检索结果-内蒙古大学图书馆

上海医科大学学报 2000年第1期27卷 28-31,34页

作者：苏剑敏周逸平徐薇苓查锡良上海医科大学基础医学院化学教研室上海200032 上海医科大学肿瘤医院病理科上海200032 上海医科大学基础医学院生化教研室上海200032

目的　研究Ｅ钙粘蛋白（Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ）在胃癌、结直肠癌、宫颈癌、乳腺癌中的表达与肿瘤分化程度，侵袭转移等生物行为的关系及在４种癌症中表达的相互关系。方法　用免疫组织化学ＡＢＣ法检测２０例胃癌、２１例结直肠癌、... 详细信息

目的　研究Ｅ钙粘蛋白（Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ）在胃癌、结直肠癌、宫颈癌、乳腺癌中的表达与肿瘤分化程度，侵袭转移等生物行为的关系及在４种癌症中表达的相互关系。方法　用免疫组织化学ＡＢＣ法检测２０例胃癌、２１例结直肠癌、２０例宫颈癌、２０例乳腺癌石蜡标本Ｅ钙粘蛋白的表达水平。结果　Ｅ钙粘蛋白在４种肿瘤中的表达有一定的相似，即癌组织较癌旁组织的表达水平低，高中分化肿瘤比低分化肿瘤表达水平高。Ｅ钙粘蛋白在不同转移情况肿瘤中的表达结果差异不明显。结论　Ｅ钙粘蛋白癌旁组织中的表达明显高于癌组织，并与分化程度有直接关系；与转移的关系比较复杂，有待于进一步研究。Ｅ钙粘蛋白在４种肿瘤中的表达有一致性，所以Ｅ钙粘蛋白免疫组织化学研究有一定的临床病理价值。

关键词： E-钙粘蛋白胃癌结直肠癌宫颈癌乳腺癌

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肝组织羟脯氨酸含量测定方法的优化

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上海医科大学学报 2000年第4期27卷 295-297页

作者：李文才张锦生李华张秀荣张月娥上海医科大学基础医学院病理学教研室上海200032

目前，评价和筛选确切有效的抗肝纤维化药物是肝脏病学者面临的一个重要的任务，药物疗效主要根据反映肝纤维化程度的指标来判定。肝纤维化量化的手段主要有定量组织学方法(组织学记分法及图像分析法等)和生化方法(3H脯氨酸掺入法及羟... 详细信息

目前，评价和筛选确切有效的抗肝纤维化药物是肝脏病学者面临的一个重要的任务，药物疗效主要根据反映肝纤维化程度的指标来判定。肝纤维化量化的手段主要有定量组织学方法(组织学记分法及图像分析法等)和生化方法(3H脯氨酸掺入法及羟脯氨酸含量测定方法)。前者或受主观影响较大，或需要昂贵的图像分析仪，后者中的同位素掺入法需要在特定的同位素实验室进行；而羟脯氨酸生化测定法可在一般实验室进行。羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)是一种非必需氨基酸，除弹性蛋白含少量羟脯氨酸(约1%)外，几乎所有的羟脯氨酸都存在于胶原中。因此，羟脯氨酸含量的测定已成为衡量机体胶原组织代谢的重要指标。胶原是肝纤维化时细胞外基质的主要成分，故肝组织羟脯氨酸含量能客观地反映肝纤维化程度［1,2］。近年来，已对尿羟脯氨酸含量测定的各种参数和条件进行了优化［3,4］，但对肝组织羟脯氨酸含量测定的方法尚未有系统的研究，尽管已有人使用该方法来评价肝纤维化程度［5,6］。另外，经福尔马林溶液固定的肝组织是否能使用同样的方法测定羟脯氨酸含量，以便进行回顾性研究尚不清楚。为此，我们在Gordeladze等［4］建立的方法基础上，寻找肝组织最适宜的水解条件，比较几种肝组织处理方法对羟脯氨酸含量测定的影响等，以建立一种可靠、稳定的肝组织羟脯氨酸含量测定方法。

关键词：肝纤维化肝组织羟脯氨酸含量

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利用新型表达载体pcDNA3.1/Myc-His表达sIL-4受体

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上海医科大学学报 2000年第4期27卷 298-299,301页

