检索结果-内蒙古大学图书馆

上海交通大学学报（医学版） 2014年第11期34卷 1563-1567页

作者：谢文娟秦东军张健周虎臣吴英理上海交通大学基础医学院病理生理学教研室细胞分化与凋亡教育部重点实验室上海200025 上海交通大学药学院上海200240

目的从天然产物中发现新的去泛素化酶2(USP2)抑制剂。方法利用泛素荧光检测试剂盒进行USP2抑制剂筛选。100μmol/L紫菀酮(SH)处理NB4细胞不同时间,Western blotting检测USP2底物蛋白Cyclin D1表达变化,流式细胞术检测细胞周期分布,分子... 详细信息

目的从天然产物中发现新的去泛素化酶2(USP2)抑制剂。方法利用泛素荧光检测试剂盒进行USP2抑制剂筛选。100μmol/L紫菀酮(SH)处理NB4细胞不同时间,Western blotting检测USP2底物蛋白Cyclin D1表达变化,流式细胞术检测细胞周期分布,分子对接技术分析SH与USP2结合情况。结果体外筛选结果显示:SH抑制USP2活性,50%抑制浓度(IC50值)为69μmol/L。Western blotting检测结果显示:SH引起USP2底物蛋白Cyclin D1表达水平降低。流式细胞术检测结果显示:SH处理NB4细胞48 h时,S和G2/M期细胞减少,并出现典型的细胞凋亡峰(Sub-G1峰);分子对接结果显示:SH的氧原子及其骨架中心和USP2的K503、W439、R363及D440对于两者之间的结合起到重要作用。结论 SH能够抑制USP2活性,为发展新的USP2抑制剂提供了先导化合物。

关键词：去泛素化酶2 抑制剂紫菀酮分子对接

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TRPV1受体基因敲除雌性小鼠背根神经节P2X3受体表达升高

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生理学报 2014年第4期66卷 431-437页

作者：方潇时霄寒黄丽斌戎伟芳马蓓中国人民解放军第二军医大学生理学教研室上海交通大学医学院生理学教研室

本文旨在考察瞬时受体电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1受体)基因敲除后小鼠慢性炎症条件下机械痛阈的改变。通过足底注射给予完全弗氏佐剂(20μL)介导雌性小鼠慢性炎症痛的形成,利用弗莱毛测痛法测量TR... 详细信息

本文旨在考察瞬时受体电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1受体)基因敲除后小鼠慢性炎症条件下机械痛阈的改变。通过足底注射给予完全弗氏佐剂(20μL)介导雌性小鼠慢性炎症痛的形成,利用弗莱毛测痛法测量TRPV1受体基因敲除型及野生型雌性小鼠在给药前1天和给药后8天内的机械痛阈。给药后第9天处死小鼠,利用蛋白质免疫印迹技术研究两组小鼠脊髓背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)和脊髓背角中c-Fos蛋白和P2X3受体表达的差别。结果显示,与野生型小鼠相比,TRPV1受体基因敲除型小鼠基础机械痛阈明显增高(P<0.05);足底注射CFA后第3天起,TRPV1受体基因敲除型小鼠机械痛阈高于野生型小鼠(P<0.05);蛋白质免疫印迹结果表明TRPV1受体基因敲除型小鼠DRG和脊髓背角中c-Fos蛋白的表达明显低于野生型小鼠(P<0.01,P<0.05),TRPV1受体基因敲除型小鼠DRG中P2X3受体的表达明显高于野生型小鼠(P<0.05)。以上结果证明TRPV1受体可能通过调节DRG和背角中的c-Fos蛋白的表达以及影响P2X3受体在DRG中的表达从而影响外周机械痛阈。

关键词： TRPV1阳离子通道 P2X3受体基因敲除小鼠背根神经节 c-Fos蛋白痛阈

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FBXO6稳定表达肿瘤细胞系的构建及其亚细胞器定位

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中国科技论文 2014年第6期9卷 696-698,702页

作者：刘彬徐含章崔佳毅苏绪波陈国强上海交通大学医学院病理生理学教研室上海200025

检测FBXO6在多种肿瘤细胞中的表达和定位情况并构建稳定表达FBXO6的肿瘤细胞株。运用RT-PCR方法,在人胚肾293T细胞以及9种不同来源的肿瘤细胞中,检测了FBXO6的表达情况。以载体质粒pBabe-3Flag-FBXO6-puro/pBabe-3Flag-con、包装质粒pCM... 详细信息

