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作者：韩连书叶军邱文娟高晓岚王瑜季文君许浩顾学范上海交通大学医学院附属新华医院上海市儿科医学研究所内分泌、遗传代谢病研究室

利用串联质谱技术检测干血滤纸片中氨基酸和酰基肉碱水平，对新生儿进行遗传代谢病筛查，目的是探讨我国氨基酸代谢病、有机酸血症和脂肪酸氧化代谢病的患病率。指出，氨基酸代谢病、有机酸血症和脂肪酸氧化代谢病在中国并不少见，串联... 详细信息

利用串联质谱技术检测干血滤纸片中氨基酸和酰基肉碱水平，对新生儿进行遗传代谢病筛查，目的是探讨我国氨基酸代谢病、有机酸血症和脂肪酸氧化代谢病的患病率。指出，氨基酸代谢病、有机酸血症和脂肪酸氧化代谢病在中国并不少见，串联质谱技术是筛查这些疾病的可靠方法，有助于这些疾病的早期诊断和治疗。这些疾病经过相应的治疗可达到较好的效果，表明在中国有条件的地区可推广应用串联质谱技术进行遗传代谢病筛查。

关键词：遗传代谢病新生儿患者疾病筛查血液检测串联质谱技术

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单纯型甲基丙二酸血症患者治疗效果分析

单纯型甲基丙二酸血症患者治疗效果分析

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中华医学会2012年医学遗传学年会暨全国第十一次医学遗传学学术会议

作者：毋盛楠韩连书叶军邱文娟张惠文高晓岚王瑜李筱燕顾学范上海交通大学医学院附属新华医院上海市儿科医学研究所内分泌遗传代谢病研究室上海 200092

目的分析总结单纯型甲基丙二酸血症(methylmalonic acidemia,MMA)患者的临床特点及治疗后病情变化,探讨单纯型MMA的治疗效果和预后.方法对象为单纯型MMA患者40例.治疗方法包括：1.饮食治疗,限制天然蛋白质摄入量,同时补充特殊奶粉;2....

目的分析总结单纯型甲基丙二酸血症(methylmalonic acidemia,MMA)患者的临床特点及治疗后病情变化,探讨单纯型MMA的治疗效果和预后.方法对象为单纯型MMA患者40例.治疗方法包括：1.饮食治疗,限制天然蛋白质摄入量,同时补充特殊奶粉;2.药物治疗,口服或静脉滴注左旋肉碱50～100mg/(kg.d);维生素B12治疗有效者给予维生素B12肌肉注射1mg,每周1～2次.每1～3个月随访一次,随访内容包括发育情况、血丙酰肉碱、尿甲基丙二酸及其他相关实验室检测.分析患者治疗前后临床表现及实验室检测结果的变化.结果 40例MMA患者中32例来自临床患者,8例来自新生儿筛查,男31例,女9例,首诊年龄中位数1月(1天～6岁10月).治疗并随访30例,男23例,女7例,随访时间1个月～5年.其中4例患者死亡,均为新生儿时期发病,死亡时年龄约为1～5月;26例治疗后急性期各临床症状明显好转,呕吐、意识障碍、呼吸困难及抽搐等减轻,其中5例仍偶有呕吐;血氨及血乳酸水平降低,贫血有所改善但均未恢复正常.6例体格及智力发育正常,18例患者遗留有不同程度运动发育迟缓,17例头颅MRI提示不同程度神经系统损害,主要为脑室脑池系统增大、双侧基底节区损害及脑萎缩.11例患者进行了不同类型神经心理学发育评价,3例DQ均＞90,4例DQ处于35～80之间;4例MDI和PDI均低于69;SM评分7～10分.治疗前患者血C3水平和C3/C2比值、尿甲基丙二酸和甲基枸橼酸水平分别为24.15(7.92～81.02)umol/L和1.08(0.38～6.01)、705.34(113.79～3078.60)和7.71(0.52～128.21),均明显高于正常参考值及对照组儿童,且差异具有统计学意义(均P＜0.05).治疗后患者血C3水平、C3/C2比值、尿甲基丙二酸、甲基枸橼酸水平分别降至10.50(3.00～30.92)umol/L、0.63(0.25～2.89)、166.23(22.40～3322.21)及3.96(0.94～119.13),与治疗前相比差异具有统计学意义(均P＜0.05),但仍高于正常参考值上限及对照组儿童,差异具有统计学意义(均P＜0.05).结论单纯型MMA患者经饮食及药物治疗后,血酰基肉碱及尿甲基丙二酸、甲基枸橼酸水平可明显降低,临床症状缓解,但并不能逆转已经形成的神经系统损伤,部分患者遗留运动发育迟缓及智力低下.

