检索结果-内蒙古大学图书馆

组织工程与重建外科杂志 2010年第6期6卷 311-314页

作者：李俊宪孙恒赟袁捷赵明衍韦敏山西省人民医院口腔外科山西省太原市030012 上海组织工程研究重点实验室上海市200011 上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市200011

目的利用流式细胞仪分选人脂肪干细胞(Human adipose-derived stem cells,hADSCs)并检测其体外成骨活性。方法分离hADSCs,通过流式细胞仪以CD105作为表面标志进行分选,所得细胞成骨诱导培养,以CD105-细胞、未分选细胞作为对照。2周后进... 详细信息

目的利用流式细胞仪分选人脂肪干细胞(Human adipose-derived stem cells,hADSCs)并检测其体外成骨活性。方法分离hADSCs,通过流式细胞仪以CD105作为表面标志进行分选,所得细胞成骨诱导培养,以CD105-细胞、未分选细胞作为对照。2周后进行碱性磷酸酶(AKP)和骨钙蛋白(OCN)定量PCR和Western-blot检测。结果流式细胞分选所得CD105+hADSCs细胞约占单核细胞的50%。定量PCR和Western-blot检测均显示分选hADSCs成骨诱导后,AKP和OCN的表达均显著高于CD105-细胞组及未分选细胞组(P<0.05)。结论诱导分选纯化后的hADSCs有较好的成骨活性,可作为骨组织工程的种子细胞。

关键词：脂肪干细胞碱性磷酸酶骨钙蛋白

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

hTRT基因荧光表达载体在真核细胞中的表达

引用

医学研究杂志 2010年第5期39卷 21-23,124页

作者：周海文杨雯君刘德莉刘伟周曾同上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔医学院口腔黏膜科/上海市口腔医学研究所/上海市口腔医学重点实验室 200011 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔医学院口腔颌面外科上海交通大学组织工程研究中心上海市组织工程重点实验室

目的研究具绿色荧光蛋白报道系统的端粒酶基因真核质粒载体在真核细胞中的表达情况。方法用Lipo-fectAMINE 2000介导重组端粒酶pEGFP-hTRT质粒转染293细胞及人正常口腔黏膜细胞,经荧光显微镜、激光共聚焦显微镜观察荧光表达并进行流式... 详细信息

目的研究具绿色荧光蛋白报道系统的端粒酶基因真核质粒载体在真核细胞中的表达情况。方法用Lipo-fectAMINE 2000介导重组端粒酶pEGFP-hTRT质粒转染293细胞及人正常口腔黏膜细胞,经荧光显微镜、激光共聚焦显微镜观察荧光表达并进行流式细胞仪检测转染效率,采用RT-PCR检测转染细胞中外源性hTRT的表达。结果质粒在293细胞及人正常口腔黏膜细胞中正确表达,外源性端粒酶在细胞中表达。293细胞及人正常口腔黏膜角化细胞转染效率分别为34.74%和6.88%。结论 hTRT基因荧光表达载体在真核细胞中表达,便于观察转染情况,对研究组织工程种子细胞的衰老问题具有重要的意义。

关键词：端粒酶绿色荧光蛋白基因转染质粒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

关节软骨生化结构及其与力学性能关系研究进展

引用

上海交通大学学报（医学版） 2009年第3期29卷 341-345页

作者：晏丹周广东曹谊林上海交通大学医学院第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海200011

关节软骨缺损在临床很常见。由于血液供应差及应答创伤反应的未分化细胞群相对缺乏,软骨缺损很难自行修复。组织工程技术可将具有软骨形成潜能的细胞接种到生物可降解材料上形成细胞-支架三维复合物,该复合物在体外或体内可形成组织工... 详细信息

关节软骨缺损在临床很常见。由于血液供应差及应答创伤反应的未分化细胞群相对缺乏,软骨缺损很难自行修复。组织工程技术可将具有软骨形成潜能的细胞接种到生物可降解材料上形成细胞-支架三维复合物,该复合物在体外或体内可形成组织工程化软骨,有望解决软骨缺损修复这一临床难题。要构建具有完整结构和稳定功能的组织工程化软骨,必须深入了解软骨的形态结构、功能及其关系。文章就正常及组织工程化关节软骨的生化结构及其与生物力学性能的关系进行综述。