检测FBXO6在多种肿瘤细胞中的表达和定位情况并构建稳定表达FBXO6的肿瘤细胞株。运用RT-PCR方法,在人胚肾293T细胞以及9种不同来源的肿瘤细胞中,检测了FBXO6的表达情况。以载体质粒pBabe-3Flag-FBXO6-puro/pBabe-3Flag-con、包装质粒pCMV-GAG-POL及包膜质粒pCMV-VSVG用Lipofectamine2000共转染包装细胞系293T,收集病毒颗粒感染A549细胞,经嘌呤霉素筛选稳定表达细胞株,Western blot鉴定FBXO6的表达。利用激光共聚焦荧光显微镜,采用间接免疫荧光方法,检测外源性FBXO6在A549中的亚细胞定位。在10种不同来源的细胞株中,FBXO6在A549细胞中的表达最高。成功筛选出嘌呤霉素抗性细胞系A549-Con与A549-3Flag-FBXO6。Western blot方法发现A549-3Flag-FBXO6细胞系稳定表达FBXO6蛋白。间接免疫荧光发现FBXO6与内质网tracker有共定位。FBXO6在肺癌A549细胞中高度表达,构建了稳定表达FBXO6的A549细胞系,部分FBXO6分布在内质网中。

关键词：病理生理学 FBXO6 逆转录病毒载体内质网 A549细胞

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人体胚胎学教学在医学整合课程实施中的探索

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解剖学杂志 2014年第3期37卷 415-417页

作者：丁之德顾鸣敏黄雷徐洪倪萦音上海交通大学医学院解剖学与组织学胚胎学系上海200025 上海交通大学医学院医学遗传学教研室上海200025 上海交通大学医学院生理学与病理生理学系上海200025 上海交通大学医学院生化与分子细胞生物学系上海200025

自2009年起,上海交通大学医学院在临床医学专业八年制学生中首先开设了“以问题为基础学习(problem-based learning,PBL)、以探究为基础学习(research-based learning,RBL)、课程整合(integrated course)、以案例为基础学习(case-based learning,CBL)和综合评价(e-valuation)为一体的PRICE教学体系”,其目的主要是为了使医学生在基础医学学习中更能与临床相结合全面掌握学习的知识点,并能培养学生的自学能力、增加对医学学习的兴趣;与此同时,也避免过去各课程教师在授课中相同知识点不必要的重复.在这教学体系中,作为传统基础医学的主干课程-人体胚胎学与医学遗传学、生物化学及分子生物学(部分章节)一起,独立形成了一门医学整合课程即医学遗传与胚胎发育.

关键词：宫外孕畸形产生异位妊娠

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中央杏仁核对大鼠心脏伤害性感受的调节作用

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西安交通大学学报（医学版） 2014年第3期35卷 320-323页

作者：雷冬玉李静孙娜李婧王锐安魏媛媛杨小立杜剑青新疆医科大学基础医学院生理学教研室新疆乌鲁木齐830010 西安医学院基础医学部生理学教研室陕西西安710021 西安交通大学医学院生理学与病理生理学系陕西西安710061 西安交通大学医学院第一附属医院疼痛科陕西西安710061

目的观察电刺激大鼠中央杏仁核(CeA)对心脏伤害性感受的调节作用。方法选择成年雄性SD大鼠,以心包内注射辣椒素(CAP)诱发的大鼠背斜方肌肌电为指标,制备心脏痛动物模型;对照组分为正常对照组和心包内注射生理盐水对照组。利用免疫组织... 详细信息

目的观察电刺激大鼠中央杏仁核(CeA)对心脏伤害性感受的调节作用。方法选择成年雄性SD大鼠,以心包内注射辣椒素(CAP)诱发的大鼠背斜方肌肌电为指标,制备心脏痛动物模型;对照组分为正常对照组和心包内注射生理盐水对照组。利用免疫组织化学方法观察心脏痛模型大鼠CeA内c-fos表达的变化;并利用电生理学方法观察电刺激CeA(强度分别为30μA和70μA)对心包内注射CAP引起的肌电(EMG)反应的影响。结果①与正常对照组相比,心包内注射辣椒素组CeA内c-fos表达量显著升高且有统计学意义;正常对照组和心包内生理盐水对照组CeA内c-fos表达量则无统计学差异;②30μA电刺激CeA后,大鼠背斜方肌的EMG较对照组明显减弱,总放电率为对照组的(78.58±4.62)%(P<0.05);70μA电刺激后总放电率为对照组的(54.89±3.98)%(P<0.05)。结论大鼠中央杏仁核可能参与了大鼠心脏伤害性感受信息的传入,且具有下行抑制性调节作用。

关键词：中央杏仁核免疫组织化学电刺激心脏伤害性感受

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补骨脂乙素诱导伊马替尼敏感和耐药的慢性粒细胞白血病细胞凋亡

