检索结果-内蒙古大学图书馆

上海交通大学学报（医学版） 2008年第2期28卷 228-231页

作者：周佳沈尊理金羽青刘伟沈华上海交通大学第一人民医院整形外科上海200080 上海交通大学医学院第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海200011

目的研究在体外快速获得骨髓基质干细胞及纯化的方法。方法采用流式细胞仪筛选法获得CD45-、CD90+原代细胞,复合胶原酶差速消化逐级传代、纯化;对第3代(P3代)细胞进行脂肪细胞、软骨细胞、骨细胞三向诱导;2～4周后,分别行oilred’O、Saf... 详细信息

目的研究在体外快速获得骨髓基质干细胞及纯化的方法。方法采用流式细胞仪筛选法获得CD45-、CD90+原代细胞,复合胶原酶差速消化逐级传代、纯化;对第3代(P3代)细胞进行脂肪细胞、软骨细胞、骨细胞三向诱导;2～4周后,分别行oilred’O、Safranin’O和茜素红染色,倒置显微镜下观察诱导结果。结果经流式细胞仪初筛和复合胶原酶差速消化,传代至P3代,细胞形态已呈现均一性。向脂肪细胞诱导后第4周,oilred’O染色见细胞内大量红染的脂滴;向软骨细胞诱导后第4周,Safranin’O染色见多数切片呈阳性,细胞团块中存在大量软骨特异性的陷窝样结构;向骨细胞诱导后第4周,茜素红染色发现肉眼可见广泛散在的红色阳性钙结节。结论本研究所采用的流式细胞仪初筛和复合胶原酶差速消化法,可快速获得高纯度的骨髓基质干细胞。

关键词：骨髓基质干细胞纯化流式筛选复合胶原酶

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不同比例的PLA-PGA支架对软骨细胞复合的影响

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组织工程与重建外科杂志 2008年第6期4卷 305-307页

作者：张路李琼周广东邓丹刘伟曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海市200011

目的研究经聚乳酸(PLA)包埋后的不同比例PLA-聚羟基乙酸(PGA)组织工程支架对软骨细胞复合的影响及原因。方法分离培养小猪软骨细胞,并以5×107cells/mL的密度接种在经PLA包埋的不同比例PGA-PLA支架材料上,4h后检测软骨细胞在支架材... 详细信息

目的研究经聚乳酸(PLA)包埋后的不同比例PLA-聚羟基乙酸(PGA)组织工程支架对软骨细胞复合的影响及原因。方法分离培养小猪软骨细胞,并以5×107cells/mL的密度接种在经PLA包埋的不同比例PGA-PLA支架材料上,4h后检测软骨细胞在支架材料上的流失率,24h后检测软骨细胞在支架材料上的粘附率,并对支架材料进行电镜扫描,分析原因。结果随着支架材料中PLA比例的提高,软骨细胞的接种流失率上升,支架材料的接种负荷下降,24h时软骨细胞粘附率无明显差异。扫描电镜证实其原因。结论PLA包埋的PGA支架材料会降低对软骨细胞的接种负荷,但细胞粘附率无变化。

关键词：组织工程聚羟基乙酸聚乳酸粘附率软骨细胞

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骨髓基质细胞修复颅骨缺损的实验研究

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组织工程与重建外科杂志 2008年第4期4卷 189-191页

作者：张艳柴岗麻荪香袁捷上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市200011

目的为验证三维打印研究中动物模型的可靠性,采用骨髓基质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)修复裸鼠颅骨缺损。方法共10只裸鼠,其中实验组(n=5只):颅骨缺损区植入BMSCs/脱钙骨;材料对照组:颅骨缺损区植入单纯脱钙骨,... 详细信息

目的为验证三维打印研究中动物模型的可靠性,采用骨髓基质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)修复裸鼠颅骨缺损。方法共10只裸鼠,其中实验组(n=5只):颅骨缺损区植入BMSCs/脱钙骨;材料对照组:颅骨缺损区植入单纯脱钙骨,采用实验组自身对照(n=5只);空白对照组(n=5只):双侧颅骨区造成缺损后旷置。术后3个月取材进行大体观察、组织学和免疫组化(骨钙蛋白)检查。结果术后3个月,实验侧组织质地较硬,组织学表现为骨结构,骨钙蛋白免疫组化阳性;对照侧质地较软,组织学表现为结缔组织,骨钙蛋白免疫组化阴性;空白对照组仍表现为颅骨缺损。结论采用BMSCs可修复裸鼠颅骨缺损,验证了三维打印研究中动物模型的可靠性。