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甲基丙二酸血症合并同型半胱氨酸血症患者治疗效果分析

甲基丙二酸血症合并同型半胱氨酸血症患者治疗效果分析

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中华医学会2012年医学遗传学年会暨全国第十一次医学遗传学学术会议

作者：黄倬韩连书叶军邱文娟张惠文高晓岚王瑜李筱燕顾学范上海交通大学医学院附属新华医院上海市儿科医学研究所内分泌遗传代谢病研究室上海 200092

目的分析甲基丙二酸血症合并同型半胱氨酸血症患者的治疗效果和预后.方法甲基丙二酸血症合并同型半胱氨酸血症患者58例,男34例,女24例,其中新生儿筛查诊断8例,临床患者50例,首诊年龄18天～30岁10个月.治疗方案包括维生素B12、甜菜碱...

目的分析甲基丙二酸血症合并同型半胱氨酸血症患者的治疗效果和预后.方法甲基丙二酸血症合并同型半胱氨酸血症患者58例,男34例,女24例,其中新生儿筛查诊断8例,临床患者50例,首诊年龄18天～30岁10个月.治疗方案包括维生素B12、甜菜碱、叶酸、维生素B6、左旋肉碱及其他对症支持治疗.随访1个月～7.1年,监测体格发育、神经精神发育、血串联质谱、尿气相色谱质谱、血同型半胱氨酸、常规实验室检查及其他特殊检查项目等内容.结果本组患者经维生素B12负荷试验后临床症状有不同程度好转,联合用药治疗1个月～6个月后急性期临床症状和贫血、代谢性酸中毒等生化异常基本消失,肌力肌张力改善.8例经新生儿筛查诊断的患儿中,4例持续无症状,4例有不同程度发育落后.42例早发型患儿中,3例感染后多器官衰竭死亡;2例智力测试正常,其余患儿均有不同程度运动智力发育落后.8例迟发型患者的智力或运动倒退无进一步恶化及反复,但残余不同程度智力落后或运动障碍.患者血丙酰肉碱、丙酰肉碱与乙酰肉碱比值、同型半胱氨酸及尿甲基丙二酸水平由治疗前的7.73(1.5～18.61)μmol/L、0.74(0.29～2.06)、97.3(25.1～250)μmol/L及168.55(3.66～1032.82)降至随访时的2.74(0.47～12.09)μmol/L、0.16(0.03～0.62)、43.8(17～97.8)μmol/L及6.81(0～95.43),差异均有显著性(P＜0.01).7例患儿试用维生素B12大剂量口服替代肌注或皮下给药,发现尿甲基丙二酸浓度明显增高.11例患儿先后给予氰钴胺和羟钴胺治疗,发现羟钴胺治疗期间血C3/C2和尿甲基丙二酸浓度降低更显著(P＜0.01).结论甲基丙二酸血症合并同型半胱氨酸血症患者经维生素B12肌注或皮下给药及甜菜碱、叶酸、维生素B6、左旋肉碱等口服药物综合治疗可有效改善临床表现及血尿生化异常,血丙酰肉碱、丙酰肉碱与乙酰肉碱比值可降至正常,血同型半胱氨酸及尿甲基丙二酸水平显著下降,但多数患者仍有运动语言及智力发育落后.羟钴胺治疗效果优于氰钴胺.

