检索结果-内蒙古大学图书馆

1-苯基2-硫脲对Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼肿瘤多重耐药相关基因表达的影响

贵州医科大学学报 2024年第11期49卷 1587-1592,1600页

作者：孔鹏莫大双陈敏黄江涛安丽娟尹正昊舒莉萍何志旭贵州医科大学临床医学院儿科学教研室贵州贵阳550004 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心贵州医院儿童急诊部贵州贵阳550004 贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004

目的探讨去色素药物1-苯基2-硫脲(PTU)对Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼肿瘤多重耐药相关基因abcb4及其标记基因egfp表达的影响及可能机制。方法选取受精后24 h(24 hpf)Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼胚胎做药物暴露实验,分为Control、PTU以及PTU+RES 3个... 详细信息

目的探讨去色素药物1-苯基2-硫脲(PTU)对Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼肿瘤多重耐药相关基因abcb4及其标记基因egfp表达的影响及可能机制。方法选取受精后24 h(24 hpf)Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼胚胎做药物暴露实验,分为Control、PTU以及PTU+RES 3个组;持续用药96 h,通过荧光显微镜拍照检测各组斑马鱼胃肠道荧光强度;RT-qPCR检测abcb4、egfp及pxr基因mRNA,Western Blot检测abcb4、egfp蛋白(Abcb4、eGFP)的表达,罗丹明B积累实验检测不同组Abcb4功能。结果与Control组相比,PTU组Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼荧光表达增强(P<0.01),PTU+RES组荧光变化不明显(P>0.05);PTU组abcb4、egfp及pxr基因mRNA表达均增加(P<0.005),PTU+RES组pxr基因mRNA表达增加(P<0.005),abcb4、egfp基因mRNA表达无明显变化(P>0.05);PTU组abcb4、egfp蛋白表达均增加(P<0.005),PTU+RES组无明显变化(P>0.05);PTU组Abcb4功能增强(P<0.01),PTU+RES组无明显变化(P>0.05)。结论PTU可诱导Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼abcb4和egfp表达增加,核因子pxr可能参与PTU对abcb4和egfp的诱导调节过程,在应用PTU去色素处理的Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼进行药物筛选时需注意PTU对abcb4和egfp表达的影响。

关键词： 1-苯基2-硫脲转基因斑马鱼斑马鱼b4型ATP结合盒人B1型ATP结合盒孕烷X受体增强型绿色荧光蛋白

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基于术前人B-淋巴细胞趋化因子1检测的肝细胞癌患者肝切除术后复发预测模型的构建及分析

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临床肝胆病杂志 2021年第4期37卷 823-828页

作者：李明蔚高见翟相威钱相君文夏杰姚明解段昭君赵二江张玲鲁凤民郑州大学公共卫生学院流行病学教研室郑州450001 上海交通大学医学院附属仁济医院上海市肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室上海200032 北京大学基础医学院病原生物学系暨感染病中心北京100191 北京大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系北京100191 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系北京100005 郑州大学附属肿瘤医院病案室郑州450008 郑州大学附属肿瘤医院肝胆胰外科郑州450008

目的探究与肝细胞癌患者肝切除术后复发相关的血清学指标,构建复发预后模型以评估患者是否适合采用姑息性肝切除手术。方法共纳入了2009年2月—2013年7月于郑州大学附属肿瘤医院接受肝切除术并进行随访的肝细胞癌患者111例。收集患者的... 详细信息

目的探究与肝细胞癌患者肝切除术后复发相关的血清学指标,构建复发预后模型以评估患者是否适合采用姑息性肝切除手术。方法共纳入了2009年2月—2013年7月于郑州大学附属肿瘤医院接受肝切除术并进行随访的肝细胞癌患者111例。收集患者的基本资料,根据患者在随访期间内是否复发分为复发组和未复发组。正态分布的计量资料两组间比较采用t检验;非正态分布的计量资料两组间比较采用Wilcoxon秩和检验。计数资料组间比较采用χ^(2)检验。Kaplan-Meier法绘制生存曲线,log-rank检验比较差异。单因素与多因素分析采用Cox回归分析,采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)判断预测效能。结果Kaplan-Meier生存曲线显示AFP、ALP、GGT、FIB低值组及人B-淋巴细胞趋化因子1(CXCL13)高值组患者的中位复发时间更长(P值均<0.05)。AFP[HR(95%CI)=1.69(1.03~2.79),P=0.039]、GGT[HR(95%CI)=1.89(1.14~3.14),P=0.014]和CXCL13[HR(95%CI)=0.54(0.33~0.89),P=0.015]为与肝切除术后复发相关的独立因素。基于其构成的预后指数:PI=0.526×AFP+0.637×GGT-0.616×CXCL13,预测姑息性切除术后0~3个月内复发的ROC曲线下面积(AUC)为0.87,灵敏度为93.75%,特异度为63.64%,但对0~6个月(AUC=0.68)及更长时间的预测效能明显下降,对姑息性切除的复发预测效能显著高于根治性切除。结论基于CXCL13、AFP和GGT构建的预后模型可用于评估患者采用姑息性肝切除术后的早期复发风险,有助于临床医生依据患者获益情况作出诊疗决策。

