检索结果-内蒙古大学图书馆

上海交通大学学报（医学版） 2023年第11期43卷 1339-1347页

作者：王晓玲葛梦凯沈少明上海交通大学医学院基础医学公共技术平台上海200025 上海交通大学基础医学院细胞病理生理系分化与凋亡教育部重点实验室上海200025

目的探讨10号染色体磷酸酶和张力同源蛋白(phosphatase and tensin homolog,PTEN)对叉头框转录因子M1(forkhead box M1,FoxM1)可变剪接的调控,以及该调控作用对肿瘤细胞迁移的影响。方法在人胚肾293T细胞,人前列腺癌DU145细胞,人结肠腺... 详细信息

目的探讨10号染色体磷酸酶和张力同源蛋白(phosphatase and tensin homolog,PTEN)对叉头框转录因子M1(forkhead box M1,FoxM1)可变剪接的调控,以及该调控作用对肿瘤细胞迁移的影响。方法在人胚肾293T细胞,人前列腺癌DU145细胞,人结肠腺癌RKO细胞,人结肠癌SW480、SW620细胞中用短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)敲低PTEN的mRNA水平。设计针对FoxM1及其亚型FoxM1B和FoxM1C的特异性引物,用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测FoxM1B和FoxM1C的mRNA表达水平在PTEN敲低前后的差异。在DU145细胞中分别过表达FoxM1B和FoxM1C,利用Transwell细胞迁移实验和划痕实验检测两者对肿瘤细胞迁移的影响。通过免疫荧光和双荧光素酶报告基因检测实验,探索FoxM1B和FoxM1C对肿瘤细胞迁移调控差异的潜在机制。结果①将293T、DU145、RKO、SW480和SW620细胞内的PTEN敲低后,qRT-PCR检测发现,与对照细胞相比,在PTEN敲低的细胞中FoxM1B的mRNA均显著增多,而FoxM1C的mRNA表现为减少或不变。PTEN敲低不影响FoxM1的转录水平,而影响FoxM1的可变剪接,促进了FoxM1B亚型的生成。②Transwell细胞迁移实验结果显示,与对照细胞相比,FoxM1B过表达组DU145细胞迁移数量增多(P=0.024),FoxM1C过表达组DU145细胞迁移数量减少(P=0.000)。细胞划痕实验结果显示,过表达FoxM1B的DU145细胞愈合能力显著增强(P=0.001),过表达FoxM1C的DU145细胞愈合能力减弱(P=0.021)。FoxM1B和FoxM1C对肿瘤细胞迁移具有相反的调节作用:FoxM1B促进肿瘤细胞迁移,而FoxM1C则抑制肿瘤细胞迁移。③FoxM1B和FoxM1C过表达,均未引起β连环蛋白入核。双荧光素酶报告基因检测实验发现FoxM1B和FoxM1C的转录活性没有差别,FoxM1B和FoxM1C在调控肿瘤转移方面的差异不是由β连环蛋白转位介导的。结论PTEN敲低影响肿瘤细胞内FoxM1的可变剪接,导致促迁移的FoxM1B表达增加,从而促进肿瘤细胞迁移。

关键词：磷酸酶和张力同源蛋白叉头框转录因子M1 可变剪接肿瘤细胞迁移

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质谱分析在具有肾脏意义的单克隆免疫球蛋白病中的应用

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中华内科杂志 2023年第4期62卷 471-474页

作者：王鑫鹭徐静孟丽媛潘晓霞上海交通大学医学院附属瑞金医院肾脏内科上海200025 上海交通大学基础医学院基础医学公共技术平台上海200025

以质谱为核心的蛋白质组学技术可分析肾组织病理标本的蛋白表达谱,有效鉴定沉积于肾组织的单克隆蛋白成分,提高了具有肾脏意义的单克隆免疫球蛋白病(MGRS)诊断的准确率,推动了疾病相关生物标志物的发现及发病机制的研究,本文就质谱分析... 详细信息

以质谱为核心的蛋白质组学技术可分析肾组织病理标本的蛋白表达谱,有效鉴定沉积于肾组织的单克隆蛋白成分,提高了具有肾脏意义的单克隆免疫球蛋白病(MGRS)诊断的准确率,推动了疾病相关生物标志物的发现及发病机制的研究,本文就质谱分析在MGRS中应用的最新进展进行了综述。

关键词：单克隆免疫球蛋白病质谱分析法

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色谱与质谱参数的优化对免疫抑制剂定量灵敏度的影响

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上海交通大学学报（医学版） 2021年第11期41卷 1461-1469页

作者：孟爽周立付勤夏立孟丽媛上海交通大学医学院基础医学公共技术平台上海200025

目的·考察色谱条件中的流动相及质谱离子源参数对环孢菌素A(cyclosporine A,CsA)、他克莫司(tacrolimus,TaC)、西罗莫司(sirolimus,SiR)及依维莫司(everolimus,EvE)4种常见免疫抑制剂药物的液相色谱-质谱分析定量结果的影响。方法&... 详细信息

