检索结果-内蒙古大学图书馆

国际生物医学工程杂志 2008年第6期31卷 365-368页

作者：蒋永康刘伟上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海市组织工程重点实验室

肌腱是连接肌肉和骨骼系统的的致密结缔组织。目前,临床上肌腱损伤的治疗尚无很好的方法,应用组织工程化技术构建肌腱进行修复为肌腱损伤的治疗提供了良好的前景。了解肌腱的发育成熟过程对组织工程化肌腱构建是相当重要的。Scleraxis ... 详细信息

肌腱是连接肌肉和骨骼系统的的致密结缔组织。目前,临床上肌腱损伤的治疗尚无很好的方法,应用组织工程化技术构建肌腱进行修复为肌腱损伤的治疗提供了良好的前景。了解肌腱的发育成熟过程对组织工程化肌腱构建是相当重要的。Scleraxis 和 Tenomodulin 是肌腱和韧带相对特异的分子标志,在肌腱发育成熟中起了重要作用。就 Scleraxis 和 Tenomodulin 的分子结构、在肌腱发育成熟中的作用和其调控予以综述,以加深对肌腱发育过程的认识。

关键词：肌腱发育 Scleraxisi Tenomodulin

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构建组织工程化耳廓软骨修复体

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中国美容医学 2008年第10期17卷 1552-1554页

作者：张路周广东曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海市组织工程重点实验室上海200011

因先天性小耳畸形、外伤、肿瘤造成的外耳缺损或缺失在临床中较为常见。目前治疗的手段主要是采用切取的自体肋软骨，并对其雕刻成型重建患耳。但其不同程度的存在耳廓造型不一，供区继发缺损等问题。组织工程技术嘲的出现无疑为无（微... 详细信息

因先天性小耳畸形、外伤、肿瘤造成的外耳缺损或缺失在临床中较为常见。目前治疗的手段主要是采用切取的自体肋软骨，并对其雕刻成型重建患耳。但其不同程度的存在耳廓造型不一，供区继发缺损等问题。组织工程技术嘲的出现无疑为无（微）创修残补缺提供了可能。目前的软骨组织工程技术主要是利用自体软骨细胞或成体干细胞作为种子细胞，接种在具有三维多孔结构的可降解支架上，通过特定的培养构建方法，最终形成软骨组织以修复缺损。

关键词：耳廓软骨组织工程化修复体组织工程技术先天性小耳畸形自体软骨细胞外耳缺损自体肋软骨

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自体骨髓基质干细胞复合珊瑚修复犬下颌骨节段缺损的初步研究

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中华整形外科杂志 2007年第1期23卷 51-55页

作者：袁捷刘广鹏柴岗刘波许锋崔磊刘伟曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室200011

目的应用自体骨髓基质干细胞（bone marrow stromal cells，BMSCs）复合珊瑚构建组织工程化骨，修复犬下颌骨节段性缺损。方法体外扩增培养、成骨诱导犬BMSCs。将第二代细胞复合珊瑚后修复犬自体右侧3cm的下颌骨节段缺损（n=6）；以单... 详细信息

目的应用自体骨髓基质干细胞（bone marrow stromal cells，BMSCs）复合珊瑚构建组织工程化骨，修复犬下颌骨节段性缺损。方法体外扩增培养、成骨诱导犬BMSCs。将第二代细胞复合珊瑚后修复犬自体右侧3cm的下颌骨节段缺损（n=6）；以单纯珊瑚植入缺损处为对照（n=6），术后12、32周分别通过影像学，大体形态观察，组织学和生物力学的方法检测骨缺损的修复效果。结果成骨诱导的BMSCs在珊瑚支架上生长良好。X线片显示12周时实验组骨痂较多，对照组材料明显吸收；32周时CT、X线片和大体观察显示术后实验组骨愈合良好，对照组为骨不连；骨密度检测示实验组显著高于对照组（P〈0．05）；组织学示实验组有较多成熟骨呈骨性愈合，对照组为纤维性愈合；生物力学测试实验组与正常下颌骨力学强度差异无统计学意义（P〉0．05）。结论自体成骨诱导BMSCs复合珊瑚形成的组织工程化骨可修复犬下颌骨节段缺损。

