检索结果-内蒙古大学图书馆

上海医科大学学报 1998年第3期25卷 163-166页

作者：田昱沈俊卿蔡晓燕李平宋后燕朱运松上海医科大学基础医学院分子遗传学研究室

目的研究建立大肠杆菌表达的重组人ＰＡＩ－２（ｒｈＰＡＩ－２）的纯化方法，并对ｒｈＰＡＩ－２蛋白进行理化和生物学性质的研究。方法工程菌被高压匀浆后，经硫酸铵分级沉淀，用分子筛、离子交换和疏水性色谱进行分离，得到了ｒｈＰ... 详细信息

目的研究建立大肠杆菌表达的重组人ＰＡＩ－２（ｒｈＰＡＩ－２）的纯化方法，并对ｒｈＰＡＩ－２蛋白进行理化和生物学性质的研究。方法工程菌被高压匀浆后，经硫酸铵分级沉淀，用分子筛、离子交换和疏水性色谱进行分离，得到了ｒｈＰＡＩ－２蛋白。对ｒｈＰＡＩ－２进行了复性，对ｒｈＰＡＩ－２的温度、ｐＨ、盐浓度、氧化剂敏感性、二级速率常数及抗ＳＤＳ复合物形成等理化性质和生物学特性进行了测定。结果每升菌液可获得约３０ｍｇ纯度达９０％的蛋白质，比活性为１１８６６ＡＩＵ／ｍｇ，得率为１９．２％。当温度高至６０℃时，ｒｈＰＡＩ－２迅速失活；当ｐＨ小于３时，ｒｈＰＡＩ－２完全失活；当盐浓度和Ｈ２Ｏ２浓度分别在１．５和０．５ｍｏｌ／Ｌ时，ｒｈＰＡＩ－２的活性仍维持在９０％以上；ｒｈＰＡＩ－２可与尿激酶形成抗ＳＤＳ复合物。结论成功地从大肠杆菌中分离纯化了ｒｈＰＡＩ－２。ｒｈＰＡＩ－２与天然ＰＡＩ－２在理化性质和生物学特性上基本一致。

关键词：分离纯化大肠杆菌 PAI-2 生物化学性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

尿激酶受体反义RNA表达质粒的构建

引用

上海医科大学学报 1998年第4期25卷 277-280页

作者：廖劲晖连福治朱运松上海医科大学基础医学院分子遗传学研究室

构建能在哺乳动物细胞中表达尿激酶受体（ｕＰＡＲ）反义ＲＮＡ的表达质粒ｐＵＲＡＳ。方法采用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增并克隆尿激酶受体（ｕＰＡＲ）ｃＤＮＡ５’端－４６～４５４ｂｐ一段长５００ｂｐ的顺序，利用ＤＮＡ重组技术将该片... 详细信息

构建能在哺乳动物细胞中表达尿激酶受体（ｕＰＡＲ）反义ＲＮＡ的表达质粒ｐＵＲＡＳ。方法采用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增并克隆尿激酶受体（ｕＰＡＲ）ｃＤＮＡ５’端－４６～４５４ｂｐ一段长５００ｂｐ的顺序，利用ＤＮＡ重组技术将该片段反向插入表达载体ｐｃＤＮＡ３的ＣＭＶ启动子下游。结果限制性内切酶分析和ＤＮＡ顺序分析证实ＲＴ－ＰＣＲ获得的ｕＰＡＲｃＤＮＡ片段与文献报道相吻合；重组质粒ｐＵＲＡＳ转染肺癌细胞株９５Ｄ，ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ证实转染细胞克隆有ｕＰＡＲ反义ＲＮＡ的表达。结论重组质粒ｐＵＲＡＳ能在肺癌细胞株９５Ｄ中表达尿激酶受体反义ＲＮＡ，尿激酶受体（ｕＰＡＲ）反义ＲＮＡ表达质粒的构建获得成功。

关键词：尿激酶受体反义RNA 质粒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

二苯乙烯类化合物对肺癌细胞株生长的抑制作用

引用

上海医科大学学报 1998年第5期25卷 327-330页

作者：盛智徐光上海医科大学基础医学院分子遗传学研究室

目的研究二苯乙烯类化合物（含３种结构类似的成分：（１）（＋）－α－ｖｉｎｉｆｅｒｉｎ，（２）ｍｉｙａｂｅｎｏｌＣ，（３）ｋｏｂｏｐｈｅｎｏｌＡ，一种蛋白激酶Ｃ抑制剂）对人肺癌细胞株Ａ５４９，９５－Ｄ，ＳＰＣ－Ａ－１，... 详细信息

