检索结果-内蒙古大学图书馆

中华高血压杂志 2008年第7期16卷 625-628页

作者：李宁宁肖冰张怡朱鼎良高平进上海交通大学医学院附属瑞金医院·上海市高血压研究所上海市血管生物学重点实验室上海200025

目的犬尿氨酸氨基转移酶(KAT)催化犬尿氨酸(KYN)生成犬尿喹啉酸(KYNA)。研究表明中枢KAT 及 KYNA 可能参与血压调节,但外周 KAT 变化及 KYNA 生成与血压的关系尚无报道。检测肾脏 KATⅡ基因表达,KAT 活性,及尿 KYNA 含量在自发性高血压... 详细信息

目的犬尿氨酸氨基转移酶(KAT)催化犬尿氨酸(KYN)生成犬尿喹啉酸(KYNA)。研究表明中枢KAT 及 KYNA 可能参与血压调节,但外周 KAT 变化及 KYNA 生成与血压的关系尚无报道。检测肾脏 KATⅡ基因表达,KAT 活性,及尿 KYNA 含量在自发性高血压大鼠(SHR)和 WKY 大鼠(正常对照组)的变化。方法采用实时定量 PCR 技术检测 KATⅡ基因表达,高效液相色谱(HPLC)检测尿 KYNA 及 KAT 活性(通过测定其酶促反应产物 KYNA)。结果虽然肾皮质和肾髓质 KATⅡ基因 mRNA 表达在 SHR 与 WKY 之间差异无统计学意义(P>0.05);但 SHR 肾皮质 KAT 的活性显著低于 WKY[(0.563±0.037)vs(1.037±0.131)μmol/(g·min),P=0.017]。同时发现 SHR 组尿 KYNA 含量在显著低于 WKY 组[(7.8±1.8)vs(19.9±3.5)μmol/24 h,P=0.013]。相关分析显示,肾皮质 KAT 的活性(r=-0.418,P=0.023)和尿 KYNA 含量(r=-0.723,P=0.001)与血压都呈显著负相关。结论 SHR 大鼠肾皮质 KAT 活性降低及尿 KYNA 含量减少,提示除中枢 KAT 及 KYNA变化外,肾皮质 KAT 活性变化导致的 KYNA 改变亦可能影响血压。

关键词：自发性高血压大鼠犬尿喹啉酸犬尿酸犬尿氨酸氨基转移酶

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沉默结缔组织生长因子对大鼠肝纤维化及细胞外基质积聚的影响

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中华肝脏病杂志 2008年第3期16卷 188-192页

作者：李光明李定国谢青史毅姜山周慧娟陆汉明金由辛上海交通大学医学院附属新华医院消化科 200092 上海交通大学医学院附属瑞金医院感染科中国科学院上海生命研究院、生物化学与细胞生物学研究所、分子生物学国家重点实验室

目的研究结缔组织生长因子（CTGF）小干扰RNA（siRNA）在CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型中的抗肝纤维化作用及其对细胞外基质积聚的影响。方法雄性SD大鼠30只，随机分成5组。模型组：皮下注射CCl4及经门静脉注射等渗盐水，3d1次，连续6周... 详细信息

目的研究结缔组织生长因子（CTGF）小干扰RNA（siRNA）在CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型中的抗肝纤维化作用及其对细胞外基质积聚的影响。方法雄性SD大鼠30只，随机分成5组。模型组：皮下注射CCl4及经门静脉注射等渗盐水，3d1次，连续6周；预防组：皮下注射CCh及经门静脉注射CTGFsiRNA，连续6周；治疗组：皮下注射CCl4 2周，随后给予CTGFsiRNA及CCl4 4周；对照siRNA干预组：皮下注射CCla及经门静脉注射对照siRNA，连续6周；空白对照组：经门静脉注射等渗盐水6周。用HE和SiNusred染色评估大鼠肝组织学变化，RTPCR或（和）Westernblot检测肝组织CTGF、Ⅰ与Ⅲ型胶原及层黏连蛋白的表达，放射免疫法检测外周血Ⅲ型前胶原及透明质酸含量。结果模型组及对照siRNA组大鼠肝组织CTGF、Ⅰ与Ⅲ型胶原及层黏连蛋白基因表达显著上调；与模型组相比，预防组及治疗组由CCl4诱导的CTGFmRNA和蛋白表达及Ⅰ与Ⅲ型胶原、层黏连蛋白mRNA表达分别下调76%±8％、95％±2％、74%±8％、78％±8％、31％±7％和80％±3％、93％±3％、57％±6%、59％±10％、43％±9％（F值分别为68．630，21．234，24．219，16．315和9．716，P值均〈0．01），肝纤维化程度明显减轻，大鼠外周血Ⅲ型前胶原和透明质酸含量也显著降低。结论经门静脉注射CTGF siRNA能显著抑制实验大鼠肝CTGF基因表达，由此通过阻止细胞外基质积聚而缓解肝纤维化。

