检索结果-内蒙古大学图书馆

上海交通大学学报（医学版） 2012年第8期32卷 973-978页

作者：刘锋孟颖王峰刘勇王如瑶卢慧施文博李铮上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿外科上海市人类精子库上海市男科学研究所精子发育与遗传学实验室上海200001

目的研究液氮蒸汽熏蒸法(简称气相冷冻法)和直接投入液氮冷冻法(简称液相冷冻法)对人类精子冷冻复苏后运动能力、形态学及超微结构的影响。方法选择25例捐精者的精液标本,按照1∶1的比例添加改良甘油-卵黄-枸橼酸钠(GYC)作为冷冻保护剂... 详细信息

目的研究液氮蒸汽熏蒸法(简称气相冷冻法)和直接投入液氮冷冻法(简称液相冷冻法)对人类精子冷冻复苏后运动能力、形态学及超微结构的影响。方法选择25例捐精者的精液标本,按照1∶1的比例添加改良甘油-卵黄-枸橼酸钠(GYC)作为冷冻保护剂。每份精液标本等分为2份,分别进行气相法冷冻和液相法冷冻。复苏后,利用IVOS精子分析仪测定精子总活动率、前向运动精子百分率、运动参数,巴氏染色观察精子形态并计算形态正常率,透射电子显微镜观察精子超微结构。结果气相法冷冻从28℃降温到-185℃用时468 s,再经过1 h后降温到-196℃;液相法冷冻从30℃降温到-196℃用时90 s。两种方法冷冻复苏后精子总活动率、前向运动精子百分率、运动参数、形态正常率与冷冻前比较均明显降低(P<0.05)。气相法冷冻复苏后精子的复苏率、总活动率、前向运动精子百分率均高于液相法,差异有统计学意义(P<0.05);两种冷冻方法复苏后精子形态正常率、运动参数比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。通过透射电子显微镜观察,使用GYC作为冷冻保护剂,两种方法冷冻复苏后,精子头部质膜和顶体膜超微结构未出现明显的损伤。结论改良GYC保护剂对精子超微结构具有保护作用;气相冷冻法冷冻人类精子的复苏结果优于液相法。

关键词：精子冷冻保存气相冷冻法液相冷冻法精子运动超微结构

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染色体核型分析对男性不育诊疗与捐精筛查的意义

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上海交通大学学报（医学版） 2012年第8期32卷 968-972页

作者：汪小波胡洪亮刘勇曹小蓉朱勇王建华李铮上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿外科上海市男科学研究所精子发育与遗传学实验室上海市人类精子库上海200001

目的对不育患者和捐精志愿者进行染色体核型分析,探讨其临床意义。方法对967例不育患者(不育组)和3 184例精液初筛合格的捐精志愿者(捐精组)进行染色体核型分析,比较两组异常核型发生率和异常核型构成情况。结果不育组异常核型发生率显... 详细信息

目的对不育患者和捐精志愿者进行染色体核型分析,探讨其临床意义。方法对967例不育患者(不育组)和3 184例精液初筛合格的捐精志愿者(捐精组)进行染色体核型分析,比较两组异常核型发生率和异常核型构成情况。结果不育组异常核型发生率显著高于捐精组(14.06%和3.39%,P<0.01)。不育组主要异常核型为非多态性变异,其发生率显著高于捐精组(9.62%和0.25%,P<0.05);捐精组主要异常核型为多态性变异,其发生率与不育组比较差异无统计学意义(3.14%和4.44%,P>0.05)。不育组另发现2例世界首次报道核型,分别为46,XY,t(3;12)(p23;q24)和46,XY,inv(20)(p13;q13.1)。结论染色体非多态性变异是导致男性不育的重要原因之一,对不育患者和捐精志愿者进行染色体核型分析利于优生优育。

关键词：染色体核型分析捐精志愿者辅助生殖技术出生缺陷

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纤毛中Hedgehog信号调控机制研究进展

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上海交通大学学报（医学版） 2013年第4期33卷 502-505页

作者：王亚楠邹沙沙李铮胡洪亮上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿外科上海市男科学研究所精子发育与遗传学实验室上海市人类精子库上海200001

纤毛是多种信号通路的重要调节者,对Hedgehog(Hh)信号通路也起着至关重要的调控作用。研究表明Hh信号通路与鞭毛内转运密切相关,遗传学与细胞生物学的相关研究也表明了Hh信号对初级纤毛有依赖性。Hh信号通路的核心元件都定位于纤毛上,... 详细信息