关键词：骨缺损组织工程骨髓基质干细胞

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Scleraxis和Tenomodulin在肌腱发育成熟中的作用

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国际生物医学工程杂志 2008年第6期31卷 365-368页

作者：蒋永康刘伟上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海市组织工程重点实验室

肌腱是连接肌肉和骨骼系统的的致密结缔组织。目前,临床上肌腱损伤的治疗尚无很好的方法,应用组织工程化技术构建肌腱进行修复为肌腱损伤的治疗提供了良好的前景。了解肌腱的发育成熟过程对组织工程化肌腱构建是相当重要的。Scleraxis ... 详细信息

肌腱是连接肌肉和骨骼系统的的致密结缔组织。目前,临床上肌腱损伤的治疗尚无很好的方法,应用组织工程化技术构建肌腱进行修复为肌腱损伤的治疗提供了良好的前景。了解肌腱的发育成熟过程对组织工程化肌腱构建是相当重要的。Scleraxis 和 Tenomodulin 是肌腱和韧带相对特异的分子标志,在肌腱发育成熟中起了重要作用。就 Scleraxis 和 Tenomodulin 的分子结构、在肌腱发育成熟中的作用和其调控予以综述,以加深对肌腱发育过程的认识。

关键词：肌腱发育 Scleraxisi Tenomodulin

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人脂肪来源细胞体内构建组织工程化脂肪的实验研究

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组织工程与重建外科杂志 2008年第2期4卷 89-93页

作者：薛桂松张英蒋婷郭妤周广东祁佐良上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市200011

目的探讨以组织工程技术,应用脂肪来源细胞(Adipose-derived cells,ADCs)体内构建脂肪组织的可行性。方法吸脂术获得人脂肪组织,一部分直接植入裸鼠体内;另一部分用酶消化法分离、培养ADCs,将第三代细胞接种于纤维凝胶(Fibrin glue)支架... 详细信息

目的探讨以组织工程技术,应用脂肪来源细胞(Adipose-derived cells,ADCs)体内构建脂肪组织的可行性。方法吸脂术获得人脂肪组织,一部分直接植入裸鼠体内;另一部分用酶消化法分离、培养ADCs,将第三代细胞接种于纤维凝胶(Fibrin glue)支架中,经成脂肪培养液诱导1周后,植入裸鼠体内,4周后取材,用称重法及油红、HE染色检测结果。实验分为直接注射脂肪组、单纯支架组、细胞-支架复合体脂肪诱导组、非诱导组。结果直接注射组在裸鼠皮下形成脂肪组织,但吸收量大;细胞-支架复合体诱导组有大量脂肪类组织形成,油红染色显示组织有脂滴形成;细胞-支架复合体非诱导组和单纯支架组均未发现脂肪组织形成。结论采用组织工程技术将吸脂术获得脂肪来源细胞接种纤维凝胶支架,体内构建脂肪组织,具有可行性。

关键词：脂肪来源细胞组织工程脂肪纤维凝胶体内

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构建组织工程化耳廓软骨修复体

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中国美容医学 2008年第10期17卷 1552-1554页

作者：张路周广东曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海市组织工程重点实验室上海200011

因先天性小耳畸形、外伤、肿瘤造成的外耳缺损或缺失在临床中较为常见。目前治疗的手段主要是采用切取的自体肋软骨，并对其雕刻成型重建患耳。但其不同程度的存在耳廓造型不一，供区继发缺损等问题。组织工程技术嘲的出现无疑为无（微... 详细信息