关键词：肝纤维化结缔组织生长因子小干扰RNA 细胞外基质

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微小RNA在自发性高血压大鼠主动脉的差异表达

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生理学报 2008年第4期60卷 553-560页

作者：许婵婵韩卫青肖冰李宁宁朱鼎良高平进上海交通大学附属瑞金医院上海市高血压研究所上海市血管生物学重点实验室医学基因组学国家重点实验室中国科学院上海生命科学研究院健康科学研究所

微小RNAs(microRNAs,miRNAs)是一类基因组编码、非蛋白质编码的小RNA,在转录后水平负性调节靶基因表达。本研究探讨miRNAs在自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)主动脉的表达特征及其与高血压的关系。取4、8、16和2... 详细信息

微小RNAs(microRNAs,miRNAs)是一类基因组编码、非蛋白质编码的小RNA,在转录后水平负性调节靶基因表达。本研究探讨miRNAs在自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)主动脉的表达特征及其与高血压的关系。取4、8、16和24周龄雄性SHR大鼠及同龄正常血压对照(Wistar-Kyoto,WKY)大鼠。MiRanda、TargetScan和PicTar用于候选miRNAs及靶基因预测分析。通过实时定量RT-PCR检测大鼠主动脉miR-1、miR-133a、miR-155及miR-208的表达,并进一步通过实时定量RT-PCR检测呈差异表达的miR-155和miR-208的预测靶基因mRNA表达。结果显示,SHR大鼠主动脉miR-155表达在4、8、24周时与同龄WKY大鼠无显著差异,但在16周时明显低于同龄WKY大鼠(P<0.05),且大鼠主动脉miR-155表达量与血压呈负相关(r=-0.525,P<0.05)。MiR-208表达在4周龄时最高,随年龄增长明显下降(P<0.05),其表达水平与血压和年龄呈负相关(r=-0.400,P<0.05;r=-0.684,P<0.0001),但在SHR和WKY大鼠之间无显著差异。miR-1和miR-133a在各年龄组SHR和WKY大鼠间未呈现差异表达。MiR-155和miR-208表达与相应预测靶基因mRNA表达无显著负相关性。以上结果表明,miR-155表达在成年SHR大鼠主动脉明显低于WKY,并与血压呈负相关,提示miR-155可能参与高血压的发生发展,主动脉miR-155表达异常可能是SHR大鼠血压升高的原因之一。大鼠主动脉miR-208表达在幼年时最高,随年龄增长而明显下降,提示其可能与血管发育有关。

关键词：微小RNAs 自发性高血压大鼠主动脉 RT-PCR

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磷酸二酯酶1A参与调节转化生长因子β_1诱导的血管外膜成纤维细胞胶原表达

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中华高血压杂志 2008年第7期16卷 629-632页

作者：周海燕朱鼎良高平进上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市血管生物学重点实验室上海市高血压研究所中科院上海生命科学院健康研究所医学基因组学国家重点实验室上海200025

目的探讨环核苷酸依赖的磷酸二酯酶1A(PDE1A)在转化生长因子β_1(TGF-β_1)诱导的血管外膜成纤维细胞(AF)Ⅰ型胶原表达中的作用。方法采用组织块贴壁法培养 SD 大鼠胸主动脉 AF。Bradford 方法测定蛋白浓度,免疫印迹技术观察Ⅰ型胶原和 ... 详细信息