关键词：下颌骨骨髓基质干细胞珊瑚组织工程

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软骨细胞与骨髓基质细胞共培养构建软骨的体内评价

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中华医学杂志 2007年第27期87卷 1929-1933页

作者：刘霞周广东吕晓杰刘天一张文杰刘伟曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海市组织工程重点实验室 200011

目的探讨软骨细胞与骨髓基质细胞（BMSC）共培养体外构建复合物体内植入形成成熟软骨组织的可行性。方法体外培养扩增猪BMSC，经绿色荧光蛋白（EGFP）基因转染标记后，与猪关节软骨细胞按1：1比例混合，以5．0×10^7／ml的细胞终浓... 详细信息

目的探讨软骨细胞与骨髓基质细胞（BMSC）共培养体外构建复合物体内植入形成成熟软骨组织的可行性。方法体外培养扩增猪BMSC，经绿色荧光蛋白（EGFP）基因转染标记后，与猪关节软骨细胞按1：1比例混合，以5．0×10^7／ml的细胞终浓度接种于聚羟基乙酸／聚乳酸（PGA／PLA）材料支架作为共培养组，以相同终浓度的单纯软骨细胞和单纯BMSC分别接种PGA／PLA作为阳性对照组及阴性对照组。各组标本均于体外培养2周后植于裸鼠皮下，8周后取材，通过大体观察、激光共聚焦显微镜观察、糖胺聚糖含量测定、生物力学、组织学以及免疫组织化学等方法对新生软骨组织进行全面评价。结果各组细胞均与材料黏附良好。体内植入8周后，共培养组及阳性对照组标本基本保持植入前的大小和形状，外观类似软骨组织，组织学显示两组均有连续的软骨陷窝样结构形成，免疫组织化学显示有大量Ⅱ型胶原沉积。定量测定结果显示，共培养组的糖胺聚糖含量和弹性模量均达到软骨细胞构建软骨组织的80％以上。共聚焦显微镜观察可见EGFP标记细胞形成了软骨陷窝。阴性对照组标本的体积较植入前明显缩小，组织学及免疫组织化学均未见软骨样组织形成。结论软骨细胞与BMSC共培养构建的复合物植入体内后能继续形成成熟软骨组织，这表明植入体内后软骨细胞仍能保持对BMSC的诱导作用。

关键词：骨髓基质细胞软骨细胞共同培养软骨形成

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血清浓度影响骨髓基质干细胞体外软骨分化的实验研究

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中华整形外科杂志 2007年第5期23卷 405-408页

作者：刘天一周广东刘霞魏娴陈付国武晓莉崔磊刘伟曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海市组织工程重点实验室200011

目的探讨含有不同浓度胎牛血清的成软骨分化诱导液对骨髓基质干细胞（BMSCs）体外分化的影响，明确体外培养用血清在细胞分化中的作用，为软骨的体外组织构建提供技术参数。取第2代猪BMSCs，以5×10^7个细胞/cm^3的密度接种到聚羟... 详细信息

目的探讨含有不同浓度胎牛血清的成软骨分化诱导液对骨髓基质干细胞（BMSCs）体外分化的影响，明确体外培养用血清在细胞分化中的作用，为软骨的体外组织构建提供技术参数。取第2代猪BMSCs，以5×10^7个细胞/cm^3的密度接种到聚羟基乙酸（PGA）制成的圆盘状支架上（直径5mm，厚度2mm），7d后分别应用含0％、5％、10％血清浓度的诱导液（诱导因子包括TGF-1、IGF-Ⅰ及地塞米松）进行体外持续性诱导培养。8周取材行组织湿重测量、GAG含量定量分析、大体观察、组织学、组织化学及免疫组织化学检测。结果 10％血清组复合物外观瓷白色，坚硬细腻，体积和外形均无明显变化。组织学及免疫组织化学检测结果显示有典型的软骨陷窝，大量的软骨特异性细胞外基质成分，组织湿重和GAG定量亦明显高于其它两组；3％血清组复合物体积缩小．有少量陷窝样结构及软骨特异性胞外基质聚集；而无血清组复合物缩小，松软易碎，未见典型的软骨陷窝和软骨特异性基质成分。结论体外诱导培养BMSCs构建组织工程软骨过程中，10％浓度的血清成分有利于BMSCs成软骨分化。