目的·考察色谱条件中的流动相及质谱离子源参数对环孢菌素A(cyclosporine A,CsA)、他克莫司(tacrolimus,TaC)、西罗莫司(sirolimus,SiR)及依维莫司(everolimus,EvE)4种常见免疫抑制剂药物的液相色谱-质谱分析定量结果的影响。方法·基于超高效液相色谱-串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)技术,通过改变流动相及离子源参数,评价不同参数设置对免疫抑制剂峰形及色谱峰响应的影响;通过考察标准曲线线性及最低定量限(limit of quantitation,LOQ)检验不同离子源温度下方法的灵敏度。结果·甲醇作为有机相能提供更窄的峰宽;水相中添加甲酸铵(ammonium formate,AF)能够明显提高色谱峰响应,高浓度的AF反而能一定程度地抑制色谱峰响应,因此选择5 mmol/L的AF作为流动相改性剂。离子源温度的优化能够明显改善色谱峰峰形和定量灵敏度,250℃下方法具良好的线性(r20.99)和灵敏度(LOQ=0.05 ng/mL)。结论·建立了基于UPLC-MS/MS技术的4种免疫抑制剂同步定量分析方法,并通过优化流动相及离子源参数便捷且显著地提高了定量灵敏度。该方法中AF的添加和离子源温度是影响定量分析的关键参数,这为基于液相色谱-质谱法的其他化合物的高灵敏度定量方法开发和优化提供新的思路。

关键词：免疫抑制剂超高效液相色谱-串联质谱离子源温度定量分析

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基于德尔菲法的温胆汤精准临床定位研究

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世界中医药 2024年第21期19卷 3362-3367页

作者：吕文文徐威龚雪温俊凯王海彬谭红胜上海交通大学医学院临床研究中心上海200025 上海交通大学医学院基础医学院公共技术服务平台上海200025 上海中医药大学附属普陀医院上海200062

目的:基于德尔菲专家咨询法探究温胆汤的临床应用经验,为其新药开发的精准临床定位提供依据。方法:遴选全国范围内的中西医临床医生45名,采用德尔菲专家咨询法围绕温胆汤治疗疾病的证候、症状、疗程及安全性等开展研究,并对结果进行统... 详细信息

目的:基于德尔菲专家咨询法探究温胆汤的临床应用经验,为其新药开发的精准临床定位提供依据。方法:遴选全国范围内的中西医临床医生45名,采用德尔菲专家咨询法围绕温胆汤治疗疾病的证候、症状、疗程及安全性等开展研究,并对结果进行统计分析。结果:2轮德尔菲专家咨询均发放问卷45份,有效回收43份,统计专家积极系数均为95.56%。温胆汤临床应用情况、临床适用人群、药物安全性等是专家比较关注的问题。在中医适用疾病方面,90.70%的专家认为不寐的患者适合使用温胆汤,86.04%的专家认为痰热内扰证是温胆汤的最佳中医证候。在干预疗程方面,48.84%的专家认为温胆汤最优干预疗程为14 d。在药物安全性方面,88.37%的专家认为严重肝、肾功能损伤的患者不宜使用温胆汤,44.19%的专家认为用药15~30 d应当关注药物安全性问题。结论:专家普遍认为温胆汤的优势治疗病种为失眠,中医证候表现为痰热内扰型,症状表现是痰多胸闷,消化不良,口苦伴恶心嗳气等。同时,临床使用不宜久服,肝肾功能严重受损为其禁忌证。

关键词：温胆汤临床定位德尔菲法问卷调查用药安全不寐痰热内扰经典名方

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流式细胞术在肿瘤相关成纤维细胞增殖检测中的应用

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中国细胞生物学学报 2022年第9期44卷 1772-1778页

作者：符蓉石兆鹏糜军上海交通大学医学院基础医学公共技术平台上海200025 上海交通大学医学院细胞生物学与分子细胞生物学系上海200025

肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblast,CAF)是肿瘤组织中数目最多的一种基质细胞,对肿瘤的发生发展起着重要作用。该文利用流式细胞术(flow cytometry,FCM)对比分析肿瘤相关成纤维细胞和非活化成纤维细胞(non-activated fib... 详细信息

肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblast,CAF)是肿瘤组织中数目最多的一种基质细胞,对肿瘤的发生发展起着重要作用。该文利用流式细胞术(flow cytometry,FCM)对比分析肿瘤相关成纤维细胞和非活化成纤维细胞(non-activated fibroblast,NAF)两者在细胞增殖和DNA倍性等方面的差异。在细胞形态学观察和细胞计数的基础上,通过PI、EdU和Ki-67等染色后利用FCM进行定量检测,并采用GraghPad软件对获得的数据进行统计分析。研究表明,与NAF细胞相比,CAF细胞增殖减缓,细胞周期在G_(0)/G_(1)期被阻滞,其差异具有统计学意义(P<0.05)。该文首次利用FCM量化CAF细胞的生物学特性,尝试为进一步机制的研究提供理论依据。