目的探讨环核苷酸依赖的磷酸二酯酶1A(PDE1A)在转化生长因子β_1(TGF-β_1)诱导的血管外膜成纤维细胞(AF)Ⅰ型胶原表达中的作用。方法采用组织块贴壁法培养 SD 大鼠胸主动脉 AF。Bradford 方法测定蛋白浓度,免疫印迹技术观察Ⅰ型胶原和 PDE1A 蛋白表达,Leica Qwin 软件进行图像灰度分析。结果 1)TGF-β_1上调Ⅰ型胶原蛋白表达呈时间和剂量依赖性,以 TGF-β_1(10 ng/mL)诱导 AF 24 h 上调Ⅰ型胶原蛋白表达最强,较诱导前上调(147.5±38.7)%(P<0.05)。2)TGF-β_1上调 PDE1A 蛋白的表达呈时间和剂量依赖性,TGF-β_1(20ng/mL)诱导 AF 24 h PDE1A 蛋白表达量达(302.7±86.3)%,较诱导前显著上调(P<0.01);3)非特异性 PDE 抑制剂 IBMX 和特异性 PDE1A 抑制剂 IC86340均显著抑制 TGF-β_1诱导的Ⅰ型胶原的表达,抑制率分别达24.6%和15.8%,(P<0.05,P<0.05)。结论 PDE1A 参与 TGFβ-1诱导的血管外膜成纤维细胞Ⅰ型胶原表达的调节。

关键词：血管外膜成纤维细胞环核苷酸依赖的磷酸二酯酶1A I型胶原转化生长因子β1

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Apelin基因与原发性高血压的相关性

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上海交通大学学报（医学版） 2008年第12期28卷 1548-1550页

作者：李薇薇张怡高平进朱鼎良上海交通大学医学院瑞金医院上海市高血压研究所上海市血管生物学重点实验室上海200025 杭州师范大学附属医院心内科杭州市心血管病研究所杭州310015

目的探讨apelin基因多态性及单倍型与原发性高血压的相关关系。方法选取上海地区汉族人群原发性高血压家系248家共1 042人为研究样本,应用TaqMan(MGB荧光探针定量PCR技术,检测各样本apelin基因启动子区T-1860C和rs3761581基因多态性分... 详细信息

目的探讨apelin基因多态性及单倍型与原发性高血压的相关关系。方法选取上海地区汉族人群原发性高血压家系248家共1 042人为研究样本,应用TaqMan(MGB荧光探针定量PCR技术,检测各样本apelin基因启动子区T-1860C和rs3761581基因多态性分型。应用FBAT软件预测该两个多态性位点可能组成的单倍型,并对多态位点及单倍型与原发性高血压的关系进行分析。结果所选位点基因型频率在研究人群中的分布均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。应用FBAT统计分析结果显示T-1860C、rs3761581及其组成的单倍型A-T与原发性高血压相关。其中T-1860C的T等位基因(Z=1.991,P=0.046)和rs3761581的A等位基因(Z=2.119,P=0.034)可以由亲代下传给患病子代。结论位于apelin基因启动子区的多态性位点与上海地区汉族人群原发性高血压存在相关关系,单倍型A-T可能参与高血压的发病。

关键词： apelin 基因多态性单倍型原发性高血压家系研究

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犬尿氨酸代谢通路与中枢神经系统

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国际脑血管病杂志 2008年第5期16卷 388-392页

作者：李宁宁高平进上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市高血压研究所上海市血管生物学重点实验室200025

犬尿氨酸代谢通路涉及一系列酶促反应，生成多种具有生物学活性的化合物，这些代谢产物统称为“犬尿氨酸能物质”。犬尿氨酸能物质参与多种病理生理学过程，在中枢神经系统中有着重要的生理功能。例如，喹啉酸是N-甲基-D-天冬氨酸受体... 详细信息

犬尿氨酸代谢通路涉及一系列酶促反应，生成多种具有生物学活性的化合物，这些代谢产物统称为“犬尿氨酸能物质”。犬尿氨酸能物质参与多种病理生理学过程，在中枢神经系统中有着重要的生理功能。例如，喹啉酸是N-甲基-D-天冬氨酸受体激动剂，在许多感染性神经系统疾病中可大量堆积在中枢神经系统，导致神经元因兴奋性中毒而死亡。犬尿喹啉酸可拮抗兴奋性谷氨酸盐受体，减少因兴奋性中毒导致的神经元死亡。文章就犬尿氨酸代谢通路在中枢神经系统中作用的相关研究做了综述。

关键词：犬尿氨酸犬尿喹啉酸喹啉酸中枢神经系统

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Dominant negative N19RhoA抑制大鼠颈动脉球囊损伤后血管再狭窄