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上海交通大学学报（医学版） 2014年第9期34卷 1309-1314页

作者：宋利利王伟卫孙云韦炜徐含章吴英理上海交通大学医学院病理生理学教研室细胞分化与凋亡教育部重点实验室上海200025 上海市黄浦区东南医院检验科上海200023 上海交通大学医学院附属新华医院血液科上海200092

目的探讨补骨脂乙素对伊马替尼敏感和耐药慢性粒细胞白血病细胞的影响。方法体外培养人慢性粒细胞白血病伊马替尼敏感细胞株K562s和伊马替尼耐药细胞株K562r,以不同浓度(0、5、10、20、40μmol/L)补骨脂乙素(IBC)处理K562s和K562r细胞... 详细信息

目的探讨补骨脂乙素对伊马替尼敏感和耐药慢性粒细胞白血病细胞的影响。方法体外培养人慢性粒细胞白血病伊马替尼敏感细胞株K562s和伊马替尼耐药细胞株K562r,以不同浓度(0、5、10、20、40μmol/L)补骨脂乙素(IBC)处理K562s和K562r细胞不同时间(0、24、48、72 h),锥虫蓝拒染法检测IBC对K562s和K562r细胞活性的影响,Annexin V/PI、Rh123/PI双染后流式细胞术检测细胞凋亡及线粒体跨膜电位的变化,Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达。结果锥虫蓝拒染法检测结果显示:IBC对K562s和K562r均有增殖抑制作用,且呈时间-剂量依赖性。流式细胞术检测结果表明,经[BC处理的K562s和K562r出现明显时间-剂量依赖性的凋亡及线粒体膜电位的降低。Western blotting检测结果显示:经IBC处理的K562s和K562r细胞发生caspase-3活化和PARP-1的剪切。结论 IBC能够诱导K562s和K5621,细胞凋亡,线粒体跨膜电位下降可能参与了这一过程。

关键词：慢性粒细胞白血病补骨脂乙素细胞凋亡线粒体跨膜电位伊马替尼耐药

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MUC1在食管癌成瘤中的作用

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外科理论与实践 2014年第5期19卷 432-437页

作者：邓华云杨杰赵克温黄雷廖晓东上海交通大学医学院病理生理学教研室上海200025

目的:研究黏蛋白1(mucin1,MUC1)在食管癌发生中的作用,寻找食管癌发病的新机制。方法 :采用MUC1-siRNA和CTL-siRNA质粒转染Ec1.71细胞获得MUC1稳定沉默细胞系,分别通过MTT法、软琼脂克隆形成实验和裸小鼠移植瘤模型检测下调MUC1对鳞状... 详细信息

目的:研究黏蛋白1(mucin1,MUC1)在食管癌发生中的作用,寻找食管癌发病的新机制。方法 :采用MUC1-siRNA和CTL-siRNA质粒转染Ec1.71细胞获得MUC1稳定沉默细胞系,分别通过MTT法、软琼脂克隆形成实验和裸小鼠移植瘤模型检测下调MUC1对鳞状上皮细胞食管癌细胞生长、克隆形成能力和体内成瘤能力的影响。结果:建立Ec1.71/MUC1-siRNA-A/B稳定沉默MUC1细胞系和Ec1.71/CTL-siRNA-A/B对照组细胞系各两株。与对照组Ec1.71/CTL-siRNA-A/B细胞系相比,MUC1沉默组Ec1.71/MUC1-siRNA-A/B细胞的生长速度显著减慢,软琼脂克隆数目明显减少,移植瘤的生长速度明显减慢、肿瘤体积更小。结论:MUC1与食管癌的形成密切相关,抑制其表达,可显著降低食管癌细胞的恶性程度。本研究为食管癌的发病机制研究和临床治疗提供了重要参考。

关键词：黏蛋白1 食管癌移植瘤

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PROTAC及其在肿瘤治疗方面的应用

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生命的化学 2014年第4期34卷 549-554页

作者：费聿东刘路龚悦李林王尹瑜吴英理上海交通大学医学院病理生理学教研室上海200025

肿瘤的发生与肿瘤特异癌蛋白的表达密切相关,调控这些蛋白质的降解已成为肿瘤治疗的一种新方法。泛素介导的蛋白质降解通路控制着真核细胞内绝大多数蛋白质的选择性降解。近年来,一种人工合成的蛋白靶向降解嵌合分子(proteolysis target... 详细信息