作者：陈琦陈广平郭慕依张秀荣朱虹光上海医科大学基础医学院病理学教研室上海200032

近二十年来，分子生物学技术飞速发展，并在各个领域得到了广泛的运用。通过构建目的基因表达质粒转化细菌或转染细胞，合成重组蛋白质技术日臻成熟［1］。在抗体制备方面，传统的方法是通过分离、纯化抗原，免疫动物制备相应抗体。而... 详细信息

近二十年来，分子生物学技术飞速发展，并在各个领域得到了广泛的运用。通过构建目的基因表达质粒转化细菌或转染细胞，合成重组蛋白质技术日臻成熟［1］。在抗体制备方面，传统的方法是通过分离、纯化抗原，免疫动物制备相应抗体。而要得到一定量纯度较高的抗原往往困难较大且过程烦琐，特别是一些表达量较低的抗原，尤为困难。随着分子生物学技术的发展，利用基因工程合成蛋白质成为可能，为制备高质量抗原开辟了新的领域。现介绍利用一种新的在哺乳动物细胞中高效表达的载体pc DNA 3.1/Myc?His，合成重组大鼠可溶性IL?4受体(sIL?4R)蛋白。材料和方法 RT?PCR扩增sIL?4R基因片段雄性5周龄Wistar大鼠1只，取脾脏，液氮内速冻，利用Isogen RNA抽提试剂(日本基因公司，日本)，参照说明书推荐方法，一步法提取总RNA。电泳鉴定RNA完整未降解，测OD 260/280值定量。取2 μg总DNA，以MULV逆转录酶(Toyobo公司，日本)常规方法逆转录反应合成cDNA［2］。

关键词：分子生物学基因载体 pc DNA 3.1/Myc-His

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用套式RT-PCR法检测肝细胞癌中丙型肝炎病毒基因型

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上海医科大学学报 2000年第1期27卷 16-19页

作者：苏英豪朱世能陆世伦张王海上海医科大学基础医学院病理学教研室上海200032

目的　检测人肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型。方法　用ＲＴＰＣＲ法常规检测ＨＣＣ组织和部分患者血清ＨＣＶ，再以巢式ＲＴＰＣＲ法对ＨＣＶ阳性标本中５种ＨＣＶ基因型进行鉴别。对多数标本中ＨＢｓＡｇ... 详细信息

目的　检测人肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型。方法　用ＲＴＰＣＲ法常规检测ＨＣＣ组织和部分患者血清ＨＣＶ，再以巢式ＲＴＰＣＲ法对ＨＣＶ阳性标本中５种ＨＣＶ基因型进行鉴别。对多数标本中ＨＢｓＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ也进行了免疫组化和原位杂交检测。结果　ＨＣＣ组织中ＨＣＶ阳性率为５０％（３９／７８），与ＨＢＶ者（６４．４％）差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５），两者重叠感染率３４％（２０／５９）。在１０例血清ＨＣＶ阴性ＨＣＣ患者中，３例ＨＣＣ冰冻组织检出ＨＣＶＲＮＡ。在ＨＣＣ组织中共检出３种ＨＣＶ基因型，其中２ａ、１ｂ、３ａ和混合型分别为１７例（４３．６％）、９例（２３．１％）、４例（１０．３％）和２例（５．１％），各基因型间差异有极显著性意义（Ｐ＜０．０１），但２ａ型与１ｂ型间差异无显著性（Ｐ＞０．０５），２ａ型与ＨＢＶ的重叠感染明显较其他ＨＣＶ基因型者常见（Ｐ＜０．０５）。结论　２ａ型ＨＣＶ是ＨＣＣ组织中最常见的基因型并易与ＨＢＶ重叠感染率，ＨＣＣ患者血清ＨＣＶ检测不一定能准确反映ＨＣＣ组织中的ＨＣＶ感染率，其所示基因型也有所不同。

关键词：肝细胞癌丙型肝炎病毒基因型乙型肝炎病毒逆转录聚合酶链反应

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胃镜病理标本中Ⅴ型胶原的定量检测

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上海医科大学学报 2000年第3期27卷 214-214,225,F003页

作者：施建英上海医科大学基础医学院病理学教研室上海200032

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高胆固醇血症对健康大鼠肾脏形态学的影响

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肾脏病与透析肾移植杂志 2000年第1期9卷 34-38页

