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第十一届全国神经病学学术会议

作者：李昕王鹏李尧华何欣于顺首都医科大学宣武医院北京老年病研究所神经生物学研究室北华大学医学院基础医学部人体解剖学教研室首都医科大学宣武医院低氧医学研究

α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)是在神经系统中表达丰富的蛋白质,存在于神经元的突触前终末、轴突、胞体和细胞核中。α-Syn的突变和异常表达与帕金森病的发病机制密切相关,但该蛋白有何生理功能尚不十分清楚。体外研究提示,α-Sy... 详细信息

α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)是在神经系统中表达丰富的蛋白质,存在于神经元的突触前终末、轴突、胞体和细胞核中。α-Syn的突变和异常表达与帕金森病的发病机制密切相关,但该蛋白有何生理功能尚不十分清楚。体外研究提示,α-Syn可以促进γ-tubulin组装成微管。鉴于微管是神经元突起形成的重要细

关键词： α-突触核蛋白原代培养神经元促生长作用

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Galectin-3在CCl_4致肝损伤及对GRP78调控的作用

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世界华人消化杂志 2007年第33期15卷 3468-3473页

作者：张鸿具英花刘晓湘平贺紘一方秀斌中国医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁省沈阳市110001 日本富山医科药科大学医学部

目的:探讨Galectin-3对CCl_4致急性肝损伤时GRP78的调控作用.方法:选择ICR系的♂Galectin-3基因敲除型[Gal-3(-/-)]和其野生型[Gal(+/+)1小鼠,一次灌胃给予CCl_4,观察给药后10,24,48和72 h的肝组织病理改变和检测其血清谷草转氨酶(AST)... 详细信息

目的:探讨Galectin-3对CCl_4致急性肝损伤时GRP78的调控作用.方法:选择ICR系的♂Galectin-3基因敲除型[Gal-3(-/-)]和其野生型[Gal(+/+)1小鼠,一次灌胃给予CCl_4,观察给药后10,24,48和72 h的肝组织病理改变和检测其血清谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)活性,并检测肝细胞不同细胞组分中的GRP78蛋白表达.结果:与Gal(+/+)型鼠比较,CCl_4对Gal-3(-/-)型鼠的肝组织病理损伤出现时间早、损伤程度重.Gal-3(-/-)型鼠在CCl_4灌胃后10和24 h的血清ALT活性(1 860±191 U/L vs 1356±177 U/L,t=6.12,P<0.01;2789±236 U/L vs 2468±221 U/L,f=3.14,P<0.01)及CCl_4灌胃后10 h的血清AST活性(946±89 vs 623±73 U/L,t=8.87,P<0.01)与Gal(+/+)型鼠比较显著升高.对照组中Gal-3(+/+)型鼠的微粒体组分(Mic)中的GRP78蛋白表达显著高于Gal-3(-/-)型鼠(140.9±21.1 vs 76.1±9.5,t=8.86,P<0.01).在CCl_4 ig后24 h,Gal-3(+/+)型鼠的肝细胞线粒体组分(Mt)和Mic中的GRP78蛋白表达明显升高,并显著高于Gal-3(-/-)型鼠(Mt:127.0±18.8 vs 49.1±6.3,P<0.01;Mic:166.5±23.4 vs 87.7±11.6,P<0.01).结论:Galectin-3蛋白在CCl_4致急性肝损伤中可能具有一定的保护作用.上调Mic和Mt中的GRP78蛋白表达可能是Galectin-3在CCl_4对肝细胞损伤中发挥保护作用的一个途径.

关键词： Galectin一3 四氯化碳肝损伤葡萄糖调节蛋白78

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绿色荧光蛋白作为神经干细胞示踪标记的实验研究

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第三军医大学学报 2006年第7期28卷 691-693页

作者：谭新杰胡长林蔡文琴重庆医科大学附属第二医院神经内科重庆400010 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的研究携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的腺病毒感染神经干细胞(neural stem cells,NSCs)后的荧光稳定性和持久性及其对NSCs生物学特性的影响;探讨利用其作为NSCs示踪标记的可行性。方法利用GFP-腺病毒空载体感染NSC... 详细信息

