检索结果-内蒙古大学图书馆

上海口腔医学 2014年第3期23卷 304-307页

作者：黄吉燕刘伟周曾同周海文上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院口腔黏膜病科.上海市口腔医学重点实验室上海200011 上海中医药大学附属曙光医院口腔科上海201203 上海交通大学组织工程研究中心上海市组织工程重点实验室上海200011

目的：以pBABE-tert重组反转录病毒为载体,介导端粒酶反转录酶基因（hTRT）转染体外培养的人口腔角化细胞,探讨端粒酶对细胞寿命的影响。方法：将含有hTRT的pBABE-tert重组反转录病毒载体扩增后,转染体外培养的人口腔角化细胞,挑选阳性... 详细信息

目的：以pBABE-tert重组反转录病毒为载体,介导端粒酶反转录酶基因（hTRT）转染体外培养的人口腔角化细胞,探讨端粒酶对细胞寿命的影响。方法：将含有hTRT的pBABE-tert重组反转录病毒载体扩增后,转染体外培养的人口腔角化细胞,挑选阳性克隆进行传代培养,以PCR-ELISA和PCR-PAGE电泳检测端粒酶活性。结果：获得端粒酶活性稳定表达的口腔角化上皮细胞克隆,寿命可延长至8~9代。结论：转导端粒酶反转录酶基因的人口腔角化细胞寿命延长1倍,但不能永生化,说明人口腔上皮角化细胞的永生化是复杂和多点调控的过程,端粒酶活性增加是细胞永生化的关键但不是唯一原因。

关键词：体外培养人口腔黏膜角化细胞端粒酶反转录酶反转录病毒基因转染

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快速获得和纯化骨髓基质干细胞的方法

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上海交通大学学报（医学版） 2008年第2期28卷 228-231页

作者：周佳沈尊理金羽青刘伟沈华上海交通大学第一人民医院整形外科上海200080 上海交通大学医学院第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海200011

目的研究在体外快速获得骨髓基质干细胞及纯化的方法。方法采用流式细胞仪筛选法获得CD45-、CD90+原代细胞,复合胶原酶差速消化逐级传代、纯化;对第3代(P3代)细胞进行脂肪细胞、软骨细胞、骨细胞三向诱导;2～4周后,分别行oilred’O、Saf... 详细信息

目的研究在体外快速获得骨髓基质干细胞及纯化的方法。方法采用流式细胞仪筛选法获得CD45-、CD90+原代细胞,复合胶原酶差速消化逐级传代、纯化;对第3代(P3代)细胞进行脂肪细胞、软骨细胞、骨细胞三向诱导;2～4周后,分别行oilred’O、Safranin’O和茜素红染色,倒置显微镜下观察诱导结果。结果经流式细胞仪初筛和复合胶原酶差速消化,传代至P3代,细胞形态已呈现均一性。向脂肪细胞诱导后第4周,oilred’O染色见细胞内大量红染的脂滴;向软骨细胞诱导后第4周,Safranin’O染色见多数切片呈阳性,细胞团块中存在大量软骨特异性的陷窝样结构;向骨细胞诱导后第4周,茜素红染色发现肉眼可见广泛散在的红色阳性钙结节。结论本研究所采用的流式细胞仪初筛和复合胶原酶差速消化法,可快速获得高纯度的骨髓基质干细胞。

关键词：骨髓基质干细胞纯化流式筛选复合胶原酶

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基于快速成形的磷酸钙多孔陶瓷成骨性能初步研究

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中国修复重建外科杂志 2010年第7期24卷 792-796页

作者：何晨光赵莉林柳兰谷辉杰周恒崔磊组织工程国家工程研究中心上海200235 上海组织工程研究与开发中心上海大学机械自动化及机器人重点实验室上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科

目的磷酸钙生物材料由于其优良的生物相容性而具有广阔的应用前景,但传统方法难以制备具有复杂形状的支架。以快速成形方法制备磷酸钙多孔陶瓷支架材料,并对其体外成骨性能进行初步研究。方法采用快速成形方法制备磷酸钙多孔陶瓷支架材... 详细信息

