检索结果-内蒙古大学图书馆

组织工程与重建外科杂志 2014年第2期10卷 82-84,99页

作者：曲淼武晓莉柴岗上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市200011

目的比较瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)和正常真皮成纤维细胞(NFs)间克隆形成能力的差异,探讨瘢痕疙瘩中病理性干细胞是否存在,及其对瘢痕疙瘩发生发展的影响。方法利用酶消化法获得瘢痕疙瘩和正常皮肤组织的原代细胞,以4 000个/皿的密度接种... 详细信息

目的比较瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)和正常真皮成纤维细胞(NFs)间克隆形成能力的差异,探讨瘢痕疙瘩中病理性干细胞是否存在,及其对瘢痕疙瘩发生发展的影响。方法利用酶消化法获得瘢痕疙瘩和正常皮肤组织的原代细胞,以4 000个/皿的密度接种,进行低密度培养,2周后观察细胞克隆的形成及形态变化。结果低密度培养条件下的瘢痕疙瘩成纤维细胞和正常皮肤成纤维细胞都可形成克隆,但KFs可形成明显的克隆集落,NFs形成的克隆不明显且松散。KFs克隆形成率高于NFs,为(0.80±0.21)%,而NFs为(0.18±0.06)%,两者间差异显著(P<0.05)。结论低密度培养条件下,瘢痕疙瘩成纤维细胞的克隆形成能力高于正常皮肤成纤维细胞,可能与瘢痕疙瘩组织中存在病理性瘢痕疙瘩干细胞有关。

关键词：瘢痕疙瘩低密度培养克隆形成率瘢痕疙瘩干细胞

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软骨细胞生物打印后细胞活力分析

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组织工程与重建外科杂志 2014年第1期10卷 11-13页

作者：曲淼沈聪聪侯亦康许佑荣柴岗高晓燕上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室200011 上海市周浦医院 201318

目的：初步确立软骨细胞的二维生物打印方法，实现对细胞喷射过程的控制并保持打印后的细胞活力。方法取原代软骨细胞，常规培养至第2代。实验分2组：打印组，快速成型组织打印机进行二维细胞打印，X轴间隔300μm， Y轴间隔1500μm，激... 详细信息

目的：初步确立软骨细胞的二维生物打印方法，实现对细胞喷射过程的控制并保持打印后的细胞活力。方法取原代软骨细胞，常规培养至第2代。实验分2组：打印组，快速成型组织打印机进行二维细胞打印，X轴间隔300μm， Y轴间隔1500μm，激光共聚焦显微镜观察，经生物打印后培养2 h，Live/Dead viability Kit测定细胞活力，激光共聚焦显微镜观察细胞荧光染色情况；对照组除细胞悬液不行打印，其余操作同打印组。结果打印组细胞激光共聚焦显微镜观察，“细胞墨滴”在二维组织中均匀分布，满足二维设计细胞打印的要求，每个“细胞墨滴”含细胞15-35个。细胞活力测试显示，打印组细胞活力与对照组无明显区别。结论通过生物打印技术可实现软骨细胞在二维平面上的定向、定量规则分布，为进一步的细胞三维打印乃至器官打印体系奠定基础。

关键词：软骨细胞细胞打印组织工程

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以PECAM-1为标志去除残留未分化胚胎干细胞的研究

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组织工程与重建外科杂志 2014年第6期10卷 301-304页

作者：王玲唐郑雅付炜张文杰上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市200011 组织工程国家工程研究中心

目的以血小板内皮细胞黏附分子-1（Platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1）为标志,去除小鼠胚胎干细胞（Embryonic stem cells,ESCs）中残留未分化的细胞,以去除其致瘤性,为ESCs在研究中的安全应用提供思路。方法 ... 详细信息

目的以血小板内皮细胞黏附分子-1（Platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1）为标志,去除小鼠胚胎干细胞（Embryonic stem cells,ESCs）中残留未分化的细胞,以去除其致瘤性,为ESCs在研究中的安全应用提供思路。方法将小鼠R1胚胎干细胞株在撤去白血病抑制因子的培养基中悬浮培养6 d,体外自发分化形成类胚体,消化打散后,以PECAM-1为标志进行磁珠分选,得到阳性与阴性细胞群体,分别以2×10^6个/点注射入裸鼠背部皮下,6-8周后观察畸胎瘤形成情况,组织学分析瘤体构成。结果裸鼠背部成瘤结果显示,PECAM-1^＋细胞群注射8个点中7个成瘤,成瘤率87.5%;而PECAM-1^-细胞群注射8个点中1个成瘤,成瘤率12.5%。PECAM-1^＋细胞群与PECAM-1^-细胞群成瘤率具有统计学差异（P=0.01）。结论应用PECAM-1可去除体外分化过程中的残留未分化ESCs,并去除其致瘤性。