目的研究携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的腺病毒感染神经干细胞(neural stem cells,NSCs)后的荧光稳定性和持久性及其对NSCs生物学特性的影响;探讨利用其作为NSCs示踪标记的可行性。方法利用GFP-腺病毒空载体感染NSCs(NSCs-GFP),经G418筛选并连续传代,在相差显微镜下观察未感染NSCs和感染NSCs的形态以及在荧光显微镜下观察感染NSCs及其诱导分化后的GFP表达情况;并检测NSCs-GFP的细胞活性和细胞周期。调整GFP标记神经干细胞浓度为1×105/μl,将其植入大鼠侧脑室内,观察其在脑内的表达。结果未感染NSCs和感染NSCs的形态学、细胞活性和细胞周期等无明显差异(P>0.05)。GFP在诱导分化后的NSCs-GFP子代细胞中有高表达,并且第1代和第20代NSCs-GFP的绿色荧光无明显差别。在植入侧侧脑室周围可见绿色荧光的强表达,且持续时间较长。结论GFP荧光稳定持久,对转染细胞的生物学特征无明显影响,并且移植后的荧光呈长时间强表达,因此可以将其作为神经干细胞的示踪标记,这将有利于神经干细胞移植后的可塑性研究。

关键词：绿色荧光蛋白神经干细胞移植示踪

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成年大鼠局灶性脑梗死后齿状回神经元前体细胞的发生研究

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第三军医大学学报 2006年第15期28卷 1575-1577页

作者：谭新杰胡长林蔡文琴杨忠重庆医科大学附属第二医院神经内科重庆400010 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的初步探讨脑缺血后神经元前体细胞的发生机制。方法建立一侧大脑中动脉缺血再灌注模型,应用神经元前体细胞的标志物DCX(Doub lecortin)检测缺血再灌注后不同时相点海马齿状回神经元前体细胞的增殖情况。结果再灌注后第7天梗死侧及非... 详细信息

目的初步探讨脑缺血后神经元前体细胞的发生机制。方法建立一侧大脑中动脉缺血再灌注模型,应用神经元前体细胞的标志物DCX(Doub lecortin)检测缺血再灌注后不同时相点海马齿状回神经元前体细胞的增殖情况。结果再灌注后第7天梗死侧及非梗死侧齿状回DCX阳性细胞数达到最高峰,与相应假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05);同时各个时相点梗死侧与非梗死侧比较,差异均有统计学意义(P<0.05);再灌注后第21天双侧齿状回DCX阳性细胞数基本恢复至正常水平。结论局灶性脑缺血可以诱导成年大鼠神经元前体细胞的发生,这对于脑缺血后的神经修复可能起关键性作用;其机制可能是缺血区域产生的一些神经发生调节因子弥散到神经发生区域所致。

关键词：大脑中动脉栓塞再灌注神经元前体细胞:齿状回

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Galectin-3在CCl_4所致肝损伤的保护作用

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解剖科学进展 2006年第2期12卷 100-102,i0002页

作者：张鸿具英花刘晓湘平贺紘一方秀斌中国医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁沈阳110001 日本富山医科药科大学医学部生化讲座

目的探讨Galectin-3在CC l4所致急性肝损伤中的作用。方法选择ICR系的雄性Galectin-3基因敲除型(Gal-3(-/-))和其野生型(Gal(+/+))小鼠,一次灌胃给予CC l4,观察给药后10 h、24 h、48 h和72 h的肝组织病理改变和检测其血清谷草转氨酶(AST... 详细信息

目的探讨Galectin-3在CC l4所致急性肝损伤中的作用。方法选择ICR系的雄性Galectin-3基因敲除型(Gal-3(-/-))和其野生型(Gal(+/+))小鼠,一次灌胃给予CC l4,观察给药后10 h、24 h、48 h和72 h的肝组织病理改变和检测其血清谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)活性。结果与Gal(+/+)型鼠比较,CC l4对Gal-3(-/-)型鼠的肝组织病理损伤出现时间早、损伤重。Gal-3(-/-)型鼠在CC l4灌胃后10 h和24 h的血清ALT活性及CC l4灌胃后10 h的血清AST活性与Gal(+/+)型鼠比较有显著升高。结论Galectin-3蛋白在CC l4致急性肝损伤中具有保护作用。