关键词：骨髓基质干细胞软骨体外研究

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皮肤成纤维细胞构建组织工程化猪角膜基质样组织

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上海交通大学学报（医学版） 2007年第2期27卷 156-160页

作者：张艳青张文杰胡晓洁周广东崔磊刘伟曹谊林上海交通大学医学院第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室

目的探讨以皮肤成纤维细胞为种子细胞,在猪角膜微环境中构建组织工程化角膜基质组织的可行性。方法分离获取胎猪皮肤成纤维细胞经体外培养、扩增。通过转染绿色荧光蛋白(GFP)基因标记细胞,示踪细胞的转归。选取第3代的细胞接种于可吸收... 详细信息

目的探讨以皮肤成纤维细胞为种子细胞,在猪角膜微环境中构建组织工程化角膜基质组织的可行性。方法分离获取胎猪皮肤成纤维细胞经体外培养、扩增。通过转染绿色荧光蛋白(GFP)基因标记细胞,示踪细胞的转归。选取第3代的细胞接种于可吸收生物材料聚羟基乙酸(PGA),形成细胞-生物材料复合物,体外培养1周后,移植于猪的角膜基质层内,于第8周取材进行大体、组织学检查及超微结构观察。以角膜基质细胞为种子细胞构建的组织工程化角膜基质组织作为对照。结果术后8周,实验组角膜逐渐恢复透明,与对照组角膜无明显差别。组织学检查显示形成新生的角膜基质样组织,呈板层状,排列较规则,与对照组角膜组织相似。超微结构观察及胶原纤维直径检测显示,实验组与对照组角膜组织差异无统计学意义。荧光显微镜观察到GFP阳性细胞存在。结论皮肤成纤维细胞可能替代角膜基质细胞,在猪角膜内构建角膜基质样组织。

关键词：组织工程角膜基质皮肤成纤维细胞

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骨髓基质干细胞体外软骨定向诱导方法的研究进展

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上海交通大学学报（医学版） 2007年第2期27卷 234-237页

作者：刘霞周广东曹谊林上海交通大学医学院第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海200011

种子细胞来源一直是限制软骨组织工程发展的瓶颈,骨髓基质干细胞(BMSCs)具有取材创伤小、增殖能力强及具多向分化潜能等优点,已逐渐成为软骨构建种子细胞的研究热点。其关键问题是如何获得大量纯化的BMSCs并在体外定向诱导为软骨表型的... 详细信息

种子细胞来源一直是限制软骨组织工程发展的瓶颈,骨髓基质干细胞(BMSCs)具有取材创伤小、增殖能力强及具多向分化潜能等优点,已逐渐成为软骨构建种子细胞的研究热点。其关键问题是如何获得大量纯化的BMSCs并在体外定向诱导为软骨表型的细胞。该文就BMSCs体外软骨定向诱导方法的研究进展进行综述,以期为应用BMSCs构建软骨组织提供参考。

关键词：骨髓基质干细胞软骨分化组织工程

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VSV-G蛋白修饰的GFP逆转录病毒的构建及表达

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上海交通大学学报（医学版） 2007年第7期27卷 798-801页

作者：陈瑾君刘伟刘德莉陆峻泓崔磊曹谊林上海交通大学医学院第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海200011

目的通过与疱疹性口腔炎病毒糖蛋白G基因(VSV-G)共转染,使含绿色荧光蛋白(GFP)基因的逆转录病毒经超速离心得以浓缩,进一步提高GFP逆转录病毒的细胞感染效率。方法应用GFP-RV质粒转染PT67细胞,并用G418筛选出GFP阳性克隆,利用其产生的... 详细信息