关键词：胚胎干细胞残留血小板内皮细胞黏附分子-1

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软骨细胞膜片修复山羊气管的实验研究

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组织工程与重建外科杂志 2014年第3期10卷 135-140页

作者：陶然刘浥陈洁何爱娟周广东曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市200011 上海市组织工程国家工程研究中心 200241

目的探讨软骨细胞膜片技术构建的组织工程软骨,修复大型哺乳动物气管缺损的方法。方法取6头山羊耳廓软骨细胞为种子细胞,利用细胞膜片技术构建软骨组织。膜片体外培养6周,回植到动物腹部皮下;3例在皮下埋置8周后包裹于硅胶管上,移植到... 详细信息

目的探讨软骨细胞膜片技术构建的组织工程软骨,修复大型哺乳动物气管缺损的方法。方法取6头山羊耳廓软骨细胞为种子细胞,利用细胞膜片技术构建软骨组织。膜片体外培养6周,回植到动物腹部皮下;3例在皮下埋置8周后包裹于硅胶管上,移植到颈旁进行再血管化和塑形,8周后带肌肉蒂修复气道缺损(带蒂移植组);另3例在皮下埋置16周后,直接用于气道缺损修复(游离移植组)。动物气管缺损范围均为3个气管环长的全段缺损。结果所有膜片在体外培养6周后,均能形成较为成熟的软骨样组织。带蒂移植组在皮下埋置8周后能形成成熟软骨组织,移植到颈旁肌肉能成功再血管化和塑形。气管缺损修复术后,带蒂移植组均能带T型管长期存活(14周),但拔出T型管后均在2周内死亡。取材时发现,带蒂移植组修复段组织工程软骨仍然存活,并在相应部位维持了很好的管壁外形,但是没有软骨外壁的部位发生明显塌陷;内壁结缔组织增生严重,阻塞管腔。游离移植组在皮下埋置16周后,也形成了成熟软骨组织。移植修复后,在T型管存在的情况下,均在术后2周内死亡。取材发现,修复段气道均发生了严重的组织坏死感染,并波及周边组织;组织学观察仅能发现少数散在的组织工程软骨组织。结论软骨细胞膜片技术是稳定可靠的组织工程软骨构建方法;在气道复杂环境中,游离移植的软骨补片会在短时间内发生坏死;带蒂移植能保证修复段组织的存活,但是完整的软骨外壁和内壁提前(或尽快)上皮化是修复成功的关键。

关键词：组织工程化软骨细胞膜片气道重建上皮化

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低分子凝胶M2和交联透明质酸作为可注射性软骨再生支架的可行性研究

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组织工程与重建外科杂志 2014年第6期10卷 305-308,313页

作者：殷宗琦李萍李丹刘浥汪振星刘豫冯传良周广东上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室组织工程国家工程研究中心上海市200041 上海交通大学材料科学与工程学院上海市200240

目的探讨以低分子量凝胶M2和交联透明质酸(Hyaluronic acid,HA)作为可注射性支架材料,在裸鼠体内构建组织工程软骨的可行性。方法常规分离、体外单层培养新生猪耳软骨细胞,将获得的软骨细胞以50×106 cells/m L和100×106cells/... 详细信息

目的探讨以低分子量凝胶M2和交联透明质酸(Hyaluronic acid,HA)作为可注射性支架材料,在裸鼠体内构建组织工程软骨的可行性。方法常规分离、体外单层培养新生猪耳软骨细胞,将获得的软骨细胞以50×106 cells/m L和100×106cells/m L的浓度分别与M2凝胶混合,以100×106 cells/m L的浓度与交联HA混合,分别注射于裸鼠皮下,并于8周后取材。以单纯M2凝胶及单纯HA作为对照组。通过大体观察、组织化学检查、湿重测定、力学检测、蛋白聚糖(Glycosaminoglycan,GAG)含量测定,判断低分子量凝胶M2及交联透明质酸在体内形成软骨的能力。结果实验组3组均可形成软骨样组织块。其中,M2+高浓度细胞组体积最大、质地较硬、表面光滑,软骨细胞位于成熟的陷窝中;M2+低浓度细胞组形成与高浓度细胞组质地相似的组织块,但体积相对较小;HA组形成不成熟的组织块,硬度差,含有的细胞数和分泌的基质最少。同时,实验组3组的力学和GAG含量结果也证实M2+高浓度细胞形成的软骨更加成熟。各组间具有显著性差异。2个对照组未有类软骨组织形成。结论低分子凝胶M2与软骨细胞的生物相容性优于交联HA,更适合作为可注射性支架材料用于组织工程化软骨的构建。

