检索结果-内蒙古大学图书馆

上海交通大学学报（医学版） 2022年第11期42卷 1627-1632页

作者：董玉山张文杰上海交通大学医学院附属第九人民医院上海市组织工程重点实验室上海200011

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种临床常见的关节病变,多累及下肢负重关节,易导致关节畸形,严重影响生活质量。目前,OA的早期治疗主要集中在对症治疗及减缓关节软骨的磨损。各类细胞因子在OA的发生和发展过程中发挥重要作用。白细胞介... 详细信息

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种临床常见的关节病变,多累及下肢负重关节,易导致关节畸形,严重影响生活质量。目前,OA的早期治疗主要集中在对症治疗及减缓关节软骨的磨损。各类细胞因子在OA的发生和发展过程中发挥重要作用。白细胞介素(interleukin,IL)家族中,IL-1β/6/8与OA的发生及进展有关,是主要的致炎因子;IL-4/10作为抗炎成分,对关节起保护作用。肿瘤坏死因子-α也是促进关节炎症发生的主要成分。体内外研究表明,转化生长因子-β、胰岛素样生长因子、成纤维细胞生长因子在延缓OA的进展过程中发挥积极作用。研究相关细胞因子的作用,不仅可以深入了解OA的发病机制,也可为OA的治疗提供新思路,有望解决当下OA传统治疗效果不理想的问题。目前,在细胞因子应用于OA的防治领域,已经获得了很多有益的研究成果,部分已经进入临床试验和应用。该文综述了几类对于OA防治具有潜在效果的细胞因子的研究进展和部分作用机制。

关键词：骨关节炎细胞因子软骨缺损修复

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人脐血间充质干细胞修复颅骨缺损的实验研究

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中华整形外科杂志 2010年第1期26卷 34-38页

作者：刘广鹏李宇琳孙剑崔磊张文杰曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院组织工程重点实验室 200011 上海组织工程研究与开发中心

目的应用人脐血间充质干细胞（umbilical cord blood derived mesenchymal stem cells，UCB—MSCs）复合脱钙骨材料构建组织工程化骨，修复裸大鼠颅骨标准缺损。方法体外扩增培养、成骨诱导人UCB—MSCs，采用AlizarinRed染色和钙离子半... 详细信息

目的应用人脐血间充质干细胞（umbilical cord blood derived mesenchymal stem cells，UCB—MSCs）复合脱钙骨材料构建组织工程化骨，修复裸大鼠颅骨标准缺损。方法体外扩增培养、成骨诱导人UCB—MSCs，采用AlizarinRed染色和钙离子半定量的方法测定细胞成骨分化能力。将第2代细胞接种在脱钙骨支架材料上继续诱导培养，扫描电镜检测细胞在材料上的生长状况。制备裸大鼠双侧颅骨全层标准缺损（直径5mm），一侧以细胞材料复合物修复作为实验侧（n=8）；另一侧以单纯脱钙骨材料修复作为对照侧（n=8）。术后6、12周取材，分别通过大体形态观察、显微CT（Micro—CT）、组织学方法检测颅骨缺损的修复效果。结果UCB—MSCs体外能够诱导分化为成骨细胞，且在脱钙骨支架材料上生长良好。Micro—CT检测显示术后6周实验侧有部分新生骨组织形成，12周时骨缺损修复率达（78．19±6．45）％，脱钙骨材料降解完全；对照侧6周时无明显新骨生成，12周时材料完全降解，骨缺损未修复。组织学检测显示12周时实验侧有较多成熟骨生成，为骨性愈合；对照侧骨缺损为纤维愈合。结论成骨诱导的人UCB—MSCs复合脱钙骨材料构建的组织工程化骨可修复裸大鼠颅骨全层标准缺损，有望成为新的组织工程骨种子细胞来源。

关键词：组织工程间充质干细胞颅骨脱钙骨

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三种亚型软骨组织来源干细胞的分离培养及鉴定

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中国修复重建外科杂志 2015年第4期29卷 483-489页