目的磷酸钙生物材料由于其优良的生物相容性而具有广阔的应用前景,但传统方法难以制备具有复杂形状的支架。以快速成形方法制备磷酸钙多孔陶瓷支架材料,并对其体外成骨性能进行初步研究。方法采用快速成形方法制备磷酸钙多孔陶瓷支架材料(直径10mm、高度5mm、孔径800μm),取Beagle犬髂骨髓分离培养BMSCs,接种第3代BMSCs于支架材料上。将实验分为4组,A组为成骨诱导培养的细胞/材料复合物组,B组为未经成骨诱导培养的细胞/材料复合物组,另设平皿成骨诱导培养及常规培养为阳性对照组(C组)及阴性对照组(D组)。于接种后第1、3、7天,利用DNA定量检测方法及ALP定量、定性检测方法检测BMSCs在支架材料上的增殖及ALP的表达;并经DiO荧光染色后,应用激光共聚焦显微镜观察BMSCs在材料上的黏附生长情况。结果 DNA定量结果表明,随培养时间增加,C、D组在第3天时细胞生长进入平台期;A、B组细胞呈持续增长趋势,细胞培养过程中增殖速度均略低于C、D组,且未出现明显的平台期。DiO荧光染色示,BMSCs在以快速成形方法制备的磷酸钙多孔陶瓷支架材料上黏附、生长状态良好。ALP染色示,随培养时间延长,A、B组支架上细胞染色均逐渐加深,A组各时间点染色程度均明显强于B组。培养后第1、3天,4组ALP表达均较低,差异无统计学意义(P>0.05);培养第7天,各组ALP表达均明显升高,A组比其他各组明显高表达(P<0.05),B组及C组均明显高于D组(P<0.05)。结论快速成形的多孔磷酸钙陶瓷具有良好的细胞相容性,BMSCs与支架复合在体外诱导培养可以进行成骨分化。因此通过快速成形技术制备的磷酸钙多孔陶瓷是骨组织工程可选的细胞支架。

关键词：快速成形磷酸钙陶瓷 BMSCs 成骨分化

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改良法分离大鼠IOUs构建小肠的初步研究

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上海交通大学学报（医学版） 2006年第4期26卷 393-396页

作者：周莹施诚仁姚晓虹刘伟周广东殷德民宗莉娟上海交通大学医学院新华医院小儿外科上海200092 上海交通大学医学院新华医院病理科上海200092 第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室

目的采用改良方法分离大鼠小肠上皮类器官单位(IOUs),鉴定IOUs裸鼠体内发育能力。方法取出生5～8d大鼠的小肠组织,采用改良分离法获得IOUs,与细胞外基质胶混合后植入裸鼠皮下,定期取材,组织学鉴定。结果采用改良方法分离时间明显缩短,... 详细信息

目的采用改良方法分离大鼠小肠上皮类器官单位(IOUs),鉴定IOUs裸鼠体内发育能力。方法取出生5～8d大鼠的小肠组织,采用改良分离法获得IOUs,与细胞外基质胶混合后植入裸鼠皮下,定期取材,组织学鉴定。结果采用改良方法分离时间明显缩短,体内植入所有实验组均有多个囊泡样组织形成,植入2周后部分囊腔凹陷可见隐窝样结构,2周后部分囊泡内壁可见分化较成熟的上皮细胞突出,类似绒毛结构;上皮下可见少量平滑肌样细胞围绕囊状管腔周围。结论初步证实改良方法分离出IOUs用于组织工程肠管构建的可行性,并为出生后组织修复重构的研究奠定了基础。

关键词：小肠上皮类器官单位分离方法组织工程大鼠

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瘢痕疙瘩患者瘢痕疙瘩与其周围正常皮肤水屏障功能的差异及其相关机制

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中华烧伤与创面修复杂志 2022年第1期38卷 63-68页

作者：于磊杨雅婷刘伟潍坊医学院整形外科研究所潍坊261042 上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海200011

目的比较瘢痕疙瘩患者的瘢痕疙瘩与其周围正常皮肤的皮肤水屏障功能的差异并初步探索相关机制。方法采用横断面观察性研究方法。2020年10月—2021年3月,上海交通大学医学院附属第九人民医院接诊30例符合入选标准的瘢痕疙瘩患者,其中男1... 详细信息

