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上海医科大学学报 1997年第2期24卷 131-133页

作者：张锦生 JeanBenhattar 上海医科大学基础医学院病理学教研室 200032 InstitutUniversitairedePathologie.RueduBugnon25 CH-1011LausanneSwitzerland

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佛波酯促进CRBH7919细胞中磷脂酰胆碱水解及其酶学基础

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1997年第6期29卷 29-35页

作者：朱全胜查锡良上海医科大学基础医学院生物化学教研室卫生部糖复合物重点实验室

用佛波酯（佛波醇－１２－豆蔻酸－１３－乙酸酯，ＰＭＡ）作用大鼠肝癌ＣＲＢＨ７９１９细胞，发现ＰＭＡ能促进ＣＲＢＨ７９１９细胞中磷脂酰胆碱（ＰＣ）水解，此效应出现在ＰＭＡ作用细胞１５分钟后，且具有ＰＭＡ浓度依赖性。分析... 详细信息

用佛波酯（佛波醇－１２－豆蔻酸－１３－乙酸酯，ＰＭＡ）作用大鼠肝癌ＣＲＢＨ７９１９细胞，发现ＰＭＡ能促进ＣＲＢＨ７９１９细胞中磷脂酰胆碱（ＰＣ）水解，此效应出现在ＰＭＡ作用细胞１５分钟后，且具有ＰＭＡ浓度依赖性。分析ＰＣ水解产物，发现ＰＣ主要水解生成胆碱而不是磷酸胆碱。进一步测定膜结合磷脂酰胆碱专一性的磷脂酶Ｄ（ＰＣ－ＰＬＤ）活性，结果显示１００ｎｍｏｌ／ＬＰＭＡ作用细胞１０分钟即激活ＰＣ－ＰＬＤ，至３０分钟ＰＣ－ＰＬＤ活力增加至３．２５倍。ＰＭＡ激活ＰＣ－ＰＬＤ在时间上先于ＰＣ水解，提示在ＣＲＢＨ７９１９细胞中ＰＭＡ通过ＰＣ－ＰＬＤ水解ＰＣ产生磷脂酸和胆碱。

关键词：佛波酯磷脂酰胆碱磷脂酶D

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实验性肝纤维化模型种类及其特点

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肝脏 1997年第1期2卷 51-52,55页

作者：黄志刚翟为溶上海医科大学基础医学院病理学教研室，200032 上海医科大学基础医学院病理学教研室，200032

为了研究肝纤维化发生机制及其防治措施，往往需制作动物模型。目前已有多种模型，它们因诱发因素不同，病理改变及纤维化形成的机制也各异。本文拟就肝纤维化实验模型的类型、特点及其进展作一简要介绍，以供不同研究目的选用相应模型... 详细信息

为了研究肝纤维化发生机制及其防治措施，往往需制作动物模型。目前已有多种模型，它们因诱发因素不同，病理改变及纤维化形成的机制也各异。本文拟就肝纤维化实验模型的类型、特点及其进展作一简要介绍，以供不同研究目的选用相应模型提供参考。

关键词：实验性肝纤维化病理改变诱发因素动物模型发生机制实验模型防治措施参考制作研究目的

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犬实验性心肌梗死心脏的电子束CT三维重建

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上海医科大学学报 1997年第3期24卷 181-184页

作者：宋志坚张闽光吴国强沈天真左焕琛上海医科大学基础医学院人体解剖学教研室 200032 华山医院放射科 200040

研究电子束CT心肌梗死部位及形态的三维图象重建。结扎犬心冠状动脉左旋支及其分支，形成左室侧壁梗死区；经电子束CT增强容积扫描方式得到犬心断面，利用区域扩张法对梗死心肌进行自动分割；采用表面重建法完成犬心的三维重建。结果：... 详细信息