关键词：癌,肝细胞肝切除术复发预测模型,统计学

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环孢素A对Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼肠道自发绿色荧光的影响

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贵州医科大学学报 2025年第3期50卷 370-377页

作者：孔鹏莫大双赵砚驰张乙进杨雁竹路政舒莉萍何志旭贵州医科大学临床医学院儿科学教研室贵州贵阳550004 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心贵州医院儿童急诊部贵州贵阳550004 贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学医学检验学院贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004

目的探讨斑马鱼肠道自发绿色荧光的原因及环孢素A(cyclosporine A,CsA)对自发荧光的影响,优化利用转基因(transgenic,Tg)斑马鱼Tg(abcb4:eGFP)筛选肿瘤多重耐药药物的方法。方法选取受精后5天(five day post fertilization,5 dpf)的野生... 详细信息

目的探讨斑马鱼肠道自发绿色荧光的原因及环孢素A(cyclosporine A,CsA)对自发荧光的影响,优化利用转基因(transgenic,Tg)斑马鱼Tg(abcb4:eGFP)筛选肿瘤多重耐药药物的方法。方法选取受精后5天(five day post fertilization,5 dpf)的野生型(wild type,WT)和Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼幼鱼,观察其肠道自发荧光;将鲢鱼胆汁注射到WT斑马鱼胚胎后观察荧光情况;检测不同处理浓度和不同处理时间的CsA对WT斑马鱼肠道自发荧光的影响;10μmol/L CsA处理2 h对Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼荧光检测的影响;Western blot检测CsA对Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼b4型ATP结合盒(ATP-binding cassette b4,Abcb4)和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,eGFP)表达的影响。结果斑马鱼肠道存在自发荧光,可影响Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼的荧光检测准确度;鲢鱼胆汁在斑马鱼胚胎中可激发出绿色荧光;CsA可抑制斑马鱼肠道自发荧光,其中10μmol/L CsA处理2 h可达到最佳抑制效应,且不影响斑马鱼Abcb4和eGFP蛋白表达。结论斑马鱼肠道自发荧光可能为胆红素所致,10μmol/L CsA处理2 h可有效抑制斑马鱼肠道自发荧光,提高Tg(abcb4:eGFP)斑马鱼药物筛选时荧光检测的准确度。

关键词：环孢素A 转基因斑马鱼斑马鱼b4型ATP结合盒自发荧光

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华支睾吸虫钙结合蛋白Cs16的重组表达及血清诊断应用的初步评价

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2018年第3期36卷 275-279,285页

作者：濮珏彪唐莉莉殷岑楠杜新月吴健桦赵蔚刘登宇王兆军吴琛耘上海交通大学医学院免疫学与微生物学系上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科上海200025 广西医科大学基础医学院寄生虫学教研室南宁530021

目的以原核和真核表达系统克隆、表达华支睾吸虫含有EF手型结构域的钙结合蛋白(Cs16),纯化并初步评价其在华支睾吸虫病免疫诊断中的作用。方法以华支睾吸虫成虫c DNA为模板,PCR扩增含有EF手型结构域的Cs16基因,分别构建原核重组质粒p GE... 详细信息

