检索结果-内蒙古大学图书馆

中国口腔颌面外科杂志 2012年第1期10卷 23-28页

作者：高文岚段惠川潘晓岗上海交通大学医学院附属第九人民医院.口腔医学院口腔正畸科上海市口腔医学重点实验室上海200011 上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海200011

目的:探索便捷而有效的小鼠毛囊来源间充质干细胞的体外培养方法,并研究该群细胞的成骨能力,以探寻新的骨组织工程种子细胞。方法:采用酶消化法分离获得小鼠毛囊来源的干细胞,用不同培养体系进行传代培养,观察各细胞的增殖能力,并对所... 详细信息

目的:探索便捷而有效的小鼠毛囊来源间充质干细胞的体外培养方法,并研究该群细胞的成骨能力,以探寻新的骨组织工程种子细胞。方法:采用酶消化法分离获得小鼠毛囊来源的干细胞,用不同培养体系进行传代培养,观察各细胞的增殖能力,并对所获得的毛囊来源的干细胞向成骨细胞诱导,行碱性磷酸酶染色、茜素红染色,对该细胞的成骨能力进行鉴定。结果:应用MEF条件培养液培养的小鼠毛囊来源的间充质干细胞具有较强的增殖能力,且诱导组和对照组能在体外被诱导成骨。结论:小鼠毛囊中存在具有较强增殖能力及成骨能力的间充质干细胞,可作为骨组织工程的种子细胞。

关键词：小鼠毛囊间充质干细胞成骨

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P17-BMP2多肽促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究

引用

组织工程与重建外科杂志 2012年第2期8卷 65-68页

作者：李佳滨张文杰崔福斋杜晓岩佳木斯大学附属第二医院口腔医院整形外科黑龙江省佳木斯市154004 上海市组织工程研究重点实验室上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科200011 清华大学材料科学与工程系北京市100084

目的探讨P17-BMP2对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖和成骨分化的影响。方法体外培养Wistar大鼠BMSCs,分4组培养:对照组(A组)、成骨诱导组(B组)、成骨诱导+P17-BMP2组(C组)、单纯P17-BMP2组(D组)。A组:采用普通DMEM培养基培养;B组:含... 详细信息

目的探讨P17-BMP2对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖和成骨分化的影响。方法体外培养Wistar大鼠BMSCs,分4组培养:对照组(A组)、成骨诱导组(B组)、成骨诱导+P17-BMP2组(C组)、单纯P17-BMP2组(D组)。A组:采用普通DMEM培养基培养;B组:含地塞米松10-7mol/L、Vit C 10 mg/L及β-甘油磷酸钠(β-sodium glycerophos-phate,β-GP)10 mmol/L的DMEM培养基培养;C组:成骨诱导液+P17-BMP2(10μg/mL)培养;D组:含P17-BMP2(10μg/mL)的DMEM培养基培养。CCK-8法检测培养第1、3、5、7天时细胞增殖情况;培养1周后,碱性磷酸酶染色(Alkaline phosphatase,ALP),实时定量PCR检测骨钙素(Osteocalcin,OCN)、骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)、转录因子(Runt-related transcription factor 2,Runx2)的mRNA表达。结果与A组相比,D组对大鼠BMSCs增殖无影响,而B组对BMSCs细胞增殖具有促进作用,C组细胞增殖能力显著提高;各组碱性磷酸酶染色均为阳性,但染色强度有差异,C组>B组>D组>A组;Q-PCR检测结果显示:与A相比,B组和C组中所有检测基因的表达均显著提高。结论 P17-BMP2能协同成骨诱导剂促进BMSCs的成骨分化。

关键词：骨髓间充质干细胞 P-骨形态发生蛋白增殖成骨分化

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HTGF-β1基因转染脂肪干细胞及其表达

引用

解剖科学进展 2011年第2期17卷 97-100,103页

作者：夏万尧孙恒赟陈瑾君刘伟周广东曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海组织工程重点实验室上海200011

目的探讨携带人转化生长因子β1(hTGF-β1)的腺病毒载体(adeno-hTGF-β1)转染人脂肪干细胞(ADSCs)及其表达的可行性。方法重组adeno-hTGF-β1经293细胞包装、扩增后,转染人ADSCs。转染72h后,RT-PCR检测重组腺病毒转染后ADSCs的hTGF-β1 ... 详细信息