研究电子束CT心肌梗死部位及形态的三维图象重建。结扎犬心冠状动脉左旋支及其分支，形成左室侧壁梗死区；经电子束CT增强容积扫描方式得到犬心断面，利用区域扩张法对梗死心肌进行自动分割；采用表面重建法完成犬心的三维重建。结果：清晰显示出了犬心的三维图象，并在三维图象上精确表示出了梗死的部位及形态。结论：在造影剂注射量与扫描起始时间适宜的条件下。

关键词：电子束CT 心脏三维重建心肌梗死

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脑血管病人血浆血栓素B_2和6-酮-前列腺素F_(1α)比值的改变

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上海医科大学学报 1997年第1期24卷 67-68页

作者：张一凡徐酝宜王玉龙上海市松江县中心医院神经内科上海医科大学华山医院神经内科 200040 上海医科大学基础医学院数学教研室 200032

急性脑血管病的发病有众多因素参与，其中血栓素A_2(TXA_2)和前列环素(PGI_2)丧失平衡则可促发急性脑血管病的发生。我们检测了150例急性脑血管病人血浆血栓素(TXB_2)和6-酮-前列腺素F_1_α(6-K-PGF_1_α)含量，观察不同脑血管病人血浆T... 详细信息

急性脑血管病的发病有众多因素参与，其中血栓素A_2(TXA_2)和前列环素(PGI_2)丧失平衡则可促发急性脑血管病的发生。我们检测了150例急性脑血管病人血浆血栓素(TXB_2)和6-酮-前列腺素F_1_α(6-K-PGF_1_α)含量，观察不同脑血管病人血浆TXB_2和6-K-PGF_1_α的比值(T/P)值改变，并探讨含量改变机理及其临床意义。

关键词：脑血管疾病血浆血栓素B2 前列腺素

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中缝隐核至导水管腹侧部投射途径的儿茶酚胺递质定量分析

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上海医科大学学报 1997年第6期24卷 417-420页

作者：卢宁周新妹龚茜玲上海医科大学基础医学院生理学教研室 200032 浙江省嘉兴市卫生学校

研究脑内交感抑制系统中中缝隐核（NRO）至中脑导水管周围灰质腹侧部（VPAG）通路的地茶酚胺递质定量。采用推挽灌流结合高效液相一电化学检测法观察连续电刺激NRO3Omin，vPAG中野上腺素（A）、去甲肾上腺素（NA）释放的变化。结果：刺... 详细信息

研究脑内交感抑制系统中中缝隐核（NRO）至中脑导水管周围灰质腹侧部（VPAG）通路的地茶酚胺递质定量。采用推挽灌流结合高效液相一电化学检测法观察连续电刺激NRO3Omin，vPAG中野上腺素（A）、去甲肾上腺素（NA）释放的变化。结果：刺激NRO10～30min，vPAG灌流液中A含量明显增加（尸＜0．O5）；刺激NRO10～20min，vPAG中NA含量也增加（P＜005）。在上述基础上，于刺激NRO前双侧侧脑室注射5－HT2受体拮抗剂ketanserin（100μg／10μl），给药后电刺激NRO10～3Omin内样品中A、NA含量无明显变化（P＞005），ketanserin阻断了刺激NRO引起的A、NA释放增加的效应。结论：NRO至vPAG投射的递质是ANA；5－HT能神经元参与NRO至vPAG的反馈效应，可能由5－HT2受体参与介导。

关键词：中缝隐核 vPAG 肾上腺不去甲肾上腺素儿茶酚胺

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用酶联比色法测定肝脏磷脂酰胆碱专一性磷脂酶D及其应用

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上海医科大学学报 1997年第5期24卷 342-346页

作者：黄勇吴兴中 QureshiImranAhmad 陈惠黎上海医科大学基础医学院生物化学教研室卫生部糖复合物重点实验室 200032

研究建立一种磷脂酞胆碱专一性磷脂酶D（PC—PLD）的酶偶联比色测定法，并研究肝脏中磷脂酰胆碱专一性磷脂酶D（PC—PLD）活力受磷脂的调节及其在肝癌中的变化。将PLD水解磷脂酰胆碱产生的胆碱用胆碱氧化酶氧化，生成的H2O2再在过氧化... 详细信息

