检索结果-内蒙古大学图书馆

组织工程与重建外科杂志 2011年第3期7卷 136-138页

作者：吴玉家朱鴷周广东江华第二军医大学附属长征医院整形外科上海市200041 北京市解放军总参谋部总医院(309医院)整形美容烧伤修复中心 100094 上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市200011

目的探讨以HDPE-PGA复合支架接种兔耳软骨细胞后,于兔阴囊原位内构建组织工程化睾丸假体的可能性。方法取成年兔耳软骨分离培养软骨细胞,制备HDPE-PGA复合支架,细胞-支架复合物体外培养2w。摘除单侧兔睾丸后即时将经体外培养的细胞-支... 详细信息

目的探讨以HDPE-PGA复合支架接种兔耳软骨细胞后,于兔阴囊原位内构建组织工程化睾丸假体的可能性。方法取成年兔耳软骨分离培养软骨细胞,制备HDPE-PGA复合支架,细胞-支架复合物体外培养2w。摘除单侧兔睾丸后即时将经体外培养的细胞-支架复合物植入阴囊原位,术后3m将兔处死取材。单纯支架植入为对照组。标本行大体观察、组织学、组织化学、免疫组化、GAG含量检测。结果实验组取材标本经检测具有预制形态与体积,有新生软骨组织产生,软骨组织呈岛状分布,其间有不同程度的纤维组织长入及炎性细胞浸润。对照组无软骨形成。结论兔阴囊原位内构建组织工程化睾丸假体具有预制形态与体积、结构与组织学形态良好。

关键词：组织工程化软骨高密度聚乙烯兔睾丸假体

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人脐血间充质干细胞修复颅骨缺损的实验研究

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中华整形外科杂志 2010年第1期26卷 34-38页

作者：刘广鹏李宇琳孙剑崔磊张文杰曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院组织工程重点实验室 200011 上海组织工程研究与开发中心

目的应用人脐血间充质干细胞（umbilical cord blood derived mesenchymal stem cells，UCB—MSCs）复合脱钙骨材料构建组织工程化骨，修复裸大鼠颅骨标准缺损。方法体外扩增培养、成骨诱导人UCB—MSCs，采用AlizarinRed染色和钙离子半... 详细信息

目的应用人脐血间充质干细胞（umbilical cord blood derived mesenchymal stem cells，UCB—MSCs）复合脱钙骨材料构建组织工程化骨，修复裸大鼠颅骨标准缺损。方法体外扩增培养、成骨诱导人UCB—MSCs，采用AlizarinRed染色和钙离子半定量的方法测定细胞成骨分化能力。将第2代细胞接种在脱钙骨支架材料上继续诱导培养，扫描电镜检测细胞在材料上的生长状况。制备裸大鼠双侧颅骨全层标准缺损（直径5mm），一侧以细胞材料复合物修复作为实验侧（n=8）；另一侧以单纯脱钙骨材料修复作为对照侧（n=8）。术后6、12周取材，分别通过大体形态观察、显微CT（Micro—CT）、组织学方法检测颅骨缺损的修复效果。结果UCB—MSCs体外能够诱导分化为成骨细胞，且在脱钙骨支架材料上生长良好。Micro—CT检测显示术后6周实验侧有部分新生骨组织形成，12周时骨缺损修复率达（78．19±6．45）％，脱钙骨材料降解完全；对照侧6周时无明显新骨生成，12周时材料完全降解，骨缺损未修复。组织学检测显示12周时实验侧有较多成熟骨生成，为骨性愈合；对照侧骨缺损为纤维愈合。结论成骨诱导的人UCB—MSCs复合脱钙骨材料构建的组织工程化骨可修复裸大鼠颅骨全层标准缺损，有望成为新的组织工程骨种子细胞来源。

关键词：组织工程间充质干细胞颅骨脱钙骨

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唇腭裂合并的单侧牙槽突裂大鼠模型的建立和稳定性研究

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上海交通大学学报（医学版） 2010年第9期30卷 1111-1114,1142页

作者：许悦陈振琦吴军李壬媚刘广鹏上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔正畸科上海市口腔医学重点实验室上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科组织工程实验室上海200011

目的建立唇腭裂合并的上颌骨缺损(牙槽突裂)大鼠模型,并研究其稳定性。方法以7周龄SD大鼠作为实验对象,于右侧上颌制备4mm×4mm×3mm的牙槽突裂,模拟建立唇腭裂合并的上颌骨缺损大鼠模型。根据术后骨缺损区的处理方式将模型大... 详细信息