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48万例新生儿串联质谱遗传代谢病筛查及随访结果分析

48万例新生儿串联质谱遗传代谢病筛查及随访结果分析

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中华医学会2012年医学遗传学年会暨全国第十一次医学遗传学学术会议

作者：韩连书叶军邱文娟高晓岚王瑜季文君许浩顾学范上海交通大学医学院附属新华医院上海市儿科医学研究所内分泌、遗传代谢病研究室上海 200092

目的利用串联质谱技术检测干血滤纸片中氨基酸和酰基肉碱水平,对新生儿进行遗传代谢病筛查,目的是探讨我国氨基酸代谢病、有机酸血症和脂肪酸氧化代谢病的患病率.方法自2003年1月至2012年7月共收集479 494例新生儿出生后2～10天的干...

目的利用串联质谱技术检测干血滤纸片中氨基酸和酰基肉碱水平,对新生儿进行遗传代谢病筛查,目的是探讨我国氨基酸代谢病、有机酸血症和脂肪酸氧化代谢病的患病率.方法自2003年1月至2012年7月共收集479 494例新生儿出生后2～10天的干血滤纸片.利用串联质谱技术检测干血滤纸片中20种氨基酸及其相互间比值、40种酰基肉碱及其相互间比值,对40种氨基酸代谢病、有机酸血症和脂肪酸氧化代谢病进行筛查.筛查阳性新生儿进行尿气相质谱有机酸检测、其他相关生化检测及基因突变检测,以便确诊疾病.结果确诊15种疾病146例患儿,患病率为1：3 284,男80例,女66例.在这些患儿中,氨基酸代谢病76例(52.0％),其中高苯丙氨酸血症最常见(58例),其次为高甲硫氨酸血症(5例)及希特林蛋白缺乏症(5)例.有机酸血症41例(28.1％),其中3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症(21例)和甲基丙二酸血症(14例)较常见,其次为丙酸血症(3例).脂肪酸氧化代谢病29例(19.9％),其中肉碱摄取缺陷多见(14例),其次为短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(11例)及中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(4例).随访结果显示,所有3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症患儿、4例甲基丙二酸血症、6例肉碱摄取缺陷患儿未经治疗,发育正常;5例甲基丙二酸血症患儿虽经治疗,4例枫糖尿病患儿、仍发病,发育落后;1例丙酸血症患儿及2例枫糖尿病患儿死亡;其余患儿经治疗,发育正常.结论氨基酸代谢病、有机酸血症和脂肪酸氧化代谢病在中国并不少见,串联质谱技术是筛查这些疾病的可靠方法,有助于这些疾病的早期诊断和治疗.这些疾病经过相应的治疗可达到较好的效果,表明在中国有条件的地区可推广应用串联质谱技术进行遗传代谢病筛查.

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串联质谱检测确诊的1135例遗传代谢病患儿疾病谱分析

串联质谱检测确诊的1135例遗传代谢病患儿疾病谱分析

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中华医学会2012年医学遗传学年会暨全国第十一次医学遗传学学术会议

作者：韩连书叶军邱文娟张惠文高晓岚王瑜李筱燕许浩顾学范上海交通大学医学院附属新华医院上海市儿科医学研究所内分泌遗传代谢病研究室上海 200092

目的分析通过串联质谱技术检测的临床遗传代谢病确诊病例中,每种疾病的频率及年龄分布,探讨我国哪些氨基酸、有机酸及脂肪酸氧化代谢病较常见.方法通过串联质谱技术对18303例遗传性代谢病疑似患者进行氨基酸、有机酸及脂肪酸氧化代谢...