因先天性小耳畸形、外伤、肿瘤造成的外耳缺损或缺失在临床中较为常见。目前治疗的手段主要是采用切取的自体肋软骨，并对其雕刻成型重建患耳。但其不同程度的存在耳廓造型不一，供区继发缺损等问题。组织工程技术嘲的出现无疑为无（微）创修残补缺提供了可能。目前的软骨组织工程技术主要是利用自体软骨细胞或成体干细胞作为种子细胞，接种在具有三维多孔结构的可降解支架上，通过特定的培养构建方法，最终形成软骨组织以修复缺损。

关键词：耳廓软骨组织工程化修复体组织工程技术先天性小耳畸形自体软骨细胞外耳缺损自体肋软骨

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自体骨髓基质干细胞复合珊瑚修复犬下颌骨节段缺损的初步研究

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中华整形外科杂志 2007年第1期23卷 51-55页

作者：袁捷刘广鹏柴岗刘波许锋崔磊刘伟曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室200011

目的应用自体骨髓基质干细胞（bone marrow stromal cells，BMSCs）复合珊瑚构建组织工程化骨，修复犬下颌骨节段性缺损。方法体外扩增培养、成骨诱导犬BMSCs。将第二代细胞复合珊瑚后修复犬自体右侧3cm的下颌骨节段缺损（n=6）；以单... 详细信息

目的应用自体骨髓基质干细胞（bone marrow stromal cells，BMSCs）复合珊瑚构建组织工程化骨，修复犬下颌骨节段性缺损。方法体外扩增培养、成骨诱导犬BMSCs。将第二代细胞复合珊瑚后修复犬自体右侧3cm的下颌骨节段缺损（n=6）；以单纯珊瑚植入缺损处为对照（n=6），术后12、32周分别通过影像学，大体形态观察，组织学和生物力学的方法检测骨缺损的修复效果。结果成骨诱导的BMSCs在珊瑚支架上生长良好。X线片显示12周时实验组骨痂较多，对照组材料明显吸收；32周时CT、X线片和大体观察显示术后实验组骨愈合良好，对照组为骨不连；骨密度检测示实验组显著高于对照组（P〈0．05）；组织学示实验组有较多成熟骨呈骨性愈合，对照组为纤维性愈合；生物力学测试实验组与正常下颌骨力学强度差异无统计学意义（P〉0．05）。结论自体成骨诱导BMSCs复合珊瑚形成的组织工程化骨可修复犬下颌骨节段缺损。

关键词：下颌骨骨髓基质干细胞珊瑚组织工程

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软骨细胞与骨髓基质细胞共培养构建软骨的体内评价

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中华医学杂志 2007年第27期87卷 1929-1933页

作者：刘霞周广东吕晓杰刘天一张文杰刘伟曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海市组织工程重点实验室 200011

目的探讨软骨细胞与骨髓基质细胞（BMSC）共培养体外构建复合物体内植入形成成熟软骨组织的可行性。方法体外培养扩增猪BMSC，经绿色荧光蛋白（EGFP）基因转染标记后，与猪关节软骨细胞按1：1比例混合，以5．0×10^7／ml的细胞终浓... 详细信息

目的探讨软骨细胞与骨髓基质细胞（BMSC）共培养体外构建复合物体内植入形成成熟软骨组织的可行性。方法体外培养扩增猪BMSC，经绿色荧光蛋白（EGFP）基因转染标记后，与猪关节软骨细胞按1：1比例混合，以5．0×10^7／ml的细胞终浓度接种于聚羟基乙酸／聚乳酸（PGA／PLA）材料支架作为共培养组，以相同终浓度的单纯软骨细胞和单纯BMSC分别接种PGA／PLA作为阳性对照组及阴性对照组。各组标本均于体外培养2周后植于裸鼠皮下，8周后取材，通过大体观察、激光共聚焦显微镜观察、糖胺聚糖含量测定、生物力学、组织学以及免疫组织化学等方法对新生软骨组织进行全面评价。结果各组细胞均与材料黏附良好。体内植入8周后，共培养组及阳性对照组标本基本保持植入前的大小和形状，外观类似软骨组织，组织学显示两组均有连续的软骨陷窝样结构形成，免疫组织化学显示有大量Ⅱ型胶原沉积。定量测定结果显示，共培养组的糖胺聚糖含量和弹性模量均达到软骨细胞构建软骨组织的80％以上。共聚焦显微镜观察可见EGFP标记细胞形成了软骨陷窝。阴性对照组标本的体积较植入前明显缩小，组织学及免疫组织化学均未见软骨样组织形成。结论软骨细胞与BMSC共培养构建的复合物植入体内后能继续形成成熟软骨组织，这表明植入体内后软骨细胞仍能保持对BMSC的诱导作用。