关键词：低分子凝胶交联透明质酸可注射支架材料组织工程化软骨

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利用软骨细胞膜片技术在山羊皮下构建软骨样组织的研究

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组织工程与重建外科杂志 2013年第2期9卷 61-65页

作者：陶然刘浥殷宗琦汪振星李丹周广东上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市组织工程国家工程中心

目的探讨软骨细胞膜片技术在大型哺乳动物体内构建软骨的优越性。方法以山羊耳廓软骨细胞为种子细胞,分别利用细胞膜片技术(实验组)和细胞复合PGA/PLA支架材料的方法(对照组)构建软骨组织。体外培养4周回植到动物腹部皮下,分别于回植前... 详细信息

目的探讨软骨细胞膜片技术在大型哺乳动物体内构建软骨的优越性。方法以山羊耳廓软骨细胞为种子细胞,分别利用细胞膜片技术(实验组)和细胞复合PGA/PLA支架材料的方法(对照组)构建软骨组织。体外培养4周回植到动物腹部皮下,分别于回植前、回植后4周及回植后8周时采集标本,观察比较两组软骨形成情况。结果体外培养4周后,两组均形成一定量的软骨样组织,但对照组可见未降解的材料纤维;体内构建4周后,实验组形成成熟软骨样组织,对照组为纤维结缔组织替代,伴有大量炎性细胞浸润;体内培养8周时,实验组较4周前无明显变化,对照组体积明显缩小,仍为纤维结缔组织。结论软骨细胞膜片技术与细胞复合PGA/PLA支架材料构建组织工程软骨方法相比,原代细胞用量少,体外培养时间短,在大动物体内能形成成熟软骨,具有更广泛的临床应用前景。

关键词：组织工程化软骨细胞膜片聚乙酸聚乳酸炎症反应

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应用p75神经营养因子低亲和力受体(p75NTR)作为小鼠毛囊干细胞分选标志物的研究

应用p75神经营养因子低亲和力受体(p75NTR)作为小鼠毛囊干细胞分...

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第六届全国组织工程与再生医学大会

作者：段惠川上海市组织工程重点实验室上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海200011

目的:本研究旨在检测p75NTR在毛囊发育及成熟后的周期性变化过程中的表达情况,并进一步确定p75NTR与已知的毛囊干细胞标志物的共定位情况,最后通过体内实验检测p75NTR阳性和阴性毛囊细胞的成毛能力,以证明p75NTR阳性毛囊细胞的干细胞特... 详细信息

目的:本研究旨在检测p75NTR在毛囊发育及成熟后的周期性变化过程中的表达情况,并进一步确定p75NTR与已知的毛囊干细胞标志物的共定位情况,最后通过体内实验检测p75NTR阳性和阴性毛囊细胞的成毛能力,以证明p75NTR阳性毛囊细胞的干细胞特性. 方法:首先检测从新生到生后56天这一漫长过程中不同时间点p75NTR在C57小鼠背部毛囊中的表达情况,并检测其与毛囊标志物K14,K15的共表达情况,通过流式分析检测p75NTR在不同毛囊不同周期的表达量,最后将流式分选得到的阳性细胞回植于裸鼠体内观测其成毛能力. 结果:从新生到毛囊成熟的漫长过程中p75NTR的表达呈现周期性的规律变化，并且其与已知的毛囊干细胞标志物有一定的共表达，最重要的是p75NTR阳性细胞能够参与形成毛囊及皮脂腺、汗腺等毛囊附件，甚至形成表皮。结论:p75NTR可能是一个合适的毛囊干细胞的分选标志。

关键词：毛囊干细胞神经营养因子低亲和力受体分选标志物成毛能力

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骨髓间充质干细胞体外构建组织工程化半月板

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组织工程与重建外科杂志 2013年第5期9卷 251-255,278页

作者：李丹周广东刘浥殷宗琦汪振星祝联上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市200011 上海市组织工程(上海)国家工程中心 200241

目的探索以骨髓间充质干细胞(BMSCs)为种子细胞,在体外构建具有完整内侧半月板形态的软骨样组织的方法。方法运用模具制备内侧半月板形的PGA/PLA支架。抽取犬骨髓,分离培养BMSCs,将其接种于支架材料上,5 d后使用软骨诱导液培养。体外培... 详细信息