目的建立唇腭裂合并的上颌骨缺损(牙槽突裂)大鼠模型,并研究其稳定性。方法以7周龄SD大鼠作为实验对象,于右侧上颌制备4mm×4mm×3mm的牙槽突裂,模拟建立唇腭裂合并的上颌骨缺损大鼠模型。根据术后骨缺损区的处理方式将模型大鼠分为对照组(骨缺损区不予特殊处理)和实验组(骨缺损区予以骨蜡填塞),每组10只。两组大鼠分别于术毕即刻和术后4、8周时点分批处死后制备模型标本;利用显微CT(MicroCT)进行三维重建,观察和定量检测骨缺损区新骨形成情况,分析和比较两组模型的稳定性。结果 MicroCT三维图像重建显示,在术后8周时点,对照组有大量新骨充填于缺损区,缺损区明显缩小;而实验组仅断端边缘有少量新骨形成,缺损区无明显缩小。定量分析显示,对照组和实验组术后4周时点的新骨形成百分比分别为54.35%和16.53%,术后8周时点的新骨形成百分比分别为93.12%和29.30%,两组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论成功建立模拟唇腭裂合并的上颌骨缺损(牙槽突裂)大鼠模型,利用骨蜡填塞骨缺损区能显著提高模型的稳定性。

关键词：牙槽突裂植骨显微CT

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基于快速成形的磷酸钙多孔陶瓷成骨性能初步研究

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中国修复重建外科杂志 2010年第7期24卷 792-796页

作者：何晨光赵莉林柳兰谷辉杰周恒崔磊组织工程国家工程研究中心上海200235 上海组织工程研究与开发中心上海大学机械自动化及机器人重点实验室上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科

目的磷酸钙生物材料由于其优良的生物相容性而具有广阔的应用前景,但传统方法难以制备具有复杂形状的支架。以快速成形方法制备磷酸钙多孔陶瓷支架材料,并对其体外成骨性能进行初步研究。方法采用快速成形方法制备磷酸钙多孔陶瓷支架材... 详细信息

目的磷酸钙生物材料由于其优良的生物相容性而具有广阔的应用前景,但传统方法难以制备具有复杂形状的支架。以快速成形方法制备磷酸钙多孔陶瓷支架材料,并对其体外成骨性能进行初步研究。方法采用快速成形方法制备磷酸钙多孔陶瓷支架材料(直径10mm、高度5mm、孔径800μm),取Beagle犬髂骨髓分离培养BMSCs,接种第3代BMSCs于支架材料上。将实验分为4组,A组为成骨诱导培养的细胞/材料复合物组,B组为未经成骨诱导培养的细胞/材料复合物组,另设平皿成骨诱导培养及常规培养为阳性对照组(C组)及阴性对照组(D组)。于接种后第1、3、7天,利用DNA定量检测方法及ALP定量、定性检测方法检测BMSCs在支架材料上的增殖及ALP的表达;并经DiO荧光染色后,应用激光共聚焦显微镜观察BMSCs在材料上的黏附生长情况。结果 DNA定量结果表明,随培养时间增加,C、D组在第3天时细胞生长进入平台期;A、B组细胞呈持续增长趋势,细胞培养过程中增殖速度均略低于C、D组,且未出现明显的平台期。DiO荧光染色示,BMSCs在以快速成形方法制备的磷酸钙多孔陶瓷支架材料上黏附、生长状态良好。ALP染色示,随培养时间延长,A、B组支架上细胞染色均逐渐加深,A组各时间点染色程度均明显强于B组。培养后第1、3天,4组ALP表达均较低,差异无统计学意义(P>0.05);培养第7天,各组ALP表达均明显升高,A组比其他各组明显高表达(P<0.05),B组及C组均明显高于D组(P<0.05)。结论快速成形的多孔磷酸钙陶瓷具有良好的细胞相容性,BMSCs与支架复合在体外诱导培养可以进行成骨分化。因此通过快速成形技术制备的磷酸钙多孔陶瓷是骨组织工程可选的细胞支架。

关键词：快速成形磷酸钙陶瓷 BMSCs 成骨分化

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快速成型机实现人骨髓基质干细胞三维定向打印的初步研究

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上海口腔医学 2010年第1期19卷 77-80页

作者：柴岗张艳刘齐海麻荪香胡庆夕崔磊曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海200011 上海大学快速成型中心上海200235

目的:采用快速成型技术实现人骨髓基质干细胞的三维打印。方法:常规培养人骨髓基质干细胞至第2代,胰酶消化,调整为1×106/mL单细胞悬液,细胞先行PI荧光标记,应用快速成型组织打印机进行三维细胞打印,单细胞悬液作为打印介质,x轴间隔... 详细信息

