检索结果-内蒙古大学图书馆

中国癌症杂志 2023年第6期33卷 613-618页

作者：黄鹤鞠侯雨杨文艺严明任国欣胡镜宙上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面-头颈肿瘤科上海交通大学口腔医学院国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011

背景与目的:程序性死亡[蛋白]-1(programmed death-1,PD-1)单抗免疫治疗在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)中的作用愈发重要,然而目前具有响应率低、缺乏预测性生物标志物的问题。本研究旨在确定程序性... 详细信息

背景与目的:程序性死亡[蛋白]-1(programmed death-1,PD-1)单抗免疫治疗在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)中的作用愈发重要,然而目前具有响应率低、缺乏预测性生物标志物的问题。本研究旨在确定程序性死亡[蛋白]配体-2(programmed death ligand-2,PD-L2)能否作为预测HNSCC中PD-1单抗免疫治疗获益情况的生物标志物。方法:收集50例接受PD-1单克隆抗体免疫治疗的中晚期HNSCC的组织标本及临床数据,采用免疫组织化学染色法分析程序性死亡[蛋白]配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)、PD-L2表达量,采用SPSS 26.0软件根据基本临床特征、PD-L1与PD-L2表达量分组统计并进行Kaplan-Meier生存分析,采用GraphPad Prism软件绘制生存曲线。结果:PD-L2在HNSCC患者中阳性表达率较高,有超过80%的患者肿瘤组织可检出PD-L2表达;PD-L2的表达量显著影响免疫治疗结局,PD-L2高表达的患者平均生存期为18.8(16.0~21.7)个月,而PD-L2低表达的患者平均生存期为11.0(9.1~12.8)个月,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PD-L2可作为评估HNSCC中PD-1单克隆抗体免疫治疗获益的生物标志物。

关键词：头颈部鳞状细胞癌免疫治疗 PD-L2 PD-1单克隆抗体

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去分化脂肪细胞及其在口腔颌面部骨组织工程中应用的研究进展

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口腔疾病防治 2024年第3期32卷 223-228页

作者：沈荧怡曹希萌胥春上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔修复科上海交通大学口腔医学院国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011

寻找合适的种子细胞是口腔颌面部骨组织再生领域亟需解决的重要科学问题。脂肪干细胞在组织与器官修复和再生中的应用已有较多研究,近年来,去分化脂肪细胞在骨组织工程领域也显露了广阔的应用前景。去分化脂肪细胞表达干细胞相关标志,... 详细信息

寻找合适的种子细胞是口腔颌面部骨组织再生领域亟需解决的重要科学问题。脂肪干细胞在组织与器官修复和再生中的应用已有较多研究,近年来,去分化脂肪细胞在骨组织工程领域也显露了广阔的应用前景。去分化脂肪细胞表达干细胞相关标志,且具有向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、神经细胞、心肌细胞和内皮细胞等多向分化的潜能,此外,去分化脂肪细胞还具有获取方式微创、增殖能力强、同质性高等优势。目前,去分化脂肪细胞在基于支架及无支架骨组织工程中应用的研究结果均能证实其促进骨再生的有效性,但其细胞学研究仍面临一些挑战,包括细胞培养纯度尚不够高、表型特性不完全明确和去分化机制不明晰等。相信随着分离、培养、鉴定以及定向诱导其成骨分化的方法不断发展完善,去分化脂肪细胞有望在未来成为口腔颌面部骨组织工程领域中优异的种子细胞。

关键词：再生医学组织工程学去分化脂肪细胞细胞去分化骨再生颌面修复术脂肪干细胞脂肪细胞

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淋巴显影结合淋巴管-静脉吻合术治疗淋巴管畸形的研究现状

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中国口腔颌面外科杂志 2025年第1期23卷 77-83页

作者：于凡杜仲李顺顺游元和田卓炜肖孟王延安上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面-头颈肿瘤科上海交通大学口腔医学院国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011

淋巴管畸形(lymphatic malformation,LM)是一种先天性淋巴管发育畸形,大量淋巴液积聚在病变区域畸形扩张的淋巴管腔内,当患者的淋巴免疫反应增强时,即出现病变区域的肿痛及功能障碍,给患者带来极大痛苦。目前,针对LM的主要治疗手段包括... 详细信息