目的研究二苯乙烯类化合物（含３种结构类似的成分：（１）（＋）－α－ｖｉｎｉｆｅｒｉｎ，（２）ｍｉｙａｂｅｎｏｌＣ，（３）ｋｏｂｏｐｈｅｎｏｌＡ，一种蛋白激酶Ｃ抑制剂）对人肺癌细胞株Ａ５４９，９５－Ｄ，ＳＰＣ－Ａ－１，ＮＣＩ－Ｈ４６０及ＮＣＩ－Ｈ４４６细胞体外生长的抑制作用。方法锥虫蓝排除法、ＭＴＴ法、Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８荧光染色及ＤＮＡ凝胶电泳。结果药物处理时间越长及浓度越高，细胞生长抑制作用越强，其中Ａ５４９细胞株ＩＣ５０为２０μｍｏｌ／Ｌ，敏感性最高，而ＮＣＩ－Ｈ４６０及ＮＣＩ－Ｈ４４６的ＩＣ５０为２００μｍｏｌ／Ｌ，敏感性最低；荧光染色结果为所有经药物处理的肺癌细胞的染色质均产生凝集现象，在ＤＮＡ凝胶电泳图中，出现梯状ＤＮＡ电泳条带。结论二苯乙烯类化合物可显著抑制Ａ５４９细胞的生长，且这种抑制作用表现出时间及浓度依赖性；此化合物对ＮＣＩ－Ｈ４６０及ＮＣＩ－Ｈ４４６细胞的生长未表现明显的抑制作用。另外。

关键词：二苯乙烯类 OS 细胞株蛋白激酶C 肺肿瘤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

mPLG—PGEM重组表达质粒构建及反义RNA探针的制备和标记

引用

上海医科大学学报 1997年第3期24卷 221-223页

作者：汪浩川宋后燕上海医科大学基础医学院分子遗传学研究室 200032

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

含人组织型纤溶酶原激活剂cDNA重组逆转录病毒的制备及鉴定

引用

中华实验和临床病毒学杂志 1997年第1期11卷 50-52页

作者：崔宁彭鲁英宋后燕韩琴琴陈灏珠上海医科大学基础医学院分子遗传学研究室上海市心血管病研究所

将人组织型纤溶酶原激活剂ｃＤＮＡ与逆转录病毒载体ＬＮＳＸ重组后转染病毒包装细胞ＰＡ３１７，形成完整的重组病毒颗粒，电镜下重组病毒呈散在分布，球形，直径９０～１８０ｎｍ，由囊膜、外壳和核心三部分组成。重组病毒颗粒感染Ｎ... 详细信息

将人组织型纤溶酶原激活剂ｃＤＮＡ与逆转录病毒载体ＬＮＳＸ重组后转染病毒包装细胞ＰＡ３１７，形成完整的重组病毒颗粒，电镜下重组病毒呈散在分布，球形，直径９０～１８０ｎｍ，由囊膜、外壳和核心三部分组成。重组病毒颗粒感染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，在含Ｇ４１８培养基中筛选培养２周后计数阳性细胞克隆数，结果达６×１０８ＣＦＵ／Ｌ；被感染的受体细胞ＮＩＨ３Ｔ３高效表达具有纤溶活性的重组人组织型纤溶酶原激活剂。

关键词： cDNA 重组逆转录病毒转染感染基因治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

糖基化、非糖基化、重组PAI－1功能和性质的比较

引用

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1996年第2期28卷 139-144页

作者：孙幼华张欣平丁皓查锡良宋后燕朱运松上海医科大学基础医学院分子遗传学研究室

对从ＨｅｐＧ２细胞培养液中分离得到植基化和非糖基化ＰＡＩ－１（１型纤溶酶原激活物抑制剂），以及从ｐＹＺＨＢＩ－６６表达菌中纯化的非糖基化重组ＰＡＩ－１的某些性质和功能进行比较，结果显示，糖基化ＰＡＩ－１对ｔＰＡ（组织... 详细信息

对从ＨｅｐＧ２细胞培养液中分离得到植基化和非糖基化ＰＡＩ－１（１型纤溶酶原激活物抑制剂），以及从ｐＹＺＨＢＩ－６６表达菌中纯化的非糖基化重组ＰＡＩ－１的某些性质和功能进行比较，结果显示，糖基化ＰＡＩ－１对ｔＰＡ（组织型纤溶酶原激活物）有较强的抑制，能较显著地被蛋白质变性剂所激活，对热有较强的稳定性，糖基化与非糖基化ＰＡＩ－１在ｐＨ２．５－９．０的范围内都相当稳定。纤维蛋白原和肝素能明显提高两者对ｔＰＡ的抑制作用。

关键词：糖基化PAI－1 非糖基化PAI－1 重组PAI－1 寡糖

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

水蛭素衍生物基因的克隆及其在哺乳类细胞中的表达

引用

上海医科大学学报 1996年第3期23卷 185-188页

作者：顾银良罗春贞李凌张艳玲宋后燕上海医科大学基础医学院分子遗传学研究室

设计特异性更高的水蛭素新突变体。化学合成编码水蛭素基因，并融会了ＲＧＤ３肽编码序列，通过连接、克隆、酶切筛选、ＤＮＡ序列分析，得到真核表达质粒ｐＡＰＲ－ＨＤ，表达质粒转染ＣＨＬ细胞，经Ｇ４１８筛选，获得表达克隆。结果... 详细信息