目的:采用快速成型技术实现人骨髓基质干细胞的三维打印。方法:常规培养人骨髓基质干细胞至第2代,胰酶消化,调整为1×106/mL单细胞悬液,细胞先行PI荧光标记,应用快速成型组织打印机进行三维细胞打印,单细胞悬液作为打印介质,x轴间隔300μm,y轴间隔500μm,z轴间隔50μm,打印速度20mm/s,频率50Hz,采用激光共聚焦显微镜进行细胞形态学观察。结果:通过生物打印后,每"细胞墨滴"包含人骨髓基质干细胞15～35个,三维平面上x轴间隔300μm,y轴间隔500μm,z轴间隔50μm,存在"细胞墨滴"层面间隔50μm,符合原设计对z轴的要求。"细胞墨滴"在三维组织中分布规则,满足三维设计细胞打印要求。结论:快速成型生物打印技术可实现人骨髓基质干细胞在三维平面上的规则分布,符合组织工程对组织三维打印的要求。

关键词：细胞打印快速成型骨髓基质干细胞

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毛细管整体柱在线二维分离系统应用于人体软骨的蛋白质组分析

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色谱 2010年第2期28卷 140-145页

作者：谢沙洁王方军晏丹周广东叶明亮邹汉法中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室国家色谱研究分析中心辽宁大连116023 组织工程国家工程研究中心上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海200011

将已建立的7cm柱长的磷酸基团强阳离子交换富集整体柱与85cm柱长的C12烷基反相整体柱结合的在线二维分离平台应用于软骨提取蛋白的蛋白质组分析。对20μg软骨提取蛋白的酶解产物进行14个盐梯度的分级,然后对14个馏分进行反相色谱梯度分... 详细信息

将已建立的7cm柱长的磷酸基团强阳离子交换富集整体柱与85cm柱长的C12烷基反相整体柱结合的在线二维分离平台应用于软骨提取蛋白的蛋白质组分析。对20μg软骨提取蛋白的酶解产物进行14个盐梯度的分级,然后对14个馏分进行反相色谱梯度分离及串联质谱鉴定,成功地鉴定得到了7434个独立肽段对应的1901个非冗余蛋白质。对所鉴定到的蛋白质进行定位分类,结果表明鉴定到的大部分蛋白质是来自于软骨细胞内部的低丰度蛋白质,这对于许多关节类疾病的研究有重要意义。

关键词：整体柱在线二维分离蛋白质组学软骨组织

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体内外联合培养提高组织工程管状软骨构建质量

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中国美容整形外科杂志 2010年第4期21卷 208-211页

作者：罗旭松周广东刘伟张文杰岑莲崔磊曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海200011 中国国家组织工程研究中心

目的探讨利用组织工程技术提高管状软骨的构建质量.方法 PLA/PGA共纺材料均匀地缠绕在硅胶模具上形成管状支架材料.从兔耳郭软骨分离软骨细胞,在体外培养扩增后接种于支架材料,软骨细胞-材料复合物先体外培养2 d.实验动物分为3组：直... 详细信息

目的探讨利用组织工程技术提高管状软骨的构建质量.方法 PLA/PGA共纺材料均匀地缠绕在硅胶模具上形成管状支架材料.从兔耳郭软骨分离软骨细胞,在体外培养扩增后接种于支架材料,软骨细胞-材料复合物先体外培养2 d.实验动物分为3组：直接植入组（DI组）,自体软骨细胞材料复合物直接植入兔颈部皮下.联合培养组（CC组）,复合物继续用相同的培养基在体外培养2周后再植入兔颈部皮下.单纯材料组（SO组）,在颈部皮下单纯植入材料和硅胶模具.在植入后1,2,4和8周定时取材,行大体观测,组织学染色,生物化学和分子生物学检测和生物力学评定,主要评估炎症反应程度和软骨形成情况.结果植入1周时,DI和SO组材料纤维周围有明显的炎症反应,大量白细胞浸润;第4周时,两组炎症明显减退,DI组形成的工程软骨被纤维组织分隔成散在的岛状;第8周时,材料基本降解,炎症消散,但DI组软骨无改善.体外培养2周后,CC组软骨细胞已分泌了许多细胞外基质,将部分降解的材料纤维包裹在内,此时植入体内没有引起明显的炎症反应;第4周时,材料完全降解并形成了相对均质、成熟的软骨组织,各项检测指标均优于同时间点DI组构建的软骨,接近正常气管软骨.结论体内外联合培养可以明显减轻软骨细胞-PLA/PGA复合物植入具有免疫功能的实验动物自体内引发的炎症反应,提高组织工程管状软骨的构建质量.