关键词：关节软骨生物力学生化结构组织工程

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

hBMSCs的生物打印初步研究

引用

中国修复重建外科杂志 2009年第4期23卷 497-500页

作者：麻荪香柴岗刘齐海胡庆夕周广东崔磊上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海200011 上海市组织工程研究重点实验室上海大学快速成型中心

目的初步确立hBMSCs的二维生物打印方法,实现对细胞喷射过程的控制并保持打印后细胞活力。方法取健康志愿者骨髓5mL,常规培养hBMSCs至第2代,调整为1×106个/mL单细胞悬液。实验分3组:打印组1细胞先行碘化丙啶(propidium iodide,PI)... 详细信息

目的初步确立hBMSCs的二维生物打印方法,实现对细胞喷射过程的控制并保持打印后细胞活力。方法取健康志愿者骨髓5mL,常规培养hBMSCs至第2代,调整为1×106个/mL单细胞悬液。实验分3组:打印组1细胞先行碘化丙啶(propidium iodide,PI)荧光标记,快速成型组织打印机进行二维细胞打印,x轴间隔300μm,y轴间隔1500μm,激光共聚焦显微镜观察。打印组2细胞未行PI标记,经生物打印后培养2h,Live/Dead viability Kit测定细胞活力,激光共聚焦显微镜观察细胞荧光染色情况;取1份未经Live/Dead viability Kit测试的打印组2细胞,培养7d后倒置显微镜观察细胞形态,贴壁后常规培养,动态观察细胞生长状态。对照组除细胞悬液不行打印,其余操作同打印组2。结果打印组1细胞激光共聚焦显微镜观察,"细胞墨滴"在二维组织中规则且均匀分布,满足二维设计细胞打印要求;每个"细胞墨滴"包含细胞15～35个。打印组2细胞经活力测试,细胞孵育30min后激光共聚焦显微镜观察显示细胞荧光染色情况。对照组细胞活力与打印组2无明显区别。打印后细胞常规培养7d,细胞可正常贴壁生长,形态、生长状态良好。结论通过生物打印技术可实现hBMSCs在二维平面上的定向、定量规则分布,并为进一步的细胞三维打印乃至器官打印体系奠定基础。

关键词：组织工程 hBMSCs 细胞打印快速成型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

利用皮肤成纤维细胞重建兔角膜基质组织的初步研究

引用

中华眼科杂志 2009年第9期45卷 827-833页

作者：张艳青张文杰刘伟胡晓洁周广东崔磊曹谊林复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科上海200031 上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海市组织工程重点实验室上海组织工程研究与开发中心

目的探讨利用皮肤成纤维细胞替代角膜基质细胞，构建兔角膜基质组织的可行性。方法实验研究。通过酶消化的方法分离培养同种异体新生兔皮肤成纤维细胞，用腺病毒转染绿色荧光蛋白（GFP）基因标记细胞，接种细胞于聚羟基乙酸（PGA）圆盘... 详细信息

目的探讨利用皮肤成纤维细胞替代角膜基质细胞，构建兔角膜基质组织的可行性。方法实验研究。通过酶消化的方法分离培养同种异体新生兔皮肤成纤维细胞，用腺病毒转染绿色荧光蛋白（GFP）基因标记细胞，接种细胞于聚羟基乙酸（PGA）圆盘支架，形成细胞．PGA复合物，移植于成年兔角膜基质层。动态观察构建组织在角膜内的变化情况，并于第3、6、8周取材进行大体、组织学、GFP表达及角膜基质特异蛋白Keratocan的检测。透射电镜观察胶原纤维排列并测量其直径。应用t检验统计分析数据。结果术后8周，实验侧角膜逐渐恢复透明，形成的新生角膜基质样组织，排列较规则。荧光显微镜检测显示GFP阳性细胞存在，形成基质板层样组织，同时该部分细胞表达Keratocan。胶原纤维排列规则，实验组胶原纤维直径为（33．08±2．47）nm，经统计学分析，与正常角膜差异无统计学意义（t=1．80，P=0．0771）。结论皮肤成纤维细胞可以替代角膜基质细胞，在兔角膜内构建组织工程角膜基质组织。