目的分析通过串联质谱技术检测的临床遗传代谢病确诊病例中,每种疾病的频率及年龄分布,探讨我国哪些氨基酸、有机酸及脂肪酸氧化代谢病较常见.方法通过串联质谱技术对18303例遗传性代谢病疑似患者进行氨基酸、有机酸及脂肪酸氧化代谢病检测,对阳性患者进行确诊,对确诊患者的疾病种类进行分析,并分析几种相对常见疾病的发病年龄.结果共确诊遗传代谢病患者1135例,男739例,女396例,年龄范围(1d～59岁)年龄中位值1岁.共涉及28种疾病,其中氨基酸代谢病12种,580例,发生率3.2％;以高苯丙氨酸血症最多(331例),其次为Citrin蛋白缺乏症(121例),鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症(42例)和枫糖尿病(33例).有机酸血症9种,408例,发生率2.2％;以甲基丙二酸血症最常见(242例),其次为丙酸血症(55例)、多种酰基辅酶A羧化酶缺乏症(40例)和戊二酸血症-Ⅰ型(31例).脂肪酸氧化障碍7种,147例,发生率0.8％;多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症最常见(79例),其次为肉碱转运障碍(28例).相对常见疾病患者的年龄分布显示：Citrin蛋白缺乏症患者发病年龄集中在出生后1至6个月(86例,71％);鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症和枫糖尿病患者发病以新生儿居多,分别为18例(43％)和15例(45％);甲基丙二酸血症以0～6个月患者最多,(121例,51％);多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症患者18岁以上发病率最高(40例,51％),原发性肉碱缺乏症发病多在6个月～3岁,(13例,46％).结论在我国,氨基酸代谢病的患病率高于有机酸血症及脂肪酸氧化代谢病,相对常见疾病为高苯丙氨酸血症、Citrin蛋白缺乏症、鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症、枫糖尿病、甲基丙二酸血症、丙酸血症和多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症.多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症多在成人时期发病,而Citrin蛋白缺乏症、鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症、枫糖尿病、甲基丙二酸血症、丙酸血症等遗传代谢病多在新生儿或婴幼儿时期发病.

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一个糖原累积病Ⅱ型家系的酸性-α-葡萄糖苷酶及其产前基因诊断

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中华医学遗传学杂志 2011年第3期28卷 261-265页

作者：曾敏慧邱文娟顾学范王瑜周建德叶军韩连书张惠文上海交通大学医学院附属新华医院上海市儿科医学研究所内分泌遗传代谢病研究室 200092

目的为1个糖原累积病Ⅱ型（glycogen storage diseasetypeⅡ，GSDⅡ）家系进行酶学和产前基因诊断。方法用酸性-α-葡萄糖苷酶（acid—alpha-glucosidase，GAA）特异性水解荧光底物4甲基伞型酮-α-D-Ptt喃葡萄糖苷（4-methylumbellifer... 详细信息

目的为1个糖原累积病Ⅱ型（glycogen storage diseasetypeⅡ，GSDⅡ）家系进行酶学和产前基因诊断。方法用酸性-α-葡萄糖苷酶（acid—alpha-glucosidase，GAA）特异性水解荧光底物4甲基伞型酮-α-D-Ptt喃葡萄糖苷（4-methylumbelliferyl-α-D-glucopyranoside，4-MUG）和阿卡波糖抑制其同工酶的方法检测外周血白细胞和羊水细胞GAA酶活性，聚合酶链反应扩增GAA基因外显子编码区序列，直接测序分析GAA基因突变情况。结果先证者外周血白细胞与胎儿羊水细胞GAA酶活性均明显低于正常参考值范围，分别为正常对照平均值的12．3％和1．1％。先证者和胎儿均携带新无义突变P．W738X和已报道的无义突变P．E888X；先证者、母亲和胎儿均携带假性缺陷等位基因[c．1726G〉A；c．2065G〉A]。结论通过GAA酶活性检测结合GAA基因分析对1个GSDⅡ家系进行了产前诊断。由于假性缺陷等位基因可引起GAA酶活性降低，故GAA基因分析应作为亚洲人群GSDⅡ产前诊断的常规手段。

关键词：糖原累积病Ⅱ型酸性α-葡萄糖苷酶产前诊断假性缺陷等位基因

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1例糖原累积病患儿酸性-α-葡萄糖苷酶基因的新无义突变p.W738X(英文)