作者：薛珂张小蝶刘凯上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海市组织工程重点实验室上海200011

目的分离培养猪不同亚型软骨组织(弹性软骨、透明软骨以及纤维软骨)来源干细胞并鉴定,为软骨组织工程提供理想种子细胞。方法利用纤维连接蛋白黏附法分别从猪耳软骨、关节软骨以及椎间盘软骨中分离培养干细胞,并进行传代。倒置相差显微... 详细信息

目的分离培养猪不同亚型软骨组织(弹性软骨、透明软骨以及纤维软骨)来源干细胞并鉴定,为软骨组织工程提供理想种子细胞。方法利用纤维连接蛋白黏附法分别从猪耳软骨、关节软骨以及椎间盘软骨中分离培养干细胞,并进行传代。倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞术鉴定细胞表面抗原表达水平(阳性标志物CD29、CD90及阴性标志物CD34、CD45),单克隆形成实验鉴定软骨干细胞单克隆形成能力。三向诱导分化鉴定软骨来源干细胞的成软骨、成骨及成脂多向分化潜能。RT-PCR检测成骨(Ⅰ型胶原、Ⅹ型胶原)、成软骨[蛋白聚糖(Aggrecan)、II型胶原]、成脂[脂联素(Adiponectin)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)]相关基因表达,并以猪BMSCs作为对照。结果通过纤维连接蛋白黏附法分别从耳软骨(弹性软骨)、关节软骨(透明软骨)、椎间盘软骨(纤维软骨)分选出一群细胞,细胞高表达干细胞表面阳性标志物CD29、CD90,几乎不表达干细胞表面阴性标志物CD34、CD45。经过体外2周培养,单个细胞均能形成细胞克隆。三向诱导分化显示软骨来源的干细胞具备成软骨、成骨和成脂分化能力。RT-PCR结果显示,成骨诱导后关节和椎间盘来源软骨干细胞的Ⅰ、Ⅹ型胶原基因相对表达量明显高于BMSCs(P<0.05),耳软骨来源干细胞与BMSCs比较差异无统计学意义(P>0.05);成软骨诱导后,3种亚型软骨组织来源干细胞Aggrecan、Ⅱ型胶原基因相对表达量均高于BMSCs(P<0.05);成脂诱导后,3种来源软骨干细胞Adiponectin及FAS基因相对表达量均低于BMSCs,但比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论不同亚型的猪软骨组织中均存在软骨干细胞,具有干细胞的典型特征。

关键词：软骨组织工程软骨干细胞软骨亚型纤维连接蛋白

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唇腭裂合并的单侧牙槽突裂大鼠模型的建立和稳定性研究

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上海交通大学学报（医学版） 2010年第9期30卷 1111-1114,1142页

作者：许悦陈振琦吴军李壬媚刘广鹏上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔正畸科上海市口腔医学重点实验室上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科组织工程实验室上海200011

目的建立唇腭裂合并的上颌骨缺损(牙槽突裂)大鼠模型,并研究其稳定性。方法以7周龄SD大鼠作为实验对象,于右侧上颌制备4mm×4mm×3mm的牙槽突裂,模拟建立唇腭裂合并的上颌骨缺损大鼠模型。根据术后骨缺损区的处理方式将模型大... 详细信息

目的建立唇腭裂合并的上颌骨缺损(牙槽突裂)大鼠模型,并研究其稳定性。方法以7周龄SD大鼠作为实验对象,于右侧上颌制备4mm×4mm×3mm的牙槽突裂,模拟建立唇腭裂合并的上颌骨缺损大鼠模型。根据术后骨缺损区的处理方式将模型大鼠分为对照组(骨缺损区不予特殊处理)和实验组(骨缺损区予以骨蜡填塞),每组10只。两组大鼠分别于术毕即刻和术后4、8周时点分批处死后制备模型标本;利用显微CT(MicroCT)进行三维重建,观察和定量检测骨缺损区新骨形成情况,分析和比较两组模型的稳定性。结果 MicroCT三维图像重建显示,在术后8周时点,对照组有大量新骨充填于缺损区,缺损区明显缩小;而实验组仅断端边缘有少量新骨形成,缺损区无明显缩小。定量分析显示,对照组和实验组术后4周时点的新骨形成百分比分别为54.35%和16.53%,术后8周时点的新骨形成百分比分别为93.12%和29.30%,两组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论成功建立模拟唇腭裂合并的上颌骨缺损(牙槽突裂)大鼠模型,利用骨蜡填塞骨缺损区能显著提高模型的稳定性。