关键词：成纤维细胞组织工程角膜基质皮肤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

聚羟基乙酸作为支架材料体外构建复层膀胱壁结构的探讨

引用

临床泌尿外科杂志 2009年第12期24卷 935-938页

作者：卢慕峻王忠董国勤姜华周广东刘伟曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院泌尿外科上海200011 上海市组织工程研究重点实验室

目的:探讨聚羟基乙酸(polyglycolic acid,PGA)作为支架材料并复合成年猪膀胱平滑肌细胞和尿路上皮细胞,体外构建复层膀胱壁结构的可行性。方法:采用PGA作为支架材料,并以聚乳酸(polylact acid,PLA)塑形。以酶消化法分别获得猪膀胱尿路... 详细信息

目的:探讨聚羟基乙酸(polyglycolic acid,PGA)作为支架材料并复合成年猪膀胱平滑肌细胞和尿路上皮细胞,体外构建复层膀胱壁结构的可行性。方法:采用PGA作为支架材料,并以聚乳酸(polylact acid,PLA)塑形。以酶消化法分别获得猪膀胱尿路上皮细胞和平滑肌细胞,并体外扩增。以MTT法分别检测P3代膀胱平滑肌细胞(SMC)和尿路上皮细胞(UC)的体外增殖能力。将P3代膀胱平滑肌细胞先接种在支架上,再接种尿路上皮细胞。将细胞-材料复合物体外培养1～2周并行组织学鉴定。结果:酶消化法获得的膀胱平滑肌细胞和尿路上皮细胞经过体外培养仍具有较强的体外增殖能力。细胞材料复合物体外培养1周后形成分层排列结构,包括黏膜上皮层和膀胱平滑肌层。免疫组织化学显示平滑肌层α-Smooth MuscleActin表达阳性,黏膜上皮层广谱角蛋白表达阳性。而细胞材料复合物继续体外培养至2周,细胞从支架上大量脱落。结论:PGA适合作为复层膀胱壁结构体外构建的支架材料。采用PGA作为支架材料并复合膀胱平滑肌细胞和尿路上皮细胞,可以体外构建出类似复层膀胱壁结构。细胞材料复合物体外培养1周左右较适合进行体内回植修复。

关键词：膀胱组织工程学聚羟基乙酸支架

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

MesenPRO RS Medium对人脂肪干细胞增殖与分化的影响

引用

组织工程与重建外科杂志 2009年第5期5卷 241-244页

作者：蒋婷张莹莹刘伟周广东上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市200011

目的探讨MesenPRO RS Medium对人脂肪干细胞增殖与分化的影响。方法应用MesenPRO RS Medium与DMEM+10%FBS两种培养基培养人脂肪干细胞,比较两者在细胞形态、体外增殖能力、成纤维细胞集落形成(CFU-F)能力及多向分化潜能的差异。结果Mese... 详细信息

目的探讨MesenPRO RS Medium对人脂肪干细胞增殖与分化的影响。方法应用MesenPRO RS Medium与DMEM+10%FBS两种培养基培养人脂肪干细胞,比较两者在细胞形态、体外增殖能力、成纤维细胞集落形成(CFU-F)能力及多向分化潜能的差异。结果MesenPRO RS Medium培养的人脂肪干细胞具有良好的细胞形态,在增殖速度、细胞集落,以及成脂、成骨及成软骨能力等方面均优于DMEM+10%FBS。结论MesenPRO RS Medium是人脂肪干细胞优良的培养基。

关键词：脂肪干细胞培养基分化潜能

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

不同分化潜能的真皮干细胞膜蛋白初步筛选研究

引用

组织工程与重建外科杂志 2009年第5期5卷 245-249页

作者：陈付国毕丹张小平刘阳程开祥张文杰刘伟崔磊曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市200011

目的寻找不同分化潜能的真皮干细胞的差异膜蛋白。方法通过选择性地抽提三向分化克隆的细胞膜蛋白,与二向分化克隆进行对比分析,以筛选出与分化能力下降有关的细胞膜相关蛋白。三向克隆与双向克隆的膜蛋白经2-D电泳、质谱分析及Western-... 详细信息

