价慢性肝病量表（CLDQ）在乙型肝炎肝硬化中应用的信度和效度。方法将CLDQ用于297例乙型肝炎肝硬化患者的自评，同时评定患者肝功能Child分级，并以117例健康者为对照。通过条目分析、精密度分析、信度分析、探索性因子分析，以... 详细信息

目的评价慢性肝病量表（CLDQ）在乙型肝炎肝硬化中应用的信度和效度。方法将CLDQ用于297例乙型肝炎肝硬化患者的自评，同时评定患者肝功能Child分级，并以117例健康者为对照。通过条目分析、精密度分析、信度分析、探索性因子分析，以及反应度、区分度分析对量表进行总体评价。计数资料用疋。检验，计量资料两组间比较用两独立样本t检验，多组间比较用单因素方差分析，两两比较用Scheffe法。内部一致性以Cronbach＇s α系数、Gunman分半系数考察，相关性分析用Pearson相关系数，或Spearman相关系数以，方差分析考察区分度，结构效度检验用探索性因子分析的主成分法，并进行最大方差正交旋转。结果量表条目、量表整体及各维度无明显地板效应；条目的天花板效应大部分为30％～60％，腹部症状、活动和焦虑3个维度的天花板效应〈30％。总量表的内部一致性较好（Cronbach’s α=0．905），不同维度的内部一致性（Cronbach＇s α）为0．442～0．848；总量表与各维度相关系数均〉0．6（P值均〈0．01）。健康组量表总得分、各维度得分显著高于患者组垆值均〈0．01），患者组量表总得分和其中的4个维度得分在与不同肝功能分级之间呈现梯度变化，Child分级越重得分越低。探索性因子分析提取的7个公因子与原维度有中等的吻合度。结论CLDQ在乙型肝炎肝硬化中的应用具有较好的信度、内容效度、反应度和区分度，精密度和结构效度中等，可有效用于对乙型肝炎肝硬化患者的生活质量以及疗效的评价。

关键词：肝炎,乙型,慢胜肝硬化慢性肝病量表信度效度生活质量

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基于SIMCA法的肝炎后肝硬化中医证候判别研究

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中国中西医结合杂志 2011年第2期31卷 177-181页

作者：张华苏越王磊张琴苏式兵刘平海中医药大学附属曙光医院上海市中医约研究院肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验摩上海201203 上海中医药大学中医复杂系统研究中心上海201203 上海市公共卫生临床中心上海201508 上海中医药大学上海市高校中医内科学E研究院上海201203

目的探讨SIMCA(soft independent modeling of class analogy)法对肝炎后肝硬化中医证候判识的可行性。方法在对变量进行归一化处理的基础上,用SIMCA法对268例肝炎后肝硬化患者临床症状、体征和生物学指标进行分析,获得相应SIMCA距离并... 详细信息

目的探讨SIMCA(soft independent modeling of class analogy)法对肝炎后肝硬化中医证候判识的可行性。方法在对变量进行归一化处理的基础上,用SIMCA法对268例肝炎后肝硬化患者临床症状、体征和生物学指标进行分析,获得相应SIMCA距离并以之对肝硬化证候进行识别,再运用秩和检验分析误判原因。结果 5种中医证候(肝郁脾虚证、肝肾阴虚证、脾肾阳虚证、湿热内蕴证及瘀热蕴结证)的识别率在最近类中为72.39%,在次近类中为17.91%,总识别率为90.30%。其中,对肝肾阴虚证的识别率最高,总识别率为95.24%。秩和检验分析结果表明,在最近类中,未得到识别者与得到识别者比较,在某些对证候判识起关键作用的症状变量得分方面差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用SIMCA法对肝炎后肝硬化中医证候进行判识,与临床实际证候拟合度较高。依据SIMCA法建立证候辨识系统可为中医证候判别提供参考。

关键词： SIMCA法肝炎后肝硬化证候症状生物学指标

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CCl4诱导的小鼠纤维化肝组织微小RNA差异表达谱及初步功能分析

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中国病理生理杂志 2013年第12期29卷 2201-2211页

作者：王清兰李俊霞吕靖陶艳艳闫秀川刘成海上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所上海市中医临床重点实验室上海中医药大学肝肾疾病病证教育部重点实验室上海高校中医内科学E研究院上海201203

目的:应用微小RNA(miRNA)芯片技术研究miRNAs在四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠纤维化肝脏中的差异表达谱,并基于基因本体论(gene ontology,GO)分析及信号转导通路分析发现差异miRNAs的主要功能。方法:实验分为正常组及模型组,皮下注射CCl4复... 详细信息

目的:应用微小RNA(miRNA)芯片技术研究miRNAs在四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠纤维化肝脏中的差异表达谱,并基于基因本体论(gene ontology,GO)分析及信号转导通路分析发现差异miRNAs的主要功能。方法:实验分为正常组及模型组,皮下注射CCl4复制小鼠肝纤维化模型;应用Agilent小鼠miRNA寡核苷酸基因芯片检测各组肝脏miRNA表达谱。用随机方差模型t检验筛选2组间的差异miRNAs,并预测其靶基因。对靶基因进行GO分析及信号转导通路分析发现差异miRNAs发挥的主要功能。结果:正常组与模型组间共筛选出39个差异miRNAs,其中模型组较正常组上调的23个,下调的16个。GO分析及信号转导通路分析结果提示差异miRNAs可能调控的靶基因及其参与的生物学功能包括细胞的增殖与活化、细胞凋亡、细胞周期、细胞黏附、细胞迁移、炎症反应、转化生长因子β(TGF-β)/Smads信号转导通路、Wnt受体信号转导通路、蛋白代谢过程的调控等。GO分析发现关键的上调miRNA包括mmu-miR-322、mmu-miR-15b、mmu-miR-195、mmu-miR-200b、mmu-miR-214等,关键的下调miRNA包括mmu-miR-16、mmu-miR-130a、mmu-miR-101b、mmu-miR-30a和mmu-miR-30e等。对显著性GO与显著性信号通路所属的靶基因取交集,对网络中miRNA在网络中的调控地位进行评价,结果发现关键的上调miRNAs包括mmu-miR-200b、mmu-miR-322、mmu-miR-106b、mmu-miR-23a、mmu-miR-15b等,关键的下调miRNAs包括mmu-miR-16、mmu-miR-30e、mmu-miR-30c、mmu-miR-30a、mmu-miR-130a等。结论:纤维化肝组织miRNAs表达较正常肝组织发生明显变化;肝纤维化形成的各个环节,包括细胞的增殖与活化、细胞黏附、细胞凋亡、细胞迁移与分化、物质代谢、TGF-β信号通路等都可能受miRNAs的调控。

关键词：微小RNA 肝纤维化差异表达四氯化碳

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从痰瘀角度论治非酒精性脂肪性肝病

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中华中医药杂志 2013年第3期28卷 623-626页

作者：孟胜喜冯琴彭景华赵瑜黄甫陈亮徐琳王文静胡义扬上海中医药大学曙光医院上海中医药大学肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点研究室上海201203 上海市高校中医内科学E-研究院上海201203

通过中医古今文献研究和现代临床总结,探讨痰瘀与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发生发展的关系,提出饮食不节是促成NAFLD的始发因素,脾虚失运是形成NAFLD的关键,痰瘀互结、蓄积于肝是NAFLD的病机核心,痰瘀同治是NAFLD的基本治法。

关键词：痰瘀非酒精性脂肪性肝病相关性探讨

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