关键词： Galectin-3 CCl4 肝损伤

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持续电针刺激调节创伤大鼠脾淋巴细胞体外增殖反应的动态观察

持续电针刺激调节创伤大鼠脾淋巴细胞体外增殖反应的动态观察

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第十一届针灸对机体功能的调节机制及针灸临床独特经验学术研讨会

作者：程晓东吴根诚姜建伟杜莅娜曹小定何球藻上海医科大学医学神经生物学国家重点实验室上海医科大学医学神经生物学国家重点实验室上海医科大学医学神经生物学国家重点实验室上海医科大学医学神经生物学国家重点实验室上海医科大学医学神经生物学国家重点实验室上海医科大学基础医学院免疫学教研室

动态观察了持续电针刺激对创伤大鼠脾淋巴细胞体外增殖反应的调节作用。结果显示:创伤后第1、3、5、7天大鼠脾淋巴细胞在体外对ConA的增殖反应明显降低,第3天达最低水平,第10天恢复正常;创伤后不同天数的大鼠血清对正常小鼠脾淋巴细胞... 详细信息

动态观察了持续电针刺激对创伤大鼠脾淋巴细胞体外增殖反应的调节作用。结果显示:创伤后第1、3、5、7天大鼠脾淋巴细胞在体外对ConA的增殖反应明显降低,第3天达最低水平,第10天恢复正常;创伤后不同天数的大鼠血清对正常小鼠脾淋巴细胞体外增殖反应具有相应的抑制作用;持续电针刺激“足三里”等穴位不仅能防止创伤大鼠脾淋巴细胞增殖率的下降,而且可有效地消除血清的抑制作用。提示:持续电针刺激可以改善创伤大鼠的免疫功能。

关键词：电针创伤应激淋巴细胞转化免疫抑制因子

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新生大鼠海马神经干细胞的分离、培养、分化和鉴定

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国际脑血管病杂志 2006年第2期14卷 107-109页

作者：谭新杰胡长林蔡文琴重庆医科大学附属第二医院神经内科 400010 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的:探讨从新生大鼠海马分离神经干细胞并进一步培养、诱导分化和鉴定的可行性。方法:分离出生1d大鼠海马,吸管吹打机械分离制成单细胞悬液,采用无血清培养和胎牛血清诱导分化,应用免疫荧光技术鉴定神经干细胞及其分化的子代细胞。结果... 详细信息

目的:探讨从新生大鼠海马分离神经干细胞并进一步培养、诱导分化和鉴定的可行性。方法:分离出生1d大鼠海马,吸管吹打机械分离制成单细胞悬液,采用无血清培养和胎牛血清诱导分化,应用免疫荧光技术鉴定神经干细胞及其分化的子代细胞。结果:从新生大鼠海马分离的细胞呈巢蛋白免疫阳性并能在体外传代培养和连续形成克隆;血清诱导分化后的细胞可分别表达神经元和星形胶质细胞的特异性抗原β-微管蛋白Ⅲ和神经胶质原纤维酸性蛋白。结论:分离和培养的细胞能表达神经干细胞的特异性标志物巢蛋白,并且具有很强的增殖能力和多向分化潜能,说明新生大鼠海马存在神经干细胞,并可用于进一步的实验研究。

关键词：神经干细胞分离培养分化鉴定大鼠

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成年大鼠局灶性脑梗死后神经元前体细胞的迁移研究

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第三军医大学学报 2005年第22期27卷 2242-2244页

作者：谭新杰胡长林蔡文琴杨忠重庆医科大学附属第二医院神经内科重庆400010 第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆400038

目的探讨成年大鼠大脑中动脉栓塞缺血再灌注后梗死灶周神经元前体细胞的迁移特征。方法建立一侧大脑中动脉栓塞缺血再灌注模型,应用免疫组化及细胞记数检测缺血再灌注后1、7、14、21 d梗死灶周神经元前体细胞的变化。结果各个时相点的... 详细信息