关键词：流式细胞术肿瘤相关成纤维细胞非活化成纤维细胞增殖

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褪黑素在儿童睡眠研究中的应用及检测方法

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中国儿童保健杂志 2021年第5期29卷 506-509页

作者：金伟琦韩冬梅王广海李归浦江帆上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心发育行为儿科教育部上海环境与儿童健康重点实验室上海200127 上海交通大学医学院基础医学公共技术平台贝因美(杭州)食品研究院有限公司

褪黑素是一种具有多种生理作用的吲哚胺类激素,近年来其在评估昼夜节律及改善睡眠方面备受瞩目,儿童褪黑素研究也逐渐增多,但目前缺乏灵敏精确的儿童褪黑素检测方法。因此,本文主要就褪黑素在生命早期的特征变化、儿童睡眠研究中的应用... 详细信息

褪黑素是一种具有多种生理作用的吲哚胺类激素,近年来其在评估昼夜节律及改善睡眠方面备受瞩目,儿童褪黑素研究也逐渐增多,但目前缺乏灵敏精确的儿童褪黑素检测方法。因此,本文主要就褪黑素在生命早期的特征变化、儿童睡眠研究中的应用及其采集检测方法进行综述,为临床处理儿童睡眠节律紊乱等睡眠问题提供一定的参考。

关键词：褪黑素昼夜节律睡眠儿童

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消除小鼠肝脏冰冻切片自发荧光4种封闭方法的比较

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第二军医大学学报 2020年第8期41卷 871-875页

作者：刘晓宁邹嫣琼袁继行李贵苹杭勤黄莹上海交通大学医学院基础医学公共技术平台上海200025 海军军医大学(第二军医大学)基础医学院医学遗传学教研室上海200433

目的通过对小鼠肝脏冰冻切片进行不同的封闭处理,探寻消除小鼠肝脏自发荧光的最佳方法,以降低对免疫荧光阳性信号的干扰,提高免疫荧光结果的准确性。方法(1)经脾静脉注射肝脏荷瘤裸小鼠:将Hepa1-6-GFP细胞通过脾脏注射方法使其在雄性无... 详细信息

目的通过对小鼠肝脏冰冻切片进行不同的封闭处理,探寻消除小鼠肝脏自发荧光的最佳方法,以降低对免疫荧光阳性信号的干扰,提高免疫荧光结果的准确性。方法(1)经脾静脉注射肝脏荷瘤裸小鼠:将Hepa1-6-GFP细胞通过脾脏注射方法使其在雄性无胸腺BALB/c裸小鼠肝脏定植,并将肝脏进行冰冻连续切片,对切片分别进行AB液(内源性生物素封闭液)、blocking、AB液+blocking、丙酮+AB液+blocking封闭处理,然后检测小鼠肝脏冰冻切片自发荧光。(2)C57BL/6小鼠:对C57BL/6小鼠肝脏进行冰冻连续切片,对切片分别进行上述4种封闭处理,用F4/80标记肝巨噬细胞(Kupffer细胞),然后检测小鼠肝脏冰冻切片自发荧光。结果肝脏组织冰冻切片免疫荧光染色时,4种封闭处理都可以减弱肝脏切片的自发荧光,但丙酮+AB液+blocking封闭处理效果最佳。结论丙酮+AB液+blocking联合应用对小鼠肝脏组织冰冻切片自发荧光的消除效果最好。

关键词：小鼠肝冰冻切片自发荧光免疫荧光技术

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新型冠状病毒感染疫情下的思考

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中国科学：生命科学 2020年第3期50卷 247-257页

作者：丁蕾蔡伟丁健青张欣欣蔡泳石建伟梁启明张录法孙丽珍瞿介明江帆陈国强上海交通大学医学院院长办公室上海200025 上海交通大学医学院科技发展处上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院临床病毒研究室上海200025 上海交通大学医学院公共卫生学院上海200025 上海交通大学医学院基础医学院上海200025 上海交通大学健康长三角研究院上海200240 上海交通大学科学技术发展研究院上海200240 上海交通大学医学院附属瑞金医院呼吸与危重症医学科上海200025

新型冠状病毒感染疫情蔓延以来,中国举国上下开展了一场史无前例的疫情阻击战.疫情蔓延之初,中国迅速向世界卫生组织通报了疫情,在第一时间破译病毒基因序列并向全球公布等一系列强有力的防控举措得到国际社会赞誉.尽管疫情尚未结束,但... 详细信息