作者：何永成廖履坦丁小强张月娥徐元钊徐元鼎上海医科大学附属中山医院肾内科上海200032 上海医科大学基础医学院病理教研室上海医科大学基础医学院形态研究中心

目的 :探讨高胆固醇血症对健康大鼠肾脏形态学的影响。　方法 :用 5 %高胆固醇饲料喂养健康雄性Wistar大鼠 ,分别于实验第 30、6 0和 90天进行肾脏的形态学观察。　结果 :自实验第 30天起 ,高胆固醇组表现为进行性肾小球系膜细胞增生 ... 详细信息

目的 :探讨高胆固醇血症对健康大鼠肾脏形态学的影响。　方法 :用 5 %高胆固醇饲料喂养健康雄性Wistar大鼠 ,分别于实验第 30、6 0和 90天进行肾脏的形态学观察。　结果 :自实验第 30天起 ,高胆固醇组表现为进行性肾小球系膜细胞增生 ,系膜基质增多 ,炎性细胞浸润 ,肾小球毛细血管塌陷 ,肾小球上皮细胞足突灶性融合 ,肾小管上皮细胞水样变性 ,肾小球体积进行性增大。电镜未发现肾小球内电子致密物沉积 ,直接免疫荧光显示肾组织IgG阴性。相关分析显示 ,血浆总胆固醇 (TCh)及低密度脂蛋白 (LDL)浓度与肾小球细胞数、肾小球PAS阳性物质积分光密度值及肾小球体积呈显著正相关。　结论 :饮食诱导的高胆固醇血症可导致健康大鼠肾脏非免疫复合物介导的病理损害 ,病变的程度与血浆TCh及LDL浓度呈正相关。

关键词：高胆固醇血症肾小球损害脂质肾毒性

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大鼠肾脏系膜细胞转染人TGF-β1基因可增强MMP-2表达

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上海医科大学学报 2000年第1期27卷 13-15,27页

作者：林文生张农张颂文刘琛顾建新郭慕依上海医科大学基础医学院病理学教研室上海200032 上海医科大学基础医学院基因研究中心上海200032

目的　研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）对培养的大鼠肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）基质金属蛋白酶２（ＭＭＰ２）表达的影响。方法　采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将人ＴＧＦβ１基因转染培养的大鼠ＭｓＣ，经Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂ... 详细信息

目的　研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）对培养的大鼠肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）基质金属蛋白酶２（ＭＭＰ２）表达的影响。方法　采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将人ＴＧＦβ１基因转染培养的大鼠ＭｓＣ，经Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ鉴定其转染成功否；又分别应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ．Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ．酶谱分析法检测阳性表达人ＴＧＦβ１的ＭｓＣＭＭＰ２ｍＲＮＡ、蛋白及酶活性变化。结果　成功获得稳定过表达人ＴＧＦβ１的大鼠ＭｓＣ克隆（ＭＴＧ１），该细胞克隆的ＭＭＰ２ｍＲＮＡ．蛋白表达及其酶活性均获增强。结论　ＴＧＦβ１可增强ＭｓＣＭＭＰ２ｍＲＮＡ、蛋白表达，并提高其酶活性，这为进一步阐明ＴＧＦβ１在肾小球硬化发生机制中的作用提供了重要的实验手段和依据。

关键词：大鼠基因转染 TGFβ1 MMP-2 肾小球疾病

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SLE模型新西兰小鼠高IgG血症易感基因的定位

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中国免疫学杂志 2000年第4期16卷 193-195,199页

作者：米小轶宋敏姜奕宋继谒白井俊一中国医科大学基础医学院病理教研室沈阳110001 日本顺天堂大学医学部第二病理教室

目的 :定位自发性SLE模型——— (NZB×NZW)F1 小鼠高IgG血症的遗传易感基因。方法 :建立 (NZB×NZW )F1 ×NZW回交小鼠模型 ,采用覆盖小鼠 19条染色体的多态性微卫星遗传标记及数量性状位点 (QTL)分析进行基因定位。结果 :... 详细信息

