目的:构建BMP-2重组基因慢病毒载体,并制备成稳定的冻干剂型。方法:利用基因重组技术构建BMP-2基因重组慢病毒载体,并将重组基因慢病毒与不同配比的保护剂相混合后冻干。根据冻干后外观、病毒感染性滴度测定筛选合适的冻干保护剂组分,并通过病毒热稳定性测定、PCR和基因测序评价冻干品的质量。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:经PCR方法鉴定,BMP-2基因重组慢病毒载体构建成功,以10%海藻糖、1%牛血白蛋白、3%甘露醇、0.5%明胶为组分的B组保护剂对BMP-2基因重组慢病毒显示了较好的保护作用,冻干前、后病毒感染性滴度下降0.42 Lg PFU/m L,优于A、C组以及对照组,差异显著(P<0.05);B组保护剂制成的冻干慢病毒在37℃放置28 d后,仍维持良好外观,病毒滴度下降0.63 Lg PFU/m L,液体慢病毒对照组感染性滴度下降较快,1周后病毒滴度下降2.37 Lg PFU/m L,2组间差异显著(P<0.05);PCR以及基因测序结果显示,复溶后的冻干慢病毒所携带的目的基因信息无丢失或变异。结论:选用合适的冻干保护剂,可以有效保护BMP-2重组基因慢病毒载体的生物稳定性。
目的:通过检索已发表的相关文献,以循证医学为主要路径来探讨和评价牙科操作术前术后是否需要预防性使用抗生素。方法:以"预防性使用抗生素"、"牙科操作"、"黏膜"、"口腔活检"、"第三磨牙拔除术"、"牙体牙髓"、"牙周"为关键词,检索自2000年1月1日～2011年4月30日收录在Medline、Pubmed、EBM Reviews和Cochrane Central Register for Controlled Trials数据库中的文献。纳入标准:"牙体牙髓病治疗预防性使用抗生素"、"牙周病治疗预防性使用抗生素"和"第三磨牙拔除术预防性使用抗生素"的随机临床对照实验(RCT)及综述。结果:共获得相关文献41篇,选取证据级别为1++、1+、1-级,推荐级别为A或B的RCT,以及证据级别为3级的推荐级别为D的综述。符合纳入标准文献8篇,其中RCT 6篇。文献指出,常规的口腔清洁工作都会不同程度地引起一过性菌血症。仅牙髓坏死和已伴有根尖周症状患者,没有必要预防性使用抗生素(证据级别1+级,推荐级别A);使用抗生素可以明显减轻翻瓣术后菌血症的发生(证据级别1-级,推荐级别B);第三磨牙拔除术根据是否涉及去骨术决定是否需预防性使用抗生素(证据级别1++级,推荐级别A)。结论:养成良好的口腔卫生习惯和保持良好的口腔卫生,有明确预防感染作用。牙医在临床操作中应根据患者和操作情况决定是否需要预防性使用抗生素。
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