目的探讨携带人转化生长因子β1(hTGF-β1)的腺病毒载体(adeno-hTGF-β1)转染人脂肪干细胞(ADSCs)及其表达的可行性。方法重组adeno-hTGF-β1经293细胞包装、扩增后,转染人ADSCs。转染72h后,RT-PCR检测重组腺病毒转染后ADSCs的hTGF-β1 mRNA表达,免疫细胞化学染色定性和酶联免疫吸附(ELASA)定量测定hTGF-β1蛋白的表达。结果转染后72h,ADSCs能有效表达hTGF-β1 mRNA,免疫细胞化学证实重组腺病毒转染后ADSCs胞浆内有大量棕黄色的hTGF-β1蛋白表达,ELISA结果提示其hTGF-βl表达量是转染Adeno-lacZ的3.85倍(<0.05)。结论重组腺病毒adeno-hTGF-β1能够被导入ADSCs并表达hTGF-β1蛋白,为hTGF-β1基因转染的ADSCs在软骨组织工程应用中奠定了基础。

关键词：脂肪干细胞基因转染腺病毒转化生长因子β1

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Tenomodulin基因转染对NIH3T3和C3H10T1/2细胞系肌腱相关分子表达的作用

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组织工程与重建外科杂志 2011年第1期7卷 6-10页

作者：蒋永康何晶李洁曹谊林刘伟上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市200011

目的研究过表达Tenomodulin(TNMD)对NIH3T3和C3H10T1/2细胞系肌腱相关分子表达的作用。方法体外培养NIH3T3和C3H10T1/2细胞系,利用脂质体法在两种细胞系中分别转染pCAGGS空载体和pCAGGS-TNMD表达载体,G418进行稳定筛选。RT-PCR确认成功... 详细信息

目的研究过表达Tenomodulin(TNMD)对NIH3T3和C3H10T1/2细胞系肌腱相关分子表达的作用。方法体外培养NIH3T3和C3H10T1/2细胞系,利用脂质体法在两种细胞系中分别转染pCAGGS空载体和pCAGGS-TNMD表达载体,G418进行稳定筛选。RT-PCR确认成功转染后,利用倒置相差显微镜观察细胞形态,同时定量PCR检测肌腱相关基因的表达情况。结果两种细胞系转染后细胞形态均无明显改变。基因水平上,NIH3T3细胞过表达TNMD后,collagenⅥ和biglycan显著降低,collagenⅠ没有显著差别。而在C3H10T1/2细胞中,collagenⅠ和biglycan显著升高,collagenⅥ没有显著差别。结论过表达TNMD对NIH3T3和C3H10T1/2细胞系的细胞形态没有影响,但能影响肌腱相关基因的表达情况。

关键词：肌腱过表达 Tenomodulin NIH3T3 C3H10T1/2

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同种异体软骨细胞与自体骨髓基质干细胞混合共培养构建软骨皮下移植的可行性研究

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中国美容医学 2011年第1期20卷 73-76页

作者：李琼张路周广东刘豫刘伟曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海市组织工程重点实验室上海200011

背景:软骨组织工程的种子细胞问题是目前研究的热点和难点,如何找到一种既能够避免对自体软骨进行取材又能够达到稳定软骨构建目的的方法呢?本研究尝试利用少量同种异体羊软骨细胞作为软骨诱导微环境提供者,与扩增后的羊自体BMSC混合共... 详细信息

背景:软骨组织工程的种子细胞问题是目前研究的热点和难点,如何找到一种既能够避免对自体软骨进行取材又能够达到稳定软骨构建目的的方法呢?本研究尝试利用少量同种异体羊软骨细胞作为软骨诱导微环境提供者,与扩增后的羊自体BMSC混合共培养并植入皮下环境,探讨利用同种异体软骨细胞共培养构建软骨皮下移植的可行性。方法:本实验对山羊软骨细胞和BMSC分别进行取材和分离培养扩增,并将以上细胞分为以下四组进行混合并接种在PGA支架材料上:A组:100%自体软骨细胞;B组:30%自体软骨细胞+70%自体BMSCs;C组:30%同种异体软骨细胞+70%自体BMSCs;D组:100%同种异体软骨细胞。经过体外构建6周后植入羊皮下进行体内构建12周,对所形成的组织块进行大体观察和组织学染色等评价。结果:自体软骨细胞组和自体软骨细胞混合自体BMSC组皮下移植后可见成熟软骨组织形成,但同种异体软骨细胞参与的两组(包括同种异体软骨细胞混合自体BMSC的实验组和单纯异体软骨细胞组)在皮下环境中都因为较强的免疫反应未能形成软骨组织。结论:同种异体软骨细胞以及PGA支架材料的存在对于组织工程软骨在羊皮下环境的构建有负面影响。