纤毛是多种信号通路的重要调节者,对Hedgehog(Hh)信号通路也起着至关重要的调控作用。研究表明Hh信号通路与鞭毛内转运密切相关,遗传学与细胞生物学的相关研究也表明了Hh信号对初级纤毛有依赖性。Hh信号通路的核心元件都定位于纤毛上,并通过鞭毛内转运实现其对信号刺激的应答,最终影响Hh基因的转录,而精子鞭毛的结构与纤毛类似,纤毛疾病也会造成精子鞭毛运动功能障碍。纤毛不动综合征等纤毛结构与功能的异常都会影响Hh通路,其诸多调节因子如Foxj1等对纤毛形成机制有重要意义,也为治疗不育症及避孕等相关措施研究提供了新思路。文章对纤毛中Hh信号调控机制研究进展进行综述。

关键词：纤毛鞭毛 Hedgehog信号通路调控分子

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温度和Hoechst 33258浓度对人活精子标记效果的影响

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上海交通大学学报（医学版） 2012年第8期32卷 979-982页

作者：卢慧施文博肖玉芳王柱清刘勇卢克敏汪小波李铮上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿外科上海市人类精子库上海市男科学研究所精子发育与遗传实验室上海200001

目的研究孵育温度和荧光染料Hoechst 33258(H258)的浓度对活体标记人类精子效果的影响。方法随机选取14份精液标本,经洗涤处理后,在不同温度(0℃、室温和37℃)下分别用0(对照)、0.01、0.1 mg/mL的H258孵育1 h。记录精子前向运动百分率及... 详细信息

目的研究孵育温度和荧光染料Hoechst 33258(H258)的浓度对活体标记人类精子效果的影响。方法随机选取14份精液标本,经洗涤处理后,在不同温度(0℃、室温和37℃)下分别用0(对照)、0.01、0.1 mg/mL的H258孵育1 h。记录精子前向运动百分率及H258着色率。以未予处理的精液标本作为空白对照组。结果在观察条件范围内,孵育温度与H258浓度对精子运动的影响有统计学意义。随着H258质量浓度的升高和孵育温度的降低,精子前向运动百分率下降(P<0.01)。精子着色率随孵育温度和H258质量浓度的升高而提高;当H258质量浓度为0.1 mg/mL时,不同孵育温度下的精子着色率比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 H258可用作精子活体荧光标记,37℃+0.1 mg/mL H258是本研究中最优的染色条件。但仍需要根据不同使用目的选择孵育条件。

关键词：精子温度 Hoechst 33258 活体标记

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PDE5抑制剂对精子活力及受精功能影响的研究进展

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上海交通大学学报（医学版） 2012年第8期32卷 1010-1013页

作者：卢克敏卢慧李铮上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿外科上海市人类精子库上海市男科学研究所精子发育与遗传实验室上海200001

磷酸二酯酶-5(PDE5)抑制剂常用于治疗阴茎勃起功能障碍。近年来,研究发现PDE5抑制剂对精子的活力和受精功能有影响,尤其在适当药物浓度时能显著提高精子运动能力。该文就PDE5抑制剂对精子活力和受精功能的影响进行综述。

关键词：磷酸二酯酶-5抑制剂精子活力受精

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干细胞向雄性配子诱导分化研究进展

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中华男科学杂志 2011年第4期17卷 356-360页

作者：李朋(综述) 胡洪亮(综述) 李铮(审校) 上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿外科上海市男科学研究所精子发育与遗传学实验室上海市人类精子库上海200001

人类雄性配子的重要功能之一是完整地将父代遗传信息传递给子代。配子发生,尤其雄性配子发生是个极其复杂的细胞分化过程,它包括有丝分裂与减数分裂两大过程。然而由于缺乏可重复、高效率研究雄性配子发生的体外培养体系,生殖细胞发生... 详细信息

人类雄性配子的重要功能之一是完整地将父代遗传信息传递给子代。配子发生,尤其雄性配子发生是个极其复杂的细胞分化过程,它包括有丝分裂与减数分裂两大过程。然而由于缺乏可重复、高效率研究雄性配子发生的体外培养体系,生殖细胞发生、发育机制研究进展缓慢。干细胞经体外诱导向雄性生殖细胞分化的研究,将推进生殖细胞发育研究,甚至生殖生物学的发展。本文综述近年原始生殖细胞体外培养及干细胞向雄性配子诱导分化的研究进展。

关键词：雄性生殖细胞干细胞分化

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生精小管异位重构研究进展

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中华男科学杂志 2010年第10期16卷 928-932页