设计特异性更高的水蛭素新突变体。化学合成编码水蛭素基因，并融会了ＲＧＤ３肽编码序列，通过连接、克隆、酶切筛选、ＤＮＡ序列分析，得到真核表达质粒ｐＡＰＲ－ＨＤ，表达质粒转染ＣＨＬ细胞，经Ｇ４１８筛选，获得表达克隆。结果：细胞培液中，重组水蛭素衍生物的活性达到１０ＡＴＵ／ｍｌ，并有抗血小板凝集作用。结论：水蛭素新突变体具有预防血栓性疾病的应用前景，但其表达水平和稳定性有待于进一步提高。

关键词：水蛭素衍生物基因合成克隆

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组链激酶在脑内血肿动物模型中的局部应用

引用

上海医科大学学报 1996年第2期23卷 87-89页

作者：陈衔城张义张福林宋后燕汤其群任军上海医科大学神经病学研究所上海医科大学基础医学院分子遗传学研究室

观察重组链激酶对人凝血块的溶化作用及对脑组织的毒性反应。分别用重组链激酶（实验组）和生理盐水（对照组）注入人凝血块制成的猫额叶脑内血肿内，观察血肿溶化效果。结果：实验组１０例中６例血肿完全溶化，对照组１０例血肿均未溶... 详细信息

观察重组链激酶对人凝血块的溶化作用及对脑组织的毒性反应。分别用重组链激酶（实验组）和生理盐水（对照组）注入人凝血块制成的猫额叶脑内血肿内，观察血肿溶化效果。结果：实验组１０例中６例血肿完全溶化，对照组１０例血肿均未溶化。病理组织学观察，实验组血肿周围脑组织病理改变轻于对照组。结论：重组链激酶对动物模型脑内血肿局部应用有良好的溶化人凝血块的作用，而对周围脑组织无毒性反应。

关键词：重组链激酶脑内血肿猫动物模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

水蛭素衍生物基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

引用

上海医科大学学报 1996年第3期23卷 181-184页

作者：罗春贞顾银良宋后燕上海医科大学基础医学院分子遗传学研究室

制备水蛭素衍生物，首次按照天然水蛭素分子中的氨基酸顺序，设计了水蛭素的基因，基因中融合了ＲＧＤ三肽编码顺序，形成水蛭素衍生物编码基因，用ＤＮＡ合成仪，分１０个寡核苷酸合成水蛭素衍生物基因。其中６个寡核苷酸组成外端大片... 详细信息

制备水蛭素衍生物，首次按照天然水蛭素分子中的氨基酸顺序，设计了水蛭素的基因，基因中融合了ＲＧＤ三肽编码顺序，形成水蛭素衍生物编码基因，用ＤＮＡ合成仪，分１０个寡核苷酸合成水蛭素衍生物基因。其中６个寡核苷酸组成外端大片段，４个寡核苷酸组成Ｃ－端大片段。各大片段与载体ｐＵＣ１９重组和无性繁殖后，通过ＫｐｎⅠ位点连接成编码水蛭素衍生物分子的完整基因。经核苷酸顺序分析证实后，水蛭素衍生物基因与表达载体重组，转化大肠杆菌，筛选含重组质粒的细菌，命名为ｐＳＧＨＲＥ。结果：ｐＳＧＨＲＥ菌破碎后，上清和沉淀部分都有水蛭素活性。上清活性约２０ＡＴＵ／ｍｌ菌液。结论：我们构建了水蛭素衍生物基因的克隆并在大肠杆菌中得到表达。

关键词：水蛭素衍生物基因克隆原核表达大肠杆菌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

聚氨基甲酸酯泡沫培养rt－PA工程细胞

引用

上海医科大学学报 1996年第3期23卷 230-231页

作者：朱慧陈幼妹宋后燕上海医科大学基础医学院分子遗传学研究室

聚氨基甲酸酯泡沫培养ｒｔ－ＰＡ工程细胞朱慧，陈幼妹，宋后燕（上海医科大学基础医学院分子遗传学研究室２０００３２）大多数动物细胞体外培养时均有贴壁生长等特性，大规模培养时需要一个很大的依附表面，目前多采用大比表面积的微... 详细信息

聚氨基甲酸酯泡沫培养ｒｔ－ＰＡ工程细胞朱慧，陈幼妹，宋后燕（上海医科大学基础医学院分子遗传学研究室２０００３２）大多数动物细胞体外培养时均有贴壁生长等特性，大规模培养时需要一个很大的依附表面，目前多采用大比表面积的微载体来提供细胞贴壁的需要。微载体多...

关键词： r-tPA工程细胞培养甲酸酯泡沫聚氨基

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：