目的以原核和真核表达系统克隆、表达华支睾吸虫含有EF手型结构域的钙结合蛋白(Cs16),纯化并初步评价其在华支睾吸虫病免疫诊断中的作用。方法以华支睾吸虫成虫c DNA为模板,PCR扩增含有EF手型结构域的Cs16基因,分别构建原核重组质粒p GEX-4T-1-Cs16和真核重组质粒p PIC9K-Cs16,将酶切和测序鉴定正确的重组质粒分别转入大肠埃希菌BL21和毕赤酵母GS115后,表达并纯化目的蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)验证其纯度及免疫原性。以华支睾吸虫重组蛋白Cs16为包被抗原,采用ELISA检测24例华支睾吸虫病患者血清中相应抗体的反应性及其与日本血吸虫病患者血清的交叉反应性。结果PCR扩增获得Cs16基因片段,大小为515 bp。构建的重组质粒p GEX-4T-1-Cs16和p PIC9K-Cs16经酶切和测序鉴定正确。SDS-PAGE结果显示,2个重组质粒在大肠埃希菌BL21和毕赤酵母GS115中均为可溶性表达,重组蛋白Cs16相对分子质量约为16 000。Western blotting结果显示,2个重组蛋白能分别被抗GST抗体和抗His抗体特异性识别。ELISA检测结果显示,原核表达和真核表达重组蛋白Cs16的敏感性分别为70.8%(17/24)和54.2%(13/24),特异性分别为95.2%(20/21)和100%(21/21),差异均有统计学意义(P<0.05)。与日本血吸虫病患者血清的交叉反应为1/10。结论获得了原核和真核Cs16重组抗原,其在华支睾吸虫病的诊断上具有潜在的应用价值。

关键词：华支睾吸虫钙结合蛋白原核表达真核表达免疫诊断

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存放方式对船载冰箱保存红细胞活性与天然免疫功能的影响

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中国输血杂志 2015年第8期28卷 988-990页

作者：刘书逊唐大海贺嘉蕾韩利华刘曼娇吴江第二军医大学基础部免疫学教研室上海200433 第四一一医院检验科上海交通大学医学院附属仁济医院输血科

目的探讨船载条件下血袋摆放方式对保存红细胞活性和天然免疫功能的影响。方法常规制备红细胞悬液4袋,每袋等分为4份,1份为对照组,留存陆地血库冰箱进行直立贴放,其余3份为实验组,于任务当天置于同1船载储血冰箱内,分别给予垂挂固定(E1... 详细信息

目的探讨船载条件下血袋摆放方式对保存红细胞活性和天然免疫功能的影响。方法常规制备红细胞悬液4袋,每袋等分为4份,1份为对照组,留存陆地血库冰箱进行直立贴放,其余3份为实验组,于任务当天置于同1船载储血冰箱内,分别给予垂挂固定(E1)、直立贴放(E2)和平铺码放(E3)等不同方式储存,任务结束后检测每袋血液的红细胞渗透脆性、补体调控蛋白表达以及天然免疫黏附功能。结果与对照组相比,平铺码放方式保存的红细胞CD35以及免疫黏附功能均显著降低,渗透脆性明显增高;垂挂固定和直立贴放储存的红细胞,上述指标没有显著改变。3种不同存放方式对红细胞表面补体调控蛋白CD55和CD59的表达没有明显影响。结论从天然免疫黏附功能的角度分析,船载冰箱保存血液不适宜采用平铺码放方式。

关键词：船载运输血液保存红细胞免疫功能

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“思、论、行”三位一体研究生培养模式探讨

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基础医学教育 2015年第4期17卷 367-369页

作者：刘书逊吴江第二军医大学基础部免疫学教研室&医学免疫学国家重点实验室上海200433 上海交通大学医学院附属仁济医院输血科

医学研究生教育是掌握科研或临床技能以及形成科研思维的重要时期,通过自身研究生学习经历,协助导师辅助培养和独立培养研究生的经历,归纳出独立思考(思)、自由讨论(论)和严格技能训练(行)三位一体的研究生培养模式,以及探讨实现思、论... 详细信息

医学研究生教育是掌握科研或临床技能以及形成科研思维的重要时期,通过自身研究生学习经历,协助导师辅助培养和独立培养研究生的经历,归纳出独立思考(思)、自由讨论(论)和严格技能训练(行)三位一体的研究生培养模式,以及探讨实现思、论、行的方法。

关键词：医学研究生教育教育模式教学改革

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长双歧杆菌染色体上的基因BLJ_864和BLJ_865构成的Ⅱ型毒素—抗毒素系统