作者：刘平李铮薄隽杰上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿外科上海市男科学研究所精子发育与遗传实验室上海市人类精子库上海200001

哺乳动物睾丸的形成和精子发生是一个复杂的过程,包括细胞的迁移、增殖、分化和细胞间的相互作用。尽管近年来对此进行了大量的研究,但对许多方面仍然是未知。缺少一个合适的研究睾丸形成与精子发生的模型是阻碍研究取得进展的一个重要... 详细信息

哺乳动物睾丸的形成和精子发生是一个复杂的过程,包括细胞的迁移、增殖、分化和细胞间的相互作用。尽管近年来对此进行了大量的研究,但对许多方面仍然是未知。缺少一个合适的研究睾丸形成与精子发生的模型是阻碍研究取得进展的一个重要原因。在过去的几年中,相继发现2种对研究哺乳动物精子发生很有价值的模型:一是未成熟的睾丸组织异位移植于免疫缺陷鼠的皮下可以成活并产生有功能的精子;另一是未成熟睾丸组织消化成单细胞后异位移植于免疫缺陷鼠的皮下可以重新形成生精小管样结构并完成完整的生精过程。本文对这两种方法的研究进展、应用及前景进行了综述。

关键词：生精小管异位重构精子发生

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小鼠睾丸消化细胞异体移植重构生精小管的研究

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中华男科学杂志 2011年第10期17卷 867-872页

作者：田汝辉胡洪亮刘平李朋杨施朱勇马猛孙璨邹沙沙郭熙志黄翼然李铮上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿外科上海市男科学研究所精子发育与遗传学实验室上海市人类精子库上海200001 上海交通大学Bio-X中心上海200240

目的:采用免疫缺陷小鼠作为受体,通过对小鼠睾丸消化细胞异位移植后不同时期移植物的研究,观察生精小管重构、生精细胞归巢及精子发生情况。方法:取新生ICR小鼠的睾丸消化成单细胞悬液,将其与Matrigel基质胶混匀后移植于雄性裸鼠背部皮... 详细信息

目的:采用免疫缺陷小鼠作为受体,通过对小鼠睾丸消化细胞异位移植后不同时期移植物的研究,观察生精小管重构、生精细胞归巢及精子发生情况。方法:取新生ICR小鼠的睾丸消化成单细胞悬液,将其与Matrigel基质胶混匀后移植于雄性裸鼠背部皮下,术后裸鼠行去势。移植后分别于4、6、8、10周处死5只裸鼠,计算移植成功率,取移植物测量直径,并进行HE染色和免疫组化检测,观察生精小管的重构、生精细胞归巢及精子发生情况。结果:20只受体鼠接受睾丸消化细胞移植后全部存活。睾丸消化细胞移植后10周内可见明显隆起的包块,包块直径由第4周的(3.91±0.71)mm增加到(6.69±0.50)mm,移植物表面有血管生成。对移植物石蜡切片进行HE染色可见生精小管样结构,部分生精小管管腔内可见由精原细胞发育至精子细胞的各级生殖细胞,未见明显精子产生。对8周移植物进行免疫组化观察,可见生殖细胞标志物Mvh、支持细胞标志物Gata4和间质细胞标志物P450Scc表达。结论:新生小鼠睾丸消化细胞移植于裸鼠背部皮下后可重构生精小管,为研究睾丸组织工程及睾丸发育和精子发生过程中睾丸各组成细胞之间的相互作用提供了理想的研究模型。

关键词：睾丸消化细胞异位重构生精小管小鼠

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诱导多能干细胞体外向生精细胞自发分化潜能的研究

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中华男科学杂志 2011年第1期17卷 8-12页

作者：李朋胡洪亮张玲玲丁慧张伟田汝辉刘平史占平郭熙志李铮黄翼然上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿外科上海市男科学研究所精子发育与遗传学实验室上海市人类精子库上海200001 上海交通大学Bio-X中心上海200240

目的:探讨诱导多能干细胞(iPS)体外培养自发分化过程中生精细胞相关基因的表达,评估iPS体外向生精细胞自发分化的潜能。方法:经类胚体(EB)形成,体外诱导iPS向生精细胞分化,实时定量PCR和PCR检测生精细胞相关基因的表达。结果:实时定量PC... 详细信息