目的通过与疱疹性口腔炎病毒糖蛋白G基因(VSV-G)共转染,使含绿色荧光蛋白(GFP)基因的逆转录病毒经超速离心得以浓缩,进一步提高GFP逆转录病毒的细胞感染效率。方法应用GFP-RV质粒转染PT67细胞,并用G418筛选出GFP阳性克隆,利用其产生的病毒上清液再转染GP2-293细胞,在G418筛选的同时,瞬时转染VSV-G基因。收集该GP2-293细胞产生的重组假病毒液,并通过低温超速离心制备含GFP基因假病毒的浓缩液,测定浓缩前后含GFP基因假病毒液滴度,并分别感染NIH 3T3细胞、软骨细胞、成纤维细胞、骨髓基质干细胞等,荧光显微镜下观察GFP在上述细胞内的表达情况,流式细胞仪检测GFP基因的转染阳性表达率。结果GFP-GP2-293细胞转染VSV-G基因后产生的重组假病毒液滴度为7.36×104CFU/mL,浓缩40倍后其滴度可提高至1.82×106CFU/mL。用浓缩前后含GFP基因假病毒液分别转染NIH 3T3细胞,GFP阳性表达率可由44.21%升高至79.80%;转染兔软骨细胞和成纤维细胞、猪骨髓基质干细胞和脂肪干细胞后,均可见GFP阳性表达明显增强。结论逆转录病毒与VSV-G共转染GP2-293包装细胞可以制备出高滴度的假病毒液。浓缩病毒液的高转染率为其在组织工程种子细胞标记方面的广泛应用奠定了基础。

关键词：疱疹性口腔炎病毒糖蛋白绿色荧光蛋白转染假病毒种子细胞

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SNL细胞作为饲养层细胞培养人胚胎干细胞

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上海交通大学学报（医学版） 2007年第7期27卷 802-804,828页

作者：谢峰张文杰王鸿陆峻泓丛笑倩曹谊林上海交通大学医学院第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海200011

目的为便于人胚胎干细胞(ES细胞)的培养和研究,寻找一种建系细胞作为人ES细胞的饲养层细胞。方法以小鼠成纤维细胞系SNL细胞作为饲养层细胞培养人ES细胞株hES1。传代17代后,检测hES细胞表面特异性标志,包括碱性磷酸酶(AKP)、Oct-4、阶... 详细信息

目的为便于人胚胎干细胞(ES细胞)的培养和研究,寻找一种建系细胞作为人ES细胞的饲养层细胞。方法以小鼠成纤维细胞系SNL细胞作为饲养层细胞培养人ES细胞株hES1。传代17代后,检测hES细胞表面特异性标志,包括碱性磷酸酶(AKP)、Oct-4、阶段特异性胚胎抗原(SSEA)-3和SSEA-4的表达;同时观察细胞的多向分化潜能。结果hES1细胞在SNL细胞饲养层上能持续生长。经多次传代后持续表达人ES细胞表面特异性标志,其注射于重症联合免疫缺陷小鼠皮下仍能形成畸胎瘤组织。结论SNL细胞能够作为饲养层细胞用于人ES细胞的培养,且操作更方便;该细胞已转染了耐受新霉素的基因,为将来对人ES细胞基因操作时进行药物筛选提供了可能。

关键词：人胚胎干细胞饲养层细胞 SNL细胞

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化学剂法对兔卵母细胞孤雌激活的效果

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上海交通大学学报（医学版） 2007年第6期27卷 666-669页

作者：唐郑雅匡延平陆峻泓曹谊林张文杰上海交通大学医学院第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海200011

目的研究钙离子载体A23187和6-二甲基氨基嘌呤（6-DMAP）及3种酶对兔卵母细胞的激活率,并观察其体外发育情况。方法兔超排后获得卵母细胞,经脱颗粒处理后用A23187和6-DMAP处理不同时间,体外培养5-7d,观察细胞发育与囊胚形成情况。结果... 详细信息

目的研究钙离子载体A23187和6-二甲基氨基嘌呤（6-DMAP）及3种酶对兔卵母细胞的激活率,并观察其体外发育情况。方法兔超排后获得卵母细胞,经脱颗粒处理后用A23187和6-DMAP处理不同时间,体外培养5-7d,观察细胞发育与囊胚形成情况。结果钙离子载体A23187激活处理5min后,继续在2.0mmol/L6-DMAP中分别处理3.5、4.0、4.5、5.0h,均能激活兔卵母细胞;以处理4.0h的卵裂率最高（58.82%,20/34）,并有15%（3/20）的囊胚发育率。透明质酸酶、胶原酶和胰酶处理20min后,均能激活兔卵母细胞,其中透明质酸酶处理20min的激活率和卵裂率最高,分别为58.33%（28/48）和63.64%（28/44）。结论兔卵母细胞孤雌激活率与激活方法密切相关。化学激活剂的处理时间及消化酶的不同均对兔卵母细胞的激活产生显著影响。

关键词：孤雌激活 A23187 6-二甲基氨基嘌呤透明质酸酶

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