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临床儿科杂志 2011年第5期29卷 401-406页

作者：曾敏慧邱文娟顾学范王瑜周建德叶军韩连书张惠文高晓岚上海交通大学医学院附属新华医院上海市儿科医学研究所内分泌遗传代谢病研究室中国上海200092

目的探讨1例临床疑似糖原累积病Ⅱ型患儿的临床特点和酸性-α-葡萄糖苷酶(GAA)基因突变情况。方法分析患儿病史,并检测患儿及其父母外周血白细胞酸性-α-葡萄糖苷酶活性,聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增GAA编码区,直... 详细信息

目的探讨1例临床疑似糖原累积病Ⅱ型患儿的临床特点和酸性-α-葡萄糖苷酶(GAA)基因突变情况。方法分析患儿病史,并检测患儿及其父母外周血白细胞酸性-α-葡萄糖苷酶活性,聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增GAA编码区,直接测序分析GAA基因突变情况。结果该患儿生后2个月即出现喂养困难和全身肌无力,4个月发现心脏增大,6个月时死于心肺功能衰竭。患儿白细胞酸性-α-葡萄糖苷酶活性明显降低,仅为正常对照中位数的17.3%。DNA测序分析显示患儿携带一个新无义突变p.W738X和一个已报道的p.E888X突变。患儿及其母亲均携带假性缺陷等位基因c.[1726G>A;2065G>A]。结论 GAA酶活性测定结合基因诊断明确诊断1例临床疑似糖原累积病(GSD)Ⅱ型,发现1个GAA基因新无义突变p.W738X。根据患儿临床表现可诊断为婴儿型GSDⅡ,推测p.W738X突变对GAA酶活性影响严重。由于假性缺陷等位基因c.[1726G>A;2065G>A]可引起正常人GAA酶活性降低,故GAA基因突变分析对明确GSDⅡ型患者的诊断及其家系的产前诊断有重要意义。

关键词：糖原累积病Ⅱ型酸性-α-葡萄糖苷酶基因突变

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45例男性黏多糖贮积症型Ⅱ型基因分析及1例女性患者的病因研究

45例男性黏多糖贮积症型Ⅱ型基因分析及1例女性患者的病因研究

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2011年第11届中华医学会儿科学分会内分泌遗传代谢学组学术会议

作者：张惠文顾学范李晶张新顺王瑜叶军邱文娟韩连书高晓岚龚珠文上海交通大学医学院附属新华医院，上海市儿科医学研究所，内分泌遗传代谢病科上海交通大学医学院附属新华医院，上海市儿科医学研究所，内分泌遗传代谢病

目的：通过对黏多糖贮积症Ⅱ型患者家系IDS基因突变谱研究，综合分析IDS基因突变的热点区域、突变方式，并试图探讨基因型与表型的关系。方法：以46例黏多糖贮积症II型患者家系为研究对象，进行(1)全部9个外显子突变检测(2)进行基因一... 详细信息

目的：通过对黏多糖贮积症Ⅱ型患者家系IDS基因突变谱研究，综合分析IDS基因突变的热点区域、突变方式，并试图探讨基因型与表型的关系。方法：以46例黏多糖贮积症II型患者家系为研究对象，进行(1)全部9个外显子突变检测(2)进行基因一假基因重组突变分析;(3)对1例女性患者在确认碱基变异的基础上进行X染色体失活分析及RNA分析。结果：(1)在本组46位患者的IDS基因中共发现36种突变或变异，（2）对本组MPS II患者进行系统的重组一假基因重组分析，发现5例患者带有重组突变，占被检测患者人数的11%。(3)对1例女性MPS II患者家系进行基因突变分析，发现该患者带有1种未见报道的同义突变。(4)对有母亲标本的15例MPS II患者家系检测结果表明13位母亲为相应突变的杂合子，2例患者母亲未携带该突变。结论：(1)中国人黏多糖贮积病患者IDS基因突变涉及类型多，呈高度异质性，但外显子点突变所在比率大，外显子点突变的区域主要集中在IDS基因外显子9和3;(2)同义突变不要被简单地认为是良性变异，也可能是病理变异，需要引起重视;C3)女性患者也可能发生X连锁的隐性遗传病，该病做产前诊断时不能仅因胎儿的女性性别排除此病。