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上海交通大学学报（医学版） 2014年第9期34卷 1319-1324页

作者：韦艳霞叶露刘佃滨郭晓奎徐州医学院病原生物学与免疫学教研室徐州221004 上海交通大学基础医学院病原生物学教研室上海200025 徐州医学院口腔医学院徐州221004

目的鉴定Bifidobacterium longum JDM301(*** JDM301)染色体上的BLJ_864、BLJ_865是否构成mazEF家族的一组Ⅱ型毒素—抗毒素系统(TA系统)。方法通过RT-PCR分析BLJ_864和BLJ_865在*** JDM301以及***中的共转录;通过将带有BLJ_864和BLJ_865的完整操纵子的质粒转化入***,证明同一操纵子中的BLJ_864、BLJ_865所编码的抗毒素蛋白和毒素蛋白共表达;通过在***中单独表达BLJ_864编码的毒素蛋白或将其与BLJ_865编码的抗毒素蛋白共表达,鉴定BLJ_864编码的毒素蛋白对细菌生长的抑制作用及其对应的BLJ_865编码的抗毒素蛋白能否消除毒素蛋白的生长抑制作用。结果 BLJ_864和BLJ_865构成一个二元操纵子,两者在其天然菌株*** JDM301中可以共转录;异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下,BLJ_864和BLJ_865所编码的抗毒素蛋白和毒素蛋白在异源宿主***中共表达。BLJ_864编码的毒素蛋白的表达抑制异源宿主***的生长,而将BLJ_865所编码的抗毒素蛋白与BLJ_864编码的毒素蛋白共表达则可以拮抗毒素蛋白的生长抑制作用。结论 *** JDM301基因组中的假定基因BLJ_864和BLJ_865编码一组有功能的、隶属mazEF家族的Ⅱ型TA系统。

关键词：毒素—抗毒素系统长双歧杆菌 mazEF

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分枝杆菌脂聚糖的分离、纯化及其结构和功能分析

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微生物学通报 2014年第1期41卷 96-103页

作者：玄松花赵俊伟孙战强周业成张朝宝余晓丽郭晓奎刘文第张舒林河南中医学院医学免疫学重点实验室河南郑州450008 上海交通大学基础医学院病原生物学教研室上海200025 四川大学生命科学学院四川成都610065 武汉工业学院生物与制药工程学院湖北武汉430023

【目的】建立分离、纯化分枝杆菌脂聚糖的方法,初步比较分析不同菌株来源的脂阿拉伯甘露聚糖(Lipoarabinomannan,LAM)和脂甘露聚糖(Lipomannan,LM)的结构差异及研究脂聚糖刺激对巨噬细胞环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)蛋白表达的... 详细信息

【目的】建立分离、纯化分枝杆菌脂聚糖的方法,初步比较分析不同菌株来源的脂阿拉伯甘露聚糖(Lipoarabinomannan,LAM)和脂甘露聚糖(Lipomannan,LM)的结构差异及研究脂聚糖刺激对巨噬细胞环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)蛋白表达的影响。【方法】应用Triton X-114液相法提取脂聚糖,电洗脱法分离纯化,基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)进行分子量鉴定;基于特异性识别非还原性末端α-D-甘露糖基的刀豆球蛋白(Concanavalin A,Con A)分析新诺分枝杆菌JDM601、结核分枝杆菌H37Rv标准株和耻垢分枝杆菌mc2155脂聚糖的结构差异;进一步用Western blot检测脂聚糖刺激的RAW 264.7巨噬细胞COX-2蛋白的表达。【结果】通过电洗脱法成功纯化出3种菌株脂聚糖;MALDI-TOF/TOF-MS鉴定发现,分子量从小到大依次为新诺分枝杆菌JDM601、耻垢分枝杆菌mc2155和结核分枝杆菌H37Rv来源的脂聚糖。Western blot显示,Con A能与结核分枝杆菌H37Rv标准株来源的LAM相互作用,而不能与新诺分枝杆菌JDM601和耻垢分枝杆菌来源的LAM相互作用;并且发现Con A与新诺分枝杆菌JDM601来源的LM有很强的反应,然而与其余两种来源的LM反应很弱。3种菌株来源的脂聚糖均能刺激RAW 264.7巨噬细胞COX-2蛋白的表达。【结论】首次成功对来源于中国临床分枝杆菌分离株的脂聚糖进行了分离纯化,初步探讨了不同菌株来源分枝杆菌脂聚糖的结构差异,并表明LAM和LM均能刺激巨噬细胞诱导COX-2蛋白的表达,为进一步研究其对宿主的毒力和免疫机制奠定了基础。