目的探索以骨髓间充质干细胞(BMSCs)为种子细胞,在体外构建具有完整内侧半月板形态的软骨样组织的方法。方法运用模具制备内侧半月板形的PGA/PLA支架。抽取犬骨髓,分离培养BMSCs,将其接种于支架材料上,5 d后使用软骨诱导液培养。体外培养6周后,行大体观察、组织学检测及生物力学检测。结果细胞材料复合物能够较好地维持半月板三维立体结构,形成了表面光滑、触之有弹性的瓷白色软骨样组织。HE染色可见典型的软骨陷窝出现,说明成熟软骨组织的形成。Safranine O染色证实有蛋白聚糖基质产生。生物力学检测显示,新生组织弹性模量达正常半月板组织的12.7%。结论 BMSCs通过体外诱导,可在体外分化为较成熟的软骨组织,并构建出组织工程化半月板。

关键词：骨髓间充质干细胞组织工程化半月板聚羟基乙酸聚乳酸支架

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利用软骨细胞膜片技术在山羊皮下构建软骨样组织的研究

利用软骨细胞膜片技术在山羊皮下构建软骨样组织的研究

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第六届全国组织工程与再生医学大会

作者：陶然刘浥殷宗琦汪振星李丹周广东上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室中国国家组织工程研究

目的:探讨软骨细胞膜片技术在大型哺乳动物模型体内构建软骨的优越性. 方法:以山羊耳廓软骨细胞为种子细胞,分别利用细胞膜片技术(实验组)和细胞复合PGA/PLA支架材料的方法(对照组)构建软骨组织.体外培养4周后同植到动物腹部皮下,分... 详细信息

目的:探讨软骨细胞膜片技术在大型哺乳动物模型体内构建软骨的优越性. 方法:以山羊耳廓软骨细胞为种子细胞,分别利用细胞膜片技术(实验组)和细胞复合PGA/PLA支架材料的方法(对照组)构建软骨组织.体外培养4周后同植到动物腹部皮下,分别于回植前,回植皮下4周及体内8周时收取标本,观察比较两组标本软骨形成情况. 结果:体外培养4周后,两组均形成一定量的软骨样组织,但对照组仍可见未降解的材料纤维.体内构建4周后,实验组形成成熟软骨样组织,对照组为纤维结缔组织替代,伴有大量炎性细胞浸润.体内培养8周时,实验组较4周前无明显变化,对照组体积明显缩小,仍为纤维结缔组织. 结论:软骨细胞膜片技术与细胞混合PGA/PLA支架材料构建组织工程软骨方法相比，具有原代细胞用量少、体外培养时间短、在大动物体内能形成成熟软骨等优点，有更广泛的临床应用前景。

关键词：组织工程化软骨细胞膜片支架材料临床应用

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应用自体肌外膜神经导管修复周围神经缺损

应用自体肌外膜神经导管修复周围神经缺损

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第六届全国组织工程与再生医学大会

作者：金羽青杨晓楠毕会吴巍程佳刘璋寅沈尊理祁佐良曹谊林上海交通大学医学院附属第一人民医院整形美容外科上海中国上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海中国天津市人民医院肾内科天津中国上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海中国中国国家组织工程中心上海组织工程重点实验室上海中国

相比于其他生物材料或人工材料,骨骼肌作为一种自体组织具有良好的生物相容性以及能够促进神经再生的结构和成分,但是其合理有效的应用仍有待进一步探讨.本研究旨在探讨能否使用带骨骼肌纤维的肌外膜薄片卷曲制备成中空的神经导管,并有... 详细信息

相比于其他生物材料或人工材料,骨骼肌作为一种自体组织具有良好的生物相容性以及能够促进神经再生的结构和成分,但是其合理有效的应用仍有待进一步探讨.本研究旨在探讨能否使用带骨骼肌纤维的肌外膜薄片卷曲制备成中空的神经导管,并有效修复周围神经缺损.为此,尝试应用显微外科技术将CAG-EGFP转基因小鼠的腹外斜肌制备成具有管腔结构的神经导管(即AMT),桥接修复野生型小鼠5mm坐骨神经缺损.手术后8周和12周,分别对再生的神经组组织进行系统的组织学及功能学方面的评测.结果显示，AMT能够有效地修复小鼠坐骨神经缺损，且在各方面均明显优于人工材料导管组的修复效果，但是在某些指标上仍逊色于自体神经移植。此外，实验还发现来源于AMT的部分细胞成分迁移进入再生神经区域并参与再生神经结构的重建。本研究证实了自体肌源性组织制备的中空导管可以作为理想的神经导管用于周围神经缺损的修复，并且移植物中的细胞成分参与了神经再生及其结构重塑，为临床急诊一期修复神经缺损提供了一个可选择的方法。

关键词：坐骨神经缺损腹外斜肌神经导管修复效果

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