关键词：黏多糖贮积症Ⅱ型基因突变女性患者病因分析

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极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症研究进展

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国际儿科学杂志 2011年第5期38卷 429-433页

作者：章瑞南(综述) 邱文娟(审校) 上海交通大学医学院附属新华医院上海市儿科医学研究所内分泌遗传代谢病研究室 200092

极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症是一种较罕见的脂肪酸代谢障碍疾病，根据起病年龄和临床表现分为三型：心肌病型、肝型、肌病型。心肌病型病情重，病死率高。临床诊断可通过血串联质谱（MS／MS）检测血肉豆蔻烯酰基肉碱（C14：1）水平进... 详细信息

极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症是一种较罕见的脂肪酸代谢障碍疾病，根据起病年龄和临床表现分为三型：心肌病型、肝型、肌病型。心肌病型病情重，病死率高。临床诊断可通过血串联质谱（MS／MS）检测血肉豆蔻烯酰基肉碱（C14：1）水平进行，进一步确诊可通过基因诊断、酶学分析及脂肪酸氧化流量分析。治疗上主要包括避免空腹，减少长链脂肪酸的摄入，补充中链甘油三酯等。

关键词：极长链酰基辅酶A脱氢酶极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症

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进行性假性类风湿性发育不良症的诊断及WISP3基因分析

进行性假性类风湿性发育不良症的诊断及WISP3基因分析

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2011年第11届中华医学会儿科学分会内分泌遗传代谢学组学术会议

作者：叶军张惠文邱文娟韩连书张雅芬顾学范上海交通大学医学院附属新华医院，上海市儿科医学研究所内分泌遗传代谢病室 200092

目的：从临床及影像学角度识别进行性假性类风湿性发育不良症;了解中国患者PPD的基因突变类型。方法：7例患者(男6例，女1例)，所有患者接受骨骼(包括脊柱、大小关节)影像学检查及实验室检查(血沉，钙磷、C反应蛋白、ASO、类风湿因子及... 详细信息

目的：从临床及影像学角度识别进行性假性类风湿性发育不良症;了解中国患者PPD的基因突变类型。方法：7例患者(男6例，女1例)，所有患者接受骨骼(包括脊柱、大小关节)影像学检查及实验室检查(血沉，钙磷、C反应蛋白、ASO、类风湿因子及尿翁多糖定性、电泳等)以进行PPD的临床诊断;对7例PPD患者采用PCR扩增WISP,噬因5个外显子及其两侧翼序列，测序分析以寻找突变(参考的基因库cDNA序列编号NG_011748.1);对发现的基因新贫异，通过对父母及50例对照者进行相应基因突变检测以证实。结果：7例患儿符合PPD的临床诊断：身高低于或接近正常儿童身高的第3百分位，3例短颈，非炎性的多关节(包括指趾关节)膨大，或伴关节僵硬、弯腰、下蹲运动受限;影像学显示扁平椎、椎体前缘呈鸟嘴或子弹头样改变，或伴脊柱弯曲、骸关节狭窄、股骨颈短、或股骨头及膝关节、指关节骨髓(干髓端)扩大等;所有患者血沉、C反应蛋白、类风湿因子、尿黏多糖定性、电泳等实验室指标正常。7例患儿中发现了7种WISP3基因突变(检出率91. 67%)。结论：PPD临床特点是进行性、非炎性的多关节(包括指趾关节)膨大及运动障碍，类风湿因子等实验室指标正常;全身骨骼(包括脊柱)的影像学检查对诊断十分重要，主要特征为扁平椎、关节骨髓(干箭端)扩大及关节腔狭窄;需要与幼年型特发性关节炎、迟发性脊柱骨髓发育不良及黏多糖病进行鉴别诊断。本研究结果发现了7种WISP3基因新变异，扩大了中国人PPD基因突变谱。

关键词：儿童患者进行性假性类风湿性发育不良症临床诊断基因突变

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