关键词：牙槽突裂植骨显微CT

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混合接种法构建组织工程皮肤

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中华整形外科杂志 2010年第5期26卷 365-368页

作者：陈灿李高峰刘伟杨柠泽王斌张晨王志军大连大学附属新华医院整形外科大连116021 上海交通大学医学院附属第九人民医院组织工程实验室

目的探讨混合接种法体外构建复合皮的可行性。方法在异种猪脱细胞真皮的真皮面接种人成纤维细胞7d后，将其分两组进行实验。实验组：将表皮细胞按5×10^5／cm^2与成纤维细胞0．2×10^5／cm^2混合后接种于表皮面，培养液用K—SF... 详细信息

目的探讨混合接种法体外构建复合皮的可行性。方法在异种猪脱细胞真皮的真皮面接种人成纤维细胞7d后，将其分两组进行实验。实验组：将表皮细胞按5×10^5／cm^2与成纤维细胞0．2×10^5／cm^2混合后接种于表皮面，培养液用K—SFM与成纤维细胞上清的1：1混合液。对照组：仅接种表皮细胞5×10^5／cm^2，培养液用K-SFM。培养1、3周后取材观察其形态变化，并行免疫组化鉴定。结果培养3周后，实验组可见表皮层连续，细胞层数3～4层，与真皮连接紧密，有表皮突形成；对照组表皮细胞层仅1～2层，且与真皮分离。实验组Laminin强阳性提示基底膜形成充分，并经透射电镜也可观察到完整的基底膜。结论将表皮细胞与少量成纤维细胞混合接种，可促进表皮细胞在脱细胞真皮上黏附增殖，并有助于基底膜充分形成。

关键词：脱细胞真皮组织工程皮肤基底膜

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组织工程化膀胱壁复层结构的体外构建

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中华泌尿外科杂志 2007年第S1期28卷 82-85页

作者：卢慕峻王忠周广东刘伟曹谊林 200011 上海交通大学医学院附属第九人民医院泌尿外科 200011 上海交通大学医学院附属第九人民医院组织工程重点实验室上海交通大学医学院附属第九人民医院泌尿外科 200011 上海交通大学医学院附属第九人民医院组织工程重点实验室 200011

目的探讨膀胱缺损组织工程修复方法.方法机械法去除膀胱黏膜层、肌层和浆膜层,仅保留膀胱黏膜下层.经SDS、Trixon-100和三蒸水处理去除细胞结构,制备获得膀胱脱细胞基质移植物(BAMG)作为支架材料.取成年猪膀胱壁,机械法分离膀胱肌层... 详细信息

目的探讨膀胱缺损组织工程修复方法.方法机械法去除膀胱黏膜层、肌层和浆膜层,仅保留膀胱黏膜下层.经SDS、Trixon-100和三蒸水处理去除细胞结构,制备获得膀胱脱细胞基质移植物(BAMG)作为支架材料.取成年猪膀胱壁,机械法分离膀胱肌层和黏膜层.以酶消化法分别获取膀胱尿路上皮细胞和平滑肌细胞.常规细胞传代和扩增后,将膀胱平滑肌细胞和尿路上皮细胞分别接种在BAMG浆膜面和黏膜面.细胞-材料复合物体外培养4周并行组织学鉴定.结果 HE和Masson染色鉴定发现,BAMG以胶原成分为主,内部未见明显细胞残留.免疫荧光方法鉴定结果显示,膀胱尿路上皮细胞uroplakin Ⅱ阳性,膀胱平滑肌细胞α-平滑肌肌动蛋白阳性.体外培养4周后,BAMG浆膜面和黏膜面分别形成连续的复层结构尿路上皮层和膀胱平滑肌层,免疫组化显示平滑肌层α-平滑肌肌动蛋白表达阳性,尿路上皮层广谱角蛋白表达阳性.结论以膀胱脱细胞材料作为支架,尿路上皮细胞和膀胱平滑肌细胞作为种子细胞,能够在体外构建形成包含膀胱黏膜层及平滑肌层的复层膀胱壁结构.细胞-材料复合物的体外构建将为体内膀胱缺损的组织工程修复提供实验依据.