目的:探讨诱导多能干细胞(iPS)体外培养自发分化过程中生精细胞相关基因的表达,评估iPS体外向生精细胞自发分化的潜能。方法:经类胚体(EB)形成,体外诱导iPS向生精细胞分化,实时定量PCR和PCR检测生精细胞相关基因的表达。结果:实时定量PCR和PCR结果显示iPS经EB形成诱导分化后生精细胞不同时期的相关基因均有不同程度表达。iPS体外培养自发分化后生精细胞相关基因出现4种时间表达特征:Oct4基因表达量呈波浪状上升;Dppa3和Stra8基因表达量随诱导时间延长而下降;Dazl基因表达量呈波浪状下降;减数分裂前期基因Tex14、Msy2,减数分裂期基因Scp1、Scp3以及单倍体基因Akap3随着诱导时间延长先表达增加,而后表达下降。结论:iPS在经EB自发分化过程中表达生精细胞不同时期的相关基因,并且表达雄性配子单倍体基因,具有向雄性配子的分化潜能。

关键词：诱导多能干细胞类胚体生精细胞基因表达

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一步熏蒸对麦管冻融人类精子运动能力的影响

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中华检验医学杂志 2012年第2期35卷 145-149页

作者：王峰刘锋孟颖李铮上海交通大学医学院 200001 上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿外科上海市人类精子库上海市男科学研究所精子发育与遗传学实验室

目的比较一步熏蒸法和程序降温法对人类精子冷冻复苏后运动能力的影响.方法 25份精液标本取自2011年5至7月上海市人类精子库25名精液捐赠者,应用麦管为冷冻载体,按照1∶1的比例添加改良甘油-卵黄-柠檬酸钠作为冷冻保护剂,将液化后的每... 详细信息

目的比较一步熏蒸法和程序降温法对人类精子冷冻复苏后运动能力的影响.方法 25份精液标本取自2011年5至7月上海市人类精子库25名精液捐赠者,应用麦管为冷冻载体,按照1∶1的比例添加改良甘油-卵黄-柠檬酸钠作为冷冻保护剂,将液化后的每份精液标本平均分为2份,分别进行一步熏蒸法和程序降温法冷冻.按照世界卫生组织推荐标准对冷冻前后的标本进行精液常规分析,利用IVOS精子分析仪进行精子密度、总活动率、前向运动精子百分率、运动参数（包括平均路径速度、平均直线速度、平均曲线速度、平均鞭打频率）的测定.精子形态学染色使用改良巴氏染色,采用人工分析办法,显微镜下计数200条精子,计算其形态正常率.同一种冷冻方法进行冷冻前、后上述各指标的比较,以及两种不同冷冻方法精子复苏后上述各指标的比较均采用配对t检验.结果冷冻前,精子总活动率、前向运动精子百分率、平均路径速度、平均直线速度、平均曲线速度、平均鞭打频率分别为（91.36 ±4.96）％、（81.28 ±6.41）％、（59.29±9.30） μm/s、（49.80 ±8.40） μm/s、（83.39±15.70） μm/s、（16.68 ±3.36） Hz,采用一步熏蒸法冷冻复苏后,分别为（46.04 ±20.14）％、（40.22±18.42）％、（48.00±11.60）μm/s、（41.11±8.50） μm/s、（71.55±17.19）μm/s、（15.94±14.30） Hz,与冷冻前比较,除平均鞭打频率差异无统计学意义外（t=0.258,P＞0.05）,其余指标差异均有统计学意义（t=11.324、11.958、4.266、3.964、3.620,P均＜0.05）.采用程序降温法冷冻复苏后,上述各指标分别为（48.05±18.27）％、（42.47±15.62）％、（45.30 ±6.51） μm/s、（38.08 ±4.99） μm/s、（64.23 ±11.75） μm/s、（14.00 ±2.99） Hz,与冷冻前比较,差异均有统计学意义（t=10.337、10.874、7.154、5.510、6.494、3.244,P均＜0.05）.一步熏蒸法和程序降温法冷冻复苏后,精子复苏率、总活动率、前向运动精子百分率、形态正常率在两种方法间差异均无统计学意义（t=0.425、0.364、0.622、0.676,P＞0.05）；而一步熏蒸法的平均路径速度、平均直线速度、平均曲线速度、平均鞭打频率均高于程序降温法,其中平均直线速度和平均曲线速度的差异有统计学意义（t=2.489、2.822,P均＜0.05）.结论麦管可作为精子冷冻的载体.与程序降温法相比,一步熏蒸法操作简便,冷冻复苏后精子具有较高的运动能力,是一种值得推荐的精子快速冷冻方法.

关键词：精子冷冻保存一步熏蒸程序降温精子运动

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