检索结果-内蒙古大学图书馆

生物工程学报 2014年第10期30卷 1522-1530页

作者：戴建军李翔吴彩凤张树山张廷宇张德福上海农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106

为探讨不同转染试剂(LipofectamineTM LTX&PLUSTM、Lipofectamine2000和纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物(PAMAM-D))和睾丸注射方法 (睾丸网注射、曲精细管注射和间质注射)对转基因小鼠生产效率的影响,将pEGFP-C1质粒分别与不同转染... 详细信息

为探讨不同转染试剂(LipofectamineTM LTX&PLUSTM、Lipofectamine2000和纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物(PAMAM-D))和睾丸注射方法 (睾丸网注射、曲精细管注射和间质注射)对转基因小鼠生产效率的影响,将pEGFP-C1质粒分别与不同转染试剂混合后,按照不同的注射方法注入小鼠睾丸内,30 d后检测小鼠精子密度、活力、精子阳性率以及配种后仔鼠转基因阳性率。结果 3种转染试剂对小鼠繁殖性能影响由小到大依次为LipofectamineTM LTX&PLUSTM、Lipofectamine 2000和PAMAM-D。转染后LipofectamineTM LTX&PLUSTM、Lipofectamine 2000和PAMAM-D组精子的GFP阳性率分别为35.65%±0.69%、12.86%±0.35%和10.04%±0.20%。配种后仔鼠的PCR阳性率分别为29.17%、13.70%和5.88%。3种不同注射方法对小鼠睾丸都造成损伤,由小到大依次为睾丸网注射、曲精细管注射和睾丸间质注射,三者的阳性精子比例分别为35.13%±1.727%、15.13%±1.457%和0%,配种后仔鼠的PCR阳性率分别为33.3%、12.5%和0%。结果表明,LipofectamineTM LTX&PLUSTM和睾丸网注射对小鼠睾丸的损伤最小,并能获得较高的转染效率。

关键词：小鼠转基因转染试剂睾丸注射

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不同形式饲粮对生长期白山羊生长性能、肉质性能和血液生理生化指标的影响

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动物营养学报 2021年第8期33卷 4748-4759页

作者：戴建军李丹阳孙玲伟吴彩凤吕玉华张树山林月霞张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106

为促进全价颗粒饲粮在山羊饲养中的推广应用,本研究以生长期长三角洲白山羊为研究对象,分别以全混合日粮(TMR,TMR组)、全价颗粒饲粮(颗粒组)和全价颗粒饲粮部分限制采食(限制采食组)进行饲喂,研究全价颗粒饲粮对其生长速度、肉质性能和... 详细信息

为促进全价颗粒饲粮在山羊饲养中的推广应用,本研究以生长期长三角洲白山羊为研究对象,分别以全混合日粮(TMR,TMR组)、全价颗粒饲粮(颗粒组)和全价颗粒饲粮部分限制采食(限制采食组)进行饲喂,研究全价颗粒饲粮对其生长速度、肉质性能和血液生理生化指标的影响。结果表明:1)颗粒组的增重效果显著高于TMR组(P<0.05),部分限制采食亦能取得良好的增重效果。2)与TMR组相比,颗粒组白山羊屠宰率提高了1.48%,但差异不显著(P>0.05);各组间pH、剪切力、滴水损失、蒸煮损失和肉色均没有显著变化(P>0.05)。3)各组间白山羊血清中生长激素(GH)、生长抑素(SS)、生长激素释放多肽(GHRP)、三碘甲状腺原氨酸(T 3)、甲状腺素(T 4)和胰岛素样生长因子(IGF)含量均无显著差异(P>0.05);限制采食组血清碱性磷酸酶(ALP)活性在第4周时出现一个异常波动,显著高于TMR组和颗粒组(P<0.05),到第8周时限制采食组血清ALP活性显著下降(P<0.05),但仍显著高于颗粒组(P<0.05);颗粒组的血清甘油三酯(TG)含量在第8周时显著高于TMR组和限制采食组(P<0.05),血清低密度脂蛋白(LDL)含量则显著低于TMR组(P<0.05),其余血清生化指标在各组之间均无显著差异(P>0.05)。在血常规指标方面,除个别指标在饲喂第2周出现一定波动外,其余时间点3组呈一致变化趋势;饲喂结束后,各组之间血清丙二醛(MDA)、活性氧簇(ROS)含量及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均没有显著差异(P>0.05)。4)组织切片观察表明,颗粒饲喂可部分增加十二指肠的肠绒毛长度,对肝脏、睾丸和附睾等组织未产生影响。综上所述,全价颗粒饲粮饲喂对生长期白山羊增重效果明显,且整个试验过程未对其健康指标产生明显影响,可用于育肥过程中的标准化饲喂。