关键词：膀胱组织工程膀胱脱细胞基质移植物平滑肌细胞尿路上皮细胞

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采用明胶海绵置入法建立大鼠皮肤切口瘢痕模型的实验研究

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中华整形外科杂志 2008年第1期24卷 42-45页

作者：武晓莉刘伟高振蔡泽浩邓丹宗丽娟殷德民曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室200011

目的采用明胶海绵置入皮肤切除型切口的方法增加大鼠皮肤切口的瘢痕宽度。方法在SD大鼠背部右侧作皮肤全层切除型切口，置入特定规格的无菌明胶海绵，左侧作同等长度线性切口后用镊子夹闭；对照组1的两侧均作切除型切口，伤口内均置入... 详细信息

目的采用明胶海绵置入皮肤切除型切口的方法增加大鼠皮肤切口的瘢痕宽度。方法在SD大鼠背部右侧作皮肤全层切除型切口，置入特定规格的无菌明胶海绵，左侧作同等长度线性切口后用镊子夹闭；对照组1的两侧均作切除型切口，伤口内均置入明胶海绵；对照组2两侧也均作切除型切口，但仅在一侧置入明胶海绵。于术后不同时段取材进行各项检测。结果置入明胶海绵后，伤口或瘢痕宽度为对照侧的4～11倍（P〈0．01），伤口上皮化延迟。对照组1的两侧伤口或瘢痕宽度无差别，同一伤口或瘢痕不同部位宽度一致。对照组2未加明胶海绵侧伤口收缩呈不规则状而非线性。结论采用明胶海绵置入的方法可以稳定增加大鼠皮肤伤口愈合后的瘢痕宽度，从而为皮肤瘢痕研究提供一种新的动物模型。

关键词：动物模型明胶海绵置入法大鼠皮肤瘢痕吸收性

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软骨细胞与骨髓基质细胞共培养构建软骨的体内评价

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中华医学杂志 2007年第27期87卷 1929-1933页

作者：刘霞周广东吕晓杰刘天一张文杰刘伟曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海市组织工程重点实验室 200011

目的探讨软骨细胞与骨髓基质细胞（BMSC）共培养体外构建复合物体内植入形成成熟软骨组织的可行性。方法体外培养扩增猪BMSC，经绿色荧光蛋白（EGFP）基因转染标记后，与猪关节软骨细胞按1：1比例混合，以5．0×10^7／ml的细胞终浓... 详细信息

目的探讨软骨细胞与骨髓基质细胞（BMSC）共培养体外构建复合物体内植入形成成熟软骨组织的可行性。方法体外培养扩增猪BMSC，经绿色荧光蛋白（EGFP）基因转染标记后，与猪关节软骨细胞按1：1比例混合，以5．0×10^7／ml的细胞终浓度接种于聚羟基乙酸／聚乳酸（PGA／PLA）材料支架作为共培养组，以相同终浓度的单纯软骨细胞和单纯BMSC分别接种PGA／PLA作为阳性对照组及阴性对照组。各组标本均于体外培养2周后植于裸鼠皮下，8周后取材，通过大体观察、激光共聚焦显微镜观察、糖胺聚糖含量测定、生物力学、组织学以及免疫组织化学等方法对新生软骨组织进行全面评价。结果各组细胞均与材料黏附良好。体内植入8周后，共培养组及阳性对照组标本基本保持植入前的大小和形状，外观类似软骨组织，组织学显示两组均有连续的软骨陷窝样结构形成，免疫组织化学显示有大量Ⅱ型胶原沉积。定量测定结果显示，共培养组的糖胺聚糖含量和弹性模量均达到软骨细胞构建软骨组织的80％以上。共聚焦显微镜观察可见EGFP标记细胞形成了软骨陷窝。阴性对照组标本的体积较植入前明显缩小，组织学及免疫组织化学均未见软骨样组织形成。结论软骨细胞与BMSC共培养构建的复合物植入体内后能继续形成成熟软骨组织，这表明植入体内后软骨细胞仍能保持对BMSC的诱导作用。

