含Ⅰ型血小板反应蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin-like motifs,ADAMTS)是一类分泌型的金属蛋白酶,该家族包括19个成员。根据已知底物谱,ADAMTS被分为5类:即蛋白多糖酶、前胶...
详细信息
含Ⅰ型血小板反应蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin-like motifs,ADAMTS)是一类分泌型的金属蛋白酶,该家族包括19个成员。根据已知底物谱,ADAMTS被分为5类:即蛋白多糖酶、前胶原N-肽酶、范威氏因子切割蛋白酶、软骨寡聚基质蛋白酶和其他未知功能蛋白酶。其中,ADAMTS蛋白多糖酶通过降解细胞外基质(extracellular matrix,ECM)中的主要成分透明质蛋白多糖参与ECM的重构和炎症反应,在女性生殖系统的发育和正常功能所需的组织形态发生和发展中起着不可或缺的作用。ADAMTS蛋白多糖酶的功能失调会影响其底物透明质蛋白多糖的结构和功能,破坏ECM微环境的稳态,引起卵泡发育异常、排卵障碍、胎盘形成异常和早产等生殖/妊娠相关疾病。因此研究ADAMTS蛋白多糖酶的作用能够帮助我们更深入地理解女性生殖系统中生理或病理过程的分子机制,为生殖系统疾病的预测和防治提供新的思路。本文综述了ADAMTS蛋白多糖酶的结构、调控机制及其在女性生殖系统中的作用。
目的·构建5-羟色胺化(serotonylation,5-HT化)修饰蛋白研究体系,为寻找和发现5-HT化修饰蛋白提供方法学基础。方法·基于癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库和基因型-组织表达(Genotype-Tissue Expression,GT...
详细信息
目的·构建5-羟色胺化(serotonylation,5-HT化)修饰蛋白研究体系,为寻找和发现5-HT化修饰蛋白提供方法学基础。方法·基于癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库和基因型-组织表达(Genotype-Tissue Expression,GTEx)数据库分析编码5-HT化修饰的关键酶的基因转谷氨酰胺酶2(transglutaminase 2,TGM2)和编码5-羟色胺转运体(serotonin transporter,SERT)的基因溶质载体家族6(solute carrier family 6,SLC6A4)在正常生理组织和肿瘤组织中的表达情况。利用5-羟色胺盐酸盐分步合成5-羟色胺衍生物5-PT(5-propargyltryptamide),并利用傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、核磁共振氢谱1H-NMR、核磁共振碳谱13C-NMR和飞行时间质谱(TOF-MS)等手段进行分析和结构表征。通过流式细胞术检测5-PT在人胰腺癌细胞AsPC-1和小鼠免疫细胞[包括CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞以及髓系巨噬细胞(bone marrow derived macrophage,BMDM)]的胞内摄入情况。通过点击化学反应、免疫共沉淀以及质谱分析技术寻找和鉴定发生5-HT化修饰的蛋白,并进行京都基因和基因组数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析。结果·生物信息学相关分析显示TGM2和SLC6A4在生物体内正常组织和肿瘤组织广泛存在。流式细胞术结果显示合成的5-PT可通过细胞表面的SERT摄取进入人胰腺癌细胞AsPC-1和小鼠免疫细胞(包括CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞以及BMDM)。质谱分析数据显示,在各个细胞蛋白的5-PT处理组都富集到了丰富的5-HT化修饰蛋白。KEGG富集分析显示这些蛋白参与糖酵解和氨基酸合成相关通路。结论·利用合成的5-PT成功构建了5-HT化修饰蛋白的研究体系,在不同的细胞中富集得到多个5-HT化修饰的蛋白,为研究蛋白的5-HT化修饰及其功能提供了相对简单高效的研究手段。
暂无评论