关键词：全价颗粒饲粮生长性能血液生理生化指标白山羊

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3种冷冻方法对猪MII期卵母细胞线粒体分布和损伤的影响

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畜牧兽医学报 2012年第10期43卷 1525-1530页

作者：戴建军吴彩凤张廷宇张树山徐利张德福上海农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106

本研究旨在探讨3种冷冻方法对猪MII期卵母细胞玻璃化冷冻后线粒体的分布和超微结构变化的影响。通过透射电镜、Rhodamine-123(R-123)荧光染色和体外发育观察,结果显示,(1)无论是FDA-DAPI复染存活率,还是孤雌激活卵裂率,CLV(Cryoloop vit... 详细信息

本研究旨在探讨3种冷冻方法对猪MII期卵母细胞玻璃化冷冻后线粒体的分布和超微结构变化的影响。通过透射电镜、Rhodamine-123(R-123)荧光染色和体外发育观察,结果显示,(1)无论是FDA-DAPI复染存活率,还是孤雌激活卵裂率,CLV(Cryoloop vitrification)法(72.00%,7.22%)效果最好,OPS(Open Pulled Straw)法(60.00%,4.85%)次之,straw法(42.22%,0%)最低;(2)CLV法经R-123染色后,卵母细胞线粒体的正常分布率(52.24%)要比其它2组要高(OPS,48.65%;straw,37.68%),但三者之间没有显著差异(P>0.05);(3)透射电镜超微结构表明,冻后卵母细胞线粒体变得粗糙和模糊,有的线粒体嵴减少甚至消失。结果表明,冷冻过程中卵母细胞线粒体的分布和形态损伤严重,CLV法可提高冷冻速率,增强冻后卵母细胞的发育能力,降低冷冻造成的卵母细胞线粒体异常分布比例。

关键词：猪 MⅡ期卵母细胞玻璃化 CLV法线粒体

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成年克隆巴马小型猪心脏差异蛋白的鉴定与生物信息学分析

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畜牧兽医学报 2013年第4期44卷 508-513页

作者：张树山戴建军吴彩凤张廷宇张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106

本研究旨在探索体细胞核移植(克隆)操作对克隆巴马小型猪心脏发育的影响。分别提取3头成年克隆猪和3头繁殖猪的心脏蛋白,利用双向电泳-质谱体系的比较蛋白质组学技术进行分离和鉴定,并结合生物信息学手段对部分差异蛋白进行功能分析。... 详细信息

本研究旨在探索体细胞核移植(克隆)操作对克隆巴马小型猪心脏发育的影响。分别提取3头成年克隆猪和3头繁殖猪的心脏蛋白,利用双向电泳-质谱体系的比较蛋白质组学技术进行分离和鉴定,并结合生物信息学手段对部分差异蛋白进行功能分析。结果表明,与对照猪相比,克隆巴马小型猪的心脏蛋白共有11个差异蛋白,其中5个为上调蛋白,6个为下调蛋白。本试验在蛋白质水平上证实:3头克隆巴马小型猪的心脏均存在一定程度的功能失调。

关键词：巴马小型猪体细胞核移植心脏比较蛋白质组学

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冠状病毒感染调控细胞凋亡机制研究进展

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微生物学通报 2020年第2期47卷 594-605页

作者：谢春芳于瑞嵩董世娟司伏生陈冰清王剑马进雯李震上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106

冠状病毒是常见的感染人类和动物并造成健康危害的主要病原性微生物之一,冠状病毒感染细胞后,细胞产生免疫应答,病毒为了在细胞内转录翻译和装配下一代,应对细胞免疫应答的同时,还参与到许多细胞活动中,当细胞特定受体与病毒蛋白结合后... 详细信息

冠状病毒是常见的感染人类和动物并造成健康危害的主要病原性微生物之一,冠状病毒感染细胞后,细胞产生免疫应答,病毒为了在细胞内转录翻译和装配下一代,应对细胞免疫应答的同时,还参与到许多细胞活动中,当细胞特定受体与病毒蛋白结合后,细胞即启动凋亡程序。冠状病毒的许多蛋白在细胞凋亡程序中起促进或抑制凋亡的不同作用,如病毒S蛋白与细胞膜死亡受体作用诱导细胞启动外在凋亡途径,病毒感染细胞后产生的M、S蛋白引起细胞内质网应激、Ca2+失衡,诱导细胞启动内在凋亡途径,而E蛋白则抑制细胞凋亡的发生。本文综述了冠状病毒对侵染细胞的促凋亡或抑制凋亡作用及其作用机制,通过了解病毒不同蛋白在各种凋亡途径中的不同作用,希望为人工干预调控细胞研究提供思路,为冠状病毒感染防控提供理论支持。