目的比较瘢痕疙瘩患者的瘢痕疙瘩与其周围正常皮肤的皮肤水屏障功能的差异并初步探索相关机制。方法采用横断面观察性研究方法。2020年10月—2021年3月,上海交通大学医学院附属第九人民医院接诊30例符合入选标准的瘢痕疙瘩患者,其中男12例、女18例,年龄20~48岁。接诊当日采用多功能皮肤测试仪测定30例患者瘢痕疙瘩皮肤及其周围正常皮肤的经皮水分丢失(TEWL)。对5例患者瘢痕疙瘩修复术后的瘢痕疙瘩皮肤及其周围正常皮肤行苏木精-伊红染色观测表皮厚度,取其中3例患者标本采用免疫组织化学法检测瘢痕疙瘩皮肤及正常皮肤细胞角蛋白10、内披蛋白和聚丝蛋白的表达。对数据行配对样本t检验或独立样本t检验。结果接诊当日,30例患者瘢痕疙瘩皮肤TEWL为9.0(6.9,13.4)g·m^(-2)·h^(-1),正常皮肤的TEWL为8.1(6.4,18.1)g·m^(-2)·h^(-1),二者比较差异无统计学意义(t=0.44,P>0.05)。瘢痕疙瘩修复术后,5例患者瘢痕疙瘩皮肤表皮厚度为(194±44)μm,明显厚于正常皮肤的(44±11)μm(t=6.88,P<0.01);且瘢痕疙瘩区域均存在角质形成细胞(KC)数量增多、正常皮肤的表皮脊结构缺乏、表皮明显增厚等现象。瘢痕疙瘩修复术后,3例患者瘢痕疙瘩皮肤细胞角蛋白10表达明显低于正常皮肤(t=8.50,P<0.01),而瘢痕疙瘩皮肤表皮的内披蛋白和聚丝蛋白表达均与正常皮肤相近(t值分别为0.07、0.96,P>0.05)。结论瘢痕疙瘩患者瘢痕疙瘩皮肤组织中存在KC增多、表皮增厚的现象,但瘢痕疙瘩区域的水屏障功能与周围正常皮肤组织相近,TEWL可能并不是影响瘢痕疙瘩持续发展的主要机制。

关键词：瘢痕疙瘩表皮皮肤水屏障功能角质形成细胞经皮水分丢失

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偏光显微镜在组织工程血管构建中的应用

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上海交通大学学报（医学版） 2007年第2期27卷 189-192页

作者：张燕忠刘阳曹谊林张柏根山西省人民医院普外科太原030012 上海交通大学医学院第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海200011 上海交通大学医学院仁济医院血管外科上海200127

目的利用偏光显微镜对组织工程构建血管壁中的胶原成分进行定性分析。方法体外培养、扩增的人脐带动脉平滑肌细胞,将其与可降解生物材料聚乙醇酸(PGA)制成的管状结构结合(实验组),体外培养1周后植入裸鼠背部皮下。于植入后2、4、5、11... 详细信息

目的利用偏光显微镜对组织工程构建血管壁中的胶原成分进行定性分析。方法体外培养、扩增的人脐带动脉平滑肌细胞,将其与可降解生物材料聚乙醇酸(PGA)制成的管状结构结合(实验组),体外培养1周后植入裸鼠背部皮下。于植入后2、4、5、11周时分别取材,普通光镜(HE和Masson染色)及偏光显微镜下观察组织学形态,并比较结果。以无细胞单纯管状PGA-DMEM植入裸鼠背部皮下作为对照。结果偏光显微镜下,随着植入时间的延长,实验组的PGA-平滑肌细胞复合结构从以PGA为主向以胶原和平滑肌细胞为主要成分过渡;对照组则随着PGA的降解无胶原成分形成。偏光显微镜检测结果与光镜下的组织形态学检查结果相同。结论偏光显微镜可用于组织工程血管壁中胶原成分的检测,方法简便且结果可靠。

关键词：组织工程裸鼠聚乙醇酸偏光显微镜

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重组hTGF-β_1基因转染骨髓间充质干细胞及其表达

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上海交通大学学报（医学版） 2007年第10期27卷 1185-1188,1222页

作者：夏万尧丁文龙刘伟钟梅芳王丹茹周广东崔磊曹谊林上海交通大学医学院第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海200011 基础医学院人体解剖学教研室上海200025

目的探讨携带人转化生长因子β1(hTGF-β1)的腺病毒载体(adeno-hTGF-β1)转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)及其表达的可行性。方法重组adeno-hTGF-β1经293细胞包装、扩增后,转染猪BMSCs。转染后72 h,RT-PCR检测BMSCs的hTGF-β1mRNA表达;免... 详细信息

目的探讨携带人转化生长因子β1(hTGF-β1)的腺病毒载体(adeno-hTGF-β1)转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)及其表达的可行性。方法重组adeno-hTGF-β1经293细胞包装、扩增后,转染猪BMSCs。转染后72 h,RT-PCR检测BMSCs的hTGF-β1mRNA表达;免疫细胞化学染色定性和酶联免疫吸附定量测定(ELISA法)hTGF-β1蛋白表达;MTT法测定水貂肺上皮细胞(MV-1-Lu)的生长抑制率,以验证转染后所表达的hTGF-β1蛋白的生物学活性。结果转染后72 h,BMSCs能有效表达hTGF-β1mRNA,胞浆内有大量棕黄色的hTGF-β1蛋白表达,其蛋白表达量是转染adeno-lacZ的2.65倍(P<0.05);MTT法检测结果显示,转染adeno-hTGF-β1的BMSCs所分泌的hTGF-β1蛋白对MV-1-Lu细胞的生长有显著抑制作用。结论重组adeno-hTGF-β1能够被导入BMSCs,并表达有生物学活性的hTGF-β1蛋白。为hTGF-β1基因转染的BMSCs在软骨组织工程中的应用奠定了基础。