研究建立一种磷脂酞胆碱专一性磷脂酶D（PC—PLD）的酶偶联比色测定法，并研究肝脏中磷脂酰胆碱专一性磷脂酶D（PC—PLD）活力受磷脂的调节及其在肝癌中的变化。将PLD水解磷脂酰胆碱产生的胆碱用胆碱氧化酶氧化，生成的H2O2再在过氧化物酶催化下将4-氨基安替匹林和酚氧化成粉红色有色物质（Trinder反应）。结果：本法中酶浓度或反应时间和产物胆碱量有良好的正比关系。用0.15％的正辛基β-吡喃葡萄糖苷可将PC-PLD从膜性组分中增溶出来，而基本上不抑制酶活力，而其他5种去垢剂即使在很低的浓度下，均能抑制该酶活力。应用此法测定6种磷脂对鼠肝PC—PLD的影响发现只有磷脂酰乙醇胺（PE）可激活PC—PLD，还发现鼠肝癌中膜结合性PC-PLD活力明显增高，尤其是癌前期；而胞液PC-PLD仅在癌前期增高。结论：结果表明，①PC-PLD的酶联比色测定法较简便，灵敏度和重复性也较好，可以满意地应用于组织和细胞中此酶活力变化的研究；②大鼠肝PC—PLD受PE激活，并在肝癌中升高。

关键词：肝脏磷脂酶D 酶偶联比色法细胞膜

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人皮肤成纤维细胞纤连蛋白的纯化及其N-糖链结构

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上海医科大学学报 1997年第1期24卷 3-6页

作者：巨同忠李月彬查锡良陈惠黎上海医科大学基础医学院生物化学教研室卫生部情复合物重点实验室200032

研究人皮肤成纤维细胞纤连蛋白及其片段Ｎ－糖链结构。用明胶－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和柱纯化培养的人皮肤成纤维细胞所分泌的纤连蛋白（Ｆｎ），用胰糜蛋白酶限制性水解，获得明胶结合片段和肝素结合片段；用肼化的凝集素与经过... 详细信息

研究人皮肤成纤维细胞纤连蛋白及其片段Ｎ－糖链结构。用明胶－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和柱纯化培养的人皮肤成纤维细胞所分泌的纤连蛋白（Ｆｎ），用胰糜蛋白酶限制性水解，获得明胶结合片段和肝素结合片段；用肼化的凝集素与经过碘酸氧化后的辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）缩合的方法制备４种ＨＲＰ－凝集素（ＣｏｎＡ，ＤＳＡ，ＷＧＡ，ＬＣＡ）探针，用ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ法检测明胶结合片段（Ｍｒ４３ × １０３）、肝素结合片段（Ｍｒ３０ ×１０３，２５ ×ｌ０３）在切除唾液酸及平分型Ｎ－乙酰氨基葡萄糖（ＧＩｃＮＡｃ）前后的Ｎ－糖链结构。结果：Ｆｎ的Ｎ－糖链主要存在于Ｍｒ分别为４３ × １０３、３０ ×１０３、２５ ×１０３的３个片段上，其结构为二、三（主要是Ｃ２Ｃ２６）或四天线的复杂型糖链；糖链末端连有唾液酸（ＳＡ）；都含有核心岩藻糖（ｃ－Ｆｕｃ；平分型ＧｌｃＮＡｃ只存在于４３ × １０３片段所连的糖链中，而且很可能与Ｃ—Ｆｕｃ共同存在于二天线或Ｃ２Ｃ２６三天线精链上；Ｆｎ的糖链中不含有Ｎ－乙酰乳糖胺重复顺序。结论：在Ｆｎ不同片段上均含有复杂型Ｎ糖链，并存在核心岩藻糖结构，平分型ＧｌｃＮＡｃ只存在于４３ ×１０３片段上。

关键词：人皮肤成纤维细胞纤连蛋白凝集素 N-糖链

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β1—4半乳糖基转移酶受体底物的动力学

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上海医科大学学报 1997年第5期24卷 339-342页

