检索结果-内蒙古大学图书馆

上海交通大学学报（医学版） 2006年第11期26卷 1233-1238页

作者：梅文瀚吴兆平徐荣婷钱关祥卢健上海交通大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室上海200025

目的建立一个非病毒介导外源基因高效转移和稳定表达体系。方法采用EB病毒(EBV)来源的附着体质粒载体,并结合顺式作用元件IFN-MAR构建重组质粒pcDNA3-EGFP-EBVR和pcDNA3-EGFP-EBNA1-MAR。采用荧光显微镜观察并摄片,FACS及逆转录-聚合酶... 详细信息

目的建立一个非病毒介导外源基因高效转移和稳定表达体系。方法采用EB病毒(EBV)来源的附着体质粒载体,并结合顺式作用元件IFN-MAR构建重组质粒pcDNA3-EGFP-EBVR和pcDNA3-EGFP-EBNA1-MAR。采用荧光显微镜观察并摄片,FACS及逆转录-聚合酶链反应检测EGFP表达阳性的COS-7细胞比例、荧光表达强度及EGFP基因的转录。通过Southern印迹和质粒还原实验分析质粒DNA在细胞中存在的形式。结果本实验构建的重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBVR和pcDNA3-EGFP-EBNA1-MAR在转染进入COS-7细胞后以染色体外附着体的形式存在。由于EBVR的存在,可以在体外获得EGFP较长时间的稳定表达。IFN-MAR替代O riP后,仍可在体外获得EGFP的稳定表达。结论MAR修饰的EBV附着体载体可以在体外获得外源基因高效稳定的表达。

关键词：基因治疗 EB病毒复制子附着体质粒载体核基质结合区

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溶瘤病毒的研究进展

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上海交通大学学报（医学版） 2006年第5期26卷 544-547页

作者：沈晓娣钱关祥上海交通大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室上海200025

近年来,溶瘤病毒用于肿瘤治疗的研究发展非常迅速,有些溶瘤病毒已进入临床试验阶段,并取得了一些令人鼓舞的成果。文章简要综述了溶瘤病毒肿瘤治疗的靶向性、杀伤性、安全性和疗效监测。

关键词：溶瘤病毒肿瘤治疗靶向性杀伤性

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CArG调控元件辐射诱导活性的研究

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上海交通大学学报（医学版） 2006年第4期26卷 385-388页

作者：徐让卢健钱关祥上海交通大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室上海200025

目的构建含有人工合成CArG调控元件的荧光素酶报告基因重组质粒,研究该元件在多种肿瘤细胞中不同剂量放射线照射下的放射诱导活性。方法将含有9个串联的CCATATAAGG结构的CArG增强子与CMVIEbasalgenepromoter构成的嵌合调控元件插入到pGL... 详细信息

目的构建含有人工合成CArG调控元件的荧光素酶报告基因重组质粒,研究该元件在多种肿瘤细胞中不同剂量放射线照射下的放射诱导活性。方法将含有9个串联的CCATATAAGG结构的CArG增强子与CMVIEbasalgenepromoter构成的嵌合调控元件插入到pGL3Basic质粒,构建荧光素酶报告质粒。利用脂质体将该报告质粒瞬时转染肿瘤细胞株HeLa、A549、HepG2,给予不同剂量137Csγ射线照射,36h后检测荧光素酶活性,观察该调控序列的放射诱导活性。结果该CArG调控元件在低剂量放射线的诱导下能明显增强下游基因的表达,在3Gy的γ射线照射下诱导活性最强。结论人工合成的CArG调控元件在低剂量的放射线作用下能有效诱导下游基因的表达,在肿瘤的放射-基因治疗中具有较强的应用潜力。

关键词： CArG元件放射基因治疗辐射诱导活性肿瘤细胞

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hVEGF基因工程生物膜对全层皮肤缺损创面愈合的影响

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上海交通大学学报（医学版） 2006年第9期26卷 1015-1018页

作者：赵雷王莉姜叙诚郑林张帆赵涵芳许伟榕上海交通大学基础医学院病理学教研室上海200025 上海交通大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室上海200025