淋巴管畸形(lymphatic malformation,LM)是一种先天性淋巴管发育畸形,大量淋巴液积聚在病变区域畸形扩张的淋巴管腔内,当患者的淋巴免疫反应增强时,即出现病变区域的肿痛及功能障碍,给患者带来极大痛苦。目前,针对LM的主要治疗手段包括硬化治疗、手术切除、靶向药物治疗等,但各种治疗方法均无法实现病变区域异常淋巴回流的长期恢复与重建。作为超显微外科技术的代表之一,淋巴管-静脉吻合术(lymphatic-venous anastomosis,LVA)可通过淋巴显影和显微镜的辅助,将病灶区域的淋巴管与周围静脉吻合重建,从而实现改善和重建局部淋巴引流的目标。目前,已有部分研究尝试在LM患者中开展此类手术,并获得了良好疗效,但尚未得到推广。本文结合最新国内外研究成果,从淋巴显影技术、基于淋巴显影的LM分型、LVA的发展与挑战、LVA治疗LM的研究及应用现状、LVA的围术期护理等方面进行综述,以期促进该技术在治疗LM领域的研究、应用及发展。

关键词：淋巴管畸形淋巴显影淋巴管-静脉吻合术围术期护理

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利用CRISPR/Cas9靶向敲除Piezo1基因对小鼠间充质干细胞成骨分化的影响研究

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上海交通大学学报（医学版） 2023年第9期43卷 1080-1088页

作者：高昕杨屹羚黄湘如代庆刚江凌勇上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颅颌面科上海交通大学口腔医学院国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔第二门诊部国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011

目的·应用CRISPR/Cas9系统对小鼠间充质干细胞C3H10T1/2进行靶向Piezo1基因稳定敲除,探究Piezo1对间充质干细胞成骨分化能力的影响。方法·根据CRISPR/Cas9原理,设计2条靶向Piezo1基因的单链指导RNA(single guide RNA,sgRNA),... 详细信息

目的·应用CRISPR/Cas9系统对小鼠间充质干细胞C3H10T1/2进行靶向Piezo1基因稳定敲除,探究Piezo1对间充质干细胞成骨分化能力的影响。方法·根据CRISPR/Cas9原理,设计2条靶向Piezo1基因的单链指导RNA(single guide RNA,sgRNA),利用Lenti-Cas9-GFP和Lenti-U6-sgRNA-mCherry载体分别构建表达Cas9的慢病毒和表达sgRNA的慢病毒。将2种慢病毒感染C3H10T1/2细胞,利用流式细胞分选技术对GFP和mCherry阳性的细胞进行筛选;挑取单克隆细胞,经PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳验证,最终得到Piezo1基因片段敲除的单克隆细胞系。序列测定、实时荧光定量PCR(quantitative realtime PCR,qPCR)及细胞免疫荧光技术对构建的Piezo1基因敲除细胞(Piezol knockout C3H10T1/2,CPK)进行敲除效率验证。CCK-8实验检测敲除Piezo1对细胞增殖的影响;对构建成功的Piezo1基因敲除细胞进行体外成骨诱导分化,并进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色及茜素红染色,利用qPCR探究敲除Piezo1对细胞的成骨相关基因mRNA水平的影响。结果·琼脂糖凝胶电泳结果显示,敲除Piezo1的单克隆细胞菌液通过PCR扩增后产物出现阳性克隆。单克隆细胞的测序结果显示,敲除Piezo1的单克隆细胞的Piezo1基因在第4外显子中提前形成终止密码子TGA,无法正确翻译蛋白;qPCR验证了CPK中Piezo1基因在mRNA水平被抑制;免疫荧光显示CPK中Piezo1基因的敲除效率较高,基本阻碍Piezo1在细胞中的表达。CCK-8实验显示敲除Piezo1后细胞增殖能力下降(P<0.05);ALP染色及茜素红染色结果显示敲除Piezo1后细胞成骨能力降低(P<0.05),且CPK中成骨相关基因如Ⅰ型胶原蛋白A1(α1 typeⅠcollagen,Col1a1)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、成骨细胞特异性转录因子(osterix,Osx)以及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,Alp)的mRNA表达水平降低(均P<0.05)。结论·利用CRISPR/Cs9基因编辑系统成功构建靶向敲除Piezo1基因的C3H10T1/2细胞系。敲除Piezo1能抑制小鼠间充质干细胞C3H10T1/2的成骨分化。

