检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2012年第6期32卷 922-926,932页

作者：吴志强谢一妮戴建军张廷宇吴彩凤张树山顾晓龙刘亮吴斌陈慧兰张德福马恒东上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 四川农业大学生命科学与理学院四川雅安625014

为了探求新生克隆猪可能的死亡原因以及是否存在不完全的DNA甲基化重编程,本试验运用亚硫酸氢盐测序法分别检测了H19基因和IGF2R基因差异甲基化区(DMR)在新生死亡克隆猪和同期正常猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的甲基化状态。结果发... 详细信息

为了探求新生克隆猪可能的死亡原因以及是否存在不完全的DNA甲基化重编程,本试验运用亚硫酸氢盐测序法分别检测了H19基因和IGF2R基因差异甲基化区(DMR)在新生死亡克隆猪和同期正常猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的甲基化状态。结果发现,H19基因DMR在克隆猪肺脏中表现为超甲基化,极显著高于正常猪(95.20%vs 46.80%P<0.01),且10个测序克隆中存在2处连续的全甲基化CpG位点(4～9位、12～S17位),而在其他组织中甲基化差异不显著(P>0.05);IGF2R基因DMR在肝脏中处于超甲基化状态,显著高于正常猪(80.00%vs 39.41%P<0.05),而在肺脏中为去甲基化状态,极显著低于正常猪(14.71%vs 66.47%P<0.01),在其他组织差异不显著(P>0.05)。结果说明,在死亡克隆猪中,H19基因DMR在肺脏和IGF2R基因在肝脏与肺脏中存在不完全的DNA甲基化重编程,这可能是导致克隆动物死亡的因素之一。

关键词：差异甲基化区 DNA甲基化体细胞克隆表观重编程

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冷冻保存对猪耳成纤维细胞H19和IGF2R基因DNA甲基化和基因表达的影响

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中国畜牧杂志 2018年第7期54卷 86-90页

作者：张宏丽陈晓戴建军姚惠娟张树山张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 上海种猪工程技术研究中心上海201302

为探索冷冻保存对猪体细胞H19和IGF2R基因DNA甲基化的影响,本研究以梅山猪耳成纤维细胞为材料,采用亚硫酸氢盐测序和RT-PCR技术,检测了新鲜和冷冻保存细胞中H19和IGF2R基因的DNA甲基化状态和表达量,并对甲基化相关基因的表达水平进行分... 详细信息

为探索冷冻保存对猪体细胞H19和IGF2R基因DNA甲基化的影响,本研究以梅山猪耳成纤维细胞为材料,采用亚硫酸氢盐测序和RT-PCR技术,检测了新鲜和冷冻保存细胞中H19和IGF2R基因的DNA甲基化状态和表达量,并对甲基化相关基因的表达水平进行分析。结果表明:冷冻组中H19基因DMR1和DMR3的甲基化率极显著高于新鲜组(P<0.01),H19基因DMR2表现为去甲基化,极显著低于新鲜组中的甲基化率(P<0.01),且该基因表达量极显著高于新鲜组(P<0.01);冷冻组IGF2R基因DMR2表现为超甲基化,冷冻组极显著高于新鲜组中的甲基化率(P<0.01),但IGF2R基因表达量无显著差异(P>0.05);冷冻组中DNMT3A和DNMT1的基因表达量极显著高于新鲜组(P<0.01),DNMT3B基因表达量则无显著差异(P>0.05)。本实验条件下,冷冻保存影响了H19和IGF2R基因甲基化控制区的DNA甲基化状态,从而影响了该基因的表达水平。

关键词：梅山猪耳成纤维细胞冷冻保存 DNA甲基化基因表达

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3种冷冻方法对猪MⅡ期卵母细胞线粒体分布和损伤的影响

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畜牧兽医学报 2012年第10期43卷 1525-1530页

作者：戴建军吴彩凤张廷宇张树山徐利张德福上海农业科学院畜牧兽医研究所上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室

本研究旨在探讨3种冷冻方法对猪MⅡ期卵母细胞玻璃化冷冻后线粒体的分布和超微结构变化的影响.通过透射电镜、Rhodamine-123 (R-123)荧光染色和体外发育观察,结果显示,(1)无论是FDA-DAPI复染存活率,还是孤雌激活卵裂率,CLV (Cryoloop vi... 详细信息

本研究旨在探讨3种冷冻方法对猪MⅡ期卵母细胞玻璃化冷冻后线粒体的分布和超微结构变化的影响.通过透射电镜、Rhodamine-123 (R-123)荧光染色和体外发育观察,结果显示,(1)无论是FDA-DAPI复染存活率,还是孤雌激活卵裂率,CLV (Cryoloop vitrification)法(72.00%,7.22％)效果最好,OPS(Open Pulled Straw)法(60.00％,4.85％)次之,straw法(42.22％,0％)最低；(2)CLV法经R-123染色后,卵母细胞线粒体的正常分布率(52.24％)要比其它2组要高(OPS,48.65％；straw,37.68%),但三者之间没有显著差异(P＞0.05)；(3)透射电镜超微结构表明,冻后卵母细胞线粒体变得粗糙和模糊,有的线粒体嵴减少甚至消失.结果表明,冷冻过程中卵母细胞线粒体的分布和形态损伤严重,CLV法可提高冷冻速率,增强冻后卵母细胞的发育能力,降低冷冻造成的卵母细胞线粒体异常分布比例.