关键词：冠状病毒促凋亡抑制凋亡内在凋亡途径外在凋亡途径

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成年克隆猪与正常繁殖猪心脏的比较蛋白质组学研究

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2013年第10期41卷 27-31页

作者：张树山戴建军吴彩凤张廷宇张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106

【目的】探讨体细胞核移植(即克隆)操作对克隆猪心脏发育的影响。【方法】分别对3头正常繁殖猪和3头成年克隆猪的心脏进行解剖学观察和组织切片分析。提取心脏蛋白样品,利用基于双向电泳-质谱体系的比较蛋白质组学技术对心脏蛋白进行分... 详细信息

【目的】探讨体细胞核移植(即克隆)操作对克隆猪心脏发育的影响。【方法】分别对3头正常繁殖猪和3头成年克隆猪的心脏进行解剖学观察和组织切片分析。提取心脏蛋白样品,利用基于双向电泳-质谱体系的比较蛋白质组学技术对心脏蛋白进行分析。【结果】解剖学观察和组织切片分析证实,克隆猪心脏发育异常;与正常繁殖猪相比,克隆猪心脏蛋白共有6种差异表达蛋白,分别为组织蛋白酶-D、骨骼肌型α-肌动蛋白、心肌肌球蛋白重链、热休克蛋白-27、Telethonin和骨骼肌型α-肌动蛋白,其中前5种蛋白表达上调,后1种蛋白表达下调。【结论】一些重要的心脏蛋白表达异常可能导致了克隆猪的心脏发育缺陷,比较蛋白质组学手段可以作为探索体细胞核移植机制的重要方法。

关键词：猪克隆体细胞核移植心脏比较蛋白质组学

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[Ca2+]及山梨醇电激液对猪卵母细胞孤雌激活的影响

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农业生物技术学报 2009年第6期17卷 1007-1012页

作者：张廷宇戴建军吴彩凤马恒东王磊杨山亭张德福上海农业科学院畜牧兽医研究所上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室四川农业大学动物科技学院

研究了电激液中不同[Ca2+]与不同电脉冲强度对猪体外成熟卵母细胞孤雌激活的影响;以及山梨醇电激活液在猪孤雌激活中的应用。结果表明,(1)[Ca2+]为0.05和0.1mmol/L时,分别以1.6和1.2kV/cm激活,得到的卵裂率为73.75%和74.70%;囊胚率为37.... 详细信息

研究了电激液中不同[Ca2+]与不同电脉冲强度对猪体外成熟卵母细胞孤雌激活的影响;以及山梨醇电激活液在猪孤雌激活中的应用。结果表明,(1)[Ca2+]为0.05和0.1mmol/L时,分别以1.6和1.2kV/cm激活,得到的卵裂率为73.75%和74.70%;囊胚率为37.50%和36.83%,显著高于其余各组(P<0.05);当[Ca2+]过高,增加脉冲强度卵母细胞孤雌发育能力反而下降,退化率升高;(2)以山梨醇液进行电激活,在1.6kV/cm的直流泳冲时,卵裂率和囊胚率最高,分别为77.23%和34.15%;(3)与甘露醇电激液不同,施加交流电,山梨醇液不能对孤雌胚胎发育起到促进作用;(4)将山梨醇和甘露醇电激液等体积混合,交流脉冲后进行电激活,1.2和1.6kV/cm组卵裂率分别72.33%和70.03%,囊胚率分别为31.03%和29.60%,虽然略低于甘露醇组(77.07%和36.03%),但优于山梨醇组(69.63%和26.93%),差异不显著(P>0.05)。结果说明,猪卵母细胞激活所需内流[Ca2+]存在临界值,临界值内,提高[Ca2+]或电参数,都能提高卵母细胞的激活效果;超过临界值,发育能力下降;山梨醇液能够取代甘露醇液用于猪卵细胞的电激活;同时以山梨醇和甘露醇作为电激液的基本成分,可以用于猪卵母细胞的电激活。

关键词：孤雌激活 [Ca2+] 山梨醇混合液猪

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红景天多糖对猪精子冷冻保护效果的研究

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农业生物技术学报 2010年第3期18卷 519-525页

作者：张树山李青旺胡建宏江中良戴建军吴彩凤张廷宇张德福上海农业科学院畜牧兽医研究所上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室西北农林科技大学动物科技学院

研究旨在探索红景天多糖以及三种添加方案对猪精子冷冻保护效果的影响。实验1中,在冷冻保存Ⅰ液中分别添加红景天多糖分别为0、2mg/L、4mg/L、6mg/L、8mg/L和10mg/L;实验2中,在冷冻保存Ⅱ液中添加红景天多糖,浓度同实验1;实验3基于实验1... 详细信息