关键词：同种异体软骨细胞骨髓基质干细胞软骨组织工程

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睾丸Leydig干细胞分离、纯化及鉴定的体外研究

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组织工程与重建外科杂志 2011年第4期7卷 186-190,206页

作者：肖斌王晓云周广东周英晋毕宏达朱吉张敬德邢新第二军医大学附属长海医院整形外科上海市200433 上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市200011

目的改进Leydig干细胞的分离及纯化方法,观察其生物学特性并进行鉴定。方法通过胶原酶消化、差速贴壁法及双抗体免疫磁珠分选法,从大鼠睾丸内获得Leydig干细胞。以条件培养液进行培养,采用CCK法测定增殖能力。通过PDGFRα、LIFR及3β-HS... 详细信息

目的改进Leydig干细胞的分离及纯化方法,观察其生物学特性并进行鉴定。方法通过胶原酶消化、差速贴壁法及双抗体免疫磁珠分选法,从大鼠睾丸内获得Leydig干细胞。以条件培养液进行培养,采用CCK法测定增殖能力。通过PDGFRα、LIFR及3β-HSD免疫组织化学染色鉴定Leydig干细胞。经定向诱导分化后,检测Leydig细胞的睾酮分泌能力。结果每个睾丸约可获得83 000个干细胞,经免疫组织化学染色分析,PDGFRα阳性率为(98.0±0.8)%。在条件培养液中培养的SLCs增殖明显,在1个月内能稳定维持其干性而未向Leydig细胞系分化。免疫组织化学染色结果表明,PDGFRα、LIFR阳性表达,3β-HSD为阴性表达。Leydig干细胞在含有T3和HCG的培养液中培养后,第5天即可测到睾酮分泌,分化后的细胞3β-HSD+。结论由差速贴壁法及双抗体免疫磁珠分选法能获得纯化的PDGFRα+/LHR-细胞,这些细胞符合SLCs所必须具有的特征。采用该方法获取SLCs,操作简便,细胞损伤小并且获取纯度高。

关键词： Leydig干细胞磁性活化细胞分选细胞培养分化鉴定

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软骨形态发生蛋白1诱导犬真皮成纤维细胞向软骨细胞表型分化的实验研究

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组织工程与重建外科杂志 2011年第3期7卷 139-142,150页

作者：赵贵庆崔磊曹谊林长沙亚韩医学美容医院湖南省长沙市410000 上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市200011

目的探讨软骨形态发生蛋白1(Cartilage-derived morphogenetic protein-1,CDMP1)诱导体外培养的犬真皮成纤维细胞(Dermal fibroblasts,DFs)向软骨细胞表型分化的可行性。方法应用CDMP1细胞诱导液对体外扩增至第4代的犬DFs进行诱导培养,... 详细信息

目的探讨软骨形态发生蛋白1(Cartilage-derived morphogenetic protein-1,CDMP1)诱导体外培养的犬真皮成纤维细胞(Dermal fibroblasts,DFs)向软骨细胞表型分化的可行性。方法应用CDMP1细胞诱导液对体外扩增至第4代的犬DFs进行诱导培养,观察细胞的形态变化,以免疫荧光染色和RT-PCR检测细胞中软骨特异蛋白的表达情况。结果诱导培养6 d后,实验组部分DFs呈星形或多角形,免疫组化染色显示有软骨特异的II型胶原分泌,RT-PCR检测也表明有Ⅱ型胶原、aggrecan和SOX9表达。但是诱导培养10 d后,均转为阴性。结论 CDMP1可以诱导犬DFs向软骨细胞表型分化,有可能成为组织工程化纤维软骨的种子细胞。

关键词：真皮成纤维细胞纤维软骨细胞软骨形态发生蛋白-1 组织工程

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不同体外诱导时间对BMSCs成软骨分化的组织学特性影响的研究

引用

组织工程与重建外科杂志 2011年第2期7卷 70-74页

作者：周栩周广东张路刘豫朱吉曹谊林中国医学科学院整形外科医院北京市100144 上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市200011

目的探索体外不同时间的成软骨诱导,对骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外成软骨分化的组织学特性的影响。方法以猪第2代BMSCs为种子细胞,以聚羟基乙酸/聚乳酸(PGA/PLA)为支架,体外构建直径12 mm,厚3 mm的圆盘状复合物,联合应用TGF-β1(10 ng/... 详细信息