关键词：组织工程管状软骨联合培养气管修复重建

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组织工程化气管的研究进展

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组织工程与重建外科杂志 2010年第3期6卷 167-170页

作者：罗旭松周广东曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市200011

先天畸形、外伤和肿瘤等引起的气管缺损临床常见,长段气管狭窄患者的死亡率可高达77%,长段气管闭锁的死亡率基本为100%。气管缺损较短时（〈6cm）,首先考虑断端拉拢吻合．

关键词：气管缺损组织工程化先天畸形气管狭窄死亡率长段

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下颌骨节段性缺损修复组织工程中珊瑚支架残留率的研究

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中国医药生物技术 2010年第5期5卷 348-352页

作者：袁捷刘广鹏韦敏祁佐良崔磊曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科 200011 上海市组织工程研究重点实验室 200011 上海组织工程研发中心 200235

目的探讨骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cell,BMSC)复合珊瑚修复犬下颌骨节段性缺损支架的残留率。方法体外扩增、成骨诱导培养犬BMSC,分别将第二代细胞复合珊瑚后植入犬自体右侧3cm的下颌骨节段性缺损,术后12周(n=6),32周(n=6)... 详细信息

目的探讨骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cell,BMSC)复合珊瑚修复犬下颌骨节段性缺损支架的残留率。方法体外扩增、成骨诱导培养犬BMSC,分别将第二代细胞复合珊瑚后植入犬自体右侧3cm的下颌骨节段性缺损,术后12周(n=6),32周(n=6)取材后分别通过Micro-CT检测和大体、组织学图像分析骨修复、支架残留率和生物力学修复强度。结果 Micro-CT检测和组织学图像分析均表明,BMSC-珊瑚组组织工程骨12周时支架残留率显著高于32周(P<0.05),而新骨随材料降解逐步成熟;生物力学显示术后32周力学强度显著高于12周(P<0.05)。结论自体成骨诱导BMSC复合珊瑚形成的组织工程骨可良好修复犬下颌骨节段性缺损,随时间延长材料逐步降解,组织工程下颌骨进一步成熟。

关键词：下颌骨骨髓祖代细胞珊瑚虫纲组织学图像分析

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诱导人孤雌胚胎干细胞向类间充质干细胞分化的实验研究

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组织工程与重建外科杂志 2010年第3期6卷 128-131页

作者：艾爱陈瑶唐郑雅宋楠曹谊林张文杰上海交通大学医学院附属第九人民医院辅助生殖科上海市200011 上海组织工程研究重点实验室上海市200011

目的探索人孤雌胚胎干细胞在体外向类间充质干细胞诱导分化的方法 ,并鉴定所得细胞的生物学特性。方法人孤雌胚胎干细胞在无血清条件下悬浮培养,形成拟胚体,10d后在含血清条件下使拟胚体贴壁生长,7d后胰酶消化,所得细胞在含血清的培养... 详细信息

目的探索人孤雌胚胎干细胞在体外向类间充质干细胞诱导分化的方法 ,并鉴定所得细胞的生物学特性。方法人孤雌胚胎干细胞在无血清条件下悬浮培养,形成拟胚体,10d后在含血清条件下使拟胚体贴壁生长,7d后胰酶消化,所得细胞在含血清的培养液中传代、扩增。观察传代、扩增后细胞的形态学变化;用免疫荧光染色和流式细胞技术进行细胞表型分析;取第9代细胞进行成脂、成骨和成软骨诱导,9～28d后行特殊染色及RT-PCR分析。结果人孤雌胚胎干细胞在诱导分化后,形态与骨髓间充质干细胞相似,多次扩增传代后仍保持细胞形态和扩增能力。免疫荧光染色发现,细胞表达中胚层标志波形蛋白(Vimentin)。流式细胞分析显示,细胞表达CD29、CD105、CD166、CD44等间充质干细胞表面标志。特殊染色及RT-PCR分析显示:成骨诱导后,细胞碱性磷酸酶和茜素红染色阳性,碱性磷酸酶和Cbfa-1表达增加;成软骨诱导后,细胞Ⅱ型胶原染色阳性,Ⅱ型胶原和软骨寡聚基质蛋白(COMP)表达增强;成脂诱导后,细胞油红染色阴性,脂蛋白酶和Leptin无表达。结论人孤雌胚胎干细胞可以诱导、分化为间充质干细胞,并具有成骨、成软骨分化潜能。

关键词：人孤雌胚胎干细胞间充质干细胞分化

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