关键词：猪 MⅡ期卵母细胞玻璃化 CLV法线粒体

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冷冻载体Cryotop降温速率的测量及系统优化

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制冷学报 2013年第5期34卷 95-98页

作者：李维杰周新丽戴建军张德福刘宝林王海松上海理工大学生物热科学研究所上海200093 上海农业科学院畜牧兽医研究所上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106

Cryotop法是玻璃化保存卵母细胞较有效的方法之一。当Cryotop载体插入液氮时,降温速度极高,几乎瞬间完成,常规的方法无法测量。实验使用数字示波器、线径25μm的T型热电偶建立起高速测温系统,测量了Cryotop法用于卵母细胞低温保存时的... 详细信息

Cryotop法是玻璃化保存卵母细胞较有效的方法之一。当Cryotop载体插入液氮时,降温速度极高,几乎瞬间完成,常规的方法无法测量。实验使用数字示波器、线径25μm的T型热电偶建立起高速测温系统,测量了Cryotop法用于卵母细胞低温保存时的降温速率。通过改变载体材料、厚度、冷源温度等条件,提高Cryotop的降温速率。结果发现当使用60μm的铜质载板,使用浆状液氮作为冷源时,降温速度最高,可达到(37130±1336)K/min,较商品化的Cryotop的降温速度((11982±1936)K/min)提高了2倍。

关键词： Cryotop 降温速率高速测温

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哺乳动物精子冷冻干燥保存技术研究进展

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上海农业学报 2010年第2期26卷 110-113页

作者：孟祥黔张德福马恒东戴建军吴彩凤张廷宇四川农业大学生命科学与理学院雅安625014 上海农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106

概述了国内外哺乳动物精子冷冻干燥保存研究工作现状,阐述了精子冷冻干燥研究历史、精子冷冻干燥保存机理、冷冻保存保护剂及相关处理研究进程,并探讨了目前研究中存在的问题和今后的研究展望。

关键词：哺乳动物精子冷冻干燥单精子注射

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克隆猪印迹基因IGF2/H19印迹控制区的甲基化状态

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中国畜牧兽医 2011年第11期38卷 125-131页

作者：吴志强谢一妮张廷宇戴建军吴彩凤马恒东张德福四川农业大学生命科学与理学院四川雅安625014 上海农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106

为了探求核移植过程中DNA甲基化重编程是否充分,运用亚硫酸氢盐测序法分别检测新生死亡克隆猪和同期正常猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏组织中IGF2/H19基因印迹控制区(DMR1、DMR2、DMR3)的甲基化状态。结果发现,DMR1、DMR3在克隆猪和... 详细信息

为了探求核移植过程中DNA甲基化重编程是否充分,运用亚硫酸氢盐测序法分别检测新生死亡克隆猪和同期正常猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏组织中IGF2/H19基因印迹控制区(DMR1、DMR2、DMR3)的甲基化状态。结果发现,DMR1、DMR3在克隆猪和正常猪各组织中的甲基化水平不同,但差异不显著(P>0.05)。DMR2在克隆猪肺脏组织表现为超甲基化,极显著高于正常猪(P<0.01),且10个测序克隆中存在2处连续的全甲基化CpG位点(分别为4-9位和12-17位),而在其它组织中甲基化差异不显著(P>0.05)。说明DMR2在克隆猪肺脏组织可能存在DNA甲基化重编程紊乱,这也可能是导致该克隆猪死亡的因素之一。

关键词：差异甲基化区 DNA甲基化体细胞克隆表观重编程

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猪卵母细胞去核方法的改进

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中国兽医学报 2006年第5期26卷 574-577页

作者：张德福刘东汤琳琳陈晓宇 Lin Cailu 上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100 Animal Breeding Institute Bonn UniversityBonn 53121 Germany

对猪体细胞克隆技术中关键步骤之一的去核方法作了较深入的研究。结果表明,由本实验室改进的Willadsen去核法———二步挤压去核法,无论在去核操作成功率(73.9%)上还是在去核效率(81.2%)上都明显好于McGrath-Solter去核法(42.5%、67.4%,... 详细信息

对猪体细胞克隆技术中关键步骤之一的去核方法作了较深入的研究。结果表明,由本实验室改进的Willadsen去核法———二步挤压去核法,无论在去核操作成功率(73.9%)上还是在去核效率(81.2%)上都明显好于McGrath-Solter去核法(42.5%、67.4%,P<0.05);同时,本试验还发现,卵母细胞成熟培养36 h后去核组去核效率(89.1%)显著地高于成熟培养44 h后去核组(55.8%,P<0.05),而核移植重构胚的发育率2个组间无显著差异。