Dominant negative N19RhoA抑制大鼠颈动脉球囊损伤后血管再狭窄

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国际心脏研究会（ISHR）中国分会第十届暨中国病理生理学会心血管专业委员会第十三届学术会议

作者：陈闻东楚玉峰朱鼎良姬开达刘建军高平进上海市血管生物学重点实验室上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市高血压研究所中国科学院上海生命科学研究院健康科学研究所血管生物学重点实验室医学基因组学国家重点实验室山东大学医学院附属山东省立医院ICU科

以往我们的细胞研究发现血管外膜成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转化过程中RhoA-Rho kinase信号通路被激活,提示该信号通路可能涉及血管外膜参与的血管重塑过程。本研究观察dominant negative N19RhoA （Ad-N19RhoA-hrGFP）对大鼠颈动脉... 详细信息

以往我们的细胞研究发现血管外膜成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转化过程中RhoA-Rho kinase信号通路被激活,提示该信号通路可能涉及血管外膜参与的血管重塑过程。本研究观察dominant negative N19RhoA （Ad-N19RhoA-hrGFP）对大鼠颈动脉球囊损伤后血管再狭窄的影响及研究可能涉及的机制,以阐明RhoA-Rho kinase信号通路在血管外膜重塑中的作用。我们制备12～14周龄SD大鼠颈动脉球囊损伤模型,损伤后即刻以生物化学胶F127 200 mL局部给予Ad-N19RhoA-hrGFP病毒（2×10～9 pfu/mL）,7或14d后处死。组织形态学观察血管损伤后再狭窄情况;免疫组织化学检测α-SM-actin表达。贴壁法培养大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞,Western blot检测N19RhoA对TGF-β1（10 ng/mL）诱导细胞的α-SM-actin表达。球囊损伤后7 d、14 d血管新生内膜的面积分别为0.10±0.06 mm和0.23±0.04 mm;管腔面积分别减小19%和44%。损伤后14 d新生内膜部位（81.6±8.6）%的细胞存在α-SM-actin表达。Ad-N19RhoA-hrGFP给药组损伤后7 d、14 d血管新生内膜的面积分别为0.06±0.04 mm、0.14±0.07 mm;管腔面积分别减小13%、24%。损伤后14 d新生内膜α-SM-actin表达率为（58.5±14.3）%。给予对照病毒Ad-hrGFP组的新生内膜面积、管腔狭窄率以及α-SM-actin表达与单纯损伤组比较无明显差异。200MOI的Ad-N19RhoA-hrGFP病毒感染血管外膜成纤维细胞24 h感染效率可达100%。Ad-N19RhoA-hrGFP明显抑制TGF-β1诱导的α-SM-actin表达。结果表明血管外膜局部给予N19RhoA能抑制血管损伤后再狭窄,其机制是N19RhoA能抑制血管外膜成纤维细胞/肌成纤维细胞表型转化。

关键词： adventitial fibroblast myofibroblast RhoA-Rho kinase neointima

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血管外膜肌成纤维细胞分化相关蛋白研究

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化学学报 2007年第15期65卷 1504-1510页

作者：郭淑杰吴凌云魏坚高平进朱鼎良上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市高血压研究所上海市血管生物学重点实验室国家医学基因组学重点实验室中国科学院上海生命科学研究院上海交通大学医学院健康科学研究所血管生物学实验室上海200025 中国科学院上海生命科学研究院上海交通大学医学院健康科学研究所血管生物学实验室

为寻找涉及血管紧张素II(AngⅡ)和转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的血管肌成纤维细胞(MF)分化的蛋白,本研究采用双向电泳和质谱从整体水平检测了MF分化前后蛋白表达谱的变化,共找到41个差异表达的蛋白点,表达水平和/或蛋白位置在AngII和T... 详细信息

为寻找涉及血管紧张素II(AngⅡ)和转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的血管肌成纤维细胞(MF)分化的蛋白,本研究采用双向电泳和质谱从整体水平检测了MF分化前后蛋白表达谱的变化,共找到41个差异表达的蛋白点,表达水平和/或蛋白位置在AngII和TGF-β1刺激后都发生明显变化的蛋白点14个,4个蛋白上调,6个蛋白下调,2个蛋白位置发生明显变化,2个蛋白表达上调,位置也发生变化;只在AngII诱导的MF中表达发生变化的蛋白20个,只在TGF-β1诱导的MF中表达发生变化的蛋白7个.选取AngII和TGF-β1共同调节的14个蛋白进行质谱鉴定,结果除骨架蛋白外,首次发现MF分化同泛素蛋白酶体系统和嘌呤合成有关;septin2的下调可能是成纤维细胞分化的标志.本研究运用蛋白质组学技术发现了新的参与MF分化的蛋白质,为进一步研究和干预细胞表型转化提供了新的思路和靶点.

