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上海交通大学学报（医学版） 2019年第9期39卷 1004-1010页

作者：余春波卢明邵雷蒲甜陈代杰周薇上海交通大学医学院附属第九人民医院上海200011 中国医药工业研究总院/上海医药工业研究院上海201203 上海健康医学院协同科研中心上海201318 上海交通大学药学院上海200240 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔医学院口腔微生态与系统性疾病实验室国家口腔疾病临床研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011

目的·观察严谨反应相关的(p)ppGpp合成酶基因(relA)对多黏菌素抗鲍曼不动杆菌异质性耐药的影响。方法·采用Red同源重组技术敲除鲍曼不动杆菌ATCC19606中relA基因;用结晶紫染色法观察鲍曼不动杆菌菌膜形成的情况;用群体分析法(... 详细信息

目的·观察严谨反应相关的(p)ppGpp合成酶基因(relA)对多黏菌素抗鲍曼不动杆菌异质性耐药的影响。方法·采用Red同源重组技术敲除鲍曼不动杆菌ATCC19606中relA基因;用结晶紫染色法观察鲍曼不动杆菌菌膜形成的情况;用群体分析法(population analysis profiles,PAP)检测在多黏菌素作用下鲍曼不动杆菌产生异质性耐药菌落数的变化并计算异质性耐药率;用杀菌曲线检测在多黏菌素作用下鲍曼不动杆菌持留菌形成情况。结果·成功敲除鲍曼不动杆菌中relA基因,获得relA基因敲除株ATCC19606-ΔrelA,鲍曼不动杆菌的菌膜形成量明显下降,多黏菌素作用下异质性耐药菌落数及持留菌形成量均显著性降低。结论·细菌严谨反应中(p)ppGpp合成酶relA基因可能是影响鲍曼不动杆菌对多黏菌素产生异质性耐药的重要因素。

关键词：鲍曼不动杆菌 relA基因多黏菌素 Red同源重组技术异质性耐药持留性菌膜

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pH值对变异链球菌和粪肠球菌混合生物膜的影响

pH值对变异链球菌和粪肠球菌混合生物膜的影响

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2019年中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会第九次全国口腔生物医学学术年会

作者：何智妍黄正蔚周薇上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔微生态与系统性疾病实验室上海市口腔医学重点实验室/上海市口腔医学研究所国家口腔疾病临床研究中心

目的:比较环境的pH值对变异链球菌和粪肠球菌混合培养形成生物膜的影响。方法:(1)将过夜培养的变异链球菌UA159和具核梭杆菌ATCC25586菌液按1:1的比例接种至pH值分别为4(酸性)、7(中性)、10(碱性)的牛心脑浸液培养基(BHI)37度体外培养,2... 详细信息

目的:比较环境的pH值对变异链球菌和粪肠球菌混合培养形成生物膜的影响。方法:(1)将过夜培养的变异链球菌UA159和具核梭杆菌ATCC25586菌液按1:1的比例接种至pH值分别为4(酸性)、7(中性)、10(碱性)的牛心脑浸液培养基(BHI)37度体外培养,24小时后得到不同pH条件下形成的混合生物膜,吸去上清液,用无菌的PBS溶液冲洗三次,去除表面的浮游细菌。在每孔中加入50μl

关键词：变异链球菌混合培养粪肠球菌生物膜

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luxS基因在变异链球菌和嗜酸乳杆菌混合生物膜形成中的作用

luxS基因在变异链球菌和嗜酸乳杆菌混合生物膜形成中的作用

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2018年中华口腔医学会第8次全国口腔生物医学学术年会

作者：何智妍周薇上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔微生态与系统性疾病实验室上海市口腔医学重点实验室/上海市口腔医学研究所国家口腔疾病临床研究中心

目的：研究 luxS 基因在口腔细菌变异链球菌和嗜酸乳杆菌混合培养形成牙菌斑生物膜中的作用。材料与方法：将变异链球菌野生株(UA159)及其两种 luxS 基因突变株(luxS基因高表达株和luxS基因缺陷株)与口腔细菌嗜酸乳杆菌(ATCC4356)按照1... 详细信息

目的：研究 luxS 基因在口腔细菌变异链球菌和嗜酸乳杆菌混合培养形成牙菌斑生物膜中的作用。材料与方法：将变异链球菌野生株(UA159)及其两种 luxS 基因突变株(luxS基因高表达株和luxS基因缺陷株)与口腔细菌嗜酸乳杆菌(ATCC4356)按照1∶1的比例接种于牛心脑浸液培养基，体外混合培养不同时间，包括生物膜形成过程中的初期(4 h)、中期(14 h)、晚期(24 h)，通过MTT法检测混合菌在生物膜形成的量。