新型冠状病毒感染疫情蔓延以来,中国举国上下开展了一场史无前例的疫情阻击战.疫情蔓延之初,中国迅速向世界卫生组织通报了疫情,在第一时间破译病毒基因序列并向全球公布等一系列强有力的防控举措得到国际社会赞誉.尽管疫情尚未结束,但对此次乃至未来潜在的疫情应对的思考已经在全国乃至世界范围内开始了.本文试图从我国公共卫生防控体系、应急响应机制、科技创新、医疗供给与储备等十大方面的问题进行系统梳理,并在此基础上着重就加强公共卫生和疾病防控体系、完善应急防控体系、提高政府治理能力和公民知识普及力度、构建相关法律法规体系以及国家生物安全体系等提出相关建议.我们希望通过对此次疫情的初步思考,总结经验教训,为进一步提升我国预防和控制传染病等突发重大公共卫生事件的整体应急能力乃至治理能力和治理体系现代化提供参考.

关键词：新型冠状病毒感染疫情突发公共卫生事件问题与不足政策建议

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小泛素样修饰物蛋白酶3调控小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞自噬

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实验动物与比较医学 2020年第4期40卷 270-278页

作者：朱慧琴邹嫣琼杨洁易静杨洁上海交通大学医学院生物化学与分子细胞生物学系上海200025 上海交通大学医学院基础医学公共技术平台上海200025

目的探讨小泛素样修饰物(small ubiquitin-like modifier,SUMO)特异性蛋白酶3(SUMO-specific protease 3,SENP3)对小鼠肺组织细胞自噬的调控作用及分子机制。方法应用免疫荧光技术检测SENP3在肺组织细胞中的定位;对SENP3基因野生型C57BL... 详细信息

目的探讨小泛素样修饰物(small ubiquitin-like modifier,SUMO)特异性蛋白酶3(SUMO-specific protease 3,SENP3)对小鼠肺组织细胞自噬的调控作用及分子机制。方法应用免疫荧光技术检测SENP3在肺组织细胞中的定位;对SENP3基因野生型C57BL/6J小鼠(SENP3^+/+)和SENP3基因敲除杂合子小鼠(SENP3^+/-)进行饥饿处理,诱导细胞自噬;应用免疫印迹法评估细胞自噬水平;应用电子显微镜观察和免疫荧光技术分析发生自噬的细胞类型;应用免疫共沉淀方法检测自噬相关分子卷曲螺旋状Myosin样Bcl-2相互作用蛋白1(coiled-coil myosin-like Bcl-2-interacting protein 1,BECN1)的SUMO化修饰。结果 SENP3在肺泡Ⅱ型上皮细胞中高表达。小鼠经饥饿处理后,肺泡Ⅱ型上皮细胞出现自噬现象,且SENP3^+/-小鼠较SENP3^+/+小鼠更明显。同时,肺组织样品中BECN1的SUMO2/3化修饰被SENP3去除。结论 SENP3抑制饥饿应激时小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的自噬,并可对细胞自噬程度进行精细调控。

关键词：小泛素样修饰物蛋白酶3 自噬肺泡Ⅱ型上皮细胞小鼠

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流式细胞仪MoFlo Astrios^(EQ)96孔板单细胞分选方法的条件优化

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上海交通大学学报（医学版） 2018年第7期38卷 845-850页

作者：张小翠符蓉赵犇鹏上海交通大学基础医学院基础医学公共技术平台上海200025

目的·优化流式细胞仪MoFlo Astrios EQ 96孔板单细胞分选方法,为单细胞技术的应用奠定基础。方法·通过对仪器精确调节及各项参数优化,采用不同孔径喷嘴、不同分选方式对32D、U937、iBMDM和293T共4种细胞进行单细胞分选,观察... 详细信息

目的·优化流式细胞仪MoFlo Astrios EQ 96孔板单细胞分选方法,为单细胞技术的应用奠定基础。方法·通过对仪器精确调节及各项参数优化,采用不同孔径喷嘴、不同分选方式对32D、U937、iBMDM和293T共4种细胞进行单细胞分选,观察分选后单细胞孔数以及单细胞所形成克隆孔数。结果·在单细胞分选模式下,70、100μm喷嘴分选获得单细胞的孔数分别为83~91、87~93孔。分选后的单细胞经7~10 d培养后,70μm喷嘴分选获得的单细胞所形成克隆的孔数为36~58孔;100μm喷嘴条件下电荷式分选、"无电"直接分选获得的单细胞所形成克隆的孔数分别为53~78、69~81孔。结论·进行单细胞分选时,选择100μm喷嘴和"无电"直接分选方式可得到较好的细胞活性与较高的细胞克隆率。

关键词：流式细胞仪 96孔板单细胞分选喷嘴 “无电”直接分选单细胞培养

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