目的探索体外不同时间的成软骨诱导,对骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外成软骨分化的组织学特性的影响。方法以猪第2代BMSCs为种子细胞,以聚羟基乙酸/聚乳酸(PGA/PLA)为支架,体外构建直径12 mm,厚3 mm的圆盘状复合物,联合应用TGF-β1(10 ng/mL)、IGF-I(50 ng/mL)及地塞米松(40 ng/mL),体外分别诱导1周和4周,并以未经诱导的BMSCs和软骨细胞为对照,分析和比较不同诱导时间对BMSCs体外成软骨分化的影响。结果体外诱导4周的BMSCs-PGA/PLA复合物的组织学结构明显较只诱导1周的致密,软骨特异性基质(如蛋白多糖、Ⅱ型胶原等)表达水平明显高于诱导1周的。结论体外诱导时间对BMSCs软骨定向分化具有重要影响,延长诱导时间可明显促进复合物成熟并增加其软骨基质分泌。

关键词：组织工程骨髓间充质干细胞诱导

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复合生物支架胶原蛋白/壳聚糖及聚乙烯醇/丝胶在大鼠膀胱扩大手术中的应用

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组织工程与重建外科杂志 2011年第4期7卷 202-206页

作者：何竑超戴军吴稼晟李伟窦红静陆国樑王晓晶刘伟孙康沈周俊上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科上海市200025 上海交通大学材料科学与工程学院金属基复合材料国家重点实验室上海市200240 上海市组织工程研究重点实验室上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市200011

目的评价复合生物材料胶原蛋白/壳聚糖及聚乙烯醇/丝胶在膀胱扩大手术中的效果及可行性。方法雌性大鼠21只随机分为3组,即膀胱扩大手术组(实验组:修补材料为胶原蛋白/壳聚糖+聚乙烯醇/丝胶);膀胱部分切除组(对照组)和非手术组(平行对照... 详细信息

目的评价复合生物材料胶原蛋白/壳聚糖及聚乙烯醇/丝胶在膀胱扩大手术中的效果及可行性。方法雌性大鼠21只随机分为3组,即膀胱扩大手术组(实验组:修补材料为胶原蛋白/壳聚糖+聚乙烯醇/丝胶);膀胱部分切除组(对照组)和非手术组(平行对照组)。所有3组实验动物在术后7 d、21 d、42 d进行膀胱容量测定,并取材观察其形态学及组织学改变。结果接受膀胱扩大手术的大鼠,术后各时间点的膀胱容量均明显高于其他两组。大体检查见膀胱血管纹理清晰,修补部位与正常膀胱无明显分界,结石发生率为71.4%。镜下组织学检查发现:术后7 d时,支架外层大量炎症细胞浸润,组织结构无法分清。术后42 d时,支架内层上可见泌尿上皮呈多层排列,黏膜下层增厚明显,但平滑肌层相对稀疏且排列欠规则。结论复合生物支架胶原蛋白/壳聚糖+聚乙烯醇/丝胶能成功应用于大鼠膀胱扩大手术,但存在膀胱平滑肌层再生情况不佳、成石率较高的缺点,有待进一步研究改善。

关键词：胶原蛋白/壳聚糖聚乙烯醇/丝胶组织工程膀胱

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泌尿系统组织工程支架材料胶原蛋白/壳聚糖、聚乙烯醇/丝胶的生物相容性评价

泌尿系统组织工程支架材料胶原蛋白/壳聚糖、聚乙烯醇/丝胶的生物...

引用

华东六省一市泌尿外科学术年会暨2011年浙江省泌尿外科、男科学学术年会

作者：何竑超王晓晶沈周俊吴稼晟李伟窦红静孙康刘伟上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科上海交通大学材料科学与工程学院金属基复合材料国家重点实验室上海市组织工程重点实验室上海交通大学医学院附属第九人民医院

目的评价复合材料胶原蛋白/壳聚糖、聚乙烯醇/丝胶作为泌尿外科组织工程支架的生物相容性和生物安全性。方法采用溶血试验评价胶原蛋白/壳聚糖、聚乙烯醇/丝胶两种复合材料对红细胞功能和代谢的影响;采用致热原试验评价两种复合材料中... 详细信息

目的评价复合材料胶原蛋白/壳聚糖、聚乙烯醇/丝胶作为泌尿外科组织工程支架的生物相容性和生物安全性。方法采用溶血试验评价胶原蛋白/壳聚糖、聚乙烯醇/丝胶两种复合材料对红细胞功能和代谢的影响;采用致热原试验评价两种复合材料中所含热原的限度是否符合规定;采用皮肤致敏试验评价两种材

关键词：组织工程支架材料生物安全性生物相容性胶原蛋白壳聚糖泌尿系统聚乙烯醇

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