关键词： Piezo1 CRISPR/Cas9 间充质干细胞成骨分化

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亚精胺对脂多糖诱导的小鼠颅骨炎症性骨溶解的作用研究

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上海交通大学学报(医学版) 2025年

作者：赵心雨张文超陈旭卓宋佳琪黄慧张善勇山东第二医科大学口腔医学院上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔外科上海交通大学口腔医学院国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所北京大学深圳医院口腔科上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔影像科

目的·探讨亚精胺（spermidine,SPD）在体内和体外对炎症性骨溶解的抑制作用。方法·采用CCK-8法检测不同浓度SPD对RAW264.7巨噬细胞的活性影响；采用二氯二氢荧光素乙酰酯（dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFHDA）和... 详细信息

目的·探讨亚精胺（spermidine,SPD）在体内和体外对炎症性骨溶解的抑制作用。方法·采用CCK-8法检测不同浓度SPD对RAW264.7巨噬细胞的活性影响；采用二氯二氢荧光素乙酰酯（dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFHDA）和二氢乙锭（dihydroethidium,DHE）染色液分别检测SPD对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）激活的RAW264.7细胞内活性氧（reactiveoxygenspecies, ROS）水平；采用反转录实时荧光定量PCR (reversetranscriptionreal-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测SPD对LPS激活的RAW264.7细胞内促炎相关基因表达的影响；采用抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP）染色检测SPD对小鼠原代骨髓来源巨噬细胞（bone marrowderived macrophage,BMM）向破骨细胞分化的影响，并进一步通过RT-qPCR分析SPD对BMM诱导分化后与破骨细胞分化和功能相关基因表达的影响。构建LPS诱导的小鼠颅骨骨溶解模型，通过Micro-CT分析以及组织切片苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,H-E）染色、TRAP染色评价SPD对炎症性骨溶解的治疗效果。结果·CCK-8结果显示，SPD达到1 000μmol/L时，对RAW264.7细胞仍无明显细胞毒性；ROS检测结果显示，SPD可以显著抑制LPS引起的巨噬细胞内ROS水平的升高；RT-qPCR结果显示，SPD可以抑制LPS诱导的促炎相关基因的表达。TRAP染色和RT-qPCR结果显示，SPD可有效抑制核因子κB受体活化因子配体（receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL）诱导的BMM向破骨细胞分化，以及降低破骨细胞分化和功能相关基因的表达。在小鼠颅骨骨溶解模型中，Micro-CT结果显示，SPD处理组颅骨骨体积分数和骨矿物质密度均较LPS组显著升高；组织切片染色结果显示，SPD处理组炎症细胞浸润减少，破骨细胞数量减少，组织受损程度较轻。结论·SPD在体外能够抑制巨噬细胞的炎症反应，以及RANKL诱导的破骨细胞分化；在体内，SPD可改善由LPS诱导的小鼠炎症性颅骨骨溶解。

关键词：亚精胺骨溶解破骨细胞炎症

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唾液腺导管内癌27例临床病理学特征及分子遗传学分析

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中华病理学杂志 2024年第3期53卷 250-256页

作者：孙祺孙晶晶王敏张雷张献伟魏建国孔令非李江河南省人民医院病理科郑州450003 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科、上海交通大学口腔医学院、国家口腔医学中心、国家口腔疾病临床医学研究中心、上海市口腔医学重点实验室、上海市口腔医学研究所上海200011 浙江省绍兴市人民医院病理科绍兴312000

目的探讨唾液腺导管内癌(intraductal carcinoma)的临床病理学特征、分子遗传学特点及鉴别诊断。方法收集2008年1月至2023年7月上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科25例、河南省人民医院病理科2例诊断为导管内癌的病例,回顾... 详细信息