目的探讨含人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的作用。方法在SD大鼠背部皮肤制作深达皮肤全层的正方形创面,实验组大鼠创面上覆含hVEGF重组质粒的成纤维细胞种植的基... 详细信息

目的探讨含人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的作用。方法在SD大鼠背部皮肤制作深达皮肤全层的正方形创面,实验组大鼠创面上覆含hVEGF重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜;对照组分别在大鼠创面上覆整合空质粒的成纤维细胞的生物膜、空白生物膜和仅覆切口膜。采用形态学和免疫组化方法,观察术后3、7、14、29 d实验组和对照组大鼠创面肉芽组织生长及创面愈合情况。结果在各时相实验组中新生的毛细血管数以及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达均显著高于对照组(P<0.01),且VEGF表达与新生毛细血管数正相关。结论将含hVEGF重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜覆盖于大鼠全层皮肤缺损创面,能使创面成纤维细胞持续、有效地表达VEGF,强有力地促进肉芽组织增生,有利于创面愈合。

关键词：人血管内皮细胞生长因子基因工程生物膜肉芽组织创伤愈合

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噬菌体展示技术构建重组人TNF-α单链抗体库

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上海交通大学学报（医学版） 2006年第2期26卷 155-158页

作者：柴蔚然杨涛胡晓年牛勃上海交通大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室上海200025 山西医科大学生物化学与分子生物学教研室中国协和医科大学基础研究所

目的应用噬菌体展示技术构建抗重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)的单链抗体库。方法利用噬菌体表面展示技术、绕过杂交瘤技术,提取经免疫BALB/c小鼠淋巴细胞总RNA,用相应引物扩增小鼠免疫球蛋白VH基因和VL基因,构建VH、VL抗体库。由L in... 详细信息

目的应用噬菌体展示技术构建抗重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)的单链抗体库。方法利用噬菌体表面展示技术、绕过杂交瘤技术,提取经免疫BALB/c小鼠淋巴细胞总RNA,用相应引物扩增小鼠免疫球蛋白VH基因和VL基因,构建VH、VL抗体库。由L inker-prim erm ix经重叠延伸反应将重链可变区基因与轻链可变区基因拼接成单链抗体。再用RS prim erm ix以单链抗体为模板进行第二次聚合酶链反应,从而获得全套抗rhTNF-α的单链抗体基因。以SfiⅠ/NotⅠ,位点定向插入pCANTAB-5E噬菌粒载体,转化大肠杆菌TG1后,经M13KO7辅助噬菌体拯救,构建成全套抗rhTNF-α单链抗体表面展示文库。结果成功构建了rhTNF-α全套单链抗体噬菌体表面展示文库。经M13KO7超感染后,噬斑计数滴度为2.1×1011pfu。结论rhTNF-α全套单链抗体噬菌体表面展示文库的构建,为研究rhTNF-α抗体结合位点,了解其结构与功能的关系以及研究用于临床免疫治疗的新型抗体打下了基础。

关键词：肿瘤坏死因子-α 单链抗体噬菌体展示技术重组人TNF-α单链抗体库

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溶瘤性腺病毒H101的实验研究及临床研究进展

溶瘤性腺病毒H101的实验研究及临床研究进展

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华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会

作者：叶玲葛盛芳卢健上海交通大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室上海交通大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室上海交通大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

H101是采用基因重组技术对人5型腺病毒进行基因重组得到的一种溶瘤腺病毒,它主要是删除了人5型腺病毒的E1B-55KD和E3区19KD基因片段,具有在肿瘤细胞中特异性复制而最终导致溶瘤的特性。

关键词：溶瘤性腺病毒 H101 基因治疗研究进展

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hVEGF基因工程生物膜覆盖大鼠全层皮肤缺损创面的模型建立

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实验动物与比较医学 2006年第1期26卷 19-22页