目的 :定位自发性SLE模型——— (NZB×NZW)F1 小鼠高IgG血症的遗传易感基因。方法 :建立 (NZB×NZW )F1 ×NZW回交小鼠模型 ,采用覆盖小鼠 19条染色体的多态性微卫星遗传标记及数量性状位点 (QTL)分析进行基因定位。结果 :高IgG血症易感基因与小鼠第 1条染色体末端 92 .3cM处微卫星遗传标记D1Mit36肯定连锁 (Lods值 >3) ,该位点附近 92 .0cM处存在Fcgr2b基因 ,且回交小鼠Fcgr2b基因B W型组血清总IgG水平明显高于W W型组 (P <0 .0 0 0 1)。结论 :(NZB×NZW)F1

关键词：高IgG血症 Fegr2b基因系统性红斑狼疮小鼠

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大鼠肺纤维化血小板源性生长因子、血小板源性生长因子-受体、转化生长因子-β、转化生长因子-β受体的表达

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中国组织化学与细胞化学杂志 2000年第2期9卷 157-160页

作者：吴浩张月娥许祖德张秀荣赵仲华上海铁道大学医学院病理学教研室上海200070 上海医科大学基础医学院病理学教研室上海200032

采用免疫组织化学方法观察实验性大鼠肺纤维化肺组织内转化生长因子 (TGF-β)及其受体 (TGF-βR)和血小板源性生长因子 (PDGF)及其受体 (PDGF- R)表达的变化。发现 :(1)实验早期 (1～ 3天 ) ,TGF-β主要由单核巨噬细胞为主的炎症细胞所... 详细信息

采用免疫组织化学方法观察实验性大鼠肺纤维化肺组织内转化生长因子 (TGF-β)及其受体 (TGF-βR)和血小板源性生长因子 (PDGF)及其受体 (PDGF- R)表达的变化。发现 :(1)实验早期 (1～ 3天 ) ,TGF-β主要由单核巨噬细胞为主的炎症细胞所产生 ;7天以后直至实验结束 (2 8天 ) ,TGF- β阳性细胞主要为增生的间质细胞。TGF- βR的变化与之同步。(2 )实验 1～ 7天 ,病灶内单核巨噬细胞细胞 PDGF染色呈强阳性反应 ,少量间质细胞呈阳性反应 ;14天以后 ,病灶内 PDGF阳性的单核巨噬细胞减少 ,阳性间质细胞亦减少。PDGF- R的变化与 PDGF相似。结果提示 PDGF的主要来源是巨噬细胞 ,在肺纤维化的早、中期发挥重要作用 ,而 TGF- β主要由间质细胞自身产生 ,在肺纤维化的中、后期发挥重要作用 ,促细胞外基质合成 ,使肺纤维化进行性进展。

关键词：肺纤维化血小板源性生长因子血小板源性生长因子-受体转化生长因子-β 转化生长因子-β受体大鼠表达

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重组人β-防御素基因在COS-7细胞的转染表达

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华西医科大学学报 2000年第4期31卷 433-437页

作者：蔡绍晖杜军陈新年黄宁王伯瑶华西医科大学基础医学院病理生理教研室感染与免疫研究室成都610041 日本名古屋大学医学部免疫学研究室

为探索建立持续稳定表达 h BD- 2的哺乳类动物型工程细胞的可能性 ,作者研究构建真核重组表达载体 p ***2 B/h BD- 2以进行 COS- 7细胞转染表达实验。将本室克隆获得的 h BD- 2全长 c DNA片段插入带有报告基因的真核表达质粒 p ***2 B... 详细信息

为探索建立持续稳定表达 h BD- 2的哺乳类动物型工程细胞的可能性 ,作者研究构建真核重组表达载体 p ***2 B/h BD- 2以进行 COS- 7细胞转染表达实验。将本室克隆获得的 h BD- 2全长 c DNA片段插入带有报告基因的真核表达质粒 p ***2 B构建出 h BD- 2的重组表达载体 p ***2 B/h BD- 2 ,并经 DNA测序证明h BD- 2 c DNA片段的插入方向和其全长 c DNA的碱基组成顺序均准确无误。通过脂质体转染法将 p ***2 B/h BD- 2导入 COS- 7细胞。RT- PCR法和免疫印迹法分别从 m RNA水平和蛋白质水平检测到被转染的 COS- 7细胞系能有效表达 h BD- 2。

关键词： COS-7细胞基因转染重组人β-防御素抗生素

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