目的探讨唾液腺导管内癌(intraductal carcinoma)的临床病理学特征、分子遗传学特点及鉴别诊断。方法收集2008年1月至2023年7月上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科25例、河南省人民医院病理科2例诊断为导管内癌的病例,回顾性分析其临床病理学特征,行荧光原位杂交及一代测序检测分子改变,随访患者并复习相关文献。结果27例导管内癌患者,男性15例,女性12例,年龄20.0~80.0岁(平均55.9岁)。临床上多表现为无痛性肿块,肿瘤最大径1.0~3.0 cm(平均2.0 cm)。所有患者均接受手术治疗,20例患者获得随访,其中1例因肺癌死亡,余均存活、无复发。组织学上,闰管型占63.0%(17/27),顶浆分泌型占25.9%(7/27),嗜酸细胞型占7.4%(2/27),混合型占3.7%(1/27)。闰管型S-100蛋白阳性,雄激素受体(AR)阴性,Ki-67阳性指数较低(1%~5%),9例检测到RET基因断裂,2例检测到BRAF V600E突变。顶浆分泌型S-100蛋白阴性,AR阳性,Ki-67阳性指数较高(10%~60%),1例检测到RET基因断裂。2例嗜酸细胞型与闰管型免疫表型相似,均检测到RET基因断裂。1例混合型表现为嗜酸细胞型与顶浆分泌型混合,检测到RET基因断裂阳性。结论导管内癌是一种少见的唾液腺低度恶性肿瘤,镜下形态结构多样,容易与形态相似的其他唾液腺肿瘤混淆,分子检测对鉴别诊断有帮助。

关键词：涎腺肿瘤分子生物学基因重排

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IgG4相关唾液腺炎临床病理特征分析

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中华口腔医学杂志 2023年第8期58卷 815-820页

作者：夏荣辉胡宇华钱佳骏王敏张莺刘怡顾挺李江上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科、上海交通大学口腔医学院、国家口腔医学中心、国家口腔疾病临床医学研究中心、上海市口腔医学重点实验室、上海市口腔医学研究所上海200011 上海交通大学医学院附属仁济医院护理部上海200001

目的探讨IgG4相关唾液腺炎(IgG4-related sialadenitis,IgG4-RS)的临床病理特征。方法收集2019年1月至2022年12月于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科诊断为IgG4-RS的患者共40例,男性26例,女性14例,年龄(59.4±11.8)岁(... 详细信息

目的探讨IgG4相关唾液腺炎(IgG4-related sialadenitis,IgG4-RS)的临床病理特征。方法收集2019年1月至2022年12月于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科诊断为IgG4-RS的患者共40例,男性26例,女性14例,年龄(59.4±11.8)岁(29~77岁),其中23例患者年龄>60岁。收集患者的病变部位、影像学表现、组织病理学特征、血清学检查结果及治疗信息,采用免疫组化方法检测组织中IgG4和IgG蛋白表达。结果颌下区肿胀是IgG4-RS最常见的首发症状[95%(38/40)],所有患者血清IgG4水平均>1.35 g/L,血清IgG4水平在年龄>60岁的患者(Z=-2.45,P=0.014)和累及多组腺体的患者(Z=-2.04,P=0.042)中均显著升高。36例大唾液腺活检组织中,所有患者均可见致密淋巴细胞、浆细胞浸润,淋巴滤泡形成、席纹状纤维化和闭塞性静脉炎分别见于88.9%(32/36)、63.9%(23/36)和30.6%(11/36)的患者。21例唇腺活检组织中,66.7%(14/21)可见淋巴细胞、浆细胞浸润,19.0%(4/21)可见淋巴滤泡形成,33.3%(7/21)组织学表现无明显异常,所有唇腺活检组织中均未见纤维化及闭塞性静脉炎表现。95.0%(38/40)患者中IgG4阳性浆细胞>10个/高倍视野,82.5%(33/40)患者中IgG4/IgG阳性浆细胞比值>40%。所有患者经糖皮质激素治疗后血清IgG4水平均有所下降,仅21.4%(6/28)患者可恢复到正常水平(≤1.35 g/L),且后续血清IgG4水平仍有显著波动。结论IgG4-RS主要好发于中老年男性患者,血清IgG4水平与患者年龄及是否累及多组腺体密切相关。唇腺活检不能替代下颌下腺进行组织病理学评估。治疗后血清IgG4水平不能恢复至正常水平是常见现象。