关键词： luxS基因生物膜变异链球菌嗜酸乳杆菌

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luxS基因在变异链球菌和嗜酸乳杆菌混合生物膜形成中的作用

luxS基因在变异链球菌和嗜酸乳杆菌混合生物膜形成中的作用

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2018全国口腔生物医学学术年会

目的:研究luxS基因在口腔细菌变异链球菌和嗜酸乳杆菌混合培养形成牙菌斑生物膜中的作用。材料与方法:将变异链球菌野生株(UA159)及其两种luxS基因突变株(luxS基因高表达株和luxS基因缺陷株)与口腔细菌嗜酸乳杆菌(ATCC4356)按照1:1的比... 详细信息

目的:研究luxS基因在口腔细菌变异链球菌和嗜酸乳杆菌混合培养形成牙菌斑生物膜中的作用。材料与方法:将变异链球菌野生株(UA159)及其两种luxS基因突变株(luxS基因高表达株和luxS基因缺陷株)与口腔细菌嗜酸乳杆菌(ATCC4356)按照1:1的比例接种于牛心脑浸液培养基,体外混合培养不同时间,包括生物膜形成过程中的初期(4 h)、中期(14 h)、晚期(24 h),通过MTT法检测混合菌在生物膜形成的量。通过激光共聚焦显微镜观察混合细菌生物膜的结构,Real time PCR检测变异链球菌相关基因(ftf, smu630, brpA, gbpB, gtfB, vicR, comDE和relA)的表达。结果:变异链球菌野生株及其两种luxS基因突变株与嗜酸乳杆菌混合培养14 h后,生物膜的量分别为0.481±0.024,0.591±0.023和0.279±0.019;24h后混合细菌形成生物膜的量趋势与该时间点一致,变异链球菌高表达株高于野生株,而缺陷株明显降低;但4 h后形成的生物膜组间没有差异。激光共聚焦显微镜的结果也表明高表达株和野生株的集聚程度更高,形成生物膜的结构更加紧密;而缺陷株生物膜菌间结构比较稀疏。以变异链球菌野生株和嗜酸乳杆菌混合形成的生物膜中相关基因的表达为标准,结果发现高表达株相关基因的表达均增加,缺陷株表达均降低,且各组间存在显著性差异(P <0.05)。结论:luxS基因会影响变异链球菌和嗜酸乳杆菌混合培养形成的牙菌斑生物膜,为进一步研究该基因在生物膜中的作用及其调控机制提供了基础。

关键词： luxS基因生物膜变异链球菌嗜酸乳杆菌

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不同碳源对变异链球菌和具核梭杆菌混合生物膜的影响

不同碳源对变异链球菌和具核梭杆菌混合生物膜的影响

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中华口腔医学会第十一次全国牙体牙髓病学学术大会

作者：何智妍周薇黄正蔚姜葳上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院口腔微生态与系统性疾病实验室国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所

目的:比较不同碳源对变异链球菌和具核梭杆菌混合培养形成生物膜的影响。方法:将过夜培养的变异链球菌UA159和具核梭杆菌ATCC10953菌液按1:1的比例接种至含不同浓度的葡萄糖和蔗糖的牛心脑浸液培养基（BHI）37℃培养,24小时后形成的混... 详细信息

目的:比较不同碳源对变异链球菌和具核梭杆菌混合培养形成生物膜的影响。方法:将过夜培养的变异链球菌UA159和具核梭杆菌ATCC10953菌液按1:1的比例接种至含不同浓度的葡萄糖和蔗糖的牛心脑浸液培养基（BHI）37℃培养,24小时后形成的混合生物膜,用3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑嗅盐法（MTT）法检测OD,确定生物膜形成的量;通过激光共聚焦显微镜观察混合细菌生物膜的形态结构。结果:两菌株混合培养形成生物膜的量OD值为0.572±0.010;当葡萄糖浓度为0.25%、0.5%和1.0%时,生物膜的量分别达到0.845±0.08 1、0.999±0.11 1和1.1 52±0.036;随着蔗糖浓度的增加,混合细菌形成生物膜的量也随之增加,相应蔗糖浓度的生物膜OD值分别为1.075±0.011、1.368±0.010和1.712±0.019;各组间的差异均有显著性。总体而言培养基中加入葡萄糖和蔗糖的使得形成的生物膜更加密集,聚集成较大团块,其中加入相同浓度的蔗糖后形成生物膜的团块在体积上比加入葡糖糖后更大。结论:不同碳源会影响变异链球菌和具核梭杆菌混合培养形成的生物膜。

关键词：变异链球菌具核梭杆菌生物膜碳源

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