肿瘤的发生与肿瘤特异癌蛋白的表达密切相关,调控这些蛋白质的降解已成为肿瘤治疗的一种新方法。泛素介导的蛋白质降解通路控制着真核细胞内绝大多数蛋白质的选择性降解。近年来,一种人工合成的蛋白靶向降解嵌合分子(proteolysis targeting chimeric molecule,PROTAC),能通过利用细胞固有的泛素-蛋白酶体系统调控靶向蛋白质降解。本文总结了PROTAC的相关研究进展,虽然对PROTAC技术的研究还有很多尚待解决的问题,但其作为肿瘤治疗的新手段具有很大的潜力。

关键词：靶向治疗肿瘤蛋白质降解 PROTAC 泛素-蛋白酶体系统

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硫化氢在胃平滑肌运动调控中的作用及其生理意义

硫化氢在胃平滑肌运动调控中的作用及其生理意义

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中国生理学会消化内分泌生殖代谢生理专业委员会2014年消化内分泌生殖代谢学术会议

作者：黄旭孟祥敏张春梅刘东海陆红丽许文燮上海交通大学基础医学院生理学教研室上海200240

硫化氢(H2S)在哺乳动物的不同组织中产生,并且在机体的生理和病理过程中起着重要的调节作用.本文利用形态学(分子生物学、免疫组织化学)与功能学(常规生理学、药理学以及电生理学等)等多种技术,探讨了硫化氢在胃平滑肌运动调控中的作用...

硫化氢(H2S)在哺乳动物的不同组织中产生,并且在机体的生理和病理过程中起着重要的调节作用.本文利用形态学(分子生物学、免疫组织化学)与功能学(常规生理学、药理学以及电生理学等)等多种技术,探讨了硫化氢在胃平滑肌运动调控中的作用及其机制.

关键词：

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NO/H2S相对平衡在胃肠平滑肌运动调控中的作用及其生理意义

NO/H2S相对平衡在胃肠平滑肌运动调控中的作用及其生理意义

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中国生理学会第24届全国会员代表大会暨生理学学术大会

作者：许文燮黄旭上海交通大学医学院生理学教研室

NO和硫化氢(H2S)均为生物体内产生气体信号分子,它们在生物体具有广泛的生物学功能,参与许多生理和病理生理学过程。本文利用形态学(分子生物学、免疫组织化学)与功能学(常规生理学、药理学以及电生理学等)等多种技术,主要探讨了两种气... 详细信息

NO和硫化氢(H2S)均为生物体内产生气体信号分子,它们在生物体具有广泛的生物学功能,参与许多生理和病理生理学过程。本文利用形态学(分子生物学、免疫组织化学)与功能学(常规生理学、药理学以及电生理学等)等多种技术,主要探讨了两种气体信号分子在胃肠动力调控中的作用及其生理学意义。我们研究结果表明:⑴H2S及NO合成酶CBS、CSE、e NOS、n NOS在胃肠道各个组织包括胃底、胃窦、空肠、回肠、近端以及远端结肠平滑肌都表达,尽管它们的分布存在差异;⑵利用免疫双标的方法在培养的胃窦平滑肌细胞上也观察到了CBS、CSE、e NOS、n NOS的表达;⑶H2S合酶CBS抑制剂AOAA明显降低胃底平滑肌的基础张力,而NOS抑制剂L-NAME则增加其张力;⑷AOAA明显抑制胃窦、小肠、结肠自发性收缩的振幅和张力,而L-NAME则增加收缩的振幅;⑸低浓度的Na HS明显增加胃窦平滑肌自发性收缩的张力,而高浓度Na HS抑制收缩;⑹SNP抑制胃窦平滑肌自发性收缩,该作用可被低浓度Na HS逆转,而AOAA诱发的收缩抑制作用也可部分被Na HS逆转;⑺可抑制胞内c GMP生成的s GC抑制剂ODQ对低浓度Na HS的兴奋性作用没有明显影响,而促进c GMP降解的PDE的抑制剂IBMX则可部分阻断Na HS的作用;⑻低浓度Na HS不影响胞内c GMP的水平,而SNP则明显增加胞内c GMP含量。以上结果表明:H2S及NO可在胃肠道平滑肌内源产生,它们对胃肠道平滑肌运动的调节可能起相反作用,即H2S作为兴奋性介质,而NO作为抑制性介质起作用。与NO不同,H2S的兴奋性作用不是通过胞内c GMP信号通路介导的。在生理条件下,胞内H2S及NO的产生可能通过某种机制保持在相对稳定的水平,从而使胃肠道平滑肌的张力维持在正常范围内,保证胃肠道的正常收缩。

关键词： NO H2S 胃肠平滑肌离子通道平滑肌运动

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