关键词：免疫球蛋白G 涎腺炎免疫球蛋白G4相关唾液腺炎免疫球蛋白G4相关性疾病临床病理特征

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下颌骨埋伏阻生第三磨牙拔除术后自然转归及对邻近第二磨牙的影响

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中国口腔颌面外科杂志 2024年第4期22卷 365-372页

作者：杨清然徐光宙上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔外科上海交通大学口腔医学院国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011

目的:观察下颌阻生第三磨牙(impacted mandibular third molars,IM3Ms)拔除术后的自然转归及对邻近下颌第二磨牙(mandibular second molars,M2Ms)的影响。方法:选择下颌第三磨牙骨埋伏阻生的患者34例(51颗IM3Ms),使用超声骨刀、气动涡... 详细信息

目的:观察下颌阻生第三磨牙(impacted mandibular third molars,IM3Ms)拔除术后的自然转归及对邻近下颌第二磨牙(mandibular second molars,M2Ms)的影响。方法:选择下颌第三磨牙骨埋伏阻生的患者34例(51颗IM3Ms),使用超声骨刀、气动涡轮手机拔除患牙,分别于术前、术后1周及术后6个月随访,观察术后反应及M2Ms远中骨缺损情况。比较手术前后M2Ms远中骨缺损深度,并分析其影响因素。采用SPSS 29.0软件包对数据进行统计学分析。结果:术前M2Ms远中骨高度未见明显缺损,但拔除IM3Ms时,由于去骨拔牙等操作产生骨缺损。术后6个月,骨高度虽有所恢复,骨缺损率减少,但未达到术前水平。IM3Ms埋伏阻生深度是恢复率的主要影响因素。探诊深度较术前显著增加。术后24 h内患者疼痛感较重,术后1周缓解,但仍存在轻度开口受限及面部肿胀。拔除IM3Ms对患者日常生活、情绪、工作、睡眠影响较小。结论:下颌第三磨牙拔除术后,邻近第二磨牙远中骨高度部分恢复,但未达到术前水平。拔牙手术中需采取更加精细的手术技巧,以减少对邻近牙和骨组织的影响。同时,拔除IM3Ms后应给予镇痛药物,加强卫生宣教,提高患者术后舒适度。

关键词：下颌第三磨牙下颌第二磨牙阻生牙拔除术骨缺损自然转归

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成年打鼾人群患阻塞性睡眠呼吸暂停的危险因素分析

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中国口腔颌面外科杂志 2024年第2期22卷 137-142页

作者：郑彤姚侃钱轶峰孙红霞卢晓峰于雯雯上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颅颌面科上海交通大学口腔医学院国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海200011

目的:探索成年打鼾人群罹患阻塞性睡眠呼吸暂停的相关危险因素,尝试性提出新型预测工具。方法:采用横断面研究,对2012年1月—2021年10月于上海交通大学医学院附属第九人民医院睡眠医学中心进行整夜多导睡眠监测(polysomnography,PSG)的... 详细信息

目的:探索成年打鼾人群罹患阻塞性睡眠呼吸暂停的相关危险因素,尝试性提出新型预测工具。方法:采用横断面研究,对2012年1月—2021年10月于上海交通大学医学院附属第九人民医院睡眠医学中心进行整夜多导睡眠监测(polysomnography,PSG)的成年打鼾人群进行数据收集,依据睡眠呼吸暂停低通气指数(apnea hyponea index,AHI)进行阻塞性睡眠呼吸暂停(obstructive sleep apnea,OSA)患病与否分组,分为非OSA组与OSA组,对成年打鼾人群OSA患病危险因素进行分析。结果:纳入研究对象1155例,整体OSA患病率为88.23%,患者男女比例为4.12∶1。成年打鼾人群罹患OSA的危险因素是年龄、颈围/身高比、性别、腰围,相应预警值为30.5岁、22.93、男性、86.25 cm。对于成年打鼾人群,提出OSA预测工具WRAG-N,预测OSA的AUC为0.789,灵敏度为87.2%,特异度为29.4%。结论:对于成年打鼾人群,30岁以上、男性、腰围大于86.25cm是OSA患病的危险因素,颈围/身高比是OSA患病与否的关键危险因素之一。作为罹患OSA的新型预测工具,WRAG-N有助于基层社区筛查成年打鼾高危人群,及时进行预防及诊治。