关键词：猪卵母细胞去核核移植

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高压均质(HPH)处理鸡蛋卵黄对猪冻精质量的影响

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中国兽医科学 2021年第7期51卷 932-938页

作者：汪俊跃何孟纤张树山戴建军孙玲伟吴彩凤张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心上海201306

为探究高压均质(HPH)处理鸡蛋卵黄对猪精液冷冻效果的影响。选取Tris—柠檬酸—葡萄糖基础稀释液,以未处理的鸡蛋卵黄(20%EY)为对照组,添加经HPH处理后的鸡蛋卵黄(20%EY)为试验组,制成Ⅰ液和Ⅱ液,冷冻-解冻后分别对猪精子活力、活率、... 详细信息

为探究高压均质(HPH)处理鸡蛋卵黄对猪精液冷冻效果的影响。选取Tris—柠檬酸—葡萄糖基础稀释液,以未处理的鸡蛋卵黄(20%EY)为对照组,添加经HPH处理后的鸡蛋卵黄(20%EY)为试验组,制成Ⅰ液和Ⅱ液,冷冻-解冻后分别对猪精子活力、活率、顶体完整率、质膜完整率、线粒体活性、抗氧化指标及DNA完整率和凋亡指标进行检测。结果显示,经HPH处理能有效提高猪精子冻后质量。精液解冻后精子活力、活率、顶体完整率、质膜完整率分别为84.32%、86.71%、68.92%、59.09%,较对照组分别提高了13.7%、16.58%、6.5%、4.88%(P<0.05)。与对照组相比,试验组的MDA和ROS较对照组均有所上升(P>0.05),SOD较对照组有所下降(P>0.05)。但冻后精子NO和NOS含量显著降低(P<0.05)。试验组的精子解冻后DNA片段完整性较对照组明显提高(P<0.05),凋亡率下降(P<0.05)。结果表明,HPH处理鸡蛋卵黄能有效提高猪精液冷冻后质量。

关键词：高压均质猪卵黄精液冷冻

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大豆卵磷脂稀释液中添加原花青素对山羊冻精效果的影响

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中国农业科技导报 2021年第9期23卷 78-86页

作者：范文华戴建军张树山孙玲伟吴彩凤张德福上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心上海201306 上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106

为研究大豆卵磷脂稀释液中添加原花青素(proanthocyanidin, PC)对山羊精子的冷冻保护作用,以20%卵黄为对照(EY组),分别在大豆卵磷脂为基础稀释液的冻精稀释液中添加最终浓度为0、10、20、40、60μg·mL-1的PC(分别命名为SL0、SL1、... 详细信息

为研究大豆卵磷脂稀释液中添加原花青素(proanthocyanidin, PC)对山羊精子的冷冻保护作用,以20%卵黄为对照(EY组),分别在大豆卵磷脂为基础稀释液的冻精稀释液中添加最终浓度为0、10、20、40、60μg·mL-1的PC(分别命名为SL0、SL1、SL2、SL3、SL4组),冷冻-解冻后分别对精子活率、活力、质膜完整率、顶体完整率、线粒体活性、抗氧化和凋亡指标进行检测。结果表明,当大豆卵磷脂稀释液中PC添加浓度为40μg·mL-1(SL3组)时,解冻后精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性最高,分别达58.49%、53.45%、50.46%、55.37%和55.16%,显著高于其他PC添加组和EY组(P<0.05)。SL3组解冻后精子的超氧化物歧化酶(SOD)(224.87 U·mL-1)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量(129.6 U·L-1)最高,总caspase凋亡率(54.33%)和TUNEL凋亡率(41.36%)最低,与EY和SL0组差异显著(P<0.05)。当PC的添加浓度提高至60μg·mL-1(SL4组)时,解冻后精子质量显著下降,表现为对精子毒性作用。综上,在山羊精液冷冻中,大豆卵磷脂稀释液中添加PC浓度为40μg·mL-1可降低精子氧化损伤和细胞凋亡,提高冻精品质。该研究改善了无动物源稀释液在山羊精液冷冻中的应用效果,提高了山羊冻精的生物安全性和应用前景。

关键词：山羊精液冷冻大豆卵磷脂原花青素抗氧化

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地方牛品种云南独龙牛的研究进展

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上海农业学报 2011年第2期27卷 139-142页

作者：张德福张树山戴建军吴彩凤张廷宇罗天福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 云南省怒江州畜牧兽医局云南673100

介绍了独龙牛的习性、起源和生产性能等,并针对目前存在的问题提出建议。独龙牛是珍贵的地方牛种资源,仅分布在中国大陆的云南省怒江流域。独龙牛种质资源的保护对保持牛种质资源多样性有着重要意义,并且在牛的新品种培育方面具有不可... 详细信息

介绍了独龙牛的习性、起源和生产性能等,并针对目前存在的问题提出建议。独龙牛是珍贵的地方牛种资源,仅分布在中国大陆的云南省怒江流域。独龙牛种质资源的保护对保持牛种质资源多样性有着重要意义,并且在牛的新品种培育方面具有不可忽视的价值。

关键词：独龙牛牛种质资源地方种云南

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