关键词：骨髓基质细胞软骨细胞共同培养软骨形成

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血清浓度影响骨髓基质干细胞体外软骨分化的实验研究

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中华整形外科杂志 2007年第5期23卷 405-408页

作者：刘天一周广东刘霞魏娴陈付国武晓莉崔磊刘伟曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海市组织工程重点实验室200011

目的探讨含有不同浓度胎牛血清的成软骨分化诱导液对骨髓基质干细胞（BMSCs）体外分化的影响，明确体外培养用血清在细胞分化中的作用，为软骨的体外组织构建提供技术参数。取第2代猪BMSCs，以5×10^7个细胞/cm^3的密度接种到聚羟... 详细信息

目的探讨含有不同浓度胎牛血清的成软骨分化诱导液对骨髓基质干细胞（BMSCs）体外分化的影响，明确体外培养用血清在细胞分化中的作用，为软骨的体外组织构建提供技术参数。取第2代猪BMSCs，以5×10^7个细胞/cm^3的密度接种到聚羟基乙酸（PGA）制成的圆盘状支架上（直径5mm，厚度2mm），7d后分别应用含0％、5％、10％血清浓度的诱导液（诱导因子包括TGF-1、IGF-Ⅰ及地塞米松）进行体外持续性诱导培养。8周取材行组织湿重测量、GAG含量定量分析、大体观察、组织学、组织化学及免疫组织化学检测。结果 10％血清组复合物外观瓷白色，坚硬细腻，体积和外形均无明显变化。组织学及免疫组织化学检测结果显示有典型的软骨陷窝，大量的软骨特异性细胞外基质成分，组织湿重和GAG定量亦明显高于其它两组；3％血清组复合物体积缩小．有少量陷窝样结构及软骨特异性胞外基质聚集；而无血清组复合物缩小，松软易碎，未见典型的软骨陷窝和软骨特异性基质成分。结论体外诱导培养BMSCs构建组织工程软骨过程中，10％浓度的血清成分有利于BMSCs成软骨分化。

关键词：骨髓基质干细胞软骨体外研究

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21世纪组织工程面临的机遇与挑战

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中华医学杂志 2005年第36期85卷 2523-2525页

作者：曹谊林周广东上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海市组织工程重点实验室 200011

组织、器官缺损或功能障碍是引起人类疾病和死亡的最主要原因.如何从根本上解决这一难题,已成为生命科学领域积极探索的国际前沿课题.自本世纪以来,组织工程研究已取得了突飞猛进的发展,各种结构相对简单的组织构建及缺损修复研究均已... 详细信息

组织、器官缺损或功能障碍是引起人类疾病和死亡的最主要原因.如何从根本上解决这一难题,已成为生命科学领域积极探索的国际前沿课题.自本世纪以来,组织工程研究已取得了突飞猛进的发展,各种结构相对简单的组织构建及缺损修复研究均已在高等哺乳动物体内获得成功,部分成果已开始临床应用,这为本世纪组织工程的进一步发展与应用带来了良好的机遇.然而,作为一门新兴学科,其深入发展也暴露出许多新的问题与挑战[1,2].本文就从组织工程的3个基本要素浅谈21世纪组织工程发展所面临的机遇与挑战。

关键词：组织工程研究 21世纪人类疾病功能障碍器官缺损生命科学动物体内缺损修复组织构建

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