目的检测6种倍半萜内酯化合物对人乳腺癌细胞增殖活性的影响,并探讨其可能的作用机制。方法人乳腺癌细胞MCF-7和人乳腺癌脑转移细胞KT分别与6种倍半萜内酯化合物作用48h,噻唑蓝比色法检测细胞存活率;珊塔玛内酯10μmol/L作用MCF-7细胞24h,双荧光素酶报告基因检测系统检测细胞内Bax报告基因和激活T细胞核因子(nuclear factor of activated T cells,NFAT)报告基因的表达。结果异土木香内酯和珊塔玛内酯对2种人乳腺癌细胞均显示极强的抑制作用,呈剂量依赖性,半数抑制浓度仅为4.40μmol/L和4.57μmol/L,而其他试验用倍半萜内酯即使在100μmol/L高浓度下,对人乳腺癌肿瘤细胞的增殖不显示抑制活性;珊塔玛内酯可显著诱导MCF-7细胞内Bax和NFAT报告基因表达(P<0.01)。结论异土木香内酯和珊塔玛内酯对2种人乳腺癌细胞均显示极强的抑制作用;珊塔玛内酯对人乳腺肿瘤细胞增殖的抑制作用可能是通过诱导MCF-7细胞的Bax表达,使NFAT激活,导致线粒体膜的转移渗透孔通透性改变,使细胞色素C从线粒体释出,活化caspase 9,进而激活caspase 3,导致细胞凋亡的发生所致。
目的:建立荧光标记D1S1676、D2S441、D3S4529、D22S1045、amelogenin 5个mini短串联重复序列(Short tandem repeat,STR)基因座复合扩增体系,并对重庆地区汉族200名无关个体此5个基因座的遗传多态性进行研究分析。方法:分别用5’TAMRA标...
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目的:建立荧光标记D1S1676、D2S441、D3S4529、D22S1045、amelogenin 5个mini短串联重复序列(Short tandem repeat,STR)基因座复合扩增体系,并对重庆地区汉族200名无关个体此5个基因座的遗传多态性进行研究分析。方法:分别用5’TAMRA标记D1S1676引物,5’6-FAM标记D2S441和D3S4529引物,5’HEX标记D22S1045引物,5’TET标记amelogenin引物,构建及优化符合扩增体系,运用3130基因分析仪检测并收集电泳结果数据,通过Gene Mapper v3.2.1软件计算扩增产物片段相对大小以及进行样本基因型分型。结果:5个miniSTR基因座荧光标记复合扩增体系每个位点都获得清晰的分型结果。对重庆地区汉族无关个体200份血样进行分型,5个基因座分别检出9、9、8、9、2个等位基因和103种基因型,其基因型分布均符Hardy-Weinberg平衡。其中D1S1676、D2S441、D3S4529、D22S1045基因座在重庆汉族群体的杂合度(Heterozygosity,Ho)分别依次为0.710、0.765、0.730、0.710;多态信息含量(Polymorphism information content,PIC)分别依次为:0.660 041、0.798 329、0.753 177、0.797 888;累计非父排除率(Exclusion probability of paternity,EP)为0.924 800 4,累计个人识别率为0.999 955 1。结论:荧光标记D1S1676、D2S441、D3S4529、D22S1045、amelogenin 5个miniSTR基因座复合扩增体系,每个基因座可获得准确分型;重庆汉族群体该5个基因座的遗传学数据,可作为群体遗传学和法医学研究与应用的基础资料。
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