研究旨在探索红景天多糖以及三种添加方案对猪精子冷冻保护效果的影响。实验1中,在冷冻保存Ⅰ液中分别添加红景天多糖分别为0、2mg/L、4mg/L、6mg/L、8mg/L和10mg/L;实验2中,在冷冻保存Ⅱ液中添加红景天多糖,浓度同实验1;实验3基于实验1和2,对比了三种红景天添加方案对猪精子冷冻效果的影响。研究结果表明:1、红景天多糖较适宜添加浓度为6mg/L,能明显提高猪冷冻精子品质,并能为猪精子提供较好的抗氧化作用;2、三种添加方案中,在Ⅰ液中添加(方案A)对猪冷冻精子保护效果明显优于方案B和C(P<0.05)。

关键词：猪精液冷冻保存红景天多糖精子品质

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海藻糖对猪精子冷冻真空干燥保存效果的影响

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生物工程学报 2010年第8期26卷 1143-1149页

作者：孟祥黔顾晓龙吴彩凤戴建军张廷宇谢一妮吴志强刘亮马恒东张德福四川农业大学生命科学与理学院雅安625014 上海农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106

猪精子经冷冻干燥后,在光学显微镜和电子显微镜下观察其超微结构,并借助辅助生殖技术将其注入猪卵母细胞后,进一步观察受精卵的发育情况。结果表明:海藻糖组雄原核形成率(68.52%)、卵裂率(59.17%)和囊胚率(19.16%)优于EDTA组(64.59%、56... 详细信息

猪精子经冷冻干燥后,在光学显微镜和电子显微镜下观察其超微结构,并借助辅助生殖技术将其注入猪卵母细胞后,进一步观察受精卵的发育情况。结果表明:海藻糖组雄原核形成率(68.52%)、卵裂率(59.17%)和囊胚率(19.16%)优于EDTA组(64.59%、56.26%和15.62%)和对照组(35.36%、52.33%和8.60%)(P<0.05);海藻糖组的冷冻真空干燥猪精子分别在4℃下保存60、120、180d,雄原核形成率、卵裂率和囊胚率均无显著差异(P>0.05);海藻糖组的冷冻真空干燥猪精子复水化后孵育1h和2h,卵裂率、卵裂率和囊胚率均差异显著(P<0.05);海藻糖处理组与EDTA处理组中的冷冻真空干燥猪精子分别在4℃和-20℃下保存后各处理组间精子形态差异不显著(P>0.05);海藻糖组中B级冷冻真空干燥精子百分数显著多于EDTA处理组(P<0.05)。超微结构分析表明,冷冻真空干燥猪精子的损伤主要表现在顶体和颈部的肿胀与缺损、尾部断裂。

关键词：猪精子冷冻真空干燥单精子注射

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体细胞核移植技术生产猪植酸酶转基因胚胎的研究

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中国畜牧兽医 2014年第11期41卷 1-6页

作者：戴建军吴彩凤张树山顾晓龙张廷宇吴志强张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106

为获得具有植酸酶腮腺特异性表达的猪转基因克隆胚胎,本研究使用植酸酶腮腺特异性表达的DNA质粒(包含腮腺分泌蛋白(parotid secretary protein,PSP)启动子与终止子序列、Neo筛选基因、绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因和高比活的植酸酶appA基... 详细信息

为获得具有植酸酶腮腺特异性表达的猪转基因克隆胚胎,本研究使用植酸酶腮腺特异性表达的DNA质粒(包含腮腺分泌蛋白(parotid secretary protein,PSP)启动子与终止子序列、Neo筛选基因、绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因和高比活的植酸酶appA基因),采用脂质体转染和基因素418(G418)药物抗性筛选的方法获取稳转细胞系,并利用体细胞核移植技术获得植酸酶转基因胚胎。结果表明,本研究构建的DNA质粒可用于细胞筛选,且质粒越小,细胞的转染效率越高,14.89kb的YM6552仅获得了7.1%的转染率,EGFP质粒则获得了43.4%的转染效率。在单克隆形成上,较小的pYN3600也获得了更高的单克隆形成数(25个),其中表达EGFP的单克隆有14个,植酸酶PCR阳性集落有11个,高于YM6552的单克隆数(19、8和6)。转基因细胞构建重构胚胎后,所有的胚胎均能表达绿色荧光蛋白,虽其体外发育能力有所下降,但差异不显著(P>0.05)。综上所述,本研究所采用的植酸酶质粒、细胞筛选方法和核移植技术可生产植酸酶重构胚。

关键词：植酸酶腮腺分泌蛋白转基因核移植猪

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