目的探讨成年大鼠大脑中动脉栓塞缺血再灌注后梗死灶周神经元前体细胞的迁移特征。方法建立一侧大脑中动脉栓塞缺血再灌注模型,应用免疫组化及细胞记数检测缺血再灌注后1、7、14、21 d梗死灶周神经元前体细胞的变化。结果各个时相点的梗死灶周均可见神经元前体细胞;在缺血再灌注后第7天阳性细胞的数量达到高峰,随后逐渐下降;但在梗死区域的镜像区域未见到阳性细胞的表达。结论成年大鼠大脑中动脉栓塞缺血再灌注可激活神经元前体细胞的发生,并诱导神经元前体细胞朝着梗死区域迁移。

关键词：神经元前体细胞大脑中动脉栓塞缺血再灌注迁移

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骨髓基质细胞条件培养液对中脑神经干细胞分化的影响

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第二军医大学学报 2003年第3期24卷 295-297页

作者：顾平娄淑杰王铭维王彦永鲍璇何成路长林第二军医大学基础医学部神经生物学教研室河北医科大学第一医院神经内科石家庄050031 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室河北医科大学第一医院神经内科石家庄050031

目的 :探讨骨髓基质细胞条件培养液诱导中脑神经干细胞分化为高比例神经元的机制。方法 :采用骨髓基质细胞条件培养液培养中脑神经干细胞 7d ,通过免疫细胞化学染色方法鉴别和计数神经元的数量 ,并与自然分化组、骨髓基质细胞膜片段组... 详细信息

目的 :探讨骨髓基质细胞条件培养液诱导中脑神经干细胞分化为高比例神经元的机制。方法 :采用骨髓基质细胞条件培养液培养中脑神经干细胞 7d ,通过免疫细胞化学染色方法鉴别和计数神经元的数量 ,并与自然分化组、骨髓基质细胞膜片段组、骨髓基质细胞固定组以及骨髓基质细胞共培养组相比较。结果 :用成年大鼠骨髓基质细胞的条件培养液体外培养新生大鼠中脑神经干细胞 ,神经干细胞分化为神经元比例 [(40 .5± 14 .5 ) % ]明显高于自然分化组 [(16 .6± 10 .5 ) % ]、骨髓基质细胞膜片段组 [(2 0 .8± 12 .5 ) % ]以及骨髓基质细胞固定组 ,但与骨髓基质细胞共培养组 [(36 .1± 9.7) % ]相比无统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论

关键词：骨髓基质细胞条件液中脑神经干细胞分化

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脑内移植BDNF载体细胞对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后运动机能和行为的影响

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中华物理医学与康复杂志 2002年第1期24卷 10-14页

作者：洪新如曲伸侍坚陈新民全军儿科中心福州总医院儿科福州350025 第二军医大学基础部神经生物学教研室上海第二医科大学基础医学部神经生物学研究室

目的　探讨脑内移植脑源性神经营养因子 (BDNF)载体细胞对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后存活、运动机能和行为的影响。方法　 7d龄新生大鼠一侧颈总动脉结扎联合低氧吸入法制成缺氧缺血性脑损伤模型。在损伤后即刻 ,于单侧皮层内植入构建... 详细信息

目的　探讨脑内移植脑源性神经营养因子 (BDNF)载体细胞对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后存活、运动机能和行为的影响。方法　 7d龄新生大鼠一侧颈总动脉结扎联合低氧吸入法制成缺氧缺血性脑损伤模型。在损伤后即刻 ,于单侧皮层内植入构建的可稳定表达和分泌BDNF的大鼠成肌细胞 ,观察植入 4周后大鼠存活、运动机能和行为的变化。结果　BDNF载体细胞可稳定表达BDNFmRNA ,其分泌上清液可维持PC1 2细胞存活、促进突触生长 ,脑内移植后 42d ,移植组动物死亡率显著降低 (2 8.6 % ,对照值为 57.7% ) ;倾斜临界角度虽仍低于假伤组 ,但显著高于移植不含BDNF载体细胞的对照组 ;开场行为的水平、垂直运动值均显著高于对照组 ,多数时间点上显著低于假伤组。结论　脑内移植可稳定表达和分泌活性BDNF的载体细胞可显著降低新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后的死亡率 ,对运动机能和行为的恢复有良好的促进作用。

关键词：新生儿缺血缺氧性脑病脑内移植 BDNF 运动机能行为脑源性神经营养因子脑缺氧脑缺血动物实验

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