关键词：骨髓基质细胞软骨细胞共同培养软骨形成

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血清浓度影响骨髓基质干细胞体外软骨分化的实验研究

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中华整形外科杂志 2007年第5期23卷 405-408页

作者：刘天一周广东刘霞魏娴陈付国武晓莉崔磊刘伟曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海市组织工程重点实验室200011

目的探讨含有不同浓度胎牛血清的成软骨分化诱导液对骨髓基质干细胞（BMSCs）体外分化的影响，明确体外培养用血清在细胞分化中的作用，为软骨的体外组织构建提供技术参数。取第2代猪BMSCs，以5×10^7个细胞/cm^3的密度接种到聚羟... 详细信息

目的探讨含有不同浓度胎牛血清的成软骨分化诱导液对骨髓基质干细胞（BMSCs）体外分化的影响，明确体外培养用血清在细胞分化中的作用，为软骨的体外组织构建提供技术参数。取第2代猪BMSCs，以5×10^7个细胞/cm^3的密度接种到聚羟基乙酸（PGA）制成的圆盘状支架上（直径5mm，厚度2mm），7d后分别应用含0％、5％、10％血清浓度的诱导液（诱导因子包括TGF-1、IGF-Ⅰ及地塞米松）进行体外持续性诱导培养。8周取材行组织湿重测量、GAG含量定量分析、大体观察、组织学、组织化学及免疫组织化学检测。结果 10％血清组复合物外观瓷白色，坚硬细腻，体积和外形均无明显变化。组织学及免疫组织化学检测结果显示有典型的软骨陷窝，大量的软骨特异性细胞外基质成分，组织湿重和GAG定量亦明显高于其它两组；3％血清组复合物体积缩小．有少量陷窝样结构及软骨特异性胞外基质聚集；而无血清组复合物缩小，松软易碎，未见典型的软骨陷窝和软骨特异性基质成分。结论体外诱导培养BMSCs构建组织工程软骨过程中，10％浓度的血清成分有利于BMSCs成软骨分化。

关键词：骨髓基质干细胞软骨体外研究

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皮肤成纤维细胞构建组织工程化猪角膜基质样组织

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上海交通大学学报（医学版） 2007年第2期27卷 156-160页

作者：张艳青张文杰胡晓洁周广东崔磊刘伟曹谊林上海交通大学医学院第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室

目的探讨以皮肤成纤维细胞为种子细胞,在猪角膜微环境中构建组织工程化角膜基质组织的可行性。方法分离获取胎猪皮肤成纤维细胞经体外培养、扩增。通过转染绿色荧光蛋白(GFP)基因标记细胞,示踪细胞的转归。选取第3代的细胞接种于可吸收... 详细信息

目的探讨以皮肤成纤维细胞为种子细胞,在猪角膜微环境中构建组织工程化角膜基质组织的可行性。方法分离获取胎猪皮肤成纤维细胞经体外培养、扩增。通过转染绿色荧光蛋白(GFP)基因标记细胞,示踪细胞的转归。选取第3代的细胞接种于可吸收生物材料聚羟基乙酸(PGA),形成细胞-生物材料复合物,体外培养1周后,移植于猪的角膜基质层内,于第8周取材进行大体、组织学检查及超微结构观察。以角膜基质细胞为种子细胞构建的组织工程化角膜基质组织作为对照。结果术后8周,实验组角膜逐渐恢复透明,与对照组角膜无明显差别。组织学检查显示形成新生的角膜基质样组织,呈板层状,排列较规则,与对照组角膜组织相似。超微结构观察及胶原纤维直径检测显示,实验组与对照组角膜组织差异无统计学意义。荧光显微镜观察到GFP阳性细胞存在。结论皮肤成纤维细胞可能替代角膜基质细胞,在猪角膜内构建角膜基质样组织。

关键词：组织工程角膜基质皮肤成纤维细胞

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