关键词：骨髓间充质干细胞基因转染腺病毒人转化生长因子β1

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经皮氧分压在瘢痕评估中的应用

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中国修复重建外科杂志 2018年第12期32卷 1615-1618页

作者：周易汤宋佳曹谊林张菊芳南京医科大学南京211166 浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院医疗美容科杭州310006 上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海200011

目的总结经皮氧分压(transcutaneous oxygen pressure,TcPO_2)测量在瘢痕评估中的应用以及研究进展。方法查阅国内外与瘢痕以及TcPO_2相关的文献,并进行总结分析。结果组织中缺氧环境在瘢痕发生发展过程起重要作用,TcPO_2能准确反映瘢... 详细信息

目的总结经皮氧分压(transcutaneous oxygen pressure,TcPO_2)测量在瘢痕评估中的应用以及研究进展。方法查阅国内外与瘢痕以及TcPO_2相关的文献,并进行总结分析。结果组织中缺氧环境在瘢痕发生发展过程起重要作用,TcPO_2能准确反映瘢痕组织内的氧分压情况,已用于瘢痕成熟度评估、指导瘢痕治疗以及研究缺氧对瘢痕发生发展的影响方面。结论 TcPO_2测量在瘢痕评估、治疗以及缺氧与瘢痕发生机制研究中有重要意义。

关键词：瘢痕经皮氧分压微血管瘢痕评估

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快速成型机实现人骨髓基质干细胞三维定向打印的初步研究

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上海口腔医学 2010年第1期19卷 77-80页

作者：柴岗张艳刘齐海麻荪香胡庆夕崔磊曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海200011 上海大学快速成型中心上海200235

目的:采用快速成型技术实现人骨髓基质干细胞的三维打印。方法:常规培养人骨髓基质干细胞至第2代,胰酶消化,调整为1×106/mL单细胞悬液,细胞先行PI荧光标记,应用快速成型组织打印机进行三维细胞打印,单细胞悬液作为打印介质,x轴间隔... 详细信息

目的:采用快速成型技术实现人骨髓基质干细胞的三维打印。方法:常规培养人骨髓基质干细胞至第2代,胰酶消化,调整为1×106/mL单细胞悬液,细胞先行PI荧光标记,应用快速成型组织打印机进行三维细胞打印,单细胞悬液作为打印介质,x轴间隔300μm,y轴间隔500μm,z轴间隔50μm,打印速度20mm/s,频率50Hz,采用激光共聚焦显微镜进行细胞形态学观察。结果:通过生物打印后,每"细胞墨滴"包含人骨髓基质干细胞15～35个,三维平面上x轴间隔300μm,y轴间隔500μm,z轴间隔50μm,存在"细胞墨滴"层面间隔50μm,符合原设计对z轴的要求。"细胞墨滴"在三维组织中分布规则,满足三维设计细胞打印要求。结论:快速成型生物打印技术可实现人骨髓基质干细胞在三维平面上的规则分布,符合组织工程对组织三维打印的要求。

关键词：细胞打印快速成型骨髓基质干细胞

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Bio-oss胶原与骨髓基质细胞相容性的实验研究

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上海口腔医学 2008年第2期17卷 161-164页

作者：宋忠臣束蓉谢玉峰张秀丽殷德民上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院牙周病科上海200011 上海市口腔医学研究所、上海市口腔医学重点实验室上海200011 上海市组织工程重点实验室上海200011

目的:探讨Bio-oss胶原与骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)的生物相容性,为用组织工程技术修复牙周缺损提供理论依据。方法:体外培养恒河猴BMSCs,将BMSCs与Bio-oss胶原复合进行体外培养。用激光扫描共聚焦显微镜检测细胞... 详细信息

目的:探讨Bio-oss胶原与骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)的生物相容性,为用组织工程技术修复牙周缺损提供理论依据。方法:体外培养恒河猴BMSCs,将BMSCs与Bio-oss胶原复合进行体外培养。用激光扫描共聚焦显微镜检测细胞与材料的黏附,MTT法检测细胞的增殖,并行碱性磷酸酶(ALP)活性测定。采用SAS6.12软件包对所得数据进行t检验。结果:BMSCs能黏附于Bio-oss胶原上;MTT结果显示,在2d、5d时,对照组和实验组间无显著性差异(P>0.05),8d时,两组间有显著性差异(P<0.05);在各时间点,对照组和实验组间ALP活性均无显著性差异(P>0.05)。结论:Bio-oss胶原与恒河猴BMSCs有良好的生物相容性,可作为组织工程材料应用于牙周骨缺损的修复。

关键词：组织工程骨髓基质细胞 Bio-oss胶原生物相容性

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