作者：吴国强江松敏顾建新上海医科大学基础医学院生物化学教研室卫生部糖复合物重点实验室 200032

研究β1-4半乳糖基转移酶（β1-4GT）与受体底物的亲和性、其底物的天线偏爱性以及糖基对亲和性的影响，以及β1-4GT对不同底物的天线特异性（branchspecificity）。用两种荧光标记的底物1（Gnβ1－2Mal－6（Gnβ1—2Mal－3）Mβ1－4Gn... 详细信息

研究β1-4半乳糖基转移酶（β1-4GT）与受体底物的亲和性、其底物的天线偏爱性以及糖基对亲和性的影响，以及β1-4GT对不同底物的天线特异性（branchspecificity）。用两种荧光标记的底物1（Gnβ1－2Mal－6（Gnβ1—2Mal－3）Mβ1－4Gnβ1—4Gn－PA）和底物2（Gnβ1－2Mal—6（Gnβ1－2Mal－3）Mβ1—4Gnβ1－4（Fucal－6）Gn－PA），用正常雄性大鼠的肝组织的高尔基体作为酶，测定β1－4GT的不同底物的Km值[1]。结果：底物1和2的Km值分别为2．31×10－3mol／L和3.12×10－3mol／L；对底物1，α1，3天线的N-乙酰氨基葡萄糖基比α1，6天线的反应性强，形成Gnβ1－2Mal－6（Gβ1－4Gnβ1－2Mal—3）Mβ1—4Gnβ1－4Gn—PA产物是Gβ1－4Goβ1—2MQl一6（Goβ1－2Mal－3）Mβ1－4Gnβ1－4Gn－PA的2．10倍左右；对底物2，α1，3天线的N-乙酰氨基葡萄糖基比α1，6天线的反应性更强，形成Gnβ1－2Mal－6（Gβ1－4Gnβ1－2Mal－3）Mβ1－4Gnβ1－4（Fucα1－6）Gn－PA的产物是Gβ1－4Gnβ1－2Mal－6（Gnβ1－2Mal－3）Mβ1－4Gnβ1－4（Fucα1—6）Gn－PA的4.59倍左右。结论：核心岩藻糖对酶与受体底物的亲和性有一定影响。

关键词：天线特异性高效液相色谱法糖蛋白 β1-4GT

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FBL-3肿瘤抗原的研究:Ⅱ.从多肽池中分析肿瘤抗原

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中国肿瘤生物治疗杂志 1997年第2期4卷 81-84页

作者：陈永良何球藻上海医科大学基础医学院免疫学教研室上海200032

在抗肿瘤免疫效应中细胞毒T淋巴细胞(CTL)是通过识别肿瘤细胞MHC I类分子结合的肿瘤源性多肽.为分析肿瘤细胞的抗原性及肿瘤抗原的多肽性质,本文选用FBL-3肿瘤细胞,用pH3.3的枸橼酸-磷酸盐缓冲液间隔24～36小时多次酸洗肿瘤细胞,以获得M... 详细信息

在抗肿瘤免疫效应中细胞毒T淋巴细胞(CTL)是通过识别肿瘤细胞MHC I类分子结合的肿瘤源性多肽.为分析肿瘤细胞的抗原性及肿瘤抗原的多肽性质,本文选用FBL-3肿瘤细胞,用pH3.3的枸橼酸-磷酸盐缓冲液间隔24～36小时多次酸洗肿瘤细胞,以获得MHC I类分子结合的多肽,并分析酸洗液中多肽混合物的肿瘤抗原性,以及RP-HPLC分离的部分收集液多肽的肿瘤抗原性,为FBL-3肿瘤细胞抗原的确定提供基本数据.结果表明:酸洗法能有效获得肿瘤细胞MHC I类分子相关的多肽抗原,肿瘤细胞多肽抗原的分离、纯化、HPLC分析以及抗原性鉴定是肿瘤抗原性确定的一个重要方法.

关键词：肿瘤多肽抗原酸洗抗原 FBL-3

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