关键词：成人打鼾阻塞性睡眠呼吸暂停危险因素

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小胶质细胞Stat3基因条件性敲除小鼠的构建及鉴定

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上海交通大学学报（医学版） 2023年第6期43卷 689-698页

作者：朱晓晨谢欣宜赵旭日徐丽娜何智妍周薇上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔微生态与系统性疾病实验室上海交通大学口腔医学院国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200125

目的·基于Cre-Loxp系统构建小胶质细胞Stat3基因条件性敲除小鼠并验证其敲除效率。方法·将Cx3cr1^(creERT2)与Stat3^(fl/fl)基因型小鼠多代交配繁育,直到获得足够数量的Stat3^(fl/fl);Cx3cr1^(creERT2)基因型小鼠,即条件敲除... 详细信息

目的·基于Cre-Loxp系统构建小胶质细胞Stat3基因条件性敲除小鼠并验证其敲除效率。方法·将Cx3cr1^(creERT2)与Stat3^(fl/fl)基因型小鼠多代交配繁育,直到获得足够数量的Stat3^(fl/fl);Cx3cr1^(creERT2)基因型小鼠,即条件敲除小鼠(conditional knockout,CKO);同窝Stat3^(fl/fl)基因型小鼠,即对照小鼠(wild type,WT)。利用小鼠组织提取DNA后通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR),结合特异性引物分别扩增的结果来判断小鼠基因型。在CKO及WT小鼠6周龄时通过腹腔注射他莫昔芬诱导小胶质细胞中Stat3基因的敲除;2周后,随机选取CKO小鼠(n=4)及WT小鼠(n=4),利用磁珠分选法(magnetic activated cell sorting,MACS)分选出小胶质细胞后通过实时荧光定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)技术从基因水平检测基因敲除效率;通过脑组织切片免疫荧光染色标记小胶质细胞和STAT3蛋白观察小胶质细胞中STAT3的表达情况;利用流式细胞术分别检测STAT3在小胶质细胞及脾巨噬细胞中的变化。通过尼氏染色检测神经元细胞的情况;通过脑组织切片荧光染色标记小胶质细胞,观察皮层和海马区域小胶质细胞的情况;通过流式细胞术检测小胶质细胞表型。结果·成功繁育出CKO小鼠和WT小鼠。MACS后脑细胞中小胶质细胞的占比从10%提升到85%。RT-PCR结果显示,相对于WT小鼠,CKO小鼠小胶质细胞中Stat3的mRNA相对表达量为0.3317±0.0414,mRNA水平下调(P=0.001)。脑组织免疫荧光染色结果显示,CKO小鼠小胶质细胞中STAT3蛋白的荧光强度较WT小鼠弱。脑组织流式细胞术显示:WT小鼠小胶质细胞中STAT3的阳性细胞占比为(85.30±5.69)%;CKO小鼠小胶质细胞中STAT3的阳性细胞占比为(39.70±3.88)%,STAT3表达率下降(P=0.001)。脾组织流式细胞术显示,CKO小鼠与WT小鼠脾巨噬细胞中STAT3的阳性细胞占比的差异无统计学意义(P>0.05)。尼氏染色显示,CKO小鼠与WT小鼠神经元细胞无显著差异。脑组织切片荧光染色结果显示,CKO小鼠与WT小鼠的小胶质细胞在形态上无明显差异。小胶质细胞流式细胞术显示CKO小鼠与WT小鼠小胶质细胞表型无显著差别。结论·成功构建小胶质细胞Stat3基因条件性敲除小鼠,为后续相关研究提供动物模型。

关键词：小胶质细胞信号转导和转录激活因子3(STAT3) 他莫昔芬小鼠 Cre重组酶

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