目的寻找不同分化潜能的真皮干细胞的差异膜蛋白。方法通过选择性地抽提三向分化克隆的细胞膜蛋白,与二向分化克隆进行对比分析,以筛选出与分化能力下降有关的细胞膜相关蛋白。三向克隆与双向克隆的膜蛋白经2-D电泳、质谱分析及Western-Blot检测,初步确认二者之间的明显差异蛋白。结果蛋白质组学分析结果显示,二者的差异蛋白主要有10种膜相关蛋白,其中膜表达差异较显著的蛋白质,如:Annexin A2 isoform1(ANXA2)、Prohibitin(PHB)、Protein disulfide-isomeraseA3(PDIA3),均与细胞分化有关。结论ANXA2、PHB、PDIA3在不同分化潜能的人真皮干细胞膜上表达存在差异,提示了这几组蛋白质参与了该细胞的分化,为初步筛选多潜能真皮成纤维细胞,以及进一步研究其分化的机理提供了重要科学依据和深入探索的新方向。

关键词：成纤维细胞真皮干细胞克隆膜蛋白

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

利用永生化人脐静脉内皮细胞构建血管瘤模型的初步研究

引用

组织工程与重建外科杂志 2009年第5期5卷 253-255页

作者：陆阳薛继鑫李伟曹谊林张文杰上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市200011

目的初步探讨永生化人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)构建血管瘤疾病模型的可行性。方法永生化HUVEC与猪骨髓间充质干细胞(BMSC)分别在普通的DMEM培养液(含10%FBS)中贴壁培养至完全融合后,胰酶消化为单... 详细信息

目的初步探讨永生化人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)构建血管瘤疾病模型的可行性。方法永生化HUVEC与猪骨髓间充质干细胞(BMSC)分别在普通的DMEM培养液(含10%FBS)中贴壁培养至完全融合后,胰酶消化为单细胞悬液;细胞计数后按不同细胞组合分组,与Matrigel混合后分别注射至裸鼠皮下,移植后1周及5周取材,HE染色观察血管生成情况。结果1周后HE所见:空白组与单纯注射BMSC组均无管样结构形成;单纯注射HUVEC组和注射混合细胞组均有管样结构形成。5周后HE所见:空白组被吸收;单纯注射BMSC组可见大量的脂肪组织;注射单纯HUVEC组以及混合组可见血管样结构存在。结论HUVEC在裸鼠皮下注射具有形成血管的能力,有望构建增生期血管瘤模型。

关键词：脐静脉内皮细胞血管瘤动物模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Cathepsin K基因siRNA的筛选及其质粒载体的构建

引用

组织工程与重建外科杂志 2009年第5期5卷 256-259,294页

作者：张艳金蓉刘伟上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市200011

目的筛选出对人Cathepsin K(CTSK)基因抑制效率最高的1对siRNA,并通过质粒载体表达该siRNA,为进一步抑制去分化人软骨细胞中CTSK的表达奠定基础。方法针对Cathepsin K基因设计4个靶位点,并根据靶位点合成4对siRNA,并转染人软骨细胞。通... 详细信息

目的筛选出对人Cathepsin K(CTSK)基因抑制效率最高的1对siRNA,并通过质粒载体表达该siRNA,为进一步抑制去分化人软骨细胞中CTSK的表达奠定基础。方法针对Cathepsin K基因设计4个靶位点,并根据靶位点合成4对siRNA,并转染人软骨细胞。通过Real-timePCR检测4对siRNA中抑制效率最高的1对,与线性化的PGCsilencer-Hl/Neo/GFP连接、转化、扩增与纯化质粒。结果4对siRNA转染软骨细胞后72h,通过对照FITC-siRNA的绿色荧光观察,siRNA的转染效率达到70%～80%。Real-time PCR检测每对siRNA的CTSK量与对照组比的百分率得到其抑制效率,分别为:第1对的比值大于对照组(无抑制作用),第2对47.5%,第3对53.1%,第4对67.3%(抑制效率最大)。成功构建出pGCsilencerTMH1/Neo/GFP/CTSK RNAi载体,经测序证实了克隆的RNAi打靶序列100%正确。结论成功构建了CTSK基因的siRNAs表达质粒,为进一步研究抑制该基因表达对延缓软骨细胞的去分化过程并促进其成软骨能力奠定了基础。

关键词：基因双链RNA 质粒体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：