作者：赵雷王莉姜叙诚郑林张帆赵涵芳许伟榕上海交通大学基础医学院病理教研室上海200025 上海交通大学基础医学院生物化学和分子生物学实验室上海200025

目的建立含人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜覆盖大鼠全层皮肤缺损创面的动物模型。方法在SD大鼠背部皮肤制作深达皮肤全层的正方形创面,实验组SD大鼠创面上覆含hVEGF重组质粒的成纤维细胞种植... 详细信息

目的建立含人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜覆盖大鼠全层皮肤缺损创面的动物模型。方法在SD大鼠背部皮肤制作深达皮肤全层的正方形创面,实验组SD大鼠创面上覆含hVEGF重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜,对照组包括3组,分别在大鼠创面上覆整合空质粒的成纤维细胞的生物膜、空白生物膜和仅覆切口膜。采用形态学方法,观察术后3、7、14、29 d实验组和对照组大鼠创面肉芽组织生长及创面愈合情况。结果在各时相实验组大鼠创面中成纤维细胞增生数及新生的毛细血管数均高于对照组大鼠。结论将含hVEGF重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜覆盖于大鼠全层皮肤缺损创面,能诱导血管生成,强有力地促进肉芽组织形成。

关键词： hVEGF 肉芽组织创伤愈合

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激发学生学习的潜能,提高学生主动学习的能力 ——谈开展设计性实验的体会

激发学生学习的潜能,提高学生主动学习的能力 ——谈开展设计性实...

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全国高等医学教育学会基础医学教育分会、中华医学会医学教育分会基础医学教育研究会第六次学术大会

作者：于丽莉许伟榕赵涵芳上海交通大学医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室 200025

开展设计性实验是教学改革探索中的一种尝试,目的是希望通过这种学习方法,提高学生学习兴趣,激发他们学习的主动性.通过三年的实践,我们认为设计性实验能提高学生自主学习及自我认识的能力,加深对生化这门课程的理解.同时能开阔学生的... 详细信息

开展设计性实验是教学改革探索中的一种尝试,目的是希望通过这种学习方法,提高学生学习兴趣,激发他们学习的主动性.通过三年的实践,我们认为设计性实验能提高学生自主学习及自我认识的能力,加深对生化这门课程的理解.同时能开阔学生的学习的思路,培养他们对今后所从事工作的能力及信心.

关键词：教学改革设计性实验自主学习高等医学教育

来源：评论

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人血管内皮生长因子基因工程生物膜愈合大鼠皮肤创伤的初步研究

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外科理论与实践 2006年第3期11卷 244-247页

作者：许伟榕王莉赵涵芳陈诗书上海交通大学医学院生物化学和分子生物学实验室上海200025 上海交通大学医学院病理学教研室上海200025

目的:观察含有人血管内皮生长因子(hVEGF)重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜对于大鼠创面新生血管的生成以及创伤愈合的影响,为基因工程生物膜用于临床提供进一步的资料。方法:实验大鼠分为3组3个时相,分别为实验组V:创面覆盖含... 详细信息

目的:观察含有人血管内皮生长因子(hVEGF)重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜对于大鼠创面新生血管的生成以及创伤愈合的影响,为基因工程生物膜用于临床提供进一步的资料。方法:实验大鼠分为3组3个时相,分别为实验组V:创面覆盖含有hVEGF重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜后常规包扎;对照组B:创面覆盖生物膜后常规包扎;对照组O:创面进行常规包扎。术后7d、14d、29d分别取创伤皮肤组织进行创面微血管密度(microvessel density,MVD)计数大鼠皮肤组织创面的新生血管量,同时观察创伤愈合的过程、通过Western印迹实验检测实验大鼠组织的VEGF蛋白表达。结果:Western印迹证实应用hVEGF制备的基因工程生物膜能使大鼠皮肤创面持续表达VEGF,表达量高于对照组;MVD计数表明创面覆盖含有hVEGF重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜后新生血管明显多于对照组(P<0.01)。结论:提示我室研制的基因工程生物膜能促进创面新生血管生成,以达到减少瘢痕形成、促进伤口愈合的目的。

关键词：生物敷料血管内皮生长因子,人创伤和损伤伤口愈合

来源：评论

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