关键词：外膜成纤维细胞分化 AngⅡ TGF-β1 双向电泳质谱

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高效液相色谱法测定SHR尿液中犬尿喹啉酸含量的变化

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上海交通大学学报（医学版） 2007年第4期27卷 361-363页

作者：张国昌高平进沈杰朱鼎良上海交通大学医学院瑞金医院上海市高血压研究所上海市血管生物学重点实验室上海200025

目的建立高效液相色谱荧光法测定尿液中犬尿喹啉酸（KYNA）含量的方法,观察不同周龄自发性高血压大鼠（SHR）及其正常对照大鼠（WKY）的尿KYNA含量变化。方法高效液相色谱荧光法采用的色谱柱为ODS色谱柱,流动相为10 mmol/L醋酸钠缓冲液... 详细信息

目的建立高效液相色谱荧光法测定尿液中犬尿喹啉酸（KYNA）含量的方法,观察不同周龄自发性高血压大鼠（SHR）及其正常对照大鼠（WKY）的尿KYNA含量变化。方法高效液相色谱荧光法采用的色谱柱为ODS色谱柱,流动相为10 mmol/L醋酸钠缓冲液（pH4.5）和乙腈（体积95∶5）,激发波344 nm,发射波398 nm。选择4周龄WKY大鼠和SHR各4只、16周龄WKY大鼠和SHR各6只检测24 h尿液中的KYNA含量,并进行统计学分析。结果KYNA浓度检测的线性范围0.220-33.000nmol/mL（R^2=0.999 1）,回收率为（90.37±8.47）%,日内差异为4.70%-9.40%,日间差异为5.20%-7.50%。4周龄WKY组24 h尿KYNA含量为（41.251±22.663）μg/24 h尿,SHR组为（35.387±10.814）μg/24 h尿,两组间无统计学差异（P〈0.05）;16周龄SHR尿KYNA含量为（39.511±15.985）μg/24 h尿,较WKY组（90.690±42.189）μg/24 h尿明显降低（P〈0.05）。结论高效液相色谱荧光方法具有灵敏、稳定、特异性高等特点,可用于临床检测尿KYNA。成年SHR尿KYNA含量较WKY大鼠减少,提示可能与高血压的发生发展有关。

关键词：高效液相色谱法犬尿喹啉酸自发性高血压大鼠

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大鼠骨髓间充质干细胞向内皮细胞分化潜能的研究

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上海交通大学学报（医学版） 2007年第12期27卷 1411-1415页

作者：马宁涛高平进朱鼎良上海交通大学医学院瑞金医院上海市高血压研究所上海市血管生物学重点实验室上海200025

目的体外研究大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)分化为血管内皮细胞的潜能。方法采用密度梯度离心法分离rMSCs,体外扩增并进行鉴定。在内皮细胞生长培养基(EGM-2)中以血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)定向诱导rMSC... 详细信息

目的体外研究大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)分化为血管内皮细胞的潜能。方法采用密度梯度离心法分离rMSCs,体外扩增并进行鉴定。在内皮细胞生长培养基(EGM-2)中以血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)定向诱导rMSCs向血管内皮细胞分化,观察细胞形态学变化。采用免疫细胞化学法和Dil荧光标记法,分别检测诱导后rMSCs的内皮细胞表型表达及对乙酰化低密度脂蛋白(Ac-LDL)的摄取能力。结果形态学观察显示,诱导后的rMSCs可见类似内皮细胞样改变,并表达血管内皮细胞特异的表面标志vWF和CD31,但仅少数细胞具有摄取Dil-Ac-LDL的能力。结论VEGF和bFGF在体外能够诱导rMSCs出现内皮细胞表型,但尚不完全具备成熟内皮细胞的功能特性。rMSCs具有向血管内皮细胞分化的潜能。

关键词：骨髓间充质干细胞血管内皮细胞血管内皮细胞生长因子碱性成纤维细胞生长因子

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