关键词：分枝杆菌脂阿拉伯甘露聚糖脂甘露聚糖基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱

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复合抗原ESAT-6/CFP-10/Rv0315在活动性肺结核辅助诊断中的价值

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郑州大学学报（医学版） 2014年第2期49卷 211-214页

作者：陈翠翠叶娟赵俊伟张舒林孙战强汤兵祥郑州大学第一附属医院呼吸内科郑州450052 河南中医学院医学免疫学重点实验室郑州450008 上海交通大学基础医学院病原生物学教研室上海200025 复旦大学生命科学学院上海200433 河南省胸科医院呼吸内科郑州450008

目的:评价结核分枝杆菌复合抗原ESAT-6/CFP-10/Rv0315在活动性肺结核诊断中的应用价值。方法:选取初治肺结核病患者70例和健康体检者34例作为结核组和健康对照组,分离PBMCs,分别用复合抗原ESAT-6/CFP-10/Rv0315、ESAT-6肽段库和CFP-10... 详细信息

目的:评价结核分枝杆菌复合抗原ESAT-6/CFP-10/Rv0315在活动性肺结核诊断中的应用价值。方法:选取初治肺结核病患者70例和健康体检者34例作为结核组和健康对照组,分离PBMCs,分别用复合抗原ESAT-6/CFP-10/Rv0315、ESAT-6肽段库和CFP-10肽段库作为抗原进行ELISPOT实验,检测斑点形成细胞数。结果:复合抗原ESAT-6/CFP-10/Rv0315、ESAT-6肽段库和CFP-10肽段库检测结核分枝杆菌感染的阳性率依次为85.7%(60/70)、77.1%(54/70)、72.9%(51/70),特异性依次为82.4%(28/34)、85.3%(29/34)、88.2%(30/34)。结论:复合抗原ESAT-6/CFP-10/Rv0315作为抗原建立的ELISPOT检测方法在活动性肺结核的辅助诊断中有较高的应用价值。

关键词：肺结核结核分枝杆菌 ESAT-6 CFP-10 Rv0315

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早期和晚期卵巢癌患者初次手术后外周血Th1/Th2和Tc1/Tc2亚群表达的研究

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中华临床医师杂志（电子版） 2013年第13期7卷 194-195页

作者：季芳季雯婷邱丽华王树军王颖狄文上海交通大学医学院附属仁济医院妇产科 200127 上海交通大学医学院妇产科学研究所上海市妇科肿瘤重点实验室上海市教委重点学科上海市重中之重临床肿瘤重点学科上海交通大学医学院附属仁济医院重点学科上海交通大学医学院基础医学院免疫学教研室上海市免疫学研究所

上皮性卵巢癌（epithelial ovariancarcinoma，EOC）居妇科恶性肿瘤死亡率首位，极易发生侵袭和转移，患者就诊时往往已处于肿瘤晚期阶段（Ⅲ期或Ⅳ期），5年生存率仅在30％左右。而早期卵巢癌（Ⅰ期和Ⅱ期）患者则预后好，五年生存率可... 详细信息

上皮性卵巢癌（epithelial ovariancarcinoma，EOC）居妇科恶性肿瘤死亡率首位，极易发生侵袭和转移，患者就诊时往往已处于肿瘤晚期阶段（Ⅲ期或Ⅳ期），5年生存率仅在30％左右。而早期卵巢癌（Ⅰ期和Ⅱ期）患者则预后好，五年生存率可达70％～90％。目前认为，减少卵巢癌复发、提高预后的一个策略是在手术和铂类为主的联合化疗这一标准一线治疗的基础上后再应用巩固治疗。近年来，免疫治疗已经成为继手术、化疗和放疗之后最有潜力的治疗手段之一，然而其在卵巢癌巩固治疗中的应用前景尚不明确。

关键词：卵巢癌患者早期卵巢癌肿瘤晚期 Th